葡萄糖基（α-1→6）β-环糊精的波谱学数据与结构确证

对酶法合成的葡萄糖基(α-1→6)β–环糊精的红外(IR)光谱、质谱(MS)、氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)、氢氢相关谱(1H-1H COSY)、氢氢完全相关谱(1H-1H TCOSY)、异核单量子相干相关谱(HSQC)和异核多键相关谱(HMBC)进行了解析报道,对所有的1H-NMR 和13C-NMR谱进行了归属,讨论了红外特征吸收峰所对应的官能团的振动形式.     

(1→3)-β-D-葡聚糖构象的理论分析

利用分子力学 (MM 2 )方法计算了 (1→ 3) β D 葡聚糖二糖结构单元全局最低能量构象 ,在此基础上搭建相对分子质量分别为 2 .0 5× 10 4 和 1.0 2 6× 10 5的 (1→ 3) β D 葡聚糖片段并进行分子几何全优化 .结果表明 ,(1→ 3) β D 葡聚糖的能量最低构象为单螺旋结构并且亲水性基团 (多羟基 )位于螺旋体的表面 ,从而认为这种构象可能是其具有刺激免疫和抗肿瘤活性的分子基础 .     

羟丙基-β-环糊精的结构

用红外光谱法对羟丙基-β-环糊精的结构进行了定性分析,用气相色谱-质谱联用方法,通过对质谱图解析,详细研究了羟丙基-β-环糊精中羟丙基的分布。此羟丙基-β-环糊精以C2位取代为主,计算得到其平均取代度为6.41。     

β-环糊精包结莪术挥发油的技术条件

为提高莪术挥发油生物利用度,研究了β-环糊精包结莪术油的技术参数.以包合物油包结率及包合物收得率为考察指标,运用饱和水溶液包封法进行包结.当V(油):m(β-环糊精):V(水)=1 mL:4 g:60 mL,搅拌时间为2 h时,包合效果最佳,可稳定保持平均油包结率为62.29％.电镜观察证明了包合物的形成,GC-MS色谱分析表明包合前后莪术挥发油的化学组成基本不变.     

核磁共振法研究β-环糊精及其衍生物对苯丙氨酸的包和过程

本文采用~1H和~(13)C核磁共振方法,依据化学位移的改变量,系统地研究了β-环糊精及其琥珀酰化衍生物对苯丙氨酸的包和能力以及包和过程运动状态。结果表明苯丙氨酸以苯基为前导经β-环糊精二级羟基口与其发生包和反应;琥珀酰化不但提高β-环糊精对苯丙氨酸的结合能力,而且完全改变了包和过程的结合方式,使得苯丙氨酸以α碳为前导经二级羟基口与β-环糊精产生包和。     

不同淀粉原料及前处理方法对β-环糊精生产的影响

为了获得β-环糊精生产的高转化率.通过对不同淀粉的比较,得出玉米淀粉具有较高的经济适用性;通过对不同前处理方法得到的淀粉生产β-环糊精转化率的比较,得出影响转化率的几个因素,分别是淀粉颗粒大小、淀粉的晶体结构的破坏程度和小分子糖的抑制作用;并得出将糊化淀粉作为底物最有利于环化反应的进行,但由于高粘度却无法工业化生产;通过研究,确定了一种新型的前处理方法,即将质量分数7%玉米淀粉浆在85℃下保温1 h,水浴摇床中65℃200 r/min转化24 h,获得了29.86%的高转化率,克服了大规模生产中糊化淀粉粘度过高无法搅拌均匀和酶解处理后的淀粉中小分子糖抑制作用的问题.     

磺胺甲基异噁唑-β-环糊精包合物的研制

目的：制备磺胺甲基异噁唑-β-环糊精(sulfamethoxazole SMZβ-cyclodextrinβ-CD)包合物,考察其有关性质。方法：采用冷冻干燥法制备SMZ-β-CD包合物,利用紫外分光光度法测定SMZ、包合物溶解度、溶出度。结果：经显微镜观察、DSC及相溶解度证明SMZ和β-CD已形成包合物,包合物的主、客分子比为1：1,包合物溶解度是原药的8倍,溶出速度明显高于SMZ原药。结论：SMZ-β-CD包合物可以提高SMZ的溶解度和溶出度。     

金天格胶囊对膝骨关节炎患者关节液中MMP-3、TIMP-1、IL -1β、TGF-β1水平的影响

目的 探讨金天格胶囊对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者关节液中基质金属蛋白酶-3 ( MMP-3 )、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法 选取90例KOA患者,分别在治疗前、治疗1个疗程、治疗2个疗程后,对患者进行WOMAC量表评分,评估患者膝关节功能。分别抽取患者膝关节腔关节液,进行酶联免疫吸附法(ELISA),测定关节液中MMP-3、TIMP-1、IL-1β、TGF-β1的含量。结果 ⑴服用金天格胶囊后,患者WOMAC评分降低,膝关节功能改善。（2)与治疗前相比,治疗后关节液中MMP-3、IL-1β含量都有所降低,TIMP-1、TGF-β1含量都有所增加,差异具有统计学意义(P <0. 01)。(3)随着服用金天格胶囊疗程的增加,膝关节液中MMP-3、IL-1β含量逐渐下降,TIMP-1、TGF-β1的含量逐渐升高,组间差异具有统计学意义(P <0. 01)。结论 金天格胶囊可以降低KOA患者关节液中MMP-3、IL-1β水平,升高TIMP-1、TGF-β1的水平,从而起到保护关节软骨、改善KOA患者膝关节功能的作用。     

海洋鱼油β-环糊精包合物中EPA和DHA含量的测定

用气相色谱法进行海洋鱼油β 环糊精包合物中主要有效成分EPA和DHA的定量分析 ,使之能够定量添加至奶粉中 .本研究的色谱分离效果好 ,实验回收率 97.67%～ 98.3 1 % ,变异系数0 .9%～ 2 .1 % .此外 ,探讨了在不同的包合条件下海洋鱼油和β 环糊精的包合情况 .     

白介素-1对培养人表皮黑素细胞增殖及黑素合成的影响研究

目的:建立正常人表皮黑素细胞体外培养体系,观察不同浓度的白介素-1α,白介素-1β对体外培养正常人黑素细胞的细胞增殖及黑素合成的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定白介素-1α及白介素-1β对黑素细胞增值的影响,NaOH裂解法测定黑素生成量,流式细胞仪检测黑素细胞的凋亡率。结果:白介素-1α及白介素-1β对黑素细胞活力有抑制作用,能使细胞增殖能力降低,黑素合成减少,增加黑素细胞的凋亡率。结论:白介素-1α及白介素-1β对体外培养的黑素细胞增殖及黑素生成都有抑制作用,这为临床应用白介素-1α及白介素-1β治疗色素性疾病提供了实验依据。     

腹膜重建门静脉后腔面6-酮-前列腺素F1α及一氧化氮合酶的变化

目的　了解腹膜重建门静脉后腔面 6 酮 前列腺素F1α(6 k PGF1α)、一氧化氮合酶(NOS)的变化及重建门静脉后的通畅率。方法　采用健康幼猪 2 5头 ,切除 1段门静脉 ,分别代以自体腹膜和自体静脉 ,观察移植后不同时期通畅率、组织病理变化并测定移植物腔面 6 k PGF1α、NOS含量。结果　腹膜重建门静脉后 1个月、2～ 3个月及 5个月时通畅率分别为 94.1%、76 .9%及71.4% ,与对照组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。腹膜间皮细胞可释放 6 k PGF1α,并具有NOS ,2组移植前后腔面 6 k PGF1α比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,NOS移植后期已恢复接近正常。结论　腹膜重建门静脉有较高的通畅率 ,间皮细胞可释放 6 k PGF1α,并具有NOS ,其释放量和酶活性与移植血管创伤修复有关。     

17-β雌二醇对肾间质纤维化防治作用的探讨

目的探讨17-β雌二醇对肾间质纤维化防治作用可能的机制。方法雌性SD大鼠30只,随机分为4组：①对照组;②生理雌激素组;③低雌激素组;④17-β雌二醇组。21d后光镜观察单侧梗阻肾组织病理改变;通过免疫组化方法检测转化生长因子（TGF-β1）、α-平滑肌动蛋白（α-SMA）;并用RT-PCR方法检测肾组织α-SMAmRNA的表达。结果单侧输尿管梗阻各组出现肾小管间质纤维化改变,其肾组织TGF-β1。和α-SMA表达上调（P〈0．01）;与生理雌激素组相比,低雌激素组纤维化病变加重,上述物质表达均明显增多（P〈0．05）;而17-β雌二醇组则病变均减轻（P〈0．05）。结论注射17-β雌二醇可能通过下调TGF-β1,和α-SMA的表达,抑制细胞外基质的生成,进而韶到延绣肾间后纤维化的作用．     

瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞对白介素-1β和白介素-6的反应

目的研究瘢痕疙瘩浸润、增生、老化3个不同部位的成纤维细胞性状。方法以6例瘢痕疙瘩为标本,6例正常皮肤为对照,通过细胞培养的疗法研究了瘢痕疙瘩3个不同部位和正常皮肤的成纤维细胞对白介素-1β(IL-1β)(200U/ml)和白介素-6(IL-6)(100U/ml)的反应。结果 IL-1β抑制瘢痕疙瘩增生部成纤维细胞而剌激正常皮肤的成纤维细胞,对浸润及老化部成纤维细胞无明显影响。IL-6抑制所有的成纤维细胞。结论瘢痕疙瘩不同部位和正常皮肤的成纤维细胞对 IL-1β和 IL-6的反应不尽相同。     

川芎嗪对体外循环心内直视手术患者血浆β-内啡肽、强啡肽A_(1-13)含量的影响

目的 观察川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对体外循环心内直视手术患者血浆β-内啡肽(β-EP)、强啡肽A_(1-13)(DynA_(1-13))含量的影响。方法 24例风湿性瓣膜病患者,随机分为对照组12例,用药组12例。检测了围手术期血浆β-EP,DynA_(1-13)含量。结果 用药组病人β-EP,DynA_(1-13)含量在术中及术后48h内显著低于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论 TMP改善体外循环心内直视手术患者脑部微循环障碍,减少脑组织β-EP,DynA_(1-13)的合成和释放。     

强脉冲光促进大鼠皮肤转化生长因子-β1表达的实验研究

目的观察强脉冲光照射对SD大鼠皮肤转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响,以进一步阐明强脉冲光治疗皮肤光老化可能的机制。方法随机选取15只SD大鼠,两侧背部皮肤去毛,以一侧为强脉冲光照射实验组,对侧背部皮肤作对照组。采用波长560～1200 nm、能量27 J/cm~2、脉宽3.0 ms、双脉冲方式、脉冲延时10 ms的强脉冲光照射实验组皮肤,取术前及术后4周大鼠实验侧和对照侧皮肤标本,行大鼠皮肤TGF-β1蛋白免疫组化染色定位,观察大鼠皮肤TGF-β1的分布情况以及强脉冲光照射后TGF-β1的表达变化。结果TGF-β1分布于大鼠正常皮肤全层,主要分布在细胞外结缔组织基质胶原纤维中。强脉冲光照射刺激大鼠皮肤分泌TGF-β1,实验组强脉冲光照射4周后,大鼠皮肤TGF-β1表达较对照组显著增强(P<0.001),阳性产物主要分布在细胞外结缔组织中。真皮浅层较对照组有非常强烈的棕黄色着染,同时皮肤表皮细胞亦出现明显的阳性表达产物。阳性表达区成纤维细胞数量明显增多。结论强脉冲光照射后上调大鼠皮肤TGF-β1的表达,是强脉冲光治疗皮肤光老化的内在机制。     

异丙酚麻醉对新生大鼠海马β-分泌酶1表达和β淀粉样蛋白1-42含量的影响

目的 评价异丙酚麻醉对新生大鼠海马β-分泌酶1(BACE1)表达和β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)含量的影响.方法 新生7d清洁级健康SD大鼠90只,体重12 ～ 16 g,雌雄各半,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=30):对照组(C组)、异丙酚单次麻醉组(SP组)和异丙酚重复麻醉组(RP组).C组腹腔注射生理盐水7.5 ml/kg,1次/d,连续7 d;SP组腹腔注射生理盐水7.5 ml/kg,1次/d,连续6d,第7天腹腔注射异丙酚75 mg/kg; RP组腹腔注射异丙酚75 mg/kg,1次/d,连续7d.于第7天注射完毕后15 min,各组随机取6只大鼠,心室穿刺采血,测定血糖并行血气分析,于注射完毕后1、3和7d时各组随机取8只大鼠,分离海马,采用Western bolt法检测BACE1表达,采用ELISA法测定Aβ1-42含量.结果 与C组和SP组比较,RP组各时点大鼠海马BACE1及及Aβ1-42水平升高(P＜0.01);C组和SP组各时点大鼠海马BACE1及Aβ1-42水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异丙酚多次麻醉新生大鼠海马BAGE1表达上调,Aβ1-42含量升高,可能是其导致远期认知功能障碍的机制之一；异丙酚单次麻醉无此作用.     

人外周血单个核细胞分泌细胞因子对α-1，3-半乳糖基转移酶基因敲除猪肝细胞的作用

目的研究异种肝细胞或肝移植中,活化的人外周血单个核细胞(h-PBMC)分泌的细胞因子对α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除猪肝细胞(GalT-KO-hep)的作用。 方法利用永生化GalT-KO-hep,与经脂多糖＋聚肌胞苷酸激活的h-PBMC共培养。生化分析检测共培养上清中白蛋白、ALT、AST和尿素水平,采用流式细胞术检测GalT-KO-hep凋亡,采用蛋白质印迹法检测GalT-KO-hep中Caspase-3剪切体表达以及c-Jun氨基末端激酶(JNK)、核因子κB(NF-κB)、P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、信号传导与活化转录因子3(STAT3)和蛋白激酶B(AKT)通路相关分子的表达变化。采用方差分析比较不同刺激时间h-PBMC分泌的细胞因子mRNA相对表达量、共培养模型不同时间点上清液生化指标含量、GalT-KO-hep中Caspase 3剪切体表达量和细胞凋亡率,进一步两两比较采用LSD法。P<0.05为差异有统计学意义。 结果GalT-KO-hep与活化h-PBMC共培养6 h组上清液中ALT含量高于共培养24 h和48 h组,差异均有统计学意义(P均<0.05);共培养48 h组AST含量高于共培养6 h和24 h组(P均<0.05);共培养24 h和48 h组尿素含量均高于共培养6 h组(P均<0.05)。GalT-KO-hep与活化h-PBMC共培养24 h和48 h后,细胞中Caspase 3剪切体表达增加,细胞凋亡程度逐渐增加。与活化h-PBMC共培养0.5、1、6和12 h后,GalT-KO-hep磷酸化蛋白p-STAT3、p-JNK、p-IκBα、p-P38 MAPK、p-AKT和p-ERK(1/2)均被不同程度激活。 结论h-PBMC释放的细胞因子可诱导GalT-KO-hep损伤和凋亡,并促进炎症相关分子通路的激活。     

缺血-再灌注期心肌组织及血清白细胞介素-1β和白细胞介素-6的变化

目的　观察家兔缺血 再灌注期心肌组织及血清白细胞介素 1β(IL 1β)、白细胞介素 6(IL 6 )的变化和芬太尼对其影响。方法　 2 4只家兔随机分为假手术组 (C组 )、缺血 再灌注组 (IR组 )和芬太尼组 (F组 ) ,每组 8只。IR组行冠状动脉左前降支阻断 30分钟 ,再灌注 3小时 ;F组缺血前 2 0分钟缓慢静注芬太尼 5 0 μg/kg后 ,以 40 0 μg·kg-1·h-1速度维持 ;C组仅分离血管 ,不阻断血流。三组分别于缺血前 5分钟 (I0 )、缺血 30分钟 (I1)、再灌注 1小时 (R1)和 3小时 (R2 )取颈内静脉血 ,并于实验结束时取心肌组织 ,测定血清及心肌组织中IL 1β和IL 6浓度 ,光镜下观察心肌病理结构变化。结果　F组血清IL 1β在R1时达到峰值 ,为I0 的 2 98倍 (P <0 0 1) ,在R2 时下降 (P <0 0 5 ) ;IL 6在R2 时升高 ,为I0 的 1 33倍 (P <0 0 5 )。IR组血清IL 1β在I1～R2 时增高 ,分别是I0 的2 90、4 85和 3 88倍 (P <0 0 1) ;血清IL 6在R1和R2 时持续升高 (P <0 0 1) ,分别为I0 的 1 5 6、1 74倍。F组心肌组织中IL 1β及IL 6含量较C组增高 ,但明显低于IR组 (P <0 0 1)。光镜下F组心肌中度水肿 ,白细胞散在浸润 ;IR组水肿严重 ,白细胞浸润明显。结论　缺血 再灌注时心肌组织和血清IL 1β、IL 6的合成增加 ,芬太尼可     

益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织中乙酰肝素酶、转化生长因子β_1表达的影响

目的:观察益肾通络方对膜性肾病(MN)大鼠肾组织中乙酰肝素(Hpa)、转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、贝那普利组、中药组,各组按相应剂量灌胃,于第9周末观察24 h尿蛋白定量、血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb);免疫荧光、电镜及免疫组化法检测各组大鼠Hpa、TGF-β1在肾组织的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠出现大量蛋白尿,血清TP、Alb均明显降低,血清TC、TG均明显升高,肾脏病理出现损害,肾小球内Hpa、TGF-β1表达显著增强(P0.05);与模型组相比较,各治疗组24 h尿蛋白定量,总胆固醇(TC)及三酰甘油(TG)均明显降低,血清TP、Alb均明显升高,肾脏病理损害较轻,肾小球内Hpa、TGF-β1表达减少(P0.05)。中药组与贝那普利组比较差异有统计学意义(P0.05),中药组优于西药组。结论:益肾通络方可显著降低MN大鼠尿蛋白、提高血浆蛋白,改善血脂代谢,能够抑制Hpa、TGF-β1在肾组织中的表达,抑制膜性肾病大鼠肾小球基底膜(GBM)免疫复合物的沉积以及基底膜的增厚,促进受损的肾小球基底膜修复,从而减轻肾脏损伤,延缓肾脏慢性病理进展。     

磷酸甘油酸变位酶5调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤中的作用

目的  研究磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及分子机制。方法  建立C57小鼠肝脏IRI模型,随机分别予再灌注6 h(6 h组)与12 h(12 h组),并设立假手术组(Sham组),每组10只。分析IRI对小鼠肝组织及血清学指标的影响; 分析小鼠肝脏IRI过程中PGAM5、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1的表达情况。建立肝细胞IRI模型(IRI组),采用Caspase-1抑制剂Z-YVAD-FMK预处理后再建立肝细胞IRI模型(抑制剂组),将未处理的AML12细胞作为对照组,分析抑制Caspase-1活性对细胞焦亡的影响。采用脂质体3000将PGAM5小干扰核糖核酸(siRNA)(siRNA组)和siRNA阴性对照(siRNA-NC)(siRNA-NC组)转染至AML12细胞,再建立肝细胞IRI模型,将未处理的AML12细胞作为对照组,分析PGAM5调控细胞焦亡对肝细胞IRI的影响。结果  6 h组和12 h组小鼠肝组织中部分肝细胞水肿,肝窦区变窄,中央静脉充血,偶见点灶状坏死等,且12 h组较6 h组病变加重。与Sham组小鼠比较,6 h组和12 h组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平升高,且12 h组高于6 h组; 6 h组和12 h组肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β水平升高,12 h组低于6 h组; 6 h组和12 h组小鼠肝组织IL-1β信使核糖核酸(mRNA)相对表达量升高,12 h组低于6 h组; 6 h组和12 h组肝组织细胞凋亡率升高,12 h组低于6 h组(P < 0.01~0.05)。与Sham组小鼠比较,6 h组和12 h组小鼠肝组织PGAM5 mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均升高,且12 h组高于6 h组(P < 0.01~0.05);6 h组和12 h组肝组织PGAM5、Caspase-1蛋白表达增多。IRI组细胞NOD样受体蛋白3(NLRP3)、裂解Caspase (cleaved Caspase)-1及Gasdermin D(GSDMD)蛋白相对表达量较对照组升高,GSDMD荧光强度较对照组增强; 抑制剂组NLRP3、cleaved Caspase-1及GSDMD蛋白相对表达量较IRI组下降,GSDMD荧光强度较IRI组减弱(P < 0.01~0.05)。与对照组比较,siRNA-NC组细胞存活率下降,PGAM5、NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD蛋白相对表达量升高(P < 0.01~0.05);与siRNA-NC组比较,siRNA组细胞存活率升高,PGAM5、NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD蛋白相对表达量下降(P < 0.01~0.05)。结论  PGAM5可加重小鼠肝脏IRI,其机制可能为通过PGAM5/Caspase-1/GSDMD信号通路调控细胞焦亡,加速肝细胞损伤。