大豆生理活性肽的研究(Ⅱ)--抗氧化性和ACE抑制活性的初步研究

采用AS1.398和Alcalase两种蛋白酶,制备了水解度为10%～24%的大豆多肽,对其抗氧化性、ACE抑制活性和相对分子质量的分布进行了研究,结果表明采用AS1.398酶水解的DH为12%的产品抗氧化活性最高,添加量为6 mg/mL时使亚油酸的氧化诱导期延长2.92倍,其相对分子质量分布在1 000以上的组分较多;采用Alcalase酶水解的DH为14%的大豆多肽产品,ACE抑制活性最高,IC50为0.144 mg/mL,其相对分子质量分布大多在200～600之间.     

海参多肽、多糖综合提取工艺条件的优化

从综合利用海参各种营养成分的角度，研究了利用酶解法制备海参多肽的同时分离纯化海参多糖的工艺。通过正交实验得出利用A．S1398精制中性蛋白酶综合提取海参多肽和多糖的最优酶解条件：加水量为鲜海参质量的6倍，加酶量为鲜海参质量的1．0%，温度30℃，水解时间6h。在该条件下多肽得率为12．0％，多糖得率为2．68％，水解度为30．35％。     

大孔树脂对射干萃取液中鸢尾苷物质的提取

研究了几种大孔吸附树脂的静态吸附特性,筛选出一种吸附性能较好的XDA-1大孔吸附树脂,并应用于柱层析进行射干正丁醇萃取液的分离纯化.研究了萃取液中鸢尾苷物质浓度、流量及温度等参数对大孔吸附树脂吸附性能的影响.对操作条件的优化得到了满意的实验结果:XDA-1大孔吸附树脂对鸢尾苷物质的静态吸附率达到83.48%,柱层析用体积分数70%乙醇洗脱,洗脱率达到93%.在一般室温下,操作温度对大孔树脂的吸附效果影响较小.     

大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肽的脱盐和色谱分离

利用DA201-C大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肽脱盐并进行分离分级.结果表明,大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肽的脱盐率在97%以上,酪蛋白非磷肽的回收率约在95%,同时用不同体积分数的乙醇对酪蛋白非磷肽进行阶段洗脱,酪蛋白非磷肽均可以分离出3个组分.     

牛肉蛋白水解物的酶解制备

采用Flavourzyme与Protamex复合蛋白酶对牛肉进行水解,并以水解度为指标,采用响应面分析对其酶解条件进行优化,建立了一个水解模型,其最优化条件为:底物质量浓度 4. 8g/dL,反应起始pH值7.0,水解温度52.5℃,水解时间9 h,在此条件下达到最大水解度50.65%.并对不同水解度水解产物的游离氨基酸含量进行了分析.     

水酶法从花生中提取蛋白质与油--酶解工艺参数

采用水酶法从花生中同时提取油与水解蛋白质,对酶制剂的筛选,酶解工艺中酶用量、蛋白质的水解度(DH)、降低乳状液稳定性以及部分破乳的方法等进行了研究.确定选用Alcalase作为水解酶,酶与底物比为2.5 g/dL.推断了DH与清油得率及等电可溶水解蛋白质得率的关系,并对花生水解蛋白质的部分功能性质及花生油质量进行了分析.     

大孔吸附树脂对大豆异黄酮的吸附与洗脱性能

研究了几种大孔吸附树脂对母液中大豆异黄酮的吸附与洗脱性能 ,从中筛选出了D4 0 2 0树脂 .对母液中的大豆异黄酮进行了纯化 ,纯化后产品的纯度可达 4 0 %以上 ,能够满足市场的要求     

大孔吸附树脂纯化裸花紫珠总黄酮的工艺优选*

摘要目的 优选裸花紫珠总黄酮的大孔吸附树脂纯化工艺。方法以总黄酮的吸附率和洗脱率为指标，采用静态吸附优选AB 8 、D 101、HP 20、HP2MG等大孔吸附树脂的型号；通过单因素实验优选裸花紫珠的动态吸附分离参数。结果HP 20型树脂的吸附效率较高，其最佳的纯化工艺为pH 3.0的4.46 mg·mL－1裸花紫珠提取液，以3 BV·h－1流速上样，3 BV·h－1水洗1 h，再用75%乙醇4 BV，以2 BV·h－1流速进行洗脱，经大孔吸附树脂纯化后的裸花紫珠总黄酮的平均纯度可达47.4%。结论HP 20型大孔吸附树脂适用于裸花紫珠总黄酮的初步纯化。     

大孔树脂纯化蓝莓果中花色苷的研究

比较了10种大孔树脂对蓝莓花色苷的吸附和解吸效果,研究了AB-8型大孔树脂对蓝莓花色苷的吸附与解吸条件.结果表明,AB-8型大孔树脂是纯化蓝莓花色苷效果较好的树脂;蓝莓花色苷在AB-8型树脂上的吸附平衡时间为4 h,解吸平衡时间为2 h,吸附的最适质量浓度为750 mg/L;30 ℃,pH 3.0时吸附能力比较强,解吸时宜选用体积分数60 %乙醇溶液.该工艺生产的花色苷产品为紫黑色粉末,色价为54.10,回收率为88.20 %.     

离子交换树脂固定果糖转移酶

超声波破碎黑曲霉细胞提取游离果糖转移酶,然后选择D201大孔阴离子交换树脂为载体,通过先吸附后交联的方法固定果糖转移酶.优化的固定化条件:加酶量为每克湿树脂400U,吸附pH值为5.0～5.5,吸附温度为30℃,吸附时间为8h,交联剂戊二醛(终)质量浓度为0.01～0.05g/dL,交联时间为8h,交联温度为1～4℃.固定化酶活最高回收率为30.2%.     

猪血蛋白的酶法改性、性能鉴定及其应用

2709碱性蛋白质酶用硫酸铵分步盐析,再经超滤、凝胶过滤色谱柱脱盐浓缩后,冷冻干燥制成精制酶。将从猪血中离心分离得到的血球溶血,按照不同水解度(DH)(12%、14%、16%、和18%)进行酶法水解。由脱色后的蛋白质水解物和先前分离得到的血清混合后,经喷雾干燥制成改性蛋白粉。分别测定了不同水解度改性蛋白质的含氮化合物、糖、脂肪、灰分、水分、氨基酸和微量元素。用凝胶过滤色谱测定了多肽分子量分布并测定了改性蛋白质的功能性质,例如:乳化能力、起泡能力、溶解度、白度等;探讨了DH与它们的关系。最后,就添加改性蛋白质对面包质量的影响作了研究。     

聚唾液酸的水解与唾液酸的纯化

在HPLC分析唾液酸质量分数的基础上,选择盐酸作为大肠杆菌发酵液中聚唾液酸的水解用酸.在85℃水浴.盐酸浓度为0.1mol/L的条件下,水解2h,水解率平均可达95%以上.水解液中和过滤后,用离子交换色谱分离与冷冻干燥得到唾液酸产品.质谱及HPLC分析证实所得产品中主要成分是N 乙酰神经氨酸,其纯度达96.4%.     

NKA-9大孔吸附树脂对元宝枫绿原酸吸附与洗脱性能的研究

利用NKA-9大孔吸附树脂对元宝枫绿原酸的吸附与洗脱性能进行了研究.测定其静态吸附率为72.30%,静态解吸率为79.74%.吸附时间为6 h,吸附基本达到最大,解吸时间为2 h,解吸基本达到最大.上样液质量浓度为0.26 mg/mL,pH 2.5,吸附效果最佳.乙醇解析液体积分数为30%时,解析率最大.经吸附、解吸和干燥后,产品纯度达到26.62%.     

Aspergillus ficuum菊粉酶的分离纯化及其酶解菊粉制备低聚果糖

采用硫酸铵分级沉淀、透析脱盐、DEAE-Cellulose离子交换色谱等分离纯化技术，从Aspergillus ficuum菌株混合酶系中分离得到4种菊粉酶组分，应用薄层层析法分离各组分水解菊粉的产物，发现其中3种组分主要含外切菊粉酶，一种主要含有内切菊粉酶。进一步对所得到的内切菊粉酶组分酶解菊粉制备低聚果糖进行了研究，研究了底物浓度、加酶量、反应温度和反应pH对低聚果糖制备的影响，确定其最适反应条件为：底物浓度50g／L、加酶量10U／g底物，反应温度45℃，反应PH6．0。在此条件下反应72h，菊粉酶解率达74％，低聚果糖得率可达50％以上，酶解产物以DP2～DP4为主。     

离子交换树脂吸附法固定化脂肪酶的研究

以D311离子交换树脂为载体,通过离子交换吸附法对Lipolase100L脂肪酶进行了固定化。采用考马斯亮蓝法测定了酶蛋白在离子交换树脂上的吸附率,考察并得到了酶固定化的最佳条件：在pH10缓冲液下,加酶液量为每克预处理过的树脂加入1.5mL,吸附时间为10h,吸附温度为35℃。所得固定化酶用于催化合成月桂酸月桂醇酯,在反应物质的量比为1∶1时,水质量分数为8%,在50mL异辛烷有机溶剂中固定化酶用量为200mg,反应时间为210min,温度为55℃的最佳条件下,酯化率可达91.3%。     

酪蛋白磷酸肽新工艺及其体外功能性质

用Alcalase水解酪蛋白,用TNBS法监测酪蛋白的水解度(DH),运用纳滤技术改善产品质量;同时还研究了不同rN/rP(摩尔比)的CPP(酪蛋白磷酸肽)结合钙离子和亚铁离子的能力.结果表明,用Alcalase酶可以使酪蛋白的水解度(DH)达到16%～20%,TNBS法可以明显减少碱的引入,从而降低CPP产品的灰分含量.截留相对分子质量为150的纳滤膜可以适当的降低CPP产品的rN/rP,改善产品质量,而且能达到80%的总氮回收率;在DH为20%左右,rP基本上没有损失.该工艺适合于工业化生产较高rN/rP的CPP产品.rN/rP较低的CPP结合钙的能力好于rN/rP较高的CPP产品;CPP也可以抑制亚铁离子的沉淀.     

木瓜蛋白酶对蚌肉蛋白质的水解

以三角帆蚌为原料 ,利用木瓜蛋白酶对蚌肉蛋白质进行水解 ,正交试验结果表明 ,酶解最适条件为 :温度 5 0℃、pH 6 .5、时间 5h、加酶量 0 .6 % ,该条件下蚌肉蛋白质的水解度为 4 8.9% ,蛋白质回收率达 78.1% .     

个青皮中辛弗林两种提取分离方法的比较研究

建立了一种从个青皮中提取纯化半弗林的优化方法.对同一批个青皮细粉,分别采用乙醇回流提取,D101型大孔吸附树脂柱吸附,不同体积分数的乙醇溶液洗脱;以及应用稀盐酸提取,001x8型强酸性阳离子树脂柱分离,不同质量分数的氨水溶液洗脱.然后对各洗脱液进行TLC显色和HPLC检测,计算得辛弗林的纯度.结果表明,质量分数4%的氨水洗脱和001x8型强酸性阳离子树脂柱效果最好,辛弗林纯度达到45.34%.     

大豆浓缩蛋白的酶法改性及其在西式火腿中的应用

采用酶法对大豆浓缩蛋白进行改性。以水解度（ＤＨ）为３％和６％的酶法改性大豆浓缩蛋白的功能性质相当或超过大豆分离蛋白。将其应用于西式火腿的加工，提高了产品的出品率和质量。     

鸡腿蘑发酵液中抑制非酶糖糖基化反应活性物质的分离及分析

以体外非酶糖基化抑制率为主要检测指标,对鸡腿蘑发酵液中抑制非酶糖基化反应具有较高活性的物质进行了初步的分析与分离,经过AB-8大孔树脂和C18反相柱的多次分离,获得一种具有高非酶糖基化反应抑制活性物质鸡腿蘑素(Comatin),经HPLC-MS分析其相对分子质量为168.在2 mg/mL质量浓度条件下,体外非酶糖基化抑制率达到95.86%,半抑制质量浓度IC50为0.39 mg/mL,体外实验初步分析鸡腿蘑素可能与蛋白质某一位点结合,且这种结合是在己二醛与牛血清白蛋白结合之后.