扶正抑瘤颗粒对食管癌、胃癌组织细胞周期及核转录因子的影响

目的：观察扶正抑瘤颗粒对食管癌、胃癌患者肿瘤组织细胞周期及核转录因子(NF-κB)的影响。方法：76例食管癌、胃癌患者随机分为2组,服药组服用扶正抑瘤颗粒15日后,与对照组分别采取手术切除肿瘤组织,用流式细胞仪检测肿瘤组织细胞周期、凋亡率和NF-κB水平。结果：服药组较对照组NF-κB水平明显升高(P<0．05);肿瘤细胞G0／G1期比率明显升高(P<0．05),S期比率明显降低(P<0．05)。同时,服药组癌细胞有明显的凋亡现象,其凋亡率与对照组比较差异有显著性(P<0．01)。结论：扶正抑瘤颗粒可提高肿瘤细胞NF-κB的表达,阻滞肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡。     

复方中药制剂对肿瘤细胞周期影响的实验研究

目的 :探讨了应用中药制剂扶正抑瘤颗粒对肿瘤细胞增殖周期影响。方法 :采用流式细胞术。结果 :使用药物后 ,能够改变肿瘤细胞增殖周期的各期细胞分布比例 ,与模型组比较有显著性差异。结论 :中药扶正抑瘤颗粒能够改变肿瘤细胞周期时项分布 ,具有明显的抑瘤作用。     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌细胞H22凋亡的影响

目的:研究中药复方扶正抑瘤颗粒药物血清对小鼠肝癌H22细胞凋亡的影响.方法:扶正抑瘤颗粒含药血清温育体外培养的小鼠肝癌H22细胞,利用光镜、电镜、流式细胞仪、原位末端标记(TUNEL)等方法观察其诱导小鼠肝癌H22细胞的凋亡作用.结果:扶正抑瘤颗粒含药血清可明显诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡,随着培养时间的延长和用药剂量的增加,细胞凋亡率随之增加,与空白对照组比较P＜0.01或0.05.结论:扶正抑瘤颗粒药物血清可诱导肝癌H22细胞凋亡.     

扶正抑瘤颗粒对乳腺癌核转录因子-kB及细胞周期的影响

目的：研究扶正抑瘤颗粒(FYK)对乳腺癌肿瘤组织核转录因子-κB(NF-κB)和细胞周期的影响及其临床意义。方法：55例乳腺癌患者，随机分为治疗组和对照组，两组均用常规化疗，治疗组同时口服FYK，1个月后取肿瘤组织用流式细胞仪检测NF-κB的表达情况及肿瘤细胞周期各时相的比例。结果：治疗组与对照组比较，NF-κB的表达明显提高(P＜0．01)；G0／1期细胞比例明显升高(P＜0．01)，S期细胞比例及细胞增殖指数(P1)明显下降(P＜0．01)。结论：FYK可提高乳腺癌组织NF-κB表达水平；能升高G0／1期细胞比例，降低S期细胞比例及PI值，对乳腺癌患者的预后起积极作用。     

扶正抑瘤颗粒对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞P53、 BCL-2蛋白表达的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(FYK)对小鼠肿瘤细胞凋亡相关基因P53、BCL-2蛋白表达的影响。方法:将48只小鼠分成FYK大剂量组、FYK小剂量组、天仙胶囊阳性对照组和荷瘤模型组,造模形成实体瘤后分别灌胃FYK、天仙胶囊、生理盐水18天,取瘤组织用流式细胞仪检测P53、BCL-2蛋白表达。结果:FYK组肿瘤细胞P53蛋白表达升高、BCL-2蛋白表达下降,与模型组相比较有显著性差异(P<0.01)。结论:FYK具有促进肿瘤细胞P53表达和抑制BCL-2表达作用。     

扶正抑瘤颗粒对乳腺癌核转录因子-kB及细胞周期的影响

目的:研究扶正抑瘤颗粒(FYK)对乳腺癌肿瘤组织核转录因子-κB(NF-κB)和细胞周期的影响及其临床意义。方法:55例乳腺癌患者,随机分为治疗组和对照组,两组均用常规化疗,治疗组同时口服FYK,1个月后取肿瘤组织用流式细胞仪检测NF-κB的表达情况及肿瘤细胞周期各时相的比例。结果:治疗组与对照组比较,NF-κB的表达明显提高(P<0.01);G_(0/1)期细胞比例明显升高(P<0.01),S期细胞比例及细胞增殖指数(PI)明显下降(P<0.01)。结论:FYK可提高乳腺癌组织NF-κB表达水平;能升高G_(0/1)期细胞比例,降低S期细胞比例及PI值,对乳腺癌患者的预后起积极作用。     

扶正抑瘤汤对肿瘤细胞端粒酶活性影响的实验研究

目的 :探讨扶正抑瘤汤抗肿瘤作用的机理。方法 :用 S1 80 瘤株接种昆明种小鼠建成 S1 80 实体瘤模型 ,采用扶正抑瘤汤等中药灌胃治疗 ,用端粒酶试剂盒检测肿瘤细胞端粒酶活性。结果 :各中药治疗组肿瘤细胞端粒酶活性较 NS(荷瘤 )组明显降低 ( P<0 .0 0 1)。结论 :扶正抑瘤汤可以明显抑制肿瘤细胞端粒酶的活性 ,是其抗肿瘤作用的机理之一。     

中药复方对小鼠肝癌皮下移植瘤细胞凋亡和免疫功能的影响

目的研究复方中药解毒消u饮和扶正抑瘤方对小鼠肝癌皮下移植瘤细胞凋亡和免疫功能的影响。方法将30只雄性ICR小鼠随机分为3组,即种瘤并灌胃解毒消瘢饮和扶正抑瘤方组（中药组）,种瘤并灌胃生理盐水组（模型组）,不接种移植瘤组（空白组）,分段给药4周后流式细胞仪测定细胞免疫功能及肿瘤细胞早期凋亡和晚期坏死率。结果模型组CD3^＋、CD3^＋CD4^＋细胞较空白组显著下降（P〈0．05）,中药组CD3^＋、CD3^＋CD4^＋细胞较模型组显著增多（P〈0．05）,各组间CD8^＋、CD^4＋／CD8^无显著性差异（P〉0．05）。中药组肿瘤细胞早期凋亡和晚期坏死率较模型组显著升高（P〈0．01）。结论解毒消瘕饮和扶正抑瘤方的联合用药能提高移植瘤小鼠细胞免疫功能,诱导移植瘤细胞凋亡。     

扶正抑瘤颗粒对H22瘤细胞bax、bcl-2及 caspase-3蛋白表达的影响

目的观察扶正抑瘤颗粒对H 22瘤细胞bax、bcl-2及caspase-3蛋白表达的影响.方法采用免疫组织化学方法检测瘤组织切片中bax、bcl-2及caspase-3的蛋白表达.结果扶正抑瘤颗粒各治疗组bax及caspase-3的IOD值均高于模型组,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05);扶正抑瘤颗粒各治疗组bcl-2的IOD值均低于模型组,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).结论通过促进bax及caspase-3的蛋白表达、抑制bcl-2基因的蛋白表达来诱导H22瘤细胞凋亡,进而发挥抑瘤效应.     

扶正抑瘤汤对人肝癌细胞Hu-7移植瘤裸鼠模型的影响

目的:探究扶正抑瘤汤对人肝癌细胞Hu-7移植瘤裸鼠模型的影响。方法:对75只裸鼠进行人肝癌细胞Hu-7移植建模后,随机分成对照组、5-氟尿嘧啶组、高剂量扶正抑瘤汤组、中剂量扶正抑瘤汤组、低剂量扶正抑瘤汤组,分别给予生理盐水、5-氟尿嘧啶、扶正抑瘤汤(高、中、低剂量)干预3周后处死,记录和比较5组裸鼠的移植瘤质量、抑瘤率、凋亡细胞数量、自噬小体数量和Beclin-1、LC3、Bnip3表达情况。结果:5-氟尿嘧啶组、高剂量扶正抑瘤汤组、中剂量扶正抑瘤汤组、低剂量扶正抑瘤汤组裸鼠的肝癌移植瘤平均质量均低于对照组、抑瘤率均高于对照组(P0.05);与中剂量扶正抑瘤汤组和低剂量扶正抑瘤汤组比较,5-氟尿嘧啶组、高剂量扶正抑瘤汤组裸鼠的肝癌移植瘤平均质量均降低,抑瘤率增加(P0.05);电镜下,5-氟尿嘧啶组、高剂量扶正抑瘤汤组裸鼠的移植瘤细胞双层膜自噬小体数量较多,而中剂量扶正抑瘤汤组、低剂量扶正抑瘤汤组裸鼠的移植瘤细胞自噬小体较少;与对照组比较,5-氟尿嘧啶组、高剂量扶正抑瘤汤组、中剂量扶正抑瘤汤组的裸鼠的Beclin-1、LC3、Bnip3的表达增加(P0.05),与中剂量扶正抑瘤汤组和低剂量扶正抑瘤汤组比较,5-氟尿嘧啶组、高剂量扶正抑瘤汤组的裸鼠的Beclin-1、LC3、Bnip3的表达增加(P0.05)。结论:扶正抑瘤汤能抑制人肝癌细胞Hu-7移植瘤裸鼠肿瘤的生长,增强肿瘤细胞的自噬活性,以高剂量扶正抑瘤汤的作用最明显。     

中药“扶正祛积汤”联合埃克替尼对肺癌移植瘤凋亡的影响

目的:从诱导细胞凋亡机制研究中药"扶正祛积汤"联合埃克替尼对肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑瘤作用。方法:以A549细胞皮下注射裸鼠腋下形成移植瘤,随机分成模型组、埃克替尼组、中药"扶正祛积汤"组和中药"扶正祛积汤"联合埃克替尼组(联合组),每组5只,给药21 d,计算各组移植瘤的抑瘤率和联合组的增效率。采用TUNEL法检测各组移植瘤细胞凋亡率。采用免疫组化法和Western Blot法分别检测凋亡相关蛋白Fas、Bax和剪切caspase-3的表达情况。结果:埃克替尼组、中药"扶正祛积汤"组和联合组的抑瘤率分别为14.74%、12.76%和31.25%,联合组增效率为111.11%。联合组凋亡率(46.03±9.26)%均明显高于埃克替尼组(28.40±3.36)%(P0.01)。与埃克替尼组相比,联合组瘤组织Fas、Bax和剪切caspase-3表达均增加(均P0.05)。结论:中药"扶正祛积汤"可以明显提高埃克替尼对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑瘤作用,协同增效抑瘤机制可能和引起Fas、Bax和剪切caspase-3表达上升导致诱导细胞凋亡增加有关。     

清热解毒扶正颗粒对PI3K/Akt/NF-κB信号通路的影响

目的探讨清热解毒扶正颗粒对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)的部分作用机制。方法采用烟熏及气管内注入脂多糖建立COPD大鼠模型,经清热解毒扶正颗粒治疗后,用ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor,TNF-α)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(metallopeptidase inhibitor-1,TIMP-1)水平;用Western Blot检测肺组织磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol3-hydroxy kinase,PI3K)、蛋白激酶B (protein kinase B,Akt)、核因子-κB-1 (nuclear factor-κB-1,NF-κB-1)蛋白表达。结果造模后大鼠血清的TNF-α、TIMP-1、MMP-9均不同程度的升高,与空白对照组比较,TNF-α、MMP-9升高,有显著性差异(P0.05),TIMP-1升高无显著性差异(P0.05)。经清热解毒扶正颗粒灌胃治疗后,大鼠血清的TNF-α、TIMP-1、MMP-9均不同程度的降低。与模型组比较,清热解毒扶正颗粒低、中、高剂量组显著降低TNF-α水平(P0.01);清热解毒扶正颗粒中剂量组显著降低TIMP-1水平(P0.01),清热解毒扶正颗粒高剂量组显著降低TIMP-1水平(P0.05),清热解毒扶正颗粒低剂量组降低TIMP-1水平,但差异不显著(P0.05);清热解毒扶正颗粒低、中、高剂量组降低MMP-9水平不显著(P0.05)。造模后磷酸化Akt、NF-κB-1、PI3K蛋白表达不同程度地增高,与空白组比较,模型组增高有显著性差异(P0.05)。经清热解毒扶正颗粒灌胃治疗后,与模型组比较,清热解毒扶正颗粒高剂量组显著降低磷酸化Akt、NF-κB-1、PI3K蛋白表达水平(P0.05);清热解毒扶正颗粒中剂量组显著降低磷酸化Akt蛋白表达水平(P0.05);清热解毒扶正颗粒中剂量组、低剂量组对磷酸化NF-κB-1、PI3K蛋白表达作用不显著(P0.05),清热解毒扶正颗粒低剂量组对磷酸化Akt作用不显著(P0.05)。结论清热解毒扶正颗粒可降低炎性因子水平,抑制Akt、NF-κB-1、PI3K蛋白表达,进而抑制炎症反应,对PI3K/Akt/NF-κB信号通路有一定的调节作用。     

扶正抑瘤颗粒对荷瘤(H22)小鼠T淋巴细胞Fas/FasL蛋白表达的影响

目的:观察复方中药制剂扶正抑瘤颗粒(FYK)对荷瘤(H22)小鼠T淋巴细胞凋亡相关基因Fas/FasL蛋白表达的影响。方法:将48只小鼠分为中药大、小剂量组、天仙胶囊阳性对照组和模型组,造模形成实体瘤后,分别灌胃FYK和天仙胶囊、生理盐水,18天后取血应用流式细胞仪测定Fas和FasL的蛋白表达。结果:各治疗组Fas蛋白表达较模型组下降,与模型组相比较有显著性差异(P<0.001)。各治疗组FasL蛋白表达较模型组升高,与模型组相比较有显著性差异(P<0.001)。结论:FYK可显著减轻荷瘤(H22)动物T淋巴细胞凋亡,在肿瘤的免疫逃逸中有重要意义。     

扶正抑瘤颗粒对食管癌放疗患者红细胞免疫功能的影响

为观察扶正抑瘤颗粒 (主药 :红芪、当归、莪术、墓头回 )对红细胞免疫功能的影响 ,6 3例食管癌患者随机分成常规放疗组和放疗 扶正抑瘤颗粒组。采用郭峰法测定放疗前和放疗 2 1d后患者红细胞C3b受体花环率 (RBC C3bRR)和红细胞黏附免疫复合物花环率 (RBC ICRR)。结果 :放疗前两组患者两红细胞免疫指标无明显差异 ,放疗 2 1天后扶正抑瘤颗粒组与常规放疗组RBC C3bRR分别是 10 0 3%、7 4 6 % ,P <0 0 1;RBC ICRR分别是 2 2 5 5 %、2 4 6 9% ,P <0 0 1。提示食管癌患者红细胞免疫功能紊乱 ,扶正抑瘤颗粒有纠正其紊乱的作用     

基于肿瘤微环境中TLR4/NF-κB通路的变化探讨乳癌术后方对乳腺癌小鼠肺转移的影响

目的:观察乳癌术后方对乳腺癌肺转移模型小鼠移植瘤生长的影响,探讨其可能的作用机制。方法:萤火虫荧光素酶标记的小鼠乳腺癌肺高转移细胞4T1(4T1-luc)接种于小鼠第三对乳房脂肪垫建立乳腺癌肺转移模型;于接种后7 d随机分组:NS组、扶正组、解毒组、全方组及环磷酰胺组,每组6只,连续给药21 d。计算肿瘤抑制率,以生物发光成像系统监测肿瘤细胞在体内的生长过程,通过肺转移灶定量分析观察小鼠肺转移情况,并采用蛋白印迹法(Western blotting)检测原位瘤中TLR4、NF-κB及IκB等蛋白的表达。结果:经过21 d给药,除了扶正组小鼠体重变化不明显,其余各组体重均有不同程度的降低。与NS组相比,各用药组瘤体积、肺转移抑制率均有所降低;全方组瘤体积、肺转移抑制率均较扶正组低(P0.05),与解毒组相比仅瘤体积差异有统计学意义(P0.05)。各组小鼠原位瘤组织中NF-κB蛋白表达水平无明显差异,但是与NS组相比,给药组的磷酸化的NF-κB蛋白(p-NF-κB)及磷酸化的IκB蛋白(p-IκB)均有明显降低,且全方组较扶正组、解毒组表达更低。另外,与NS组比较,乳癌术后方全方组及其拆方组IκB蛋白表达均有所上升,而TLR4蛋白表达水平均有所下降。结论:乳癌术后方对乳腺癌肺转移模型小鼠均有抑瘤和抗肿瘤转移作用,其机制可能与调节肿瘤微环境中TLR4/NF-κB通路相关蛋白表达有关。     

扶正抑瘤汤对肿瘤细胞周期及端粒酶影响的实验研究

目的探讨扶正抑瘤汤抗肿瘤的作用机理.方法用S180瘤株接种昆明种小鼠,造成S180实体瘤模型,扶正抑瘤汤等中药灌胃治疗,用流式细胞仪分析实体瘤的细胞周期;用端粒酶试剂盒检测端粒酶活性.结果各治疗组肿瘤细胞G0/1期比率升高,S期比率下降,端粒酶活性被抑制,与生理盐水(荷瘤)组相比,差异有显著性(P＜0.001).结论扶正抑瘤汤能阻滞肿瘤细胞增殖的进程,阻抑肿瘤细胞DNA的合成和复制,而端粒酶活性被抑制是影响肿瘤细胞增殖周期进程的机理之一.     

β-七叶皂甙治疗创伤性脑水肿分子作用机制的实验研究

目的　研究 β-七叶皂甙 (β -Aescin)对大鼠急性脑损伤后脑组织NF -κB活性的影响。方法　 6 2只SD大鼠采用自由落体致伤法制作脑外伤模型 ,随机分成假手术对照组 (A组 )、创伤组 (B组 )、β -七叶皂甙治疗组 (C组 )、吡咯烷二硫基甲酸酯 (PDTC)治疗组 (D组 ) ,每组分别在术后 6h、2 4h和 3d 3个时点收取脑组织标本 ,采用凝胶电泳迁移率分析法 (EMSA)测定脑组织NF -κB活性 ;同时测量脑组织含水量以及做病理形态学观察。结果　与A组比较 ,B组大鼠脑损伤后脑组织NF -κB活性和脑组织含水量显著增高 (P <0 .0 1) ;C、D组无显著性差异 ,但D组脑组织含水量略有增高 ;与B组比较 ,C组和D组脑组织NF -κB活性 (P <0 .0 1)、脑组织含水量 (P <0 .0 5 )均显著降低。结论　β-七叶皂甙可以抑制NF -κB活化 ,可能是 β -七叶皂甙治疗创伤性脑水肿的分子作用机制之一。     

核因子кB对支气管哮喘大鼠淋巴细胞增殖和凋亡的调节作用及雷公藤甲素对其影响

目的 探讨核因子κB(NF—κB)是否参与支气管哮喘淋巴细胞增殖和凋亡的调节过程以及雷公藤甲素对哮喘淋巴细胞增殖和凋亡的调控作用是否通过NF—κB发挥。方法 分别给予哮喘大鼠模型NF—κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)和免疫抑制剂地塞米松及雷公藤甲素干预,进行病理检查、气道反应性测定,采用免疫荧光法检测肺组织和脾淋巴细胞NF—κB P65的表达,免疫组织化学法测定脾淋巴细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、流式细胞术检测脾淋巴细胞凋亡,电泳迁移率改变试验测定NF—κB活性。结果 哮喘气道及脾淋巴细胞NF—κB的核表达量和活性均明显高于正常对照(均P<0.05);哮喘脾淋巴细胞的增殖率明显高于正常对照(P<0．05)。而凋亡率明显低于正常对照(P<0．05);NF—κB抑制剂PDTC的应用可使哮喘异常上调的NF-κB核表达量及活性下降,脾淋巴细胞增殖减少、凋亡增多：且NF—κB活性与脾淋巴细胞的增殖率呈显著正相关(r=0．89,P<0．05),而与其凋亡率呈显著负相关(r=0．54,P<0．05)。在体应用雷公藤甲素后,哮喘气道及脾淋巴细胞NF—KB的核表达量及活性、脾淋巴细胞的增殖率均明显下降(均P<0．05),而凋亡率明显增加(P<0．05),同时气道炎性细胞的浸润及气道高反应性亦明显减轻(均P<0．05),且气道嗜酸粒细胞的数量及气道的反应性与NF—κB活性呈显著正相关(r分别为0．79和0．68,P<0．05);雷公藤甲素的作用与地塞米松差异无显著性(P>0．05)。结论 (1)NF—KB通过促进淋巴细胞增殖并抑制其凋亡而参与哮喘炎症反应及气道高反应性的形成;(2)雷公藤甲素通过抑制NF—κB进而抑制淋巴细胞增殖,从而发挥抗哮喘气道炎症的作用,它抑制NF—κB的分子机制是否与糖皮质激素类似有待进一步研究。     

扶正抑瘤汤诱导荷瘤（S180）小鼠肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的：探讨扶正抑瘤汤对肿瘤细胞凋亡的影响。方法：扶正抑瘤汤对荷瘤(S180)小鼠灌胃治疗20天后,剥离肿瘤组织,用流式细胞仪、DNA琼脂糖凝胶电泳检测扶正抑瘤汤诱发荷瘤(S180)小鼠肿瘤细胞凋亡的情况。结果：扶正抑瘤汤大、小剂量组流式细胞仪检测出现亚二倍体峰(AP峰),DNA琼脂糖凝胶电泳图上出现DNA梯形条带(NDA ladder)。结论：扶正抑瘤汤能诱导荷瘤(S180)小鼠肿瘤细胞凋亡。     

“扶正祛积汤”联合埃克替尼通过细胞周期阻滞机制协同抑制肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤增殖的研究

目的:从诱导细胞周期阻滞机制研究中药"扶正祛积汤"联合埃克替尼对肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤的协同抑瘤作用。方法:(1)将A549细胞裸鼠移植瘤随机分成模型组、埃克替尼组、中药"扶正祛积汤"组和中药"扶正祛积汤"联合埃克替尼联合组(联合组),每组5只,按分组给药,21 d后处死裸鼠,计算各组抑瘤率和联合组增效率;(2)采用流式细胞仪检测各组移植瘤细胞周期分布情况;(3)采用免疫组化法和Western Blot法分别检测CDK4、Rb和Cyclin D1的表达水平。结果:(1)埃克替尼组、中药"扶正祛积汤"组和联合组的抑瘤率分别为14.74%、12.76%和31.25%,联合组增效率为111.11%,说明中药"扶正祛积汤"可以增效埃克替尼的抑瘤作用;(2)联合组G0/G1期细胞比例(54.51±0.35)%均明显高于埃克替尼组(49.39±0.27)%、"扶正祛积汤"组(47.59±1.05)%和模型组(45.88±0.24)%(P0.05),细胞周期G1/S阻滞最更明显;(3)联合组瘤组织Cyclin D1和CDK4表达水平均低于埃克替尼组、中药"扶正祛积汤"组和模型组(均P0.05),Rb表达则均高于上述3组(均P0.05)。结论:中药"扶正祛积汤"可以增效埃克替尼对肺癌细胞A549裸鼠移植瘤的抑制增殖作用,其协同抑瘤机制可能和引起Cyclin D1、CDK4表达进一步下降和Rb表达进一步上升导致细胞周期G0/G1阻滞加重有关。