凋亡细胞TUNEL技术经验与改进

检测凋亡细胞的方法有几种 ,细胞凋亡过程中核酸内切酶的活化是关键的过程 ,其导致 DNA被裂解成寡核苷酸大小的片段 ,因此 ,这个过程由于在琼脂糖凝胶电泳上出现典型的DNA梯形带而被检测到 ,但是这种方法既不能检测单细胞水平的凋亡 ,又不能提供细胞发生凋亡的位置和细胞的分化     

原位细胞凋亡TUNEL法检测培养细胞中的凋亡细胞

目的　探讨细胞凋亡TUNEL法检测体外培养细胞中凋亡细胞的特异性、敏感性。方法　用末端脱氧核苷酸转移酶介导duTP缺口末端标记法(TUNEL)检测了体外培养的白血病细胞经化疗药物处理后的细胞涂片和再生障碍性贫血病人骨髓涂片。结果　与化疗药物共同培养的白血病细胞和再生障碍性贫血病人的骨髓细胞中有较多的凋亡细胞。被染成紫色的细胞在形态学上符合凋亡细胞的形态学改变。结论　TUNEL法可用于培养细胞中凋亡细胞,并能检测早期的细胞凋亡,并可通过计算标记指数对凋亡细胞进行定量或半定量,因此在预测白血病的药物敏感性研究方面具有重要的应用价值。     

细胞DNA-Feulgen染色方法的改良

自从1924年Feulgen等人建立了DNA-Feulgen染色方法以来,至今这种方法仍是DNA定量测定的主要染色方法之一.     

髓性过氧化物酶染色方法的改进

目的寻找一种简便可靠的血细胞髓性过氧化物酶染色方法。方法采用硫酸铜溶液固定样品、联苯胺为底物和沙黄为复染剂的改进方法,与经典的Washburn等方法比较。结果不同浓度的硫酸铜溶液对细胞形态和染色结果都有影响,5%~7%的硫酸铜溶液较为适度;观察多种底物都不比联苯胺有更多的优点;选择沙黄为复染剂可以高度突出本法染色阳性反应细胞的特点;比对40例不同疾病骨髓涂片的染色结果,改进方法具有可靠的准确性。结论改进方法具有试剂简单、操作容易、染色成功率高等优点,是一种方便可行的血细胞髓性过氧化物酶染色法。     

细胞DNA—Fuelgen染色方法的改良

自从 192 4年 Feulgen等人建立了 DNA- Feulgen染色方法以来 ,至今这种方法仍是 DNA定量测定的主要染色方法之一。我们在从事工作中 ,做了大量的 Feulgen染色以及 DNA含量测定工作 ,在传统的 DNA- Feulgen染色基础上 ,对经典的 Feul-gen染色方法 [1 ]进行了改良 ,获得了理想的特异性 DNA染色效果。经过多次与原 Feulgen染色方法及 DNA测定结果对比 ,改良的 Feulgen染色方法具有结果恒定、染色清晰、组织标本保留时间长、具有重复性和测定标本的稳定性。而且染液的放置时间明显延长 ,节省了染液的配置时间及染料用量 ,并在整个染色…     

细胞凋亡的荧光染色法用于白血病细胞药物敏感试验的研究

我们采用了一种新的利用细胞凋亡机制筛选抗癌药物的方法,即细胞凋亡的荧光染色法（ａｐｏｐｔｏｓｉｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅａｓｓａｙ,ＡＦＳ）进行药敏试验,并初步证明它具有比原有ＭＴＴ法更特异、更灵敏等优点,将来可推广至临床使用。材料和方法１细胞株Ｒ...     

细胞凋亡检测方法评价

现知细胞凋亡与多种临床疾病 (如病毒性感染、肿瘤和自身免疫病等 )的发病机制以及拟订防治的方法密切相关。但实验室迄今尚无单一理想的凋亡检测方法。本文结合新近文献和作者在研究中的体会 ,就凋亡检测方法 ,适用范围及应用中的关键环节 ,影响因素和结果分析等方面作一评价。一、凋亡细胞形态学的检测1 .显微镜观察　体外培养的细胞一旦凋亡即离壁变圆、解聚、膜皱缩、折光性下降。 HE染色见核浓缩 ,聚集至核膜下形成半月形 ,蹄形或镰形。电镜或相差显微镜可见胞浆膜失去伪足和微绒毛 ,表面变平滑。共聚焦显微镜还能看到核碎裂的三维改…     

用瑞氏染色及四种细胞化学染色进行急性白血病的FAB分类109例分析

目的:探讨急性白血病FAB分类的准确率。方法:骨髓穿刺涂片、瑞氏及细胞化学染色镜检。结果:瑞氏染色后阅片,按FAB分类诊断准确率达81.6%。配合四种细胞化学染色诊断准确率可达95.4%。结论:对不能开展M IC分型及血液病少的医院,用瑞氏染色及四种细胞化学染色对急性白血病进行FAB分类是完全可以的。     

DNA末端原位标记结合免疫酶标技术研究骨髓增生异常综合征原位细胞凋亡

目的　观察骨髓增生异常综合征 (MDS)患者原位细胞凋亡数量及红系、巨核系凋亡状况。方法　用DNA末端原位标记 (ISEL)结合碱性磷酸酶 抗碱性磷酸酶 (APAAP)免疫酶标技术分析 2 5例MDS患者骨髓塑料冷包埋切片中造血细胞原位凋亡数量及红系和巨核系凋亡状况 ,缺铁性贫血 14例作对照。结果　MDS患者凋亡细胞数平均为 (39.44± 2 9.34 ) /mm2 ,对照组为 (13.43± 8.39) /mm2 (P<0 .0 1) ;MDS中低危组 (RA +RAS)凋亡细胞数为 (4 7.5 6± 32 .86 ) /mm2 ,较高危组 (RAEB +RAEB t)[(2 1.87± 13.6 5 ) /mm2 ]高 (P <0 .0 5 )。MDS患者红系、巨核系细胞凋亡分别占该两系细胞的 3.3%和4 5 % ;对照组分别为 3.0 %和 2 .8% ,两组比较差异无显著性。部分显示红系、巨核系形态学特征的凋亡细胞不表达簇分化抗原。结论　MDS存在过度凋亡 ;MDS中危组细胞凋亡数高于高危组 ;未观察到有核红细胞及巨核细胞凋亡明显增加 ,可能与晚期凋亡细胞表面抗原丢失有关     

TUNEL Assay for Identifying Ablated Myocardium

The terminal deoxynucleotidyl transferase biotin‐dUTP nick end labeling (TUNEL) assay identifies apoptosis and is used in transplant pathology to detect cardiac allograft rejection. We illustrate the use of TUNEL in identifying segments of ablated ventricular myocardium, and discuss its advantages over conventional histopathological stains. The TUNEL assay can be useful to investigators of catheter ablation therapy. (PACE 2010; 33:1548–1549)     

踝足矫形器的改进与应用

目的:设计和制作“T”形和可调式踝足矫形器(AFO),探讨其对预防、矫治踝关节畸形的作用。 方法:截瘫、偏瘫及骨折患者中配戴“T”形AFO(T形组)40例,配戴传统式AFO(传统组)34例及可调式 AFO(可调组)10例,分别观察其踝关节活动度的保持状态。结果:配戴4-12周后T形组仅3例踝关节活 动度评为差,传统组10例,2组比较差异有显著性(P<0.01);可调组中8例畸形状况明显改善。结论:“T” 形AFO可预防足下垂和内外翻足;可调式可以较好矫治踝关节畸形,2种既保留原有的功能,又增加和扩大 了对踝关节畸形的预防、矫治作用。     

牛舌模型技术改良及临床教学应用

目的 改良制作具备多种会阴裂伤伤口的牛舌模型,并探讨其用于助产专业临床教学的可行性和有效性.方法 在原有牛舌模型基础上,改良制作具备多种会阴裂伤伤口(包括阴道壁舌状裂、会阴侧切加直裂、Ⅰ～Ⅳ度会阴裂伤、阴道壁血肿、缝合线穿透直肠壁等)和能进行肛门检查的模拟直肠及有张力的肛门括约肌的模型.将78例到分娩室临床实习的助产专...     

无创正压通气的临床应用及其进展

机械通气是抢救呼吸衰竭、心力衰竭等危重病患者重要手段之一。传统意义上的机械通气是指有创通气，是通过气管插管连接患者与呼吸机，这种连接方式能确保机械通气的效果，但同时也造成了气道损伤、脱机困难，患者耐受性差等缺点。近年来，通过鼻罩或面罩连接呼吸机和患者的无创正压通气（noninvasive positive pressure ventilation，NPPV）技术得到广泛使用，并成为慢性阻塞性肺疾病（c0PD）急性加重期、急性肺损伤（ALI）、急性呼吸窘迫综合征（ARDS）、急性心源性肺水肿、重症哮喘等所致急性呼吸衰竭的重要呼吸支持手段。本文介绍NPPV的作用原理与适应证，阐述实施NPPV必要的技术要求及常见并发症的处理，综述如下。     

应用三腔二囊管的改良方法

三腔二囊管压迫止血是治疗食管胃底曲张静脉破裂出血的有效方法之一 ,但是由于此方法会造成众多不良反应 ,已有诸多报道[1] 。为了减少不良反应 ,增加患者的耐受性及止血效果 ,现将其改良方法加以总结如下。1　置入方法的改良罗伟香等[2 ] 运用导丝交换法置管 ,与传统置管法比较 ,成功率有明显的提高。具体方法为 :常规检查胃管和三腔二囊管 ,剪去胃管前端盲端及有侧孔部分 ,插入 5 0～ 6 0cm至胃内 ,将不锈钢导丝涂上石蜡油 ,从胃管内插入至胃内 ,助手固定导丝 ,操作者慢慢退出胃管 ,将三腔二囊管外抹石蜡油 ,腔内注射石蜡油 5～ 10ml润滑…     

结肠清洁灌肠方法的改良与应用

三叉神经痛在保守治疗无效时，常采用外科治疗。目前，在国内外开展的有颅外三叉神经周围支撕脱术、颅内感觉根切断术、血管减压术和射频热凝术。但由于颅内手术及射频热凝术术后并发症多、手术风险大、术后复发率高，不易被病人所接受。1995～2002年，我科在传统的三叉神经周围支撕脱的基础上，采用种植体填塞三叉神经孔治疗三叉神经痛，取得了良好的效果，现将21例手术的术前准备、术中配合及术后护理总结如下。     

持续质量改进在预防和控制医院感染中的应用

目的探讨持续质量改进在预防和控制医院感染中的应用及其效果。方法对2009-2011年解放军第163医院的感染情况进行分析,持续质量改进,制定实施方案,评价效果。结果经过持续质量改进,医院感染发生率由2009年的4.30%下降至2011年的2.49%,环境卫生学监测合格率由2009年的97.26%提高至2011年的99.01%。结论持续质量改进有利于促进预防和控制医院感染良性循环模式的建立,对预防和控制医院感染有重要的作用。     

持续质量改进在大便标本采集送检中的应用

目的探讨持续质量改进（continuous quality improvement,CQI）在大便标本采集送检中的应用成效。方法分析249例患者大便标本送检率低（67.9%）的原因有护士在繁忙的工作中对大便标本送检的重要性认识不足,缺乏主动服务意识,在管理方面缺乏大便标本采集送检流程;老年患者多,由于便秘致无大便送检;事务中心人员缺乏大便标本采集相关知识,对大便标本及时送检的意义不明确,工作缺乏主动性。制定预期目标,实施相应的质量改进方案,评价持续质量改进效果。结果实施CQI前后大便标本送检情况比较,差异有统计学意义;患者对护士采集大便标本的服务满意度比较,差异有统计学意义,实施CQl后患者对护士采集大便标本服务满意度明显提高。结论实施CQI有效提高了大便标本送检率,提高了患者满意度。