老年学习记忆减退大鼠的海马GABA能神经元数量变化

为探讨γ-氨基丁酸 (GABA)能神经元在老年脑的改变及其与老年性学习记忆减退间的关系。本研究通过 Morris水迷宫测试将老年大鼠分为学习记忆正常和损害组 ,用免疫细胞化学和体现视学方法定量描述 GABA能神经元的改变。结果显示 ,老年记忆正常和损害组海马本部各区的 GABA能神经元均较年轻组明显减少 ,但正常组和损害组海马之间无显著性差异。齿状回分子层的 GABA阳性神经元的数量仅在老年学习记忆损害组明显减少 ,且 GABA神经元数量与搜寻平台的游泳时间呈负相关 (r=- 0 .91,P<0 .0 1)。提示老年学习记忆能力减退可能与齿状回分子层的 GABA能神经元丢失有关     

老年学习记忆减退大鼠脑线粒体DNA缺失

目的和方法:测定老年大鼠脑mtDNA缺失型(以下简称缺失型),缺失mtDNA比例,探讨mtDNA缺失与老年性学习记忆减退的关系,为研究其分子机制提供基础资料。用Morris水迷宫将老年大鼠(24个月)筛选为老年学习记忆正常和学习记忆减退两组。用稀释PCR法测定大鼠大脑皮质、海马和小脑缺失型mtDNA比例。结果:青老年鼠大脑皮质、海马和小脑均存在mtDNA缺失,片段为4834bp;青年鼠的缺失比例约为0.00018%。老年记忆正常鼠上述3个脑区缺失型mtDNA缺失比例分别是青年鼠的6倍、6倍和2倍;老年记忆减退大鼠上述脑区的缺失型mtDNA比例分别是老年记忆正常鼠的2倍、1.8倍和3倍。结论:衰老时脑组织缺失型mtDNA增多,而老年学习记忆减退鼠较老年学习记忆正常鼠mtDNA缺失进一步成倍增加,表明相关脑区的mtDNA缺失在老年学习记忆减退的细胞分子机制中发挥重要作用。     

衰老时海马神经元树突的可塑性增生

用形态计量的方法对老年(30个月)和成年(17个月)大鼠脑(Golgi染色标本)的海马CA3区锥体细胞的树突分支进行分级计数和测量了终末支的长度。结果是CA3神经元基树突和顶树突共有9级分支,衰老时第4级和第9级分支有显著的增多(P<0.02,P<0.03)。基树突终末支的长度衰老时无明显改变,顶树突终末支长度较成年组增加(P<0.05)。提示衰老时海马神经元的树突仍具有一定的增生和分化能力。这可能是对神经元退变的一种代偿机制。     

老年大鼠海马神经元细胞核体积和直径的体视学观察

目的 确定老年大鼠海马神经元的细胞核是否萎缩。 方法 从1、2和3年龄的正常雄性SD大鼠（每个年龄组5只）的一侧（随机选择）大脑半球,完整剥离海马结构,甲基丙烯酸树脂包埋后作连续切片,厚 40 μm, 等距随机抽选3~4张切片,过碘酸、席夫试剂和苏木精染色。用体视学方法估计海马神经元细胞核的大小：先用光学体视框均匀随机抽选细胞核,然后在其最大轮廓的聚焦平面（光学切片）测其费雷特（Feret）直径作为细胞核直径,然后在其核仁的最清晰聚焦平面用核距测量法测其体积。 结果 整个海马内,3个年龄组的神经元细胞核平均直径为8.7~9.2 μm,平均体积为392~457 μm3,两者组间差异皆无显著性。海马各区——CA区（海马本部）、齿状回或下托的细胞核平均直径或体积组间差异也无显著性。 结论 从中年到老年,大鼠整个海马内神经元细胞核的大小未发现明显的年龄相关变化。     

大鼠运动皮层的胼胝体起源细胞与GABA能终末的突触联系

用ＨＲＰ逆行标记结合ＧＡＢＡ免疫组织化学染色法，在电镜下观察大鼠运动皮层胼胝体起源细胞的超微结构特征及其与ＧＡＢＡ能终末的关系。结果表明：大鼠运动皮层内的轴突终末与胶胝体起源细胞胞体仅形成对称型突触，与近端树突梗也形成少量的对称型突触，而一其树突棘则形成非对称型突触。与胞体和近端树突形成对称型突触的轴突终末主要是ＧＡＢＡ能终末。由这些ＧＡＢ能终末形成轴－体突触数量占胞体表面总对称性突触数的８５．６     

蓝斑周围树突区向蓝斑的GABA能投射:中间神经元的可能来源

~~蓝斑周围树突区向蓝斑的GABA能投射:中间神经元的可能来源@陈鹏     

大鼠背海马内生长抑素mRNA神经元的老年变化

采用原位杂交组织化学及图像定量分析法，研究了大鼠背海马中生长抑素（ＳＳ）ｍＲＮＡ神经细胞的老年变化。年轻大鼠内，ＳＳｍＲＮＡ胞体主要分布于ＣＡ１和ＣＡ２区的锥体层和多形层、ＣＡ３区的辐状层和多形层，以及齿状回的多形层。老年大鼠内，ＳＳｍＲＮＡ胞体则主要集中于背海马的多形层。和年轻大鼠相比，老年大鼠背海马内ＳＳｍＲＡＮ胞体数量显著减少，胞体灰度值明显升高，而胞体截面积无明显年龄变化。结果表明，大鼠背     

大鼠在水迷宫训练后海马内神经纤维出芽的追踪研究

目的：以往研究发现了空间辨别性学习记忆可以引致大鼠海马ＣＡ３区多形层有纤维出芽，在训练的７￣１４天内，出芽的程度随着训练时间的延长而增多，但１４￣２１天则出现减少的趋势。该文探讨纤维出芽的程度与训练的时间间的关系。方法：用水迷宫训练大鼠２１天，使其在海马ＣＡ３区多形层有纤维，然后在不同时间段杀死取材，用Ｔｉｍｍ染色方法显示海马内出芽纤维进行比较，寻找停止训练不同时间出芽程度差异。结果：模型组，训练２１天，停止７天后的出芽纤维量与训练２１天的比有明显减少，多为点状的银颗粒分布在海马ＣＡ３区多形层内，偶尔可见片状的银颗粒残留。训练停止１４天后的与停止训练７天后的比又有所减少，片状的银颗粒完全消失，仅见点状的银颗粒散在分布于海马ＣＡ３区多形层内。训练停止２１天后的未见银颗粒沉积在海马ＣＡ３区多形层内，即出芽的纤维全部     

NOV蛋白在切割海马伞大鼠海马中表达的变化

通过切割右侧海马伞制备大鼠海马伞损伤模型,应用Westernblotting、免疫组织化学技术,观察切割海马伞后不同时程海马中肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)蛋白表达的变化,并对结果进行图像处理和统计学分析。Westernblotting结果显示,NOV蛋白在切割海马伞后3d表达开始上升,14d达高峰后缓慢下降。切割海马伞后14d切割侧和正常侧相比较,海马CA1-CA3区的锥体细胞层及齿状回颗粒层NOV阳性细胞数目无显著性差异(P>0.05),但切割侧NOV阳性细胞明显比正常侧深染,两侧比较平均灰度值有显著性差异(P<0.01)。结合本课题组以往的工作,本研究结果提示,切割海马伞后海马中高表达的NOV蛋白可能参与了诱导神经干细胞迁移和向神经元分化的过程。     

大鼠纹状体边缘区与海马逃避性学习记忆功能的比较

为了比较纹状体边缘区 (Mr D)与海马在逃避性学习记忆方面的差别 ,藉以探讨 Mr D与海马两个不同脑区在大脑学习记忆功能上的区别和作用地位。应用 Y迷宫训练大鼠后 2 4h,化学损毁大鼠双侧 Mr D或切断双侧穹窿海马伞 (fornix/fimbria,FF ) ,手术 5 d后再观察大鼠在 Y迷宫中学习记忆的行为表现。结果表明 ,化学损毁 Mr D组大鼠在 Y迷宫中的记忆能力和对照组相比 ,明显降低 ,差别显著 (P<0 .0 1) ;而切断双侧穹窿海马伞组大鼠与对照组相比 ,无显著性差异 (P>0 .0 5 )。说明大鼠在 Y迷宫中的逃避性学习记忆行为主要和 Mr D有关 ,和海马无明显关系。提示 Mr D和海马两个脑区在参与大脑的学习记忆功能方面 ,并非处于相同的位置     

单侧磨牙缺失对老年记忆减退大鼠海马结构的影响

为了探讨单侧缺牙对不同学习记忆能力老年大鼠海马结构的影响 ,本研究用 Morris水迷宫筛选出老年记忆减退鼠和老年记忆正常鼠 ,拔除单侧磨牙后 2个月 ,观察其海马结构神经元和胆碱能纤维密度的影响变化。结果显示 :(1)海马 CA1 区锥体细胞密度 :老年记忆减退鼠拔牙组较对照组 (未拔牙 )明显下降 (P<0 .0 1) ;(2 )海马 CA1 区 ACh E阳性纤维密度 :老年记忆减退鼠拔牙组和老年记忆正常鼠拔牙组均较对照组 (未拔牙 )明显下降 (P<0 .0 1)。结果提示 :单侧磨牙缺失可加速老年性学习记忆减退鼠海马结构的损害。     

慢性复合应激对大鼠学习和记忆的影响

本文观察慢性复合应激对海马长时程增强(LTP)和一氧化氮合酶1(NOS1)表达变化的影响,并探讨了其在学习与记忆中的作用。将Wistar大鼠随机分为对照组和慢性复合应激组,每组各10只。应激组动物采用4种应激原无规律、交替性地进行长达6周的慢性复合应激试验。实验过程中测定动物血清皮质酮(CORT)水平,采用Morris水迷宫和Y迷宫测试大鼠学习和记忆成绩,记录海马齿状回LTP群体峰电位(PS)幅值的变化,同时观察海马CA1及齿状回区NOS1阳性神经元数目的变化。结果显示:(1)与对照组比较,慢性复合应激组动物在应激第4周和第6周时,血清皮质酮浓度的比值显著增高(P<0.05,P<0.01);(2)高频刺激(HFS)后各时间点的PS幅值增高更为明显(P<0.01);(3)Morris水迷宫和Y迷宫实验后慢性复合应激组动物的学习和记忆成绩优于对照组(P<0.05,P<0.01);(4)慢性复合应激组和对照组大鼠海马齿状回NOS1阳性神经元个数分别为8.80±3.91和5.44±1.14,两者间有统计学差异(P<0.05)。以上结果提示,慢性复合应激对大鼠的学习和记忆有一定的影响,可能与齿状回群体峰电位幅值增强和NOS1表达增强有关。     

老年学习记忆减退大鼠齿状回突触的定量研究

据老年大鼠在Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫中的行为表现，将其分为老年学习记忆减退和学习记忆正常两部分，采用透射电镜观察、拍片，对齿状回中分子层触的数量和大小进行体视学定量分析。     

衰老晚期海马CA1区锥体细胞线粒体改变──电镜定量分析

选用成年健康SD大鼠20只.分为青年组（3个月）和老年组（34～36个月）二个实验组，每组10只。应用透射电镜结合体视学方法观察并比较了海马CA1区锥体细胞线粒体的变化，结果如下：和青年组相比，老年组肿胀、变性线粒体增多，体视学分析显示老年组线粒体密度和平均体积增大，线粒体数密度和比表面减少，线粒体切面积大小频数分布图向右侧迁移，显示到衰老晚期较小的线粒体数减少.较大的线粒体数增多。本研究结果表明，衰老晚期海马CA1区锥体细胞线粒体严重退变，进入失代偿状态。     

慢性复合性应激大鼠学习和记忆与海马突触后致密物质CaMKII的表达变化

目的　探讨慢性复合性应激对大鼠学习和记忆的影响 ,Ca2 + 钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(CaMKII)的表达 ,及其在学习与记忆中的作用。　方法　采用行为训练和免疫组织化学相结合的方法 ,将大鼠随机分为应激组和对照组 ,应激组动物进行 6周的慢性复合性应激试验。实验后 ,动物进行 3d的Morris水迷宫和Y迷宫测试 ,记录其学习和记忆成绩 ,同时观察CaMKII在海马CA1和CA3区的分布和表达。　结果　应激组动物的学习与记忆成绩均超过或优于对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;与对照组比较 ,CaMKII在应激组海马CA3区辐射层灰度明显降低(P <0 0 1) ,而始层灰度无明显变化 (P >0 0 5 ) ,在应激组CA1区海马辐射层和始层的灰度均较对照组降低 (P <0 0 5 ) ;大鼠的学习记忆成绩与CaMKII的表达呈正相关。　结论　慢性复合性应激致大鼠的学习与记忆能力加强 ,CaMKII在海马CA1区和CA3区的表达增加 ,说明CaMKII参与了慢性复合性应激对学习记忆的影响。     

海马的树突和树－树连接的超微结构

用电镜方法观察了大白鼠ＣＡ１区的神经组织超微结构，发现神经毯内的树突、侧棘、轴突以及神经胶质非常复杂。树突内微管显著。侧棘有不同的形态类型，有些侧棘常有小棘伸出。棘器不仅出现在侧棘内，而且在一些树突内也可遇见。某些侧棘内可见颗粒小泡或包被小泡。神经毯内广泛存在轴－树突触（圆形小泡，Ⅱ型突触），轴－棘突触（圆形小泡，Ⅰ型突触）和树－树突触（圆形小泡，Ⅲ型突触）。此外，还首次在海马内发现非突触性的树－树紧密连接，它可能是假突触，其功能意义有待进一步研究。本文提示海马树突和突触的复杂性可能对学习和记忆有着重要的作用。