人绒毛膜癌裸鼠原位移植模型的建立

目的建立人绒毛膜癌裸鼠原位移植瘤模型。方法培养人绒毛膜癌细胞系JAR,制备JAR单细胞悬液,给5只8周龄BALB/c裸鼠经皮下注射建立皮下移植瘤模型。待裸鼠皮下成瘤后,无菌条件下取瘤组织并切成1 mm^3组织块,通过手术方式植入10只10周龄BALB/c裸鼠子宫腔内,裸鼠濒死状时4%水合氯醛(10 g/kg)腹腔注射麻醉处死,观察子宫成瘤及腹腔转移情况。解剖取子宫原位移植瘤、腹腔内转移瘤、腹腔淋巴结及其他脏器组织标本,通过组织病理学检查进行鉴定。结果10只BALB/c裸鼠中共有7只裸鼠子宫内可见移植瘤肿块形成,其中2只可同时观察到子宫移植瘤和腹膜转移瘤。在病理学形态和结构上,皮下移植瘤模型、原位移植模型和腹膜转移瘤的瘤细胞与人绒毛膜癌细胞系JAR一致。结论成功建立人绒毛膜癌JAR细胞的BALB/c裸鼠原位移植瘤模型。     

小鼠树突状细胞肉瘤细胞系的建立及形态学鉴定

本研究目的是建立鉴定树突状细胞肉传代细胞系，即荷ＬＩＩ瘤６１５鼠脾脏进行原代细胞培养，经传统代培养后新建立一株体外传代细胞系，经鉴定为树突状细胞肉瘤细胞系，命名为ＤＣＳ。该细胞体外呈分支状。酶组织化学检查发现碱性磷酶酶、酸性磷酶酶、１非特异性脂酶、过氧化酶及胞膜ＡＴＰａｓｅ均阴性。     

人胰腺癌PANC-1细胞裸鼠移植瘤模型建立及其用于观察载siRNA纳米微粒体内效应的研究

 目的：探讨建立人胰腺癌PANC-1裸鼠移植瘤模型的最佳实验方法,并应用该模型进行载基因纳米微粒体内效应的研究。方法：将不同数量PANC-1细胞悬液接种于BALB/c (nu/nu)小鼠右侧背部皮下,当肿瘤体积达100 mm3时尾静脉注射siRNACY5.5纳米复合物进行活体荧光成像。此外,于尾静脉注射负载siRNAKras纳米复合物,蛋白印迹及免疫组织化学染色法观察肿瘤组织Kras蛋白表达水平。结果：1×107 cells/300 μL 接种成瘤率达100%,成瘤时间＜2周。荧光呈像及组织学检查显示载siRNA纳米微粒可靶向聚集在肿瘤组织发挥体内基因沉默效应。结论:本研究报道的人胰腺癌裸鼠移植瘤模型建立方法成瘤率达100%,成瘤时间短,是研究药物示踪和观察疗效的理想模型。     

黏液瘤病毒对裸鼠子宫内膜癌移植瘤的抑瘤作用及机制

目的 探讨黏液瘤病毒对裸鼠皮下移植子宫内膜癌的抑瘤作用及其可能机制.方法 采用皮下注射子宫内膜癌HEC-IB细胞的方法建立裸鼠子宫内膜癌模型.瘤内注射黏液瘤病毒后,观察肿瘤生长变化,并用免疫组化方法检测肿瘤组织中PI3K、Akt、GSK表达水平及活性的变化.同时通过瘤内注射灭活病毒和生理盐水作为对照组.结果 黏液瘤病毒对正常裸鼠不存在毒性及致病能力.黏液瘤处理组肿瘤大小较对照组缩小,差异具有统计学意义.经黏液瘤病毒处理的肿瘤组织中PI3K、Akt的表达水平较对照组显著降低.结论 黏液瘤病毒对裸鼠子宫内膜癌移植瘤具有抑瘤作用,其可能机制是通过调节PI3K/AKT（磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸苏氨酸激酶）信号通路调控细胞凋亡.     

人白血病K562细胞系在裸小鼠体内成瘤性的观察

用K56 2 细胞裸小鼠体内移植模型进行试验治疗研究 ,分别用K56 2 传代细胞直接接种和K56 2 瘤块移植法 ,将人白血病K56 2 传代细胞系 1× 10 7个细胞接种于裸小鼠皮下 ,其成瘤率为 32 % (8/2 5 ) ,38d肿瘤体积达 790 .8± 5 6 5 .7mm3。瘤块移植法未获可测量的瘤体。表明K56 2 细胞裸小鼠体内移植 (或细胞直接接种 )模型难以用作试验治疗研究。     

表皮生长因子及其抗体对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长…

在原代培养中添加大豆胰蛋白酶抑制剂，成功地建立了一株新的人胰腺癌细胞系ＰＣ－７。该细胞系经形态学和生物学研究证实为人胰腺癌细胞系。染色体核型分析和流式细胞ＤＮＡ含量分析表明ＰＣ－７细胞系为低二倍体。应用此细胞系建成的裸鼠移植瘤模型，观察表皮生长因子（ＥＧＦ）及其抗体（抗－ＥＧＦ）对裸鼠移植瘤生长的影响，发现ＥＧＦ组和抗－ＥＧＦ组分是对照组肿瘤重量的１３８％和６７％。组织学和超微结构研究表明：ＥＧＦ     

高转移人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立及其生物学特性

用人卵巢癌细胞系HO－8910移植探鼠，建立高转移人卵巢癌探鼠皮下移植瘤模型命名为（NSMO），已传代23次，仍保持高转移的特性。共接种BALB/c棵小鼠57只，皮下成瘤率为100％，平均带瘤存活时间为159．9天。在解剖47只裸鼠中有转移瘤鼠42只（89．4％）。最早出现转移的时间为56天。移植瘤组织学和超微结构保持原来人卵巢分化差的浆液性乳头状囊腺癌的形态特征和分泌功能。流式细胞术分析显示DNA指数为1．4，染色体分析显示众数为54（属于超二倍体），显示人类癌症的特征。移植瘤相关标记物检测显示大多数癌细胞雌激素受体和孕激素受体阳性。该模型为转移机制的研究和寻找抗转移药物提供了理想的工具。     

人乳头瘤病毒阴性的喉鳞癌细胞系的建立

目的 建立1株人乳头状瘤病毒（HPV）阴性的喉鳞状细胞癌细胞系,为体外研究喉癌提供理想的实验模型。方法 以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）证实为HPV阴性的高分化喉鳞癌手术切除标本接种于裸鼠皮下,取连续传代2次的裸鼠皮下移植瘤进行体外原代培养。通过光镜、电镜、生长曲线、细胞周期时相、软琼脂克隆实验、异种移植成瘤实验、角蛋白、癌胚抗原及HPV检测,对其生物学特性进行初步分析。结果 经裸鼠过渡所建立的高分化喉鳞癌细胞系（Lscc-02）目前已传至86代,细胞生长增殖稳定。该细胞系呈单层形式生长,群体倍增时间为39．1h。透射电镜下见胞质内典型的张力原纤维,细胞问以桥粒方式连接。染色体为人类核型,呈亚三倍体,众数分布在63～72。该细胞系具有恶性肿瘤细胞生长特征：软琼脂中形成克隆,裸鼠接种成瘤且形态结构、分化程度与原发瘤相似。免疫组织化学显示高分子量细胞角蛋白及癌胚抗原阳性,PCR显示HPV阴性。结论 建立Lscc-02细胞系为研究无HPV感染喉癌的发生、发展规律及HPV与喉癌演进的关系提供了有价值的体外模型。     

兔VX2肿瘤细胞系的建立及其生物学特性的观察

目的建立兔VX2肿瘤细胞系,观察其生物学特性。方法采用小块法对兔VX2肿瘤进行原代培养,体外传代观察,传代40次以上对培养细胞进行形态学观察、组织化学染色、细胞周期检查、核型分析、兔及裸鼠移植。结果新建立的兔VX2肿瘤细胞,呈多角形、短梭形,电镜下细胞内可见张力纤维、细胞间可见桥粒,细胞角蛋白阳性,体外连续培养10个月,传代70次以上,细胞倍增时间为34．5h,细胞周期测定G,期为69．3％,G：期为5．6％,S期为25．1％。染色体为亚三倍体核型,众数为58～62条。同种移植成瘤率100％,裸鼠移植成瘤率100％,无支原体污染。结论兔VX2肿瘤细胞系来源于兔鳞状细胞癌,可用于兔（较大动物）的肿瘤实验研究。     

表皮生长因子及其抗体对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长的影响

在原代培养中添加大豆胰蛋白酶抑制剂，成功地建立了一株新的人胰腺癌细胞系ＰＣ一７。该细胞系经形态学和生物学研究证实为人胰腺癌细胞系。染色体核型分析和流式细胞ＤＮＡ含量分析表明ＰＣ一７细胞系为低二倍体。应用此细胞系建成的裸鼠移植瘤模型，观察表皮生长因子（ＥＧＦ）及其抗体（抗一ＥＧＦ）对裸鼠移植瘤生长的影响，发现ＥＧＦ组和抗一ＥＧＦ组分别是对照组肿瘤重量的１３８％和６７％。组织学和超微结构研究表明：ＥＧＦ组的核分裂明显多于对照组，而抗一ＥＧＦ组则少于对照组．结果表明ＥＧＦ促进ＰＣ一７裸鼠移植瘤的生长，而抗一ＥＧＦ抗体可部分地抑制ＰＣ一７移植瘤的生长。     

Suppression of endometrial carcinoma cell tumorigenicity by human chromosome 18

Presumptive tumor suppressor genes may be localized to specific chromosomes by the procedure of microcell fusion, whereby individual chromosomes derived from normal human cells are introduced into tumor cells. Allelic loss on chromosome I 8 is commonly seen in endometrial carcinoma, and the DCC gene on chromosome arm 18q is a potential human tumor suppressor gene. In this study, we investigated the hypothesis that a gene on chromosome 18, possibly DCC, is capable of suppressing the tumorigenicity of endometrial carcinoma cells. Microcells from the mouse A9 cell clone containing one human chromosome I8 tagged with the pSV2-neo plasmid were fused with the highly tumorigenic endometrial carcinoma cell lines HHUA and Ishikawa, and G418-resistant microcell hybrids containing an extra copy of chromosome I8 were isolated. Clones isolated from the HHUA cell line were completely suppressed for tumorigenicity in nude mice, and clones from the lshikawa line were suppressed or inhibited for tumorigenicity. In contrast, growth rates in vitro were not significantly affected in clones from either parental cell line. DCC expression was elevated in most of the suppressed hybrids. These results indicate that a gene on human chromosome I 8 is capable of suppressing the tumorigenicity of endometrial carcinoma cells, and that DCC is a candidate for this endometrial carcinoma tumor suppressor gene. © 1995 Wiley-Liss, Inc.     

一株人胰腺癌细胞系的建立及其特性

人胰腺癌是很难建系的癌细胞之一,特别是从原发瘤建立的细胞系。我们成功地从一个胰腺癌组织建立了一株人胰腺癌细胞系,命名为PC-3。PC-3细胞呈上皮样,贴壁生长,经过四年连续培养,细胞系稳定。通过免疫组化、电镜观察、染色体及DNA含量分析,细胞集落形成及裸鼠移植,生长因子对瘤细胞生长的影响和癌基因的表达证实PC-3细胞系为人胰腺癌细胞系。PC-3细胞系的建立进一步丰富了人胰腺癌细胞库,对深入了解人胰腺癌细胞生物学及分子生物学特性提供了有力的物质基础。     

标记抗人肝癌单克隆抗体SPIO对荷瘤裸鼠的定位诊断作用

目的：探讨标记抗人肝癌单克隆抗体超顺磁性氧化铁粒子（ＭｃＡｂ－ＳＰＩＯ）对荷瘤裸鼠模型的诊断作用。材料和方法：用过碘酸盐法将Ｈａｂ－１８ 抗人肝癌单抗标记到ＳＰＩＯ粒子;建立裸鼠载瘤模型（ｎ＝１２ 只）。结果：实验组（ｎ＝ ８）从尾静脉注入０．３ ｍ ｇ Ｆｅ／２０ｇ 的ＭｃＡｂ－ＳＰＩＯ,给药后２４ 小时成像观察到裸鼠瘤结均有选择性信号下降,对照组（ｎ＝ ４）在注射ＬｇＧ－ＳＰＩＯ后未见明显信号改变。结论：ＭｃＡｂ－ＳＰＩＯ磁共振免疫成像对肝癌的早期定性诊断有较高价值。     

Growth and metastatic behavior of human tumor cells implanted into nude and beige nude mice

The growth and metastatic behavior of several human tumor lines grown in adult nude mice, nude mice pretreated with antiserum against asialo GM1 glycoprotein, and beige nude mice were studied. The cell lines were all injected s.c. and i.v. A human colon carcinoma line was also injected into the spleen, and two human renal carcinoma lines were injected into renal subcapsule. All the tumor lines grew as fast or faster in adult nude mice compared with beige nude mice. There were no discernible differences in the production of experimental lung metastasis among the three groups of mice, but human colorectal carcinoma cells and human renal carcinoma cells produced more metastases in nude mice than in beige nude mice after intrasplenic or renal subcapsule injection, respectively. In vitro cytotoxicity assays confirmed that adult nude mice had high levels of natural killer (NK) cell activity whereas nude mice pretreated with anti-asialo GM1 serum and beige nude mice did not. The in vitro NK cell activity of nude mice was demonstrable against mouse lymphoma cells but not against human leukemia cells which were sensitive to lysis by human NK cells. These results suggest that the implantation of human tumor cells into beige nude mice, which are deficient in NK cell activity does not provide an advantageous model for the study of growth and metastasis of human neoplasms.Abbreviations NK natural killer - HCC human colon carcinoma - HRCC human renal cell carcinoma - anti-asGM1 anti-asialo GM1 - i.s. intrasplenic - RSC renal subcapsule - HBSS Ca²⁺- and Mg²⁺-free Hanks' balanced salt solution     

新发现1例人卵巢上皮癌组织移植裸鼠形成的“端着丝粒染色体”恶性细胞系

目的 按照常用肿瘤细胞建系方法,以人卵巢上皮癌组织移植免疫缺陷小鼠,通过原代培养建立永生化细胞系,为人体肿瘤的研究提供体外研究模型。 方法 将1例卵巢浆液性乳头状癌IIIcG3患者手术切除的肿瘤组织接种裸鼠皮下成瘤,通过体外原代培养,建立1株悬浮生长的细胞系。通过光学显微镜、电子显微镜、生长曲线测定、染色体分析、克隆形成实验、双层软琼脂培养、裸鼠接种等,对其生物学特性进行研究。 结果 该细胞系已传至100代以上,命名为WSZ。其生物学特性为：形态学观察细胞呈悬浮球形生长状态;细胞生长增殖旺盛,对数期细胞群体倍增时间约15.8h;染色体为16~135条,以68和69条染色体为多见,染色体分析显示,基本全部为端着丝粒染色体;细胞克隆形成率为89.3%,具有软琼脂集落形成能力;异种移植实验表明10⁶细胞在裸鼠皮下可成瘤, 而100个细胞接种非肥胖型糖尿病/重症联合免疫缺陷（NOD/SCID）小鼠即可形成皮下肿瘤。 结论 WSZ能够在体外长期生长和稳定传代,WSZ是一高度恶性的细胞系。     

Four new human germ cell tumor cell lines

Four new human tumor cell lines, NCC-EC-1, NCC-EC-2, NCC-EC-3, and NCC-IT, were derived from different germ cell tumors established in vitro. On the basis of morphologic studies of cell cultures and nude mice xenografts, it was concluded that NCC-EC-1, and NCC-EC-2 cell lines are equivalent to developmentally nullipotent embryonal carcinoma; cell line NCC-EC-3 showed trophoblastic differentiation, whereas the NCC-IT cell line was composed of developmentally pluripotent cells capable of somatic and extraembryonic differentiation. Nude mouse-xenografts of NCC-IT contained foci of embryonal carcinoma, yolk sac tumor, immature somatic tissues, and trophoblastic giant cells indicating that this cell line is indeed developmentally pluripotent. We conclude that human embryonal carcinoma cell lines may be developmentally nullipotent, show restricted capacity for differentiation, or be developmentally pluripotent.     

小干扰RNA抑制卵巢癌模型裸鼠移植瘤葡萄糖调节蛋白94的表达及意义

背景：一些实验在模型鼠移植瘤中葡萄糖调节蛋白94被敲除后,细胞黏附中断,刺激肝起源细胞增殖,进而促进肝肿瘤的发生,推测葡萄糖调节蛋白94在肝癌中起到保护作用。 目的：应用小干扰RNA技术抑制裸鼠卵巢癌模型皮下移植瘤内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白94的基因表达,探讨移植瘤中葡萄糖调节蛋白94基因及蛋白表达的变化对移植瘤生长的影响。 方法：从GeneBank中选取人类葡萄糖调节蛋白94基因序列,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6 的真核表达载体psiSTRIKETM/葡萄糖调节蛋白94。建立人卵巢癌HO-8910细胞株裸鼠皮下接种模型,并将真核表达载体转染入裸鼠移植瘤体内,观察肿瘤生长情况。卵巢癌裸鼠模型经过不同给药方案干预后分为特异性小干扰RNA组,非特异性小干扰RNA组和生理盐水对照组, RT-PCR和免疫组化SP法检测葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白在肿瘤内的表达情况,并观察模型裸鼠的移植瘤生长情况。 结果与结论：成功构建RNA干扰质粒载体,所有裸鼠模型均接种成功,5 d后即可见皮下肿瘤形成,14 d左右肿瘤直径达7-10 mm。转染质粒完毕后抑瘤率为65.1%,与非特异性小干扰RNA组和生理盐水对照组比较,差异有显著性意义(P < 0.01)。psiSTRIKETM/GRP94治疗后瘤体内葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白显著下调(P < 0.01)。说明靶向葡萄糖调节蛋白94 mRNA的小干扰RNA可显著抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能是诱导葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白表达下调所致。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

Survivin反义寡核苷酸抑制肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用

目的：研究survivin反义寡核苷酸（ASODN）对人肝癌耐药细胞株移植裸鼠皮下后，移植瘤生长的抑制作用。方法:将人肝癌耐药细胞系SMMC-7721/ADM裸鼠移植瘤模型，随机分为：空白对照组、单纯脂质体转染组、正义链转染组、200 μg/L ASODN组、400 μg/L ASODN组和600 μg/L ASODN组，观察裸鼠移植瘤体积，计算抑瘤率。免疫组化检测Survivin蛋白的表达。结果:A组、B组和C组移植瘤随时间增长而增大，但3组间无显著差异（P>0.05）。D组、E组和F组注射ASODN后，裸小鼠移植瘤的体积随着注射ASODN时间的延长和ASODN浓度的增加，移植瘤生长越来越小，并呈时间-剂量-效应依赖性。实险第20 d D组、E组和F组的肿瘤抑制明显大于A组、B组和C组（P<0.05）。HE染色见对照组移植瘤细胞密集成群，核大深染，而ASODN组见肿瘤细胞少，癌细胞皱缩变圆，胞核固缩深染。免疫组化见对照组肝癌细胞浆Survivin蛋白表达较强，而ASODN组Survivin蛋白表达较弱。结论:Survivin反义寡核苷酸能够抑制裸鼠皮下移植瘤的生长。