LC-MS/MS法研究活血化瘀方中丹参素在兔体内的组织分布

目的：建立高效液相色谱-串联质谱分析方法，研究丹参-郁金中丹参素在兔体内的组织分布。方法：免灌胃给予丹参-郁金水煎液后，于30，50，70min处死，取心、脑、肝、肾、肺、脾组织，10％高氯酸沉淀组织蛋白，上清液2倍量乙酸乙酯萃取3次，氮气吹干，残渣用流动相溶解，高效液相色谱-串联质谱法测定各组织中的丹参素含量。结果：检测限为0．01μg／mL，线性范围为0．05～400．0μg/mL，方法回收率为83．2％～105．6％；丹参中丹参素在各组织中的分布特征为：肾〉脑〉肝〉脾〉肺〉心。结论：该方法精密、灵敏、准确，可用于其他生物样品中丹参素的测定。     

呋喃丹及其代谢产物呋喃酚在大鼠体内的死后分布研究

建立生物样品中呋喃丹及其代谢物呋喃酚的高效液相色谱-质谱联用内标分析法,研究两者大鼠体内的死后分布规律。灌胃给予大鼠4倍LD₅₀(44 mg/kg)浓度为1.8 mg/mL自制呋喃丹混悬液,死亡后分别于0,12,24,48,72和96 h取材,HPLC-MS/MS法测定心血、心、肝、脾、肺、肾、脑、左下肢肌、胃壁等检材中呋喃丹及呋喃酚含量。结果显示,死后0 h呋喃丹在大鼠体内分布如下:胃壁>肺、肝>肾、脾>心脏、心血、脑,并逐渐从胃壁、肺及心血向肝、肾、心及骨骼肌中转移。而呋喃酚在大鼠体内分布如下:胃壁>心血>肝、肾>脾、肌肉、肺、脑>心,心血、心、肝、脾、肾中的呋喃酚浓度死后显著上升(P<0.05)。呋喃丹的降解及呋喃丹在不同组织间的扩散迁移共同导致了呋喃丹及其代谢产物呋喃酚组织浓度的死后变化。本研究建立的呋喃丹及呋喃酚组织含量HPLC-MS/MS检测方法及获得的死后分布规律可作为呋喃丹中毒死亡案件的法医学鉴定提供参考,并且为全面正确采取检材进行毒物分析提供方向。     

汉坦病毒感染BALB／c小鼠组织中特异性抗原及病毒RNA的检测

目的检测汉坦病毒感染BALB／c小鼠组织中特异性抗原及病毒RNA,建立汉坦病毒感染动物的评价体系。方法将1000LD50的汉坦病毒悬液经肌肉注射感染BALB／c小鼠,在感染后的第3天,分别取小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等组织研磨后制成病毒悬液,以ELISA法和qRT—PCR法分别检测各组织中的汉坦病毒特异性抗原及病毒RNA。结果BALB／c小鼠感染汉坦病毒后短期内在脑和肝组织中可以检测到大量汉坦病毒特异性抗原以及病毒RNA,而心、脾、肺、肾组织中未检测到特异性抗原及病毒RNA。结论实验结果为建立汉坦病毒感染动物模型的评价体系提供了参考依据。     

降香对丹参素兔药代动力学及组织分布的影响

目的:用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)法研究使药降香对君药丹参中丹参素兔药代动力学及组织分布的影响.方法:加热回流法制备丹参单煎液及丹参-降香合煎液,以4-羟基苯甲酸为内标,丹参素为指标,HPLC-MS法测定不同采样点丹参素的血药浓度及组织中的含量,DAS2.0数据处理软件拟合房窒模型并计算药代动力学参数.结果:配伍前,丹参素的t1/2a为20.8 min;V1>为84.5 L/kg;AUC(0-∞)>为119.4ms/(L·min);CL为0.42 L/(min·kg).配伍后,丹参素的t1/2a为30.9 min;V1为108.3 L/kg;AUC(0-∞)>为178.7 mg/(L·min);CL为0.28L/(min·kg).降香能使丹参素组织分布特征由肾>心>脑>肝变为肾>肝>脑>心.结论:配伍后,使药降香能提高君药丹参中丹参素吸收入血的程度,使丹参素向肝、脑中转移,为阐明"君-使"对药"丹参-降香"的相使作用提供依据.     

汉滩病毒感染SCID小鼠动物模型的建立

目的通过检测汉滩病毒(HTNV)76-118株感染SCID小鼠组织中的特异性病毒抗原、核酸的分布以及病理学变化,以建立汉滩病毒感染动物的评价体系。方法取汉滩病毒76-118株病毒液通过肌肉注射接种SCID小鼠,接种3 d后,取小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等组织,并分别利用ELISA法检测各组织中的病毒特异性抗原;利用q RT-PCR法检测各组织中的病毒RNA;利用HE染色法检测各组织中的病理学变化。结果SCID小鼠感染汉滩病毒后,用夹心ELISA法可在其心、肝、脾、肺、肾组织中检测到HTNV特异性抗原,平均P/N值分别为2.33、7.41、8.13、7.40、2.89,其中脾病毒抗原含量最高;以q RT-PCR法检测小鼠各脏器组织中的HTNV核酸,在实验组小鼠的心、肝、脾、肺、肾中均可检测到病毒核酸,与对照组相比,其相对量分别达到2~(2.11)、2~(6.23)、2~(8.21)、2~(5.26)、2~(3.79)倍,其中脾病毒核酸含量最多;HE染色法可见肝、脾、肺中伴有显著的病理学变化。结论成功检测了汉滩病毒感染SCID小鼠后组织中特异性抗原、核酸的分布以及病理学变化,从而为建立汉滩病毒感染动物的评价体系提供一种参考。     

八宝素的组织分布和排泄研究

目的 研究八宝素(Hylotelephin)的组织分布和排泄,为临床试验提供依据.方法 用HPLC紫外检测法,以蒽为内标,苯甲酰氯为衍生剂,甲醇-水为流动相,测定静脉注射八宝素后生物样品中的药物含量.结果 Beagle犬静脉注射八宝素10.6 mg/kg后5 min药物已迅速分布到各组织;药后90 min大部分组织中药物含量明显低于5 min时的含量.药物主要分布在肾、肝和脾组织,其次在心、肺、肠等组织中.肾、肝和脾中的药物含量与相同时间的血浆药物浓度接近.大鼠静脉注射八宝素36 mg/kg后从尿、粪和胆汁(0～48 h)中排泄的原型药物分别占给药总量的88.45%,0.61%和1.08%;给药后3 h 67%药物已从体内排出.结论 八宝素在Beagle犬体内分布和排泄较快,药物主要分布在肾、肝、脾和血浆等组织中,主要以原型药物方式由尿液排泄.     

复方丹参注射液对汞中毒家兔不同组织脂质过氧化物的研究

通过皮下注射氯化高汞溶液造成家兔急性汞中毒模型。采用硫代巴比妥酸比色法测定肾皮质、肺、肝脾组织过氧化脂质含量，观察复方丹参注射液对其含量的影响，并同时测定了血尿素氮的动态变化。     

丁丙诺啡在家兔体内分布规律研究

目的:研究丁丙诺啡在家兔体内的分布规律。方法:家兔经灌胃或静脉注射给药丁丙诺啡氯化钠溶液(0.04mg/kg 丁丙诺啡),2 h 后处死家免,取血液、尿液、肝、肾、肺、胃、脑、心脏、胃内容物、粪便等体液、组织检材,处理后用液相色谱- 质谱(liquid chromatographic-mass spectrometric,LC-MS) 方法测定检材中丁丙诺啡含量。结果:家兔经灌胃或静脉注射丁丙诺啡2 h 后, 家兔体内尿液中丁丙诺啡浓度最高,其次是胃内容物,之后依次为脑、心脏、胃、肺、肾、肝、血液、粪便。结论:所建立的方法可用于丁丙诺啡涉毒案件中体液、组织检材的检验,尿液为鉴定丁丙诺啡滥用的最佳检材。     

高效液相测定加替沙星在大鼠体内的组织分布

目的建立HPLC测定大鼠肝、肾、肺、脾、心等组织内加替沙星的药物浓度.方法待测组织匀浆中加入加替沙星与内标环丙沙星后,用二氯甲烷提取,进行高效液相紫外检测,色谱柱为Sphweisorb ODS柱(5 μm粒径),200 mm×4.6 mm;流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液-甲醇-三乙胺(55:44.5:0.5), pH为3.10;流速1.0 ml/min,检测波长为293 nm.结果本测定方法肝、肾、肺、脾、心组织浓度的线性范围均为0.05～4.0 mg/L;相关系数分别为0.999 9,0.996 0,0.999 9,0.999 9,0.999 9;肝、肾、肺、脾、心的相对回收率分别为:91.4 %～99.2%,98.6%～104.4%,99.0%～110.2%,90.2%～98.7%,99.0%～100.0%;绝对回收率分别为:78.5%～92.4%,87.7%～94.8%,98.3%～111.6 %,83.5%～85.7%,81.4%～91.7%;日内、日间变异均小于10%,各组织中加替沙星的最低检测限均为0.04 mg/L.结论加替沙星在各组织中均有分布,其中肝、肾分布最多,该法测定大鼠各组织中药物浓度精确、灵敏、可靠,为加替沙星药代动力学研究提供依据.     

耻垢分枝杆菌疫苗经灌胃免疫在小鼠体内的分布与安全性研究

目的 探讨携带编码幽门螺杆菌UreB基因质粒(pLUB)的重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,M.s)经灌胃免疫在小鼠体内的分布和安全性.方法 将携带绿色荧光蛋白(GFP)基因质粒(pLUB)的重组耻垢分枝杆菌灌胃BALB/c小鼠后8周,处死小鼠,观察胃、心、肝、脾、肺和肾组织中荧光蛋白的分布,测定小鼠肌酐及ALT;处死小鼠,分离出肺、肾、肝并分别测定其重量及HE染色.结果 在BALB/c小鼠胃、脾组织中均检测到绿色荧光蛋白的表达,其他组织及对照组未检测到绿色荧光;小鼠体质量、各脏器质量、各血清肌酐和ALT含量与对照组无差异(P>0.05).结论 携带GFP的重组耻垢分枝杆菌可在胃和睥组织分布,对小鼠无系统毒性作用.