服棉酚者睾丸活检的免疫组织学观察

对48例服棉酚者睾丸活检组织进行了常规组织学及免疫组织学研究,电镜下可见除生精细胞形态发生明显改变外,还发现多种异常的曲细精管基膜结构,如接膜增厚、分层、断裂,出现大泡样颗粒和异常膜样结构及电子致密颗粒沉积等现象,免疫组织学检测见26例标本有免疫复合物沉积。另外,部分服药者睾丸组织中可见肥大细胞数目明显增多。最后,对服棉酚后产生不可逆性生精障碍的原因及其可能机制进行了讨论。     

棉酚对小鼠睾丸生精细胞凋亡影响的实验研究

目的　研究棉酚对小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。方法　选昆明种雄性小鼠 2 0只 ,随机分成对照组和服棉酚组 ,采用核固红—结晶紫染色法 ,对比观察小鼠睾丸生精细胞凋亡数目的变化。结果　服棉酚组小鼠睾丸生精细胞凋亡的数目 (3 0 .5 7± 3 .0 3 )较对照组 (6.3 8± 1 .41 )明显增多 (P <0 .0 1 )。结论　棉酚可促使小鼠睾丸生精细胞的凋亡数目增加 ,造成睾丸生精功能受损     

停服棉酚后睾丸活检及精液观察

用光镜检查服棉酚、不育及正常人(各2例)睾丸活检,结果:不育者睾丸曲细精管管腔闭锁,基膜增厚,透明样变,腔内以支持细胞为主;生精上皮细胞疏松变薄,组合紊乱,并中止于精子细胞阶段。服棉酚者睾丸萎缩,多数曲细精管退化消失,各级生精细胞消失,仅存支持细胞,且呈空网状结构。间质胶原纤维增生,间质细胞和小血管变性,大量淋巴细胞浸润。电镜观察2例服棉酚1和4年后,停药7和1年精液标本。发现精液中生精细胞和畸形精子仍多,但细胞质内多膜层结构,线粒体呈空泡状,顶体和尾部均不发育。     

不同旋光异构体棉酚对睾丸支持细胞的影响

研究不同旋光异构体棉酚对体外培养大鼠睾丸中支持细胞的影响。观察到不同旋光异构体棉酚均能引起支持细胞形态产生变化,细胞器中以线粒体变化最明显,表现为SDH活性减弱,有些酶粒变粗,电镜下看到线粒体肿胀,嵴排列不规则,甚至断裂或消失。细胞受损伤程度按( )<(±)<(-)棉酚程序。上述变化与口服棉酚大鼠睾丸中支持细胞变化相似。     

新生儿睾丸和副睾的组织学观察

新生男婴睾丸的曲精小管上皮,含精原细胞,可区分A型和B型,支持细胞为不规则形,数量较多。间质细胞,成群分布,细胞多边形,胞质含脂滴,嗜苏丹黑B颗粒或嗜六胺银颗粒,表明其已有分泌功能。输出小管和副睾管已可区分两种上皮细胞。     

右旋棉酚和左旋棉酚对离体大鼠黄体细胞的影响

利用大鼠黄体细胞体外培养技术,研究了右旋( )和左旋(-)棉酚对孕酮产生的影响。观察到在基础状态下,( )、(-)棉酚对孕酮产生有促进作用。浓度为20μmol/L时,孕酮产量(±SD)分别为60.3±10.1、70.2±5.1ng/10~6细胞,各自对照组分别为40.5±3.9、55.2±4.6ng/10~6细胞,差异有显著性意义(P均<0.05)。( ),(-)棉酚均抑制hCG促孕酮产生的作用,浓度为20μmol/L时,孕酮产量分别为142.5±17.8、159.2±8.6ng/10~6细胞,与各自对照组173.4±8.4、192.5±17.0ng/10~6细胞比较,差异有显著性意义(P均<0.01)。     

醋酸棉酚对人射出精子Ca^2＋内流和大鼠输精管收缩反应的影响

本实验旨在观察醋酸棉酚对人射出精子Ｃａ~（２＋）跨膜转运和对离休大鼠输精管收缩作用的影响。结果表明，醋酸棉酚抑制人射出精子Ｃａ~（２＋）内流，并呈量－效依赖关系。醋酸棉酚破坏精子膜内、外Ｃａ~（２＋）浓度梯度的动态平衡，可能是其抑制精子活力的重要机理之一。但醋酸棉酚对高Ｋ＋诱发离体大鼠输精管平滑肌的收缩作用没有影响，可能醋酸棉酚对大鼠精子膜有选择性的作用。     

醋酸棉酚对血浆孕酮和子宫平滑肌的作用

醋酸棉酚能兴奋雌激素化小鼠和豚鼠的离体子宫,对孕激素化或妊娠小鼠和豚鼠的离体子宫无明显影响。给妊娠大鼠灌服醋酸棉酚能使子宫自发收缩明显提高,该作用可被消炎痛拮抗。经醋酸棉酚处理的妊娠大鼠的离体子宫平滑肌对15-Me-PGF_2α的反应比对照组明显提高,醋酸棉酚能降低妊娠大鼠和超排卵大鼠血浆孕酮浓度。结果提示醋酸棉酚兴奋子宫平滑肌作用为雌激素促进;孕激素抑制,促进妊娠大鼠子宫自发收缩可能与其在卵巢水平降低血浆孕酮水平,及促进内源性前列腺素释放有关。     

Effects of Local Testicular Heating on Bcl-2 and Bax Protein Expression in Spermatogenic Cells in Rats

Objective To investigate the expression of Bcl-2 and Bax in spermatogenic cells induced by local testicular heating in rats Methods Forty adult male SD rats were divided into experimental group and control group at random. According to day 0.5, 1, 3 and 6 after local testicular heating, each group was divided into 4 subgroups： experimental subgroup （n=6） and control subgroup （n=4）. The expression of Bcl-2 and Bax in the spermatogenic cells was detected on day 0.5, 1, 3 and 6 after heat exposure by using immunohistochemistry. Results Compared with control groups, the ratio of positive cells and content of Bcl-2 positive cells significantly decreased in all experimental subgroups （P〈0.01）. The content of Bax positive cells increased in all experimental subgroups （P〈0.01）, the ratio of positive cells which had no significant difference （P〉0.05） except 6 d group decreased （P〈0.01 ）. Redistribution of Bax from a cytoplasmic to perinuclear or nuclear localization could be observed after heating. Conclusions Expression of Bcl-2 would decrease and Bax would increase with redistribution in spermatogenic cells in rats after heating. The change of Bcl-2 and Bax expression in spermatogenic cells would be correlated with the spermatogenic cell apoptosis induced by heating.     

醋酸棉酚对Raji细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察醋酸棉酚对人Burkitt淋巴瘤细胞株Raji细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用台盼蓝染色和噻唑蓝(MTT)法观察醋酸棉酚对Raji细胞生长存活的影响,瑞氏染色法观察药物处理后细胞形态学变化,琼脂糖凝胶电泳和Annexin V-FITC标记流式细胞仪检测细胞凋亡,流式细胞仪分析细胞周期、检测细胞凋亡率及Bcl-2蛋白表达水平变化,比色法测定Raji细胞Caspase-3样蛋白酶活性.结果 5 μmol/L以上浓度醋酸棉酚能抑制Raji细胞生长增殖并诱导其凋亡,效应与药物浓度及给药时间呈正相关.醋酸棉酚作用后,Raji细胞被阻滞于G_0/G_1期.比色法显示Caspase-3样蛋白酶活化.流式细胞仪检测到Bcl-2蛋白表达下调,且与Caspase-3活化在时间上存在同步趋势.结论 醋酸棉酚能抑制aaji细胞增殖并诱导凋亡,其原因可能与调节细胞周期及下调Bcl-2蛋白表达有关.     

Study on the Regulation of Bcl-2 Gene on Rat Spermatogenic Cells Apoptosis in Transcription Level

Apoptosis is regarded as a natural phenomenon accompanying the whole periodof spermatogenesis.Therefore,the number of mature sperm was only5 0 % to75 %of the estimated number.Some interventions,such as vasoligation,could promoteapoptosis.Bcl-2 gene,known as an anti-apoptosis gene,plays a very importantrolein spermatogenic cells apoptosis in rats with vasoligation and vasostomy[1 ] ,but thestudies on this key gene have been almostlimited atprotein level so far[2～ 4] .We de-signed this experime…     

人小肠黏膜潘氏细胞形态学和功能作用的实验研究

 [目的] 观察人各段小肠潘氏细胞的分布，形态结构特点，探讨潘氏细胞颗粒状态与小肠黏膜上皮细胞增殖之间的关系。[方法] 人十二指肠、空肠、回肠及结肠黏膜上皮组织各12例，应用免疫组织化学SP法检测潘氏细胞内溶菌酶及黏膜增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。全自动图像分析系统进行图像半定量分析。[结果] 人肠道中潘氏细胞仅存在于小肠，从十二指肠、空肠到回肠，细胞数量呈递增分布，各组之间有显著性差异（P<0.05）,结肠中未见有潘氏细胞。潘氏细胞的颗粒分泌状态与小肠上皮细胞PCNA增殖指数的表达呈直线正相关（r =0.776, P=0.003）。[结论] 人潘氏细胞颗粒分泌与小肠黏膜细胞的增殖状态有关，PCNA指数在一定程度上可以反应肠上皮干细胞的增殖状态,潘氏细胞对维护肠黏膜屏障功能的完整性具有重要的生理学意义。     

平阳霉素对人静脉畸形内皮细胞增殖活性和细胞形态的影响

目的观察平阳霉素(PYM)对体外培养的人静脉畸形内皮细胞(human venous malformation endothelialcells,HVMECs)增殖活性和细胞形态的影响。方法采用组织块培养法,从人静脉畸形组织中培养人静脉畸形内皮细胞(HVMECs)。采用CCK-8(cell counting kit-8)试剂盒检测不同浓度PYM(0.01～1 000μg/mL)作用不同时间(6、12、18、24、48h)后HVMECs的生长抑制率。同时,通过倒置相差显微镜和扫描电镜观察内皮细胞形态。结果 0.01、1、10、1 000μg/mL PYM作用内皮细胞6h后,细胞活性为对照组的(91.3±0.4)%、(82.4±0.5)%、(75.2±0.1)%、(28.3±0.5)%。5、10、1 000μg/mL PYM作用内皮细胞24h后细胞增殖活性分别为对照组的(75.0±0.3)%、(58.4±0.5)%、(2.0±0.5)%(均P<0.01)。>10μg/mL PYM对内皮细胞活性抑制较严重。0.01μg/mL PYM作用于内皮细胞24h后,细胞未见明显改变,1μg/mL PYM作用细胞24h后,细胞内线粒体等细胞器肿胀较明显,10μg/mL PYM作用于内皮细胞24h后可见内皮细胞空泡性变,胞质水肿,核膜皱缩,染色质浓缩,核仁趋边。结论平阳霉素对人静脉畸形内皮细胞的增殖具有抑制作用,与剂量、时间呈正相关。在体外实验中PYM能诱导静脉畸形内皮细胞形态呈现凋亡样改变。