脐血间充质干细胞与帕金森病

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)作为一种成体干细胞,具有未分化细胞的特性,能高效率的自我更新,并且有着向多种成熟细胞分化的潜能,在生物医学和组织工程中具有巨大的科研价值[1].骨髓是第一个被报道含有MSCs的组织来源,也是如今临床应用的主要来源,但获取过程有创,易导致感染、出血、慢性疼痛,并且其增殖、分化潜能均随年龄的增长而降低,因此对于老年患者的效果得不到保证.     

骨髓间充质干细胞在周围神经系统的应用

1968年。Friedenstein发现骨髓中存在一类可以单克隆形式增殖．在体外培养过程中细胞形态与集落方式类似成纤维细胞的细胞，这类细胞与造血干细胞完全不同。实验发现在体外培养这类细胞的过程中，严格控制其所处的微环境，这类细胞可向骨、软骨、脂肪．肌肉、神经元及神经胶质细胞等间充质来源的细胞类型分化，在体内移植后同样具有这一特性，因而将其命名为骨髓间充质干细胞。[第一段]     

骨髓间充质干细胞在肾脏疾病中的应用

背景：研究证明,移植间充质干细胞可以修复受损肾脏并可分化为肾小管上皮细胞,从而恢复肾脏的组织结构和功能。目的：综合分析骨髓间充质干细胞对肾脏疾病的治疗作用及其作用机制。方法：应用计算机检索中英文科技期刊数据库1999-01/2009-12期间与间充质干细胞移植和肾脏疾病防治相关的文献,检索词“间充质干细胞、肾脏疾病”,限定文章语言种类为中英文。对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文,文献所述内容应与间充质干细胞移植、肾脏疾病相关,且以近5年发表在较权威杂志者优先。排除重复性文章及Meta分析类文章。结果与结论：骨髓间充质干细胞移植可以促进多种肾脏疾病的恢复,通过向肾小球和肾小管细胞分化及促进肾脏分泌等机制对肾脏疾病起到治疗作用。骨髓间充质干细胞用于治疗肾脏疾病多停留在试验阶段,研究对象主要是动物模型,临床研究开展不多,主要在IgA肾病及一些继发性肾脏疾病,如狼疮性肾炎、淀粉养变肾损害、转移性肾细胞癌等中应用,且大多都处于摸索阶段,有很多问题有待解决。     

脂肪间充质干细胞移植治疗阿尔茨海默病

阿尔茨海默病是一种神经退行性疾病,其典型特征是进行性神经元缺失,迄今为止还没有一种药物和治疗方法对其彻底根治。随着干细胞技术与理论的发展和完善,阿尔茨海默病的治疗研究主要集中在神经干细胞移植方面。为避免免疫反应,最好用自体干细胞进行移植,而获取自体神经干细胞是非常困难的。与神经干细胞相比,间充质干细胞具有更广泛的来源,可以从肝脏、骨髓、脂肪等多种组织中获得,且具有多向分化潜能的特质,在一定诱导条件下可分化为骨、肌肉、脂肪等多种组织,其中脂肪间充质干细胞因其具有容易获得、对患者损伤小等特性而备受关注。新近研究显示,脂肪间充质干细胞具有神经分化潜能,预测其很可能在阿尔茨海默病治疗中发挥重要作用。     

间充质干细胞治疗癫癎的研究进展

间充质干细胞的应用是神经系统疾病治疗的新技术。骨髓、脐血、脂肪源性的间充质干细胞先后被用于治疗癫癎的实验。在癫癎治疗中,间充质干细胞主要通过旁分泌细胞因子、神经递质和神经营养因子调节癫癎病灶的生化环境和受体功能,也可作为基因工程载体发挥治疗作用。本综述总结了间充质干细胞治疗癫癎的实验方法、移植途径和可能机制。     

温度敏感型骨髓间充质干细胞的构建

目的 构建温度敏感型永生化的骨髓间充质干细胞( tsSV40LTag - BMSCs).观察不同温度条件下,tsSV40LTag - BMSCs的增殖情况.方法 分离、培养大鼠原代骨髓间充质干细胞(BMSCs),FITC标记CD29、CD31、CD44、CD45、CD90抗体,CD34单克隆抗体荧光标记大鼠BMSCs,流式细胞仪检测其表面标志.pRNS -1质粒转染BMSCs以及阳性克隆的筛选和扩增.RT - PCR检测BMSCs中tsSV40LTag的表达.测定33℃和37C两种温度下,tsSV40LTag - BMSCs生长曲线.结果 成功构建tsSV40LTag - BMSCs.33℃时,tsSV40LTag - BMSCs生长增殖速度较快,在体外培养条件下可连续传代增殖;37℃时,细胞生长增殖速度明显减慢,甚至停止生长.结论 tsSV40LTag- BMSCs的成功构建,为其移植治疗颅脑创伤奠定了实验基础.     

骨髓间充质干细胞对创伤性脑损伤治疗的研究进展

骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Derived Mesenchymal Stem Cells,BMSCs)是一种存在于骨髓中的组织干细胞,具自我更新和多向分化潜能,在不同的诱导条件下可分化为多种细胞,其中包括神经元细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞。BMSCs能合成多种细胞生长因子,促进中枢神经系统的神经再生,促进损伤脑组织的生存与重塑。     

骨髓间充质干细胞治疗缺血性脑卒中的机制研究

骨髓间充质干细胞具有易获取、易培养、低免疫原性等优点,一直是治疗治疗缺血性脑卒中的研究热点,本文主要对骨髓间充质干细胞的生物学特征及其在神经功能修复方面的作用机制等问题予以综述。     

稳定表达报告基因脂肪间充质干细胞的培养与分子影像鉴定

背景：干细胞为治疗缺血性心脏病带来希望,然而干细胞的移植后转归及有效监测方法等严重制约其应用。报告基因成像为干细胞的实时定量评价提供有力手段。 目的：构建稳定表达报告基因的脂肪间充质干细胞,并运用报告基因成像等方法实现其体外和移植后的评价与鉴定。 设计、时间及地点：细胞学体外和体内随机对照试验,于2009-08/2010-08在第四军医大学西京医院心血管内科实验室完成。 材料：纯系SPF级?actin-luc 转基因小鼠10只,用于细胞分离;BALB/c裸鼠(T细胞缺陷)10只,用于细胞移植。 方法：繁殖与筛选出携带?actin-luc报告基因小鼠后,改良胶原酶消化法分离培养其脂肪间充质干细胞,取第3代细胞进行其表面标志鉴定并采用fluc报告基因成像对其进行体外和体内定量评价和示踪。 主要观察指标：?actin-luc转基因小鼠的成像鉴定,培养第3代ADMSCs的形态及表面标志,细胞体外及体内移植后fluc光学报告基因成像及其定量分析。 结果：转基因小鼠稳定携带fluc,由其腹腔脂肪组织分离和培养出的基质细胞较高表达MSCs表面标志CD90(98.92%)及CD44(89.73%),而CD45、CD34 和CD31呈现低表达(<5%),其细胞数与fluc报告基因生物发光信号强度呈显著的直线相关（r2=0.96）,与对照组相比P<0.01。细胞活体肌肉移植24h后存活并显示较强的生物发光信号,在底物注射后0-42 min内先迅速增强后平缓减弱,21min时最强,达6.92?06?.11?05Photons?s-1?cm-2?sr-1。 结论：携带?actin-luc报告基因小鼠脂肪组织分离的基质细胞高表达间充质干细胞表面标志,可在体外和外周肌肉组织移植后稳定表达该报告基因并实现fluc分子影像的示踪与定量。     

骨髓间充质干细胞移植修复肾损伤

背景：研究发现外源性骨髓间充质干细胞能够定居于肾脏并且分化为肾脏细胞，参与损伤肾组织的修复，但对其修复作用途径尚无公认。 目的：探讨外源性骨髓间充质干细胞移植对肾损伤的可能治疗作用。 设计、时间及地点：细胞学体内实验，于2007-03/09在南昌大学泌尿外科研究所完成。 材料：清洁级SD大鼠56只。雄鼠8只用于制备骨髓间充质干细胞，雌鼠48只随机分为细胞移植组、模型对照组、假手术组，16只/组。荧光染料DAPI为Biotium Inc产品，蓖麻血凝素为Vector Laboratories产品，BrdU为Sigma产品。 方法：以密度梯度离心法分离鼠骨髓间充质干细胞，加入DAPI进行标记，调整细胞数为1.5×1010 L-1。细胞移植组、模型对照组建立缺血再灌注肾损伤模型，假手术组开腹后不予结扎肾血管。缺血45 min后，细胞移植组经下腔静脉注入用DAPI标记的骨髓间充质干细胞悬液1 mL，模型对照组、假手术组输入1 mL无菌生理盐水。移植后各组每天腹腔注射BrdU，其后留取血标本和肾组织。 主要观察指标：荧光显微镜及免疫组织化学染色观察移植细胞在肾组织中的分布，采用能与肾小管内腔壁特异结合的蓖麻血凝素鉴定移植细胞的分化，以免疫组化方法检测Brdu反映肾组织细胞的增殖状况，检测血清肌苷、尿素氮水平。 结果：移植后第3天可见少量DAPI阳性细胞，第4天DAPI阳性细胞数明显增加（P < 0.05），且多数DAPI标记细胞能结合蓖麻血凝素，DAPI阳性细胞主要分布于肾脏外髓质肾小管中，肾皮质和内髓质阳性细胞很少，而肾小球内则未见DAPI阳性细胞。假手术组肾组织细胞增殖非常弱，移植后第4天Brdu阳性细胞数明显低于模型对照组（P < 0.05）；移植后第2，3，4天细胞移植组Brdu阳性细胞均明显多于模型对照组（P < 0.05），其分布类似于DAPI阳性细胞。与模型对照组比较，细胞移植组大鼠血清尿素氮水平移植后第1，2天明显降低（P < 0.05）；细胞移植组大鼠血清肌苷水平移植后第1，2，3天均显著降低（P < 0.05）。 结论：移植的外源性骨髓间充质干细胞能够迁移、定居于缺血再灌注损伤后的肾组织中并分化为肾小管上皮细胞；骨髓间充质干细胞移植可促进损伤肾脏本身的细胞增殖再生；对肾损伤后早期肌苷、尿素氮的升高具有一定抑制作用，这种早期对肾功能的保护与其迁移定居到肾脏局部、分化修复损伤的肾小管无关。     

脐血间充质干细胞与神经损伤修复

干细胞是指一类具有高度增殖和自我更新能力,并具有多向分化潜能的原始细胞。骨髓造血干细胞是较早发现的一类成体干细胞．随后,人们发现骨髓中除造血干细胞外,还存在另一类干细胞,即间充质干细胞(mesenchymal stem cell,     

骨髓和脂肪来源间充质干细胞的免疫调节作用☆

背景：脂肪来源的间充质干细胞是否具有和骨髓来源间充质干细胞类似的免疫调节作用?目的：观察骨髓来源和脂肪来源间充质干细胞的免疫学特征。方法：分离骨髓和脂肪来源的间充质干细胞,分别检测它们对T细胞周期、活化、抑制和增殖的作用情况。结果与结论：骨髓来源和脂肪来源的间充质干细胞同样具有抑制T细胞增殖的能力,在有丝分裂原刺激和混合淋巴细胞反应的T细胞增殖中这种作用都是具有剂量依赖性的,在1︰2时有极强的抑制作用,但是在1︰100时这种作用基本消失,在共培养时骨髓来源和脂肪来源的间充质干细胞都可以使更多的T细胞被抑制在G0/G1期,同时也可以抑制T细胞的早期活化,但是上述作用脂肪来源的间充质干细胞均较骨髓来源间充质干细胞弱,且脂肪来源的间充质干细胞并不具有抑制T细胞凋亡的作用。     

脐带间充质干细胞移植治疗帕金森病效果分析

目的 探讨脐带间充质干细胞移植治疗帕金森病的临床效果.方法 选择我院收治的38例帕金森病为研究对象,采用足月妊娠产妇脐带处理后干细胞,于第2周期进行鞘内注射移植治疗.分析治疗后临床症状及体征改善情况.治疗前及治疗后1个月,采用帕金森病统一评分量表（UPDRS）对患者精神、行为、情绪、日常活动、运动功能、并发症进行评价.结果 所有患者的静止性震颤、运动迟缓、肌强直、姿势步态障碍均不同程度缓解,治疗过程中及治疗后患者各项生命体征均较平稳.38例患者移植后UPDRS评分显著低于移植前,差异有统计学意义（P＜0.05）.治疗过程中患者有低热、头痛、腰痛、兴奋症状出现,给予对症处理后均完全缓解.均未见抗移植物宿主病.结论 脐带间充质干细胞移植可显著改善帕金森病患者的临床症状.     

骨髓间充质干细胞治疗脑梗死的研究进展

骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）是一类具有多项分化潜能的干细胞,通过诱导BMSCs可分化为各胚层细胞。已有动物实验证明,BMSCs治疗能够促进脑梗死后受损神经组织结构和功能的恢复,其可能的机制有：刺激神经发生和突触的形成,分泌多种神经营养因子和细胞因子,发挥免疫调节作用改变缺血区微环境,促进新生血管的形成等。对BMSCs进行修饰处理后,其治疗脑梗死效果更好,临床试验结果较乐观。     

大鼠骨髓间充质干细胞的原代培养条件

背景：间充质干细胞适合生长、培养的条件尚不十分明确,目前对于间充质干细胞的分离纯化以及体外培养亦没有统一的方法,而培养出生长状态良好、数量足够多的大鼠骨髓间充质干细胞是进行以上实验的重要前提。 目的：寻求适宜有效的大鼠骨髓间充质干细胞体外培养条件,观察培养的间充质干细胞生物学特性。 设计、时间及地点：分组对比观察,实验于2007-04/09在重庆医科大学附属第一医院实验中心完成。 材料：6~8周龄雄性Wistar大鼠1只,体质量120 g,用于间充质干细胞的分离及培养。 方法：采用全骨髓培养法获取间充质干细胞,按不同接种密度(1×106,5×105,1×105,5×104,1×104 cm-2)、血清体积分数(体积分数5%,10%,15%的胎牛血清)、首次换液时间(接种后6,12,24,48,72 h)及pH值(分别为7.0~7.1,7.1~7.2,7.2~7.3,7.3~7.4,7.4~7.5)分组接种,10 d后进行活细胞计数。 主要观察指标：不同培养条件对间充质干细胞生长的影响;倒置显微镜下观察原代及传代间充质干细胞的形态变化;采用四甲基偶氮唑盐法绘制细胞的生长曲线,并计算细胞倍增时间;常规SABC免疫组织化学法检测传代间充质干细胞CD44、CD34的表达;流式细胞仪检测传代间充质干细胞生长周期。 结果：①以1×106,5×105 cm-2密度接种的细胞数较多,余3种接种密度获得细胞数明显低于上述2种密度(P < 0.05)。首次换液时间为48 h获得的细胞数量最多,各组间相比,差异有显著性意义(P < 0.05)。体积分数5%血清组较体积分数10%、15%血清组细胞数量少(P < 0.05)。pH值为7.1~7.2,7.2~7.3的培养液细胞生长活跃,细胞数量多,以pH值为7.0~7.1和pH 7.4~7.5培养的细胞生长缓慢,数量较少。②刚接种的间充质干细胞呈圆形,培养6~8 h后开始贴壁,呈纺锤状或类圆形;约10 d左右细胞基本汇合长满瓶底;传代后,细胞形态以梭形为主;经过一二次传代后,细胞呈放射状或平行排列,形态趋于一致。③传代一二天细胞生长缓慢,生长停滞期;自3 d起,细胞生长进入对数生长期,四五天达到高峰;之后进入平台期,细胞倍增时间约为39.5 h。④传代间充质干细胞存在CD44抗原表达,而CD34呈阴性表达。⑤传代后82.93%的间充质干细胞处于G0/G1期,G2+M+S期细胞占17.07%。 结论：细胞较佳接种密度为5×105 cm-2,合适血清体积分数为10%,首次换液时间为48 h,pH值为7.2左右;在适宜的培养条件下,间充质干细胞在体外生长状态良好,增殖速度快。     

脐血间充质干细胞对淋巴细胞增殖的作用*★

目的：骨髓间充质干细胞抑制混合淋巴细胞反应及丝裂原刺激的T细胞增殖，是通过自分泌转化生长因子发挥其免疫调节作用,而关于脐血间充质干细胞对淋巴细胞增殖作用的影响及其机制尚不清楚。实验拟观察验证脐血间充质干细胞对植物血凝素诱导的淋巴细胞增殖的影响。 方法：实验于2005-07/2006-03在南昌大学第二附属医院血液病研究所、江西省医学分子重点实验室完成。①实验材料：健康产妇分娩后的脐带血及正常志愿者外周血各9份，由南昌大学第二附属医院妇产科提供，产妇及家属对实验知情同意，并经医院伦理委员会批准。②实验方法：采脐血进行间充质干细胞的培养扩增,并经形态学、细胞表面分子测定及定向分化功能加以鉴定。将1.0×105，0.75×105，0.5×105，0.25×105，0.1×105，0.05×105，0.02×105，0.01×105的间充质干细胞加入到经植物血凝素诱导的外周血淋巴细胞增殖体系中,应用MTT法测定细胞增殖率，观察脐血间充质干细胞对淋巴细胞增殖的影响。应用ELISA法测定脐血间充质干细胞培养上清液中转化生长因子β1水平。 结果：①不同数量脐血间充质干细胞对植物血凝素诱导的淋巴细胞增殖均有抑制作用，抑制作用在一定范围内呈细胞剂量依赖性，以淋巴细胞：间充质干细胞为1∶0.75时抑制作用最强。②转化生长因子β1水平与脐血间充质干细胞数量有关，随着间充质干细胞数量增多，转化生长因子β1水平渐增高。③将脐带血间充质干细胞对淋巴细胞增殖的抑制率与转化生长因子β1水平进行相关性分析,两者间存在明显相关性（r =0.85）。 结论：①脐血间充质干细胞对植物血凝素诱导的淋巴细胞增殖有抑制作用，在一定范围内呈细胞剂量依赖性。②脐血间充质干细胞所分泌的转化生长因子β1含量与脐带血间充质干细胞数量呈正相关性。     

骨髓间充质干细胞治疗脑出血后神经功能障碍的研究进展

本文目的是对骨髓间充质干细胞治疗脑出血后功能障碍的研究进展进行综述,为脑出血的治疗提供参考。脑出血是一种对脑组织损害严重的疾病,在全世界范围内造成了沉重的公共健康负担。该病具有高致残率、高死亡率的特点,且治疗效果欠佳。骨髓间充质干细胞在移植后具有能定向分化为神经元并旁分泌神经营养因子的功能,成为治疗脑出血的新选择。     

骨髓间充质干细胞的生物学特征及应用

近年来，骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)的多胚层方向分化能力，及其在细胞和基因治疗中的应用前景，引起了干细胞研究的广泛关注。尤其在神经科学领域，MSCs与神经干细胞(neural stem cells，NSCs)相比，前具有取材方便、体外扩增相对容易及伦理法律等方面的优势，使得     

骨髓间充质干细胞对移植免疫的影响

背景：近年来研究发现,骨髓间充质干细胞除具有支持体外造血、促进体内造血功能重建外,还具有较低的免疫原性和抑制异体T淋巴细胞增殖的作用,在调节移植免疫方面发挥重要作用,但其机制尚不十分明确。目的：就近年来关于骨髓间充质干细胞的免疫调节特性及其在造血干细胞移植中的作用简要综述。方法：由第一作者检索2000/2008 PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)有关骨髓间充质干细胞对移植免疫影响的文章,检索词为“BMSCs,hematopoietic stem cell transplantation,transplantantion immunity”,排除重复性研究。共保留37篇文献归纳总结。 结果与结论：骨髓间充质干细胞是存在于骨髓中除了造血干细胞外的另一种干细胞,在免疫反应中可以逃避免疫识别、抑制免疫反应。骨髓间充质干细胞的免疫抑制作用能有效地运用于造血干细胞移植,降低移植物抗宿主病、促进移植物存活等,有广阔的应用前景。但目前为止尚未能建立鉴定骨髓间充质干细胞的统一标准,至今还未能筛选到骨髓间充质干细胞特异性的标记分子;缺乏安全性评价;影响移植物抗宿主病同时是否影响移植物抗白血病效应;以及对肿瘤细胞生长的影响等问题都有待于进一步的研究才能解决。     

脂肪与骨髓来源间充质干细胞生物学特性的比较☆

背景：近几年来脂肪来源的间充质干细胞因其取材容易也被广泛研究。 目的：比较脂肪来源和骨髓来源间充质干细胞的生物学特性。 方法：分离及体外培养人骨髓源间充质干细胞和脂肪源间充质干细胞,比较它们的表型、细胞倍增时间及分泌因子水平等。 结果与结论：脂肪来源和骨髓来源的间充质干细胞在细胞表型上类似,只有CD106的表达有差异。脂肪来源间充质干细胞增殖速率比骨髓来源的间充质干细胞快。在相同体积的脂肪组织中能够得到的干细胞前体细胞的数量是骨髓的10倍以上。提示脂肪来源和骨髓来源的间充质干细胞具有相同功能,但脂肪组织是一个更有应用前景的干细胞来源。