微波ELISA法快速检测抗HAV-IgM

近年来微波技术在ELISA法检验中的应用多有报道。我们自开展了微波ELISA法快速检测乙肝病毒5项标志物和丙型肝炎抗体的工作后,接着又进行了微波ELISA法快速检测甲型肝炎病毒免疫球蛋白M型抗体（抗HAV-IgM）的尝试,取得了令人满意的效果,反应时间由115min缩短为11min,提高效率10倍多,现将其方法报告如下。1 材料与方法1.1 标本:采取门诊或住院病人血清,以标准方法测定ALT高于上限2.5倍（100U/L）为检测病例,其血清标本于-24℃冰箱保存备检。1.2 酶标试剂盒:ELISA抗HAV-IgM试剂盒,上海实业科华生物技术有限公司生产,批号950230。1.3 仪器:DG3022型酶标免疫检测仪,波长292nm,南京华东电子管厂生产。1.4 600W上菱牌家用微波炉,输出功率选择为20％。     

无偿献血者梅毒抗体筛检方法与试剂的价值评价

目的：评价无偿献血者梅毒抗体筛检方法与试剂的筛检价值。方法：以卫生部临床检验中心梅毒抗体临床科研血清盘标本40份及随机抽取西安市无偿献血者梅毒抗体阴性血清100份为评价标本。用梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)法，厦门新创梅毒抗体ELISA1诊断试剂盒(ELISA1)及北京金豪梅毒抗体ELISA诊断试剂盒(ELISA2)对评价标本作盲法筛检，以卫生部临床检验中心梅毒抗体已知阳性和阴性作为金标准。用四格表法评价真实性与可靠性指标，并对二种ELISA试剂盒的Cut-off值的合理性进行评价。结果：TRUST法、ELISA1及ELISA2试剂盒的灵敏度分别为68．2％，95．5％，100．0％，特异度分别为77．8％，94．4％，94．4％，约登指数分别为0．46，0．900．94，重复试验符合率分别为90．0％，100．0％，100．0％，二种ELISA试剂盒的Cut-off值较合理。结论：ELISA试剂盒的灵敏度、特异度及重复试验符合率要远高于TRUST法。尽管TRUST法的灵敏度与特异度较低，在无偿献血者的粗筛快检中可降低血液报废率，因而在无偿献血中的仍有很高价值，如果将ELISA试剂盒的灵敏度与特异度加以提高，将会具有更大的临床应用价值。     

乙型肝炎病毒前S_2蛋白活力与病毒复制的关系

本文通过用ELISA法检测了122例各型乙型肝炎病人血清中的Pre-s_2蛋白:研究其与HBV复制的各种标志的关系,并讨论了其临床意义。 前s_2蛋白(Pre-s_z蛋白)测定以单克隆抗Pre-s_2抗体为主要试剂,采用夹心法原理,检测患者血清中Pre-s_2蛋白,具体操作方法按试剂盒说明书进行,S/N比值≥2.1及血清滴度>1∶10为阳性;HBV标志(HB_sAg,抗-HB_s、HB_eAg、抗-HB_e、抗-HB_c)均采用ELISA法     

酶联免疫法与金标法检测抗-HIV的比较

目的 观察ELISA(间接法、双抗原夹心法)快速诊断金标法(胶体金免疫分析技术)在检测抗-HIV中试剂质量比较,并分析其原因。方法 用2001年卫生部免疫检验室间质评HIV质控血清10份,其中6份为阳性血清(经Weet-Blot确诊),用两厂家生产的ELISA间接法、双抗原夹心法、金标法做比较。结果 两厂家生产的ELISA间接法一份阳性标本不能检出,但两厂家生产的ELISA双抗原夹心法和金标法阳性检出率为100％。结论 试剂的质量对保证大量的献血员、高危人群的HIV筛查工作至关重要。     

HIV阳性室内质控血清制备及其稳定性观察

ＨＩＶ抗体阳性室内质控血清检测光密度 (ＯＤ)值及ＯＤ/ＣＯ值 :取本实验室制备的ＨＩＶ抗体阳性室内质控血清 ,ＥＬＩＳＡ法批内重复检测 30次 ,其ＯＤ/ＣＯ均值为 2 8,标准差为 0 2 1,变异系数为 7 14%。批间重复检测 ,每天重复测定 3次 ,连续测定 2 0天 ,其ＯＤ/ＣＯ均为 2 78,标准差 0 2 3,变异系数为 8 2 7%。应用硫柳汞和叠氮钠作为ＨＩＶ阳性血清防腐剂对效价的影响 :将本实验室制备的ＨＩＶ阳性室内质控血清分别为0 1%硫柳汞和 0 1%叠氮钠防腐 ,分别重复测定 2 0次 ,其结果用硫柳汞防腐的ＨＩＶ抗体阳性室内质控血清ＯＤ/Ｃ…     

武警部队1999年度新兵艾滋病病毒抗体检测质量调查分析

为了解各部队艾滋病初筛实验室对新兵艾滋病病毒(ＨＩＶ)抗体检测情况,了解各实验室的技术人员检测ＨＩＶ抗体技术水平,我们随机抽查了24个实验室对新兵ＨＩＶ抗体的检测资料,调查结果与讨论分析如下。1　材料和方法11　仪器　ＣＦ-5000型酶标仪(中国航天工业总公司二八三厂生产)。ＤＮＸ-9620型洗板机(北京普朗新技术公司生产)。12　试剂盒　艾滋病病毒抗体酶联免疫诊断试剂盒由金豪生物工程公司生产(简称金豪)及北京华美制药有限公司生产(简称华美)提供。13　方法　分别按金豪、华美试剂盒使用说明操作。2　调查结果21　阳性对照测定吸光…     

ELISA法检测乙肝患者抗-HBs假阳性1例

病例男,30岁,患乙肝大三阳3年;以往在其他医院（具体不详）检查HBsAg均阳性。2009年12月8日早晨,空腹以真空采血管按要求定量采血检查病毒性肝炎血清标志物,按常规操作分离血清,无溶血、无凝块、无乳糜及黄疸。ELISA实验采用上海科华生物技术有限公司的试剂,批号20090909,有效期为20100909;ELISA法操作和质控均按操作规范进行。金标试剂为北京万泰生物药业有限公司产品,     

6142例HIV初筛试验结果分析

目的提高HIV抗体的初筛检测质量，了解因其它疾病就诊人群的HIV感染状况。方法采用ELISA方法共检测6142例HIV抗体初筛抗体测定，其中116例阳性，为避免检测误差，对阳性者进行二次抽血检查，再用ELISA法和，胶体金法同时检测对照，阳性者送上级确认。结果116例HIV抗体初筛阳性，经省、州疾病预防控制中心（CDC）确认实验室确认，结果符合率为100％。结论只要严格按照《全国艾滋病检测规范》的要求，ELISA法对HIV检测结果准确可靠；普通人群中HIV感染状况不容乐观。     

ELISA法用于患者输血前检测Tp设置灰区的意义

目前检测梅毒抗体的方法较多,选择合适的方法对于准确判断患者输血前感染状况至关重要。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测梅毒螺旋体特异性抗体被认为是受血者输血前梅毒检测的常规方法[1]。但由于ELISA方法本身的局限性以及不同试剂的灵敏性和特异性的差异,在实际检测中存在假阳性和假阴性结果。以试剂盒阳性判断值(cut off)上下一段区域设定为灰区,对OD值落在灰区内的标本进行重新检测从而得出准确结果,直接关系到患者的诊断、治疗和输血安全,有利于防范医疗纠纷。1资料与方法1.1标本来源:2008-01~2009-06本院住院患者首次输血前血清标本6 807份,标本无溶血、脂血。1.2仪器:瑞士HAM ILTON公司,M icrolab AT P lus2全自动加样系统;M icrolab FAME全自动酶免处理系统。1.3试剂:ELISA试剂购自英科新创(厦门)公司和北京万泰生物药业公司;TPPA试剂为日本富士瑞必欧株式会社产品。抗-Tp质控品由全军血液监督检定中心提供。1.4方法:所有标本均经ELISA试剂常规检测。OD值落在灰区的标本37℃水浴箱孵育15 m in后重新离心,分别用原批号试剂和另一种试剂双孔复检...     

酶联免疫法与金标法检测抗-HIV的比较

目的 观察EUSA(间接法、双抗原夹心法)快速诊断金标法(胶体金免疫分析技术)在检测抗-HIV中试剂质量比较，并分析其原因。方法用2001年卫生部免疫检验室间质评HIV质控血清10份，其中6份为阳性血清(经Weet-Blot确诊)，用两厂家生产的EUSA间接法、双抗原夹心法、金标法做比较。结果两厂家生产的ELISA间接法一份阳性标本不能检出。但两厂家生产的EUSA双抗原夹心法和金标法阳性检出率为100％。结论试剂的质量对保证大量的献血员、高危人群的HIV筛查工作至关重要。     

艾滋病病毒抗体和梅毒螺旋体抗体快速诊断试剂临床应用评价

目的　对目前常用的快速诊断试剂卡 (DIGFA)检测梅毒螺旋体抗体 (抗 TP)和艾滋病病毒抗体 (抗 HIV1/2 )的技术参数进行评估。方法　对多份质控血清和 5 863份患者血清或血浆分别采用三个厂家的DIGFA试卡和酶免疫法 (EIA)进行检测 ,以EIA技术检测结果为参照对DIGFA检测试卡的灵敏度、特异性、检测效能和物理性能等参数进行评价。结果　多份质控血清抗 TP和抗 HIV1/2DIGFA试卡检测特异性均为 10 0 % ;抗 TP、抗 HIVI1/2DIGFA试卡检测的灵敏度分别为 80 .0 0 %和 93 .3 3 % ;检测效率分别为 88.44 %和 96.97%。 5 863份患者血清 (血浆 )的抗 TP和抗 HIV1/2DIGFA试卡检测特异性分别为 99.86%和 99.76% ;灵敏度分别为 5 0 .94%和 77.78% ;检测效率分别为99.42 %和 99.69%。结论　DIGFA试卡检测灵敏度比较低 ,花费成本较大。该技术适合急诊病人的初步筛选 ,不适合献血员筛选试验。如果应用到街头 (采血车 )献血员快速筛选 ,必须和EIA技术联合应用。     

艾滋病血清学诊断

现行艾滋病血清学诊断分初筛试验和确证试验。初筛试验用于检测HIV特异性抗体总量,需用2种方法或1种方法2次检测,最常用颗粒凝集试验(PA)或ELISA,但不可出阳性结果报告,其试验阳性或可疑标本应及时作确证试验。确证试验用于检测HIV组分抗原的特异性抗体,主要用蛋白印迹试验(WB)。确证试验HIV特异性抗体阳性并结合临床机会感染及症状,可诊断现症艾滋病;HIV特异性抗体阳性而无临床症状者系HIV感染潜伏期或HIV携带者;HIV特异性抗体阴性或可疑者6个月内经复查仍不为阳性者,可排除HIV感染的可能性。     

3TP法与ELISA法检测梅毒螺旋体抗体价值的比较

目的对3TP法与ELISA方法在梅毒螺旋体抗体检测能力及其在临床应用中的价值进行比较。方法应用3TP法与ELISA方法分别对85份确诊病例与体检正常TPHA方法确证为梅毒特异性抗体阴性的人员血清180份进行同时检测,检测结果进行χ2统计分析。结果总计265份标本检测3TP法阳性符合率100%,假阳性2例,灵敏度为100%,特异度98.9%;ELISA方法阳性符合率98.8%,假阴性1例,假阳性2例,灵敏度为98.8%,特异度为98.9%。两种方法间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 3TP法与ELISA方法均具有高灵敏度、高特异度的特点,二者之间无统计学差异(P>0.05),3TP法可以替代现行的梅毒血清学筛检的ELISA方法;3TP法适用于自动生化分析仪,具有简便、快速的优势,可实现对血清梅毒抗体的定量检测,便于疗效和预后观察。     

3205名新入校大学生HBsAg及ALT检测报告

对新入校的大学生进行HBsAg和ALT检查 ,有助于了解他们的健康状况 ,提醒身体状况不良的学生积极接受治疗 ,这样不仅有利于其顺利完成学业 ,而且能减少乙肝病毒的传播 ,保障学校正常教学秩序的顺利进行 ,现将北京某高校学生HBsAg和ALT的检查情况报告如下。1　对象和方法1.1　研究对象　北京某高校 2 0 0 2级新生 32 0 5人 ,年龄172 0岁 ,生源为全国各地。1 2　用清晨空腹静脉血 34ml,30 0 0r/min分离血清 ,测定HBsAg及ALT。HBsAg检测方法为酶联免疫吸附试验(ELISA) ,使用试剂由上海科华实业生物有限公司生产 ,结果判定按照试剂盒…     

艾滋病的诊断

1　实验室诊断1.1　抗体检测　抗体可分为IgM和IgG抗体,前者可在HIV感染后2周出现,持续12～41周消退;后者一般在感染后4～12周出现,亦可推延至18个月才出现,通常终生存在。当检出HIV抗体时,即认为有病毒存在。采用血清学方法检测HIV抗体,为本病的主要实验室检测手段,方法有:(1)酶联免疫吸附试验(ELISA):敏感性可达99.5%,但特异性不高,是目前最常用的初筛方法;(2)免疫印迹试验(WB):敏感性及特异性均较高,主要用于HIV初筛检测阳性结果的确诊试验,是最常用的确诊方法;(3)间接免疫荧光法(IIF):较其他方法可更早地检出IgM及IgG抗体,…     

牛布鲁氏菌抗体ELISA试剂盒与国标血清学SAT试验在布病检测中的比较试验

采集的牛血清100份、羊血清250份,分别进行国标布病虎红平板凝集试验（RBn,在牛血清中检出13份布病阳性血清,羊均为阴性。对牛的13份阳性血清分别进行动物布病试管凝集试验（SAT）和牛布鲁氏菌抗体ELISA试验。经SAT试验结果为10份阳性,ELISA试验结果为13份阳性。结果表明牛布鲁氏菌抗体ELISA试剂盒快速...     

某部急性上呼吸道感染暴发疫情的病原学检测

目的 通过实验室病原学筛查,结合流行病学史及临床表现,初步筛查某部急性上呼吸道感染暴发疫情的致病病原体.方法 采集51例患者血液和咽拭子标本,分别采用免疫荧光、酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应(PCR)、病毒分离及微生物学细菌培养等实验室诊断方法筛查、确定致病病原体,并对15例恢复期患者(发病后15～28d)血清进行IgG滴度检测,比较急性期与恢复期抗体滴度的变化.结果 所有咽拭子的细菌培养及7例咽拭子的病毒分离试验结果均为阴性.对24例患者血清进行的免疫荧光法呼吸道常见20种病原体IgM抗体筛查结果显示:流感A型阳性率为20.8%(5/24),流感B型阳性率为12.5%(3/24),肺炎衣原体阳性率为20.8%(5/24),肺炎支原体阳件率为50.0%(12/24),其余病原体检测均为阴性.ELISA检测IgM抗体结果显示:总流感病毒IgM抗体阳性2例(3.92%),肺炎衣原体抗体阳性7例(13.7%),肺炎支原体抗体阳性20例(39.2%),呼吸道合胞病毒抗体阳性2例(3.92%),EB病毒抗体阳性1例(1.96%).免疫荧光法肺炎支原体IgG抗体滴度检测结果显示1:100稀释后阳性反应37例(72.5%),其中的31例(60.8%)在1:1000稀释后仍呈阳性反应,对照组仪2例(6.45%)IgG抗体1:100时呈阳性,在1:1000稀释后均为阴性.PCR实验未见特异扩增反应.恢复期与急性期血清抗体效价检测发现15例中有7例肺炎支原体抗体效价有4倍以上变化.结论 初步推断此次某部群体急性上呼吸道感染事件系肺炎支原体感染引起;该疫情的实验室快速诊断为今后疫情的早期诊断提供了思路.     

聚合酶链反应在检测HBV—DNA中的价值

为探讨乙型肝炎的检出率,1997年1～6月,我们采用聚合酶链反应(PCR法)对乙型肝炎78例的血清HBV-DNA进行检测,并与乙肝病毒血清标志物(HB-VM)的检出情况(ELISA法)进行比较,以评价PCR法在监测乙肝病毒感染者中的临床意义。1　对象和方法1.1　对象　乙肝78例,男42例,女36例;年龄14～56岁,平均38.2岁。均无HAV、HCV、HDV、HEV重叠感染。1.2　方法1.2.1　HBV-DNA检测　乙型肝炎病毒基因扩增试剂盒由中山医科大学科技开发公司提供。取患者DNA血清40μl,加40μlDNA提取液后打匀,沸水浴5min,以10000r/min离心5min,取上清液2μl行P…     

抗-HIV单克隆抗体的筛选与鉴定

我们用HIV抗体阳性者血浆包被聚苯乙烯条,加入纯化的HIV组织培养抗原,通过夹心ELISA法,筛选出3株能分泌抗HIV单克隆抗体杂交瘤细胞,传代稳定。培养上清经Western blot染色鉴定含有抗-HIV gag蛋白。夹心ELISA法测得杂交瘤细胞培养上清中单克隆抗体滴度达到1∶6400,接种BALB/C小鼠获腹水抗体效价为1∶2430000。实验表明,用此单克隆抗体检测HIV病人血清抗体敏感、特异、稳定、重复性好,是一种良好的试剂。     

两种方法检测乙肝HBsAg效果对比

目的 :考察胶体金联免疫吸附与酶联免疫吸附试验的灵敏度与特异性。方法 :用乙肝表面抗原胶体金联免疫吸附试剂 (GCISA)和酶联免疫试剂 (ELISA)检测各种肝炎病人血清 90 9份 ,正常人血清 173份及乙肝表面抗原质控标准品。结果 :GCISA和ELISA分别检出 773和 770份阳性样品 ,总符合率为97 0 %。检测乙肝表面抗原质控标准品 ,GCISA的灵敏度为 1ng/ml,ELISA为 1～ 2ng/ml,且两种方法都只与HBsAg有特异反应 ,与乙肝病毒核心抗原、e抗原无交叉反应。结论 :GCISA检测血清中的HBsAg特异性强 ,灵敏度与ELISA一致 ,在检测单份样品时较ELISA简单快速 ,观察结果直观 ,不需仪器设备。