7-硝基吲唑对大鼠脑缺血再灌流保护作用的研究

目的：探讨神经元型一氧化氮合酶抑制剂（ｎＮＯＳＩ）７－硝基吲唑（７－ｎｉｔｒｏｉｎｄａｚｏｌｅ,７－ＮＩ）对脑缺血再灌流保护作用的机理。方法：选用体重１８０－２２０ｇ的雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠,随机分组,左颈外动脉管腔内置渔线经颈内动脉送至大脑中动脉内,使之闭塞。     

7-硝基吲唑对椎基底动脉脑缺血豚鼠ABR及耳蜗核nNOS活性的影响

目的：探讨脑干耳蜗核缺血后听力损失情况，以及神经元型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase)及其选择性抑制剂7－硝基吲 唑（7－nitroindazole,7-NI)在缺血中的作用。方法：随机将50只耳廓反射灵敏的健康花色豚鼠分为4组：①正常对照组，②假手术组，③缺血组，④用药组。通过结扎一侧颈总动脉，阻断基底动脉，建立豚鼠椎基底动脉脑缺血的动物模型。用药组动物在缺血前5min腹腔注射7－NI，观察每组动物ABR及单位面积耳蜗核内nNOS阳性神经元的变化。结果：与对照组比较，缺血15min,30min,60min和120min ABR各波潜伏期、I－Ⅲ波间期均显著延长，阈值提高（P＜0．05）。用药组ABR各测试参量在相应缺血时间段内较单纯缺血组明显缩短或降低（P＜0．05）。与对照组比较，nNOS阳性神经元数量在缺血后15min即明显升高，缺血30min达到高峰，60－120min基本恢复正常，而用药组各时间段nNOS阳性神经元数量与对照组比较，差异无统计学意义。结论：nNOS主要参与耳蜗核缺血早期的病理性损伤，是造成循环障碍性听力下降的重要因素之一。7－NI可选择性地抑制nNOS的活性，对神经元缺血早期NO生成过量造成的听力损失具有保护作用。     

7-硝基吲唑对深低温停循环大鼠的脑保护作用

目的:探讨神经元型一氧化氮合酶(nNOS)在深低温停循环(deep hypothermic circulatory arrest,DHCA)大鼠中的脑损伤作用。方法:154只健康SD大鼠随机分为4组:假手术组、DHCA组、7-硝基吲唑(7-NI)组和花生油组,后3组再分为DHCA术后2,6,12和24 h 4个亚组。假手术组与24 h亚组各16只大鼠,其余亚组各10只大鼠,冰块包埋体温降至21℃时阻断双侧颈总动脉建立DHCA模型。观察特异性nNOS抑制剂7-NI对脑水肿,脑组织光镜、电镜结构和脑组织丙二醛含量的影响。结果:与DHCA组相比,7-NI能减轻脑水肿(P<0.05),改善脑细胞形态,并能降低丙二醛含量(P<0.05)。结论:nNOS在DHCA脑损伤中起细胞毒性作用,7-NI有希望延长DHCA安全时限。     

背根神经节微量注射7-硝基吲唑抑制炎症性疼痛

目的:观察完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)诱导炎症性疼痛的现象,并探究背根神经节(DRG)部位注射神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)抑制剂7-硝基吲唑(7-nitroindazole,7-NI)对于炎症性疼痛是否有镇痛作用并简要探讨其镇痛机制?方法:小鼠足底注射10 ?滋l CFA诱导炎症性疼痛动物模型,使用von Frey纤维丝采用up-and-down的方法测定小鼠的50%足底回缩阈值(50% paw withdrawal threshold,50%PWT)作为痛觉行为学的评价指标?在小鼠的背根神经节部位微量注射10 ?滋g 7-NI观察50%PWT的变化情况?用免疫印迹的方法观察炎症相关的降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)在CFA诱导模型后?造模后给予7-NI和nNOS基因敲除小鼠造模后的表达情况?结果:与DMSO组相比,7-NI组造模后2~12 h 50%PWT显著升高?观察到CGRP的表达量在CFA诱导后增加,而在给予7-NI和nNOS基因敲除组内CGRP的表达增加可以被逆转?结论:小鼠DRG部位注射7-NI对炎症性疼痛具有镇痛作用,且炎症性疼痛中CGRP表达量的增加可能是一氧化氮(nitric oxide,NO)在DRG内起疼痛敏感性作用的下游机制?     

7-NI对脑缺血再灌流后NOS、MDA和神经元超微结构的影响

探讨神经元型一氧化氮合酶抑制剂（ｎＮＯＳＩ）７－硝基吡唑（７－ｎｉｔｒｏｉｎｄａｚｏｌｅ,７－ＮＩ）对脑缺血再灌流保护作用的机理。方法选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠,制成大脑中动脉闭塞模型（ＭＣＡＯ）,闭塞１小时后治疗组给予７－ＮＩ（５０ｍｇ／ｋｇ）,对照和假手术组给予花生油５ｍｌ／ｋｇ,再灌流１小时后测定各项指标。结果再灌流１小时后,７－ＮＩ组ＮＯＳ（一氧化氮合酶）活性、ＭＤＡ（丙二醛）含量均明显低于单纯     

脑络通对实验性大鼠脑缺血的保护作用

脑络通胶囊能够降低不完全性脑缺血模型大鼠的脑含水量、毛细血管通透性,并且能够降低缺血脑组织过氧化脂质含量,提高过氧化物歧化酶活性。     

大鼠急性局灶性脑缺血再灌注损伤血浆一氧化氮含量的动态变化

为探讨一氧化氮和神经元性一氧化氮是否参与急性局灶性脑缺血再灌注的发病机理，用栓线法建立大脑中动脉阻塞模型大鼠，观察急性局灶性脑缺血再灌注损伤血浆一氧化氮含量的动态变化和神经元型一氧化氮合酶抑制剂———７硝基吲唑对再灌注期一氧化氮含量的影响．结果，脑缺血３０ｍｉｎ血浆一氧化氮含量明显升高，缺血３ｈ组一氧化氮含量下降，接近对照组；缺血３ｈ、再灌注３０ｍｉｎ组血浆一氧化氮含量再次升高，再灌注３ｈ组一氧化氮含量又下降，但仍高于对照组．７硝基吲唑（２５ｍｇ／ｋｇ）能显著抑制缺血３ｈ、再灌注３０ｍｉｎ升高的血浆一氧化氮水平．７硝基吲唑的作用可被Ｌ精氨酸（３００ｍｇ／ｋｇ）逆转，而Ｄ精氨酸（３００ｍｇ／ｋｇ）无效．     

硝基-L-精氨酸对大鼠脑梗死的保护作用

目的：观察一氧化氮合酶抑制剂硝基-L-精氨酸(L—NNA)对脑梗死大鼠的影响。方法：闭塞一侧大脑中动脉造成脑梗死模型，检测一氧化氮合酶抑制剂L—NNA对脑梗死大鼠血一氧化氮(NO)含量、行为障碍、脑梗死范围、脑含水量及脑组织病理学的影响。结果：L—NNA可显著性缩小脑梗死范围、降低脑梗死大鼠血NO含量和脑组织含水量、减轻其行为障碍和脑组织病理学改变。结论：L—NNA对脑梗死大鼠脑组织有保护作用。     

几种不同药物对缺氧缺血新生大鼠神经元凋亡的影响

目的：探讨7—硝基吲唑(7—NI)、N—乙酰-L-半胱氨酸(NAC)、硫酸镁、脑细脆生长肽(bFGF)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)时神经细胞凋亡的影响。方法：72只Wistar大鼠随机分成6组，(1)假手术组(n＝12)，仅作正中切口，不作颈总动脉结扎；(2)空白对照组(生理盐水组)(n＝12)，HIBD后即刻腹腔注射生理盐水(NS)0．5ml；(3)7—NI组(n＝12)HIBD后即刻腹腔注射7—NI 25mg/kg；(4)NAC组(n＝12)HIBD后即刻腹腔注射NAC200μg/只；(5)硫酸镁组(n＝12)HIBD后即刻腹腔注射硫酸镁450mg／kg；(6)bFGF组(n＝12)HIBD后即刻腹腔注射bFGF 10mg。各组均于处置后24小时(h)处死断头取脑，取丘脑中1／3平面行冠状切片，常规石蜡包埋后切片6um,用HE和Tunel染色检测脑细胞凋亡数目。结果：假手术组末见有凋亡特征的阳性细胞；7—NI、NAC硫酸镁和bFGF组脑细胞凋亡数均明显低于对照组；各组与对照组分别经统计学处理差异有显著意义。结论：7—NI、NAC硫酸镁和bFGF对HIBD时脑细胞凋亡确有显著的影响。     

当归对大鼠脑缺血损伤保护作用的实验研究

探讨当归对大鼠脑缺血损伤是否具有保护作用。阻断大鼠右颈总动脉和大脑中动脉90 min后恢复再灌,给予25%当归注射液7.5 mL静脉滴注6 h。术后第8 天用图像处理技术测定脑梗死体积。结果显示当归治疗组梗死体积显著小于实验对照组。本实验首次证实当归具有缩小脑梗死体积的作用,其作用机制待深入研究阐明。     

Memantine对大鼠局灶性脑缺血损伤的长期神经保护效应

目的：探讨N-甲基-D-天门冬氨酸盐（NMDA）受体拮抗剂美金刚（MEM）对大鼠局灶性脑缺血损伤的长期神经保护作用.方法：将70只SD大鼠随机分为假手术组（n=6）和对照组,MEM5,10,20mg/kg组（n=16）.除假手术组外,其余各组动物均行线栓法阻闭大脑中动脉（MCAO）120min.MEM各组分别在脑缺血后15min腹腔注射MEM5,10,20mg/kg,对照组在脑缺血后15min腹腔注射等容积生理盐水.再灌注7d后进行神经功能评分,处死动物后行2,3,5-氯化三苯四唑（TTC）染色,测定脑梗死容积百分比,酶联免疫法检测脑组织肿瘤坏死因子α（TNFα）,白细胞介素-6（IL-6）含量.结果：再灌注7d后,神经功能评分MEM10,20mg/kg组均明显优于对照组,MEM20mg/kg组优于MEM10mg/kg组（P〈0.01）,MEM5mg/kg组与对照组相比较差异无显著性.脑梗死容积MEM10,20mg/kg组明显小于对照组,MEM20mg/kg组小于MEM10mg/kg组（P〈0.01）,MEM5mg/kg组与对照组相比较差异无统计学意义.脑组织中炎症因子TNFα,IL-6含量对照组较假手术组显著升高（P〈0.01）,MEM10,20mg/kg组较对照组明显降低（P〈0.01）.MEM5mg/kg组较对照组TNFα,IL-6含量差异无统计学意义.结论：MEM对大鼠局灶性脑缺血损伤有长期神经保护效应,此神经保护效果呈剂量依赖性,其机制可能与降低脑组织TNFα,IL-6含量相关.     

胡椒碱对大鼠局灶性脑缺血的神经保护作用

目的观察胡椒碱对急性缺血性脑损伤大鼠的神经保护作用。方法随机将SD大鼠分为假手术组、生理盐水组、胡椒碱组、溶媒组,每组8只。采用颈内动脉线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞脑缺血模型,术后0.5 h灌胃给药,1次/d,连续3 d。不同时间点进行神经功能评分。72 h断头取脑,TTC染色,测量梗死体积。另择32只大鼠,分组同上,于脑缺血24 h处死,断头取脑,观察神经细胞凋亡及Caspase-3蛋白表达。结果胡椒碱组大鼠神经功能评分、脑梗死体积、凋亡细胞数及Caspase-3阳性细胞数较生理盐水组、胡椒碱溶媒组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胡椒碱通过减少Caspase-3蛋白的表达抑制细胞凋亡、缩小脑梗死体积、改善神经功能。     

大鼠可逆性局灶性脑缺血模型复制方法的改进

目的 寻找操作简便,创伤较小的建立可逆笥局灶性脑缺血模型的方法。方法 在现有线栓法的基础上作如下发行蛎鼠体重与线栓直径的匹配以及线栓插入深度的控制,线前段覆我 肝素;麻醉后拔线。取脑组织作ＴＴＣ染色和ＨＥ染色,并进行神经功能缺陷体征评分。结果 左侧大脑中动脉缺血区经ＴＴＣ染色颜色苍白 ,经ＨＥ染色呈缺血性改变。不予再不春评分进行性增加,给予再灌则评分呈不同程度下降。结论 改进后的线栓法复制的可塑性     

大鼠脑缺血/再灌注层粘连蛋白表达的实验研究

目的探讨层粘连蛋白(Laminin,LN)在大鼠脑缺血再灌注中的作用.方法制备大鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,分为假手术组与缺血再灌注组;缺血2h后依照再灌注时间点的不同分为2h、6h、12h、24h、3d及7d共6组.各时相点取材,免疫组化观察脑组织LN的表达变化,并使用多媒体彩色病理图像分析系统进行定量分析.结果 LN的表达于再灌注2h开始降低,24h时达最低,第3日时开始回升.结论 LN可能参与了缺血再灌注血管源性脑水肿的形成与发展,并且可能参与了再灌注损伤后新生血管的生成、血管重塑及侧支循环的建立.     

灯盏生脉胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的：研究灯盏生脉胶囊对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：将大鼠随机分为假手术组、模型组和灯盏生脉胶囊组。采用改良的Zea Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞模型,缺血后24 h灌胃给予灯盏生脉胶囊,于缺血后7、14、21 d分别测定神经功能缺损评分和体重增长率,于缺血后21 d采用TTC法测定脑梗死体积百分比,免疫组织化学法检测脑组织血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果：与模型组比较,灯盏生脉胶囊组神经功能缺损评分、体重增长率、脑梗死体积百分比及VEGF的表达差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论：灯盏生脉胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用,可能与其促进VEGF表达有关。     

海风藤提取物对老龄大鼠缺血性脑损伤保护作用研究

目的 探讨海风藤提取物在老龄大鼠局灶脑缺血后可能的脑保护作用。方法 建立光化学导的老龄大鼠避灶性脑缺血模型,利用ＴＴＣ染色、ＨＥ染色原位末端标记第风藤提取物地缺血灶大小、血脑屏障、缺血灶周围坏死细胞、凋亡细胞的影响,结果 海风藤提取物可显著减轻局灶性脑缺血后血脑屏障的破坏,减少缺血灶周围坏死细胞、凋亡细胞数量,并具有减少梗死灶直径的趋势。结论海风藤具有抵御缺血后脑屏障破坏,减少缺血灶周围神经细胞坏     

大鼠脑缺血后缺血区BDNF表达变化及通心络的影响

目的观察大鼠脑缺血后缺血区BDNF mRNA及蛋白表达水平的变化及通心络对其的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分为:假手术组、模型组、通心络高剂量(2.24g.kg-1.d-1)、低剂量(1.12g.kg-1.d-1)组。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)局灶性脑缺血模型,逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化法检测脑缺血后3h、24h、72h、7d缺血区BDNF mRNA及蛋白表达的变化以及通心络的作用。结果(1)大鼠脑缺血后缺血区BDNF表达变化:大鼠局灶性脑缺血后3h缺血区BDNF mRNA表达略有上升,而24h表达下降,72h后又开始上升,至缺血后7d达高峰;免疫组化染色显示:在脑组织缺血区,BDNF主要在小神经元阳性表达,表达趋势与mRNA基本吻合。(2)通心络对缺血区BDNF表达的影响:与模型组相比,通心络高剂量组BDNF mRNA的表达水平在缺血后3h、24h、7d均有显著提高(P<0.01,P<0.05);通心络低剂量组BDNF mRNA的表达水平在缺血后3h、24h有明显升高(P<0.01,P<0.05);在缺血后7d,高剂组BD-NF mRNA的表达与低剂组相比明显升高(P<0.01)。在缺血后各时间点,通心络各组BDNF阳性神经元数量增多。结论局灶性脑缺血可促进缺血区内源性神经保护因子BDNF高表达;通心络可增强和延长缺血区BDNF高表达,发挥对脑缺血的保护作用。