左旋多巴对帕金森病大鼠结肠神经递质的影响

目的 探讨左旋多巴对帕金森病(PD)大鼠模型结肠平滑肌收缩性和神经递质的影响。方法 6-羟多巴胺损毁制备偏侧PD大鼠模型。动物分为对照组、PD组、左旋多巴组、PD+左旋多巴组4组;左旋多巴组和PD+左旋多巴组给予左旋多巴灌胃治疗35 d,对照组和PD组给予生理盐水灌胃治疗35 d;采用生物信号采集分析系统记录各组结肠平滑肌收缩频率和幅度;免疫组织化学SP法观察结肠肌间神经丛神经元型一氧化氮合酶(nNOs)、酪氨酸羟化酶(TH)和乙酰胆碱转移酶(CHAT)的变化;RT-PCR检测nNOS、TH、ChAT mR-NA在结肠的表达。结果 ①与对照组比较,PD组和PD+左旋多巴组收缩频率和幅度明显下降(P<0.05);与PD组比较,PD+左旋多巴组收缩频率和幅度增加(P<0.05)。②与对照组比较,PD组和PD+左旋多巴组nNOS免疫阳性产物积分光密度(IOD)和nNOS mRNA表达明显升高(P<0.05),TH免疫阳性产物IOD和TH mRNA表达明显降低(P<0.05);与PD组比较,PD+左旋多巴组nNOS免疫阳性产物IOD和mRNA表达降低(P<0.05),TH免疫阳性产物IOD和mRNA表达升高(P<0.05);各组ChAT免疫阳性产物IOD和CHAT mRNA表达无明显差异。结论 PD大鼠结肠收缩性下降,其机制可能与nNOS的增多和多巴胺的减少有关。左旋多巴可改善PD大鼠结肠收缩功能,可能与nNOS的减少和多巴胺的增多有关。     

司来吉兰对帕金森病模型大鼠胃窦酪氨酸羟化酶和神经元型一氧化氮合酶表达的影响

目的观察司来吉兰对帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠胃功能障碍及胃窦酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)及神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)表达的影响,探讨司来吉兰对PD胃功能障碍的治疗作用及可能机制。方法 72只健康SD大鼠随机分为正常对照组、PD模型组和司来吉兰治疗组,后两组采用颈背部皮下注射鱼藤酮制备PD模型,模型制备成功后,模型组每日并灌胃生理盐水,治疗组每日灌胃给药司来吉兰0.5mg/kg。分别于治疗后4d、8d测定胃固体食物残留率,并采用免疫组化法和蛋白质印迹法检测胃窦TH和nNOS的表达。结果与对照组相比,模型组各时间点胃内固体食物残留率均增加,胃窦TH表达均减少,nNOS表达均增加,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,治疗组各时间点胃内固体食物残留率均降低,胃窦TH表达均升高,nNOS表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与治疗4d组相比,治疗8d组大鼠胃内固体食物残留率明显降低,TH表达明显升高,nNOS阳性细胞表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论司来吉兰可改善PD大鼠胃功能障碍,其作用机制可能与其减轻PD模型大鼠胃窦多巴胺能神经元的损伤和抑制nNOS表达有关。     

实验性帕金森病大鼠结肠动力的研究(摘要)

以6-OHDA诱导的实验性帕金森病(PD)大鼠模型为研究对象,并用左旋多巴(levodopa)处理正常大鼠和模型鼠,记录各组结肠电机械活动信号,结合免疫组织化学方法检测结肠肠神经系统的nNOS和VIP,并用RT-PCR方法测定nNOSmRNA的表达,同时结合帕金森病发病机制,用免疫组化方法观察结肠肌间酪氨酸羟化酶(TH)的表达变化。     

胰腺炎相关腹水对空肠运动和肠组织含nNOS神经的影响

目的探讨急性胰腺炎相关腹水对在体胃肠平滑肌电生理和运动的影响,以及对肠道神经型一氧化氮合酶(nNOS)神经的影响。方法以5%牛磺胆酸钠溶液逆行注入胰胆管制作急性胰腺炎(AP)模型,24h后收集腹腔液低温离心取上清液作为胰腺炎相关腹水。24只Wistar大鼠随机分为正常对照、实验对照、腹水模型组和Nω-硝基-L-精氨酸(L-NNA)治疗组。用Maclab数据分析系统,同时记录肠运动和电信号。记录后取各组距幽门15cm的空肠全层标本,用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP法)做nNOS免疫组化染色。结果正常组与实验对照组的空肠运动频率和平均振幅比较无明显差异;慢波峰值频率和平均振幅与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);腹水组与实验对照组比较运动频率和平均振幅均明显降低(P<0.05);慢波峰值频率和平均振幅与正常组比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),并伴有明显节律紊乱;L-NNA治疗组慢波频率和运动频率均恢复。反映空肠收缩的运动指标和慢波平均振幅指标虽然有一定的恢复,但与腹水组比较差异无统计学意义(P>0.05)。正常肌间神经丛和黏膜下层可见nNOS阳性神经元和神经纤维,腹水组与实验对照组比较,神经元、神经纤维着色程度加深,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胰腺炎相关腹水可引起胃肠动力抑制和胃肠电节律紊乱。胰腺炎相关腹水的这种抑制作用可能部分通过增加肠壁肌间神经丛和黏膜下层非肾上腺非胆碱能(NANC)神经中nNOS的活性来完成。     

左旋多巴对帕金森病大鼠纹状体多巴胺转运体的影响

目的研究左旋多巴(L-dihydroxy-phenylalanine,LD)对帕金森病大鼠纹状体多巴胺转运体的影响。方法采用脑部偏侧注射6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)制备PD模型,并将成功模型随机分为PD模型组、LD治疗组,并以正常大鼠作对照,每组9只。其中LD治疗组大鼠给予腹腔注射左旋多巴/苄丝肼(50mg/kg左旋多巴和12.5mg/kg苄丝肼即左旋多巴和苄丝肼溶于含0.05%的乙醇和0.1%的抗坏血酸的注射用水中,配成10mg/ml),每日两次;PD模型组及正常对照组给予腹腔注射等量的含0.05%的乙醇和0.1%的抗坏血酸的注射用水,每日两次。分别于4、6、8周,每组各取3只大鼠,行脑纹状体内多巴胺转运体125I-β-CIT放射自显影,同时用γ-计数器测定纹状体内多巴胺转运体放射活性,计算每克纹状体含放射性占注射剂量的百分比(%ID/g)。结果损毁侧在不同时间段,与正常对照组比较,PD模型组、LD治疗组DAT数量均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01);LD治疗组随时间的延长,呈现递减趋势,但差异尚无统计学意义(P>0.05)。健侧在6周时与正常对照组比较,PD模型组及LD治疗组DAT数量降低,差异有统计学意义(P<0.05);LD治疗组DAT数量有递减趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。纹状体自显影结果与纹状体内标志物放射活度测定结果基本一致。结论长期每日应用50mg/kg LD治疗PD模型大鼠可能会使纹状体内多巴胺转运体的数量减少。     

重症急性胰腺炎伴胃肠动力障碍大鼠结肠黏膜下血管活性肠肽神经元的变化

目的:探讨结肠黏膜下神经丛血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)神经元对重症急性胰腺炎伴胃肠动力障碍疾病的影响?方法:用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠的方法建立重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠模型,检测胰腺病理评分以及小肠推进比?利用全层铺片方法制作结肠黏膜下神经丛标本,双重免疫荧光法计数VIP阳性神经元占总神经元的百分比?结果:与正常大鼠比较,SAP组大鼠开腹后见大量腹水及腹壁?胰周皂化斑点,肠管扩张明显,胰腺病理评分明显增高(P < 0.01),小肠推进比明显下降(P < 0.01),VIP阳性神经元与总神经元百分比明显增高(P < 0.01)?结论:重症急性胰腺炎大鼠胃肠动力障碍可能与结肠黏膜下神经丛VIP神经元增多有关?     

左旋多巴对帕金森病模型大鼠结肠酪氨酸羟化酶和α-突触核蛋白表达的影响

目的探讨左旋多巴(L-dopa)对帕金森病(PD)模型大鼠结肠酪氨酸羟化酶(TH)及α-突触核蛋白(α-Syn)表达的影响。方法健康SD大鼠72只随机分为对照组、帕金森病模型组(模型组)、左旋多巴治疗组(治疗组),各组随机再分为模型制备成功后4 d、8 d 2个亚组,各12只。采用大鼠颈背部皮下注射鱼藤酮制备帕金森病模型,免疫组化法和Western blotting蛋白印迹法检测结肠TH和α-Syn表达水平。结果 1 h粪便排出量及含水量:与对照组比较,模型组、治疗组大鼠显著降低(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠增加(P<0.05);与治疗4 d亚组比较,治疗8 d亚组增加(P<0.05)。免疫组化法与Western blottng检测TH、α-Syn比较:(1)与对照组比较,模型组、治疗组各时间点结肠TH阳性细胞及蛋白表达均明显减少,α—Syn阳性细胞及蛋白表达均明显增加(P均<0.05);(2)与模型组比较,治疗组各时间点结肠TH阳性细胞及蛋白表达均增多,α—Syn阳性细胞及蛋白表达均明显减少(P均<0.05);(3)与治疗4 d亚组比较,治疗组治疗8 d亚组的TH阳性细胞及蛋白表达升高(P<0.05),α—Syn阳性细胞及蛋白降低(P<0.05)。结论 PD模型大鼠结肠功能障碍的机制可能与多巴胺的减少及α—Syn水平的增多有关,左旋多巴可能通过增加多巴胺和减少α—Syn水平改善PD大鼠结肠功能障碍。     

noggin对帕金森病大鼠黑质神经元的保护作用

目的  观察noggin对6-羟基多巴胺(6-OHDA)致帕金森病模型大鼠神经行为的影响及其对黑质神经元的保护作用。方法  随机将60只雄性SD大鼠,分为正常对照组、模型组和模型治疗组。采用脑立体定位右侧纹状体内注射6-OHDA构建帕金森病(PD)模型,模型治疗组纹状体内注射noggin,正常对照组与模型组同时给予等量生理盐水,术后7d于行为检测完毕后行尼氏染色、TH、TUNEL与GFAP免疫组化染色,光镜下观察3组大鼠黑质多巴胺能神经元、凋亡神经元与星形胶质细胞的形态变化并进行计量分析,电镜下观察黑质神经元超微结构变化。结果    模型治疗组大鼠的旋转次数较模型组明显改善(P<0.05),TH阳性神经元较模型组增多,凋亡神经元显著减少(P<0.05),GFAP阳性神经元较模型组减少,胞浆内GFAP阳性产物的平均光密度值亦明显降低(P<0.05);TH、TUNEL与GFAP阳性神经元主要位于黑质致密部;电镜下对照组黑质神经元结构清晰,胞核形态规则,核膜光滑、完整,染色质分布均匀;胞浆电子密度中等,细胞器丰富;模型组黑质神经元胞核皱缩,核膜凸凹不整、异染色质减少,胞浆内大量线粒体嵴断裂消失,粗面内质网扩张;模型治疗组黑质神经元细胞核形态规则,部分线粒体肿胀,细胞器丰富。结论  noggin可改善PD模型大鼠的行为能力、使凋亡神经元及反应性星形胶质细胞数目减少,这些变化可能与noggin能促进黑质内部分神经元再生有关。     

VIP在慢性便秘大鼠结肠肌间神经丛中的表达和意义

目的:观察VIP在慢性便秘大鼠结肠肌间神经丛中的表达情况,探讨VIP在其发病中作用。方法:复方地芬诺酯建立慢性便秘大鼠模型,采用免疫组织化学SP法检测正常对照组和模型组的表达情况,应用彩色病理图像分析系统对阳性表达的平均光密度值(MD)进行半定量比较分析。结果:发现正常对照组和慢传输型便秘模型组大鼠的结肠肌间神经丛内均有VIP表达;检测两组中免疫组织化学VIP阳性表达平均吸收光密度值,发现模型组MD值高于正常对照组,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:血管活性肠肽的分布异常可能与慢性便秘的发病相关。     

电针对吗啡成瘾大鼠中枢多巴胺能神经元的影响

目的:探讨吗啡对大鼠中脑腹侧被盖区(VTA)、伏隔核(NAc)、前额皮层(PFC)内酪氨酸羟化酶(TH)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的影响及电针的调节作用。方法:大鼠随机分为正常对照组、模型组、电针治疗组,每组5只,模型组、电针治疗组采用吗啡自身给药成瘾大鼠模型。电针治疗组选取双侧L5、L2夹脊穴,20 min/d,电针连续治疗10 d;正常对照组、模型组不予电针干预。采用免疫组化法观察各组大鼠VTA、NAc、PFC内TH、GFAP含量的变化。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠脑区VTA、NAc、PFC内TH及VTA内GFAP含量明显增加,差异均有统计学意义(P0.05);与模型组比较,电针治疗组大鼠脑区VTA、NAc、PFC内TH及VTA内GFAP含量明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:吗啡成瘾后大鼠相关脑区的多巴胺能神经元发生了相应改变,电针治疗可调节多巴胺能神经元的异常表达,对吗啡成瘾大鼠的多巴胺能神经元起到保护作用。     

长期应用大黄对大鼠结肠肌电及Cajal间质细胞的影响

目的 研究长期服用刺激性泻剂对大鼠结肠肌电的影响,探讨Ｃａｊａｌ间质细胞（ＩＣＣ）在“泻剂结肠”肌电变化中的作用。方法 ３２只大鼠随机分为２组,实验组饲以含大黄饲料,３月后测定结肠慢波频率及振幅;用碘化锌－狐酸法（ＺＩＯ）观察肌间念念不忘爱射电镜观察肌间丛神经和ＩＣＣ的超微结构变化。结果 长期服用大黄后,大鼠结肠慢波频率明显减慢（Ｐ〈０．０５）,肌间丛ＩＣＣ分布不均匀,突起连接杂乱;电锏上见肌间丛     

益气开秘方对结肠慢输型便秘大鼠肠动力和肠神经肽的影响

目的:探讨益气开秘方对结肠慢输型便秘大鼠肠道动力和肠神经肽的影响。方法:共纳入80只无特定病原体级大鼠,将60只造成结肠慢输型便秘模型,并随机分为模型组、西沙比利组和益气开秘方组(简称中药组),其余20只设为正常对照组。以碳末推进百分率、离体肠肌条收缩频率及振幅、一氧化氮合酶1(nitricoxide synthase-1,NOS1)和P物质为观察指标。结果:模型组的碳末推进百分率较正常对照组明显降低(P<0.05),中药组和西沙比利组均明显高于模型组(P<0.05)。模型组与正常对照组相比,其各肠段肠肌条收缩的频率和振幅明显降低,中药组和西沙比利组与模型组比较均有提高(P<0.05)。模型组结肠肠壁组织NOS1阳性细胞面积百分比明显高于正常对照组、西沙必利组和中药组,中药组与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组P物质阳性细胞面积百分比较正常对照组明显下降,中药组与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益气开秘方可通过提高大鼠肠道平滑肌收缩的频率和振幅来促进肠道动力。其作用途径与调控肠神经丛NOS1和P物质阳性表达有关。     

脾虚证大鼠胃肠道VipYNnNos神经元共存

目的：探讨Vip、nNos神经元在脾虚证大鼠胃肠道消化活动中的调节作用。方法：免疫组织化学染色法和双重染色法。结果：脾虚证时Vip、nNos神经元同肘存在于胃肠道组织中,且主要分布于胃窦及结肠的肌间丛,黏膜下丛较少见到共染现象。结论：大鼠脾虚证所表现的胃肠生理功能紊乱／不足的病理生理过程是由Vip、nNos神经元协同调节实现的,由此验证了结构与功能的相关性。     

中药白术对大鼠胃肌电紊乱调节作用的机制探讨

目的　观察白术对大鼠胃肌电紊乱的调节作用 ,同时探讨其可能机制 ,为临床应用提供依据。方法　健康成年Wistar大鼠 3 0只随机分为 3组 :①正常对照组 ;②模型组 ;③白术 +模型组。通过胃电记录仪记录并分析各组慢波频率、慢波频率变异系数及异常节率指数 ,同时对各组大鼠胃窦组织进行P物质、血管活性肠肽及一氧化氮合酶免疫组化染色。结果　模型组大鼠胃慢波频率变异系数及异常节率指数明显高于对照组 (P <0 0 1) ,应用白术水提取液后模型组大鼠胃慢波频率变异系数及异常节率指数与对照组无明显差异 (P >0 0 5 )。模型组大鼠胃窦肌间神经丛P物质的神经含量明显低于对照组 (P <0 0 1) ,血管活性肠肽 (P <0 0 5 )及一氧化氮合酶 (P <0 0 1)神经含量明显高于对照组 ,应用白术水提取液后模型组大鼠胃窦肌间神经丛P物质神经含量明显增加而血管活性肠肽、一氧化氮合酶神经含量明显减少且与对照组无明显差异 (P >0 0 5 )。结论　白术对大鼠胃肌电紊乱具有一定调节作用 ,其机制可能与胃窦肌间神经丛P物质的分布增加及血管活性肠肽、一氧化氮合酶的分布减少有一定关系     

STZ-糖尿病大鼠小肠动力与肠神经胆碱能和氮能神经元关系的研究

目的:探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠小肠动力改变与小肠肌间神经丛胆碱能和氮能神经元之间的关系。方法:45只SD大鼠随机分为STZ-糖尿病组、胰岛素组和正常对照组,造模后16周处死。测定大鼠肠动力,采用组织化学染色法观察大鼠小肠肌间神经丛胆碱能和氮能神经元的形态改变。结果:与对照组相比较,糖尿病组和胰岛素组大鼠肠动力均明显减弱(P均<0.05);肌间神经丛胆碱能神经元数目均显著减少(P均<0.01),氮能神经元数量均有减少的趋势(P均>0.05)。胰岛素组肠动力显著高于糖尿病组(P<0.05),但肠神经元计数两组无显著性差异(P>0.05)。结论:STZ-糖尿病大鼠肠动力减弱与肠道肌间神经丛胆碱能和氮能神经损伤有关,胰岛素强化治疗可延缓糖尿病胃肠动力障碍的进展。     

糖尿病大鼠胃肠运动障碍与胃肠神经元的关系

目的探讨链脲佐菌素（STZ）-糖尿病大鼠胃肠动力障碍和胃肠肌间神经丛胆碱能和氮能神经元的关系。方法45只sD大鼠随机分为对照组、糖尿病组和胰岛素组。成模后16周测定大鼠胃肠动力,观察胃肠肌间神经丛胆碱能和氮能神经元的形态变化。结果与对照组比较,糖尿病组大鼠胃肠动力减弱（P〈0．01）,胃窦、小肠肌间神经丛胆碱能神经元（6．6±2．9VS15．7±3．815．6±10．3VS22．6±7．4,P均〈0．01）和胃窦部氮能神经元（5．3±1．2VS11．8±2．2,P〈0．01）计数显著降低。胰岛素组胃肠动力、胃窦部氮能神经元和小肠胆碱能神经元计数均显著高于糖尿病组（P均〈0．05）,但均低于对照组（P均〈0．05）。结论STZ-糖尿病大鼠胃肠动力障碍可能与胃肠肌间神经丛胆碱能和氮能神经损伤有关;胰岛素治疗能在一定程度上改善糖尿病胃肠动力障碍。     

烫伤应激对大鼠结肠胆碱能和CO能神经的影响

目的：探讨烫伤后大鼠肠功能障碍时肌间神经丛有无形态学异常及可能机制。方法：20只大鼠随机分成对照组（n=10）和烫伤组（n=10）,建立30%TBSAIII度烫伤大鼠模型,测定肠传输速率,用酶组织化学方法观察结肠肌间神经丛内胆碱能和CO能神经的组织学改变,并对两组大鼠结肠肌间神经丛内乙酰胆碱酯酶（Actylcholinesterase,AE）和血红素氧合酶-2（Hemeoxygenase-2,HO-2）阳性神经元、神经节的密度进行了测定。结果：烫伤组大鼠肠传输速率明显降低。烫伤后大鼠结肠肌间神经丛内胆碱能神经元及神经节密度明显减小（P〈0.01）;HO-2阳性神经元在两组大鼠结肠组织中均有表达,烫伤组大鼠结肠肌间神经丛HO-2阳性神经元及神经节的密度,明显低于对照组（P〈0.05）。结论：烫伤后大鼠结肠肌间神经丛胆碱能和CO能神经受损,可能是烫伤引起肠功能障碍的原因。     

胰腺炎相关腹水致胃肠电生理紊乱机制的研究

目的 探讨急性胰腺炎相关腹水对在体胃肠平滑肌电生理和运动的影响及肠道nNOS神经变化。方法以5％牛磺胆酸钠溶液逆行注入胰胆管制作ANP模型．24小时后收集腹腔液低温离心取上清液作为胰腺炎相关腹水。24只Wistar大鼠随机分为正常对照、实验对照、腹水模型组和LNNA治疗组。用Maclab数据分析系统．对肠运动和电信号同时记录。记录后取实验对照组与腹水组距出门15厘米的空肠全层标本，常规制成石蜡切片，SP方法做nNOS免疫组化染色。结果正常组与实验对照组之间空肠运动频率和平均振幅无明显差异；慢波峰值频率和平均振幅与正常组比较差异无显著性（P〉0．05）；腹水组与实验对照组比较运动频率和平均振幅均明显降低（P〈0．05）；慢波峰值频率和平均振幅比正常组差异也有显著性（P〈0．05）并伴有明显节律紊乱；LNNA治疗组慢波频率和运动频率均恢复。但反应空肠收缩的运动指标和慢波平均振幅指标虽然有一定的恢复，但用药前后无显著差异（P〉0．05）。正常肌闻神经丛和粘膜下层可见nNOS阳性神经元和神经纤维，腹水组与实验对照组比较．神经元、神经纤维着色加深差异有显著性（P〈0．05）。结论胰腺炎相关腹水可引起胃肠动力抑制和胃肠电节律紊乱。胰腺炎相关腹水的这种抑制作用可能部分通过增加肠壁肌间神经丛和粘膜下层NANC神经中nNOS的活性。     

通腑汤对胃肠动力障碍大鼠小肠肌间神经丛中5-HT、SP和VIP含量的影响

目的：探讨通腑汤的药物作用及作用机制。方法：用甘草灌胃建立胃肠动力障碍动物模型；观察通腑汤对大鼠十二指肠，空肠肌间神经丛中5-羟色胺（5-HT），P-物质（SP）和血管活性肠肽（VIP）含量的影响。结果：与模型组比较，经通腑汤治疗6d后十二指肠肌间神经丛内5-HT，SP和VIP含量有显著性差异，5-HT，SP含量明显增加，VIP含量明显减少。结论：通腑汤可纠治甘草引起的胃肠动力障碍，使5-HT，SP，VIP的分泌恢复正常，说明通腑汤的药物作用机制与5-HT，SP和VIP的分泌密切相关。