梅毒螺旋体低分子量多肽基因的克隆表达及临床应用

梅毒是由苍白螺旋体(Ｔ)感染引起的一种严重危害人类健康的性传染性疾病。血清学非特异性试验是目前诊断梅毒的主要方法,例如快速血浆反应素试验(ＲＰＲ)、不加热血清反应素试验(ＵＳＲ);应用梅毒螺旋体抗原检测梅毒患者体内的特异性抗体,已被用于确诊梅毒感染,例如荧光螺旋体抗体吸收试验(ＦＡＴＡＢＳ)、梅毒螺旋体血凝试验(ＴＰＨＡ)等,但使用的均为全抗原,由于可能存在的非特异性交叉反应,使上述方法受到一定的限制。因此,研制一种先进且实用的梅毒诊断及普查的方法已成为当务之急。近年来,由于分子生物学技术的普及,几种梅毒螺旋体的主…     

梅毒常用的实验室诊断方法?

答 :梅毒螺旋体暗视野显微镜检查 :取溃疡基底的分泌物 ,主要适用于有活动性溃疡的 1期梅毒患者 ,特别是血清学反应阴性者 ,阳性有确诊意义。但应注意 ,正常口腔黏膜表面有非梅毒螺旋体寄生 ,暗视野显微镜检查不适用于口腔黏膜溃疡。血清学检查是最常用的梅毒实验诊断方法 ,包括非梅毒螺旋体抗原试验和梅毒螺旋体抗原试验。非梅毒螺旋体抗原试验以心磷脂为抗原常用快速血浆试验 (RPR)、梅毒性病试验 (VDRL)等 ,此类方法敏感性高但特异性稍差 ,尤其对于自身免疫性疾病患者和老年患者假阳性率较高 ,多用于梅毒的筛查。有效治疗后此类抗体的…     

56例梅毒感染者病原与血清学试验结果分析

梅毒螺旋体(TP)是引起性传播疾病梅毒的病原体。梅毒的诊断依据病史、症状、体征、暗视野显微镜检查TP和血清学试验。血清学试验包括非特异性类脂质抗原试验即以心磷脂等为抗原,检查患者血清中的反应素,如RPR,TRU ST等,常用作筛查试验;另一种为TP抗原试验,即以纯化TP抗原检测特     

四种常用梅毒检测试验在基层医院的合理应用

目的探讨四种常用的梅毒血清学试验在基层医院梅毒诊断中的合理应用。方法将110份梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)阳性标本和200份阴性标本均进行梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、快速血浆反应素试验(RPR)、梅毒螺旋体快速诊断试验(TP-RT)检测。将TP-ELISA、RPR、TP-RT与TPPA结果进行比较,采用SPSS19.0进行数据统计。结果 TP-ELISA、TP-RT与TPPA方法一致性检验的KAPPA值分别为0.94,0.95。RPR的检出率为61.82%。结论正确认识梅毒的血清学试验方法的特点并合理应用非常重要,对于基层医院适合先用TPPA进行筛选,阳性的再进行非梅毒螺旋体的抗原血清学试验。大批量查体标本可选用TP-ELISA筛查,阳性的再进行非梅毒螺旋体的抗原血清学试验和TPPA。     

梅毒螺旋体特异性表面抗原的克隆表达与血清鉴定

梅毒病原体为苍白密螺旋体 (Ｔｐ) ,俗称梅毒螺旋体。对Ｔｐ的诊断目前主要依据病史与临床检查 ,辅助以一些血清学方法 ,如血球凝集试验 (ＴＰＨＡ)和荧光抗体吸收试验 (ＦＴＡ ＡＢＳ) [1] 。蛋白分子量 170 0 0与 4 70 0 0是Ｔｐ特异性表面抗原[2 ,3 ] ,患者感染Ｔｐ后能够产生相应的特异性抗体。我们利用基因工程的方法 ,通过大肠埃希菌表达Ｔｐ的 170 0 0与 4 70 0 0特异性抗原 ,以建立一种Ｔｐ血清学诊断方法。一、材料和方法1 分子量 170 0 0与 4 70 0 0基因的扩增 :用蛋白酶Ｋ消化的方法纯化ＴｐＤＮＡ。通过聚合酶链反应 (ＰＣＲ)扩…     

两种方法检测梅毒的比较

梅毒是严重危害人类健康的疾病之一，近年来梅毒的发病率呈上升趋势，在一些高危人群中尤为严重。人体受梅毒螺旋体侵袭后，血清中可产生非特异性反应素抗体和特异性抗体，目前广泛用于临床筛查的血清学方法是检测非特异性抗体，主要试验有甲苯胺红血清试验(TRUST)和快速血浆反应素试验(RPR)法；而梅毒螺旋体抗原血清学试验如梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)法等，大多作为确证试验。由于TRUST试验具有较高的假阳性率，近年来国内外开始采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清梅毒螺旋体抗体，笔对两种实验方法进行了对比分析，现将结果报告如下。     

ELISA双抗原夹心法在血液检测中的应用

梅毒是由密螺旋体属苍白球细菌引起的传染性疾病 ,可经血液途径传播。梅毒螺旋体侵入机体后 ,产生两种抗体 :一种是特异性抗体 ,另一种是非特异性抗体。目前 ,国内各采供血机构大多采用血清学非特异性试验检测献血者梅毒抗体 ,主要有 TRUST法和RPR法。由于非特异性试验检测结果敏感性高而特异性较低 ,常出现假阳性和漏检[1] 。本站于 2 0 0 1年 6月～ 2 0 0 2年 1 0月 ,对 1 3465例街头无偿献血者应用 ELISA双抗原夹心法作为献血者血液的梅毒抗体复检试剂 ,初检试剂仍用TRUST法 ,并以梅毒螺旋体血凝试验 ( TPHA)作为确证试验 ,现将…     

胶乳凝集试验检查梅毒螺旋体抗体

梅毒的诊断标准需依据病史、临床表现、血清学检测和损伤部位的梅毒螺旋体鉴定,其中以血清学检测最为重要。临床上常用的方法有梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、荧光抗体吸收试验(FTA-ABS)和血浆快速反应素试验(RPR)。前两种试验以梅毒螺旋体作为抗原,而后者无梅毒螺旋体参与。RPR试验操作简单,但不能用于自动分析仪,且假阳性反应     

11 799例普通住院患者梅毒血清学试验结果分析

梅毒螺旋体(Treponemapallidum,TP)是引起性传播疾病(STD)梅毒的病原体。梅毒的诊断依赖病史、症状和体征、暗视野显微镜检查TP和血清学试验。后者包括非特异性类脂质抗原试验即以心磷脂等为抗原,检查患者血清中的反应素,如RPR、USR、TRUST、VDRL等,常用作筛查试验。另一种为TP     

干燥综合征患者TPPA和TRUST检测梅毒抗体假阳性1例

梅毒是由梅毒螺旋体(又称苍白螺旋体)感染引起的一种慢性疾病,可引起多器官感染,严重危害患者的生命健康[1].梅毒的诊断主要根据流行病学史、临床表现和实验室检查.目前血清学检查包括非梅毒螺旋体血清学试验和梅毒螺旋体血清学试验,其中梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)是实验室血清学检测梅毒螺旋体的重要方法,该方法准确度和...     

经修饰的重组梅毒螺旋体膜蛋白及其应用

目的　寻找高灵敏度、高特异性、检测结果定量、简便易行的梅毒螺旋体抗体酶联免疫检测方法。　方法　采用重组技术 ,在现有已公布的梅毒螺旋体基因组中筛选出公认抗原性最强的三个基因片段 Tpp1 5、Tpp1 7、Tpp47进行克隆。为了获得水溶性高、特异性强、可标记性好的重组抗原蛋白 ,有针对性地设计引物以便对表达的梅毒螺旋体膜蛋白进行修饰和改造 ,同时在收获高效表达的目的蛋白后采取了一系列针对性切割和高特异性纯化。以纯化的重组梅毒螺旋体膜蛋白 (r-KTp1 5 ,r-KTp1 7及 r-KTp47)为抗原 ,建立了诊断梅毒螺旋体抗体的双抗原夹心酶联检测方法 (DAGS ELISA)。　结果　在大肠杆菌中获得了重组梅毒螺旋体膜蛋白的高效表达 ,经修饰纯化之后的目标蛋白水溶性提高 ,特异性增强 ,可标记性优于常规不修饰的重组蛋白。应用该三种蛋白为抗原建立的双抗原夹心法血清学诊断试剂盒共检测各期梅毒阳性患者 2 1 0例 ,灵敏度达 98.6% (2 0 7/2 1 0 ) ,检测正常献血者 1 3 2 7例 ,特异性达 1 0 0 .0 % (1 3 2 7/1 3 2 7) ,优于常规梅毒血清学初筛诊断方法 RPR及 TRUST法 ,与 TPHA法的符合率为 1 0 0 .0 %。　结论　以双抗原夹心法酶联免疫诊断试剂盒在梅毒血清学初筛实验室进行梅毒螺旋体抗体的筛查 ,在灵敏度、特异     

梅毒血清学试验的方法学比较及对国产第一代ELISA试剂的初步评价

梅毒螺旋体一旦侵袭人体后,血清中可产生非特异性反应素抗体和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体。目前,广泛用于临床筛查的血清学方法是检测非特异性抗体,主要试验有TRUST和RPR,而常用的梅毒螺旋体抗原血清学试验,如TPHA、TPPA等,大多用于确证试验［1］。随着近年来分子生物学技术的发展,国内外均已克隆出梅毒螺旋体多肽抗原,用基因工程重组抗原研制的ELISA试剂盒已经面市［2、3］。本文旨在探讨上述几种检测方法之间的差异,并为国产ELISA试剂盒在临床的常规应用提供初步的依据。     

用TP-ELISA、RPR与TP-PA法检测梅毒的价值评价

本研究将梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体非特异性血浆反应素试验(RPR)与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TP-PA)3种血清学方法进行比较,以获得3种方法在梅毒螺旋体感染的诊     

3种血清学特异性抗体检测在梅毒螺旋体检测中的比较研究

梅毒(syphilis)属于一种性传播疾病,病原体为苍白密螺旋体(TP)苍白亚种,又称梅毒螺旋体.近年来,TP 的感染率仍持高不下,虽然用于检测 TP特异性抗体的检测方法越来越多,梅毒血清学诊断仍具有挑战性,而且两次检测结果的不一致使临床决策变得困难[1 ].因此,本研究选择了 3 种 TP 特异性抗体的检测与TPPA...     

两种方法诊断早期梅毒的对比分析

梅毒是由苍白螺旋体引起的性传播疾病(STD).梅毒螺旋体侵入机体后可产生两种抗体,即抗心磷脂抗体和抗密螺旋体抗体.由于潜伏期梅毒和晚期梅毒临床表现极不典型,常不出现皮肤黏膜病损,得不到直接检查梅毒螺旋体的标本,故梅毒的血清学试验非常重要.目前临床实验室常用的过筛试验主要有快速血浆反应素试验(RPR),甲苯胺红不加热血清试验(TRUST),属非特异性梅毒螺旋体血清试验,梅毒特异性试验主要以明胶颗粒凝集试验(TPPA)为主.本实验室选用TRUST和TPPA两种方法,对112例早期梅毒血清进行检测,现分析如下.……     

酶联免疫吸附法检测梅毒特异性免疫球蛋白G

酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）是新近用于诊断梅毒的血清学方法。我们试用国产ＥＬＩＳＡ试剂盒,对梅毒特异性抗体ＩｇＧ进行检测,并与密螺旋体吸收试验（ＦＴＡＡＢＳ）及梅毒螺旋体明胶凝集试验（ＴＰＰＡ）对照,现报告如下。一、材料和方法１标本来源：梅毒患...     

梅毒检测技术进展

梅毒螺旋体(TP)属于密螺旋体属苍白螺旋体的苍白亚种,是引起人类梅毒的病原体。TP的人工培养问题迄今仍未解决,直接涂片镜检简便,但敏感性低且标本要求高。实验室诊断以血清学检测方法为主。近年来出现的新型免疫学方法和聚合酶链式反应技术具有较高的敏感性和特异性。本文将     

梅毒血清学诊断不同方法的比较

梅毒是由苍白螺旋体(TP)所引起的一种性传播疾病，也是一种经血传播疾病。目前梅毒血清学诊断方法常用的有快速血浆反应素试验环状卡片试验(RPR)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、酶联免疫吸附试验(ELIS)、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)等。各种梅毒血清试验敏感性不一样，前两种是     

RPR、TPPA、ELISA在梅毒血清学检测中的对比观察

临床梅毒检测常用的血清学试验分为非梅毒螺旋体抗原血清试验 (USR、RPR)和梅毒螺旋体抗原血清试验 (如 TPPA、EL ISA等 )。非特异性试验是检测心拟脂刺激机体产生的抗体 ,风湿、红斑狼疮患者可与之发生交叉反应 ,所以常出现假阳性。特异性梅毒血清试验敏感性和特异性都较高。我院先后开展了RPR、TPPA、EL ISA三种梅毒血清检测方法 ,并在实验室对10 3份各期梅毒患者标本进行了平行测定 ,并设 70份对照 ,现将结果报告如下1　对象和方法1.1　血清标本　 10 3份梅毒患者血清 ,均经 TPPA及病史、临床体征确诊 ,70份正常血清作为对…     

三种梅毒螺旋体抗体检测方法比较

梅毒是由苍白螺旋体引起的性传播疾病,梅毒血清学诊断方法为非梅毒螺旋体血清试验和梅毒螺旋体血清试验,这两类血清学方法埘梅毒的诊断具有特异性强、敏感性高等特点,但对早期梅毒螺旋体感染（4周前）的硬下疳患者敏感性较差,对神经梅毒和梅毒孕妇所生新生儿是否感染梅毒的早期诊断,以及经正规抗梅治疗的判愈等尚待研究。国内广泛应用的筛查试验主要为梅毒快速血浆反应素诊断试验（RPR）,梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验TP—Ab（ELISA）的方法检测梅毒螺旋体抗体,梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（treponema pallidum particle assay,TP—PA）,此法敏感度和特异度高,操作方法简单,是TPHA的升级产品,适用于潜伏梅毒及非特异性梅毒螺旋体试验阴性而又高度怀疑为梅毒的患者。