血小板源性生长因子与角膜损伤修复

血小板源性生长因子(PDGF)在机体伤口愈合过程中具有重要的调节作用。由于角膜的特殊结构和功能,其伤口愈合的调节显得至关重要。本文简述PDGF的结构、受体、生物学活性及其在角膜伤口愈合中的作用。     

生长因子对角膜上皮细胞损伤修复的作用

角膜上皮细胞是维持角膜正常生理功能的重要细胞。角膜上皮缺损,一般修复较快,但也有些角膜疾患可导致持续性角膜上皮缺损,从而此起一系列并发症,一些生长因子可促进角膜上皮的修复,开创了治疗角膜上皮持续缺损的新方法,本着重介绍与角膜上皮细胞关系密切的表皮生长因子（EGF）、血小板源性生长因子（PDGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、转化生长因子（TGF）、肝细胞生长因子（HGF）和角质细胞生长因子（KGF）的结构及其在角膜上皮细胞修复中的作用。     

表皮生长因子促角膜损伤修复的研究进展

EGF是促生长因子家族成员之一，呈单链多肽结构，通过与靶细胞上的受体结合而发挥促细胞生长发育及组织损伤修复等作用。随着基因工程技术的进展，EGF重组蛋白已广泛用于组织损伤修复的研究。本就EGF促进组织损伤愈合机制的研究进展作一综述。     

表皮生长因子促进猫角膜内皮损伤修复

角膜内皮细胞的屏障和泵功能对于维持角膜的透明性起着关键的作用，研究促进角膜内皮细胞生长的药物非常重要。本实验的目的是观察EGF对角膜内皮损伤修复的影响。     

表皮生长因子与角膜损伤修复

近年来，基因工程技术及生化技术的迅速发展，使一系列生长因子的临床成为可能，ＥＧＦ是目前研究得最为深入最早应用于临床的生长因子，本重点就与ＥＧＦ应用有关的基础及临床研究进展以及综述。     

血小板源性生长因子与视神经

视神经损伤常可导致严重的和永久性的视力损害,严重危害人类健康。过去认为,视神经无再生能力,损伤后难以恢复正常结构和功能。国外学者研究发现,血小板源性生长因子(PDGF)与视神经的生长发育密切相关,且可能在视神经损伤的修复过程中发挥重要作用。深入研究血小板源性生长因子与视神经的关系,特别是其在视神经损伤修复过程中的作用,对视神经损伤性疾病的防治,可能有重大意义。     

血小板源性生长因子与视神经

视神经损伤常可导致严重的和永久性的视力损害，严重危害人类健康。过去认为，视神经无再生能力，损伤后难以恢复正常结构和功能。国外学研究发现，血小板源性生长因子(PDGF)与视神经的生长发育密切相关，且可能在视神经损伤的修复过程中发挥重要作用。深入研究血小板源性生长因子与视神经的关系，特别是其在视神经损伤修复过程中的作用，对视神经损伤性疾病的防治，可能有重大意义。     

兔准分子激光角膜切削术后角膜血小板源性生长因子mRNA表达的变化

研究角膜上皮下混浊形成的发生机制,检测准分子激光屈光性角膜切削术后角膜上皮和基质血小板源性生长因子表达的变化。方法新西兰白兔施行ＰＲＫ后１,２,３月用裂隙灯显微镜观察ｈａｘｅ形成情况,并用原位酸分子杂交方法,检测角膜上皮和基质ＰＤＧＦ ｍＲＮＡ的表达。结果正常角膜上皮细胞有ＰＤＧＦ ｍＲＮＡ表达,基质层无表达;ＰＲＫ后角膜上皮细胞ＰＤＧＦｍＲＮＡ表达增加,术后２月表达最强,且基质中亦有轻微表达。上     

大鼠角膜碱烧伤后血小板源生长因子的表达

目的 :检测血小板源生长因子 (PDGF)在大鼠角膜碱烧伤后表达的变化情况。方法 :建立大鼠角膜碱烧伤模型 ,用免疫组化法检测角膜碱烧伤后不同时段PDGF BB在角膜各层次中的表达 ,用RT PCR法检测PDGF B的mRNA在角膜碱烧伤后不同时段表达的变化。结果 :免疫组化检测显示 ,在正常角膜中 ,PDGF BB在上皮层中为弱表达 ,角膜碱烧伤后 ,PDGF BB在角膜各层组织中均有表达且表达逐步增强。各实验组中 ,7d组表达最强 ,而后逐渐下降 ,至 30d组基质层已基本无表达。RT PCR检测显示 ,正常角膜和损伤角膜中均有PDGF B的mRNA表达 ,角膜碱烧伤后 7d组和15d组 ,PDGF B的mRNA表达量最多。结论 :PDGF B在角膜碱烧伤后表达增强 ,且其表达的量随病程的发展而变化 ,PDGF B在角膜的损伤和修复过程中起一定作用。     

血小板源性生长因子和bFGF促进猫角膜内皮细胞增生的协同作用研究

目的 观察血小板源性生长因子（PDGF-BB）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对猫角膜内皮细胞（CECs）增生的影响及其联合应用对细胞增生是否有协同作用。方法 猫CECs原代培养，传1代后，分别在培养液中加不同浓度的PDGF-BB和bFGF，加药后第1、3、5d分别利用MTT法测定在490nm处的吸光值来判断CECs的增生情况；同时应用倒置相差显微镜观察细胞形态，扫描电镜检测细胞超微结构。结果 与对照组比较，加药后第1、3、5d，PDGF-BB和bFGF均能增加培养的猫CECs的数量，最有效质量浓度分别为100ng／ml和10ng／ml，二者联合培养组猫CECs的增生能力更强。结论 PDGF-BB和bFGF可促进猫CECs的增生，二者具有协同作用。     

表皮生长因子对家兔角膜内皮损伤修复作用的实验研究

目的 研究表皮生长因子对家兔角膜内皮损伤的修复作用。方法 将溶于透明持酸钠的ＥＧＦ注入角膜内皮已损伤的兔眼前房,对照眼只注入ＮａＨＡ。结果 １０μｇ和５μｇ的ＥＧＦ均可使角膜内皮缺损面积显著缩小,并可使再生的角膜中央内皮细胞密度,六边形细胞出现率显著上升及细胞面积变异系数明显减小。     

表皮生长因子对碱烧伤角膜伤口愈合的实验研究

目的　观察鼠表皮生长因子 (m ouse epiderm al grow th factor,m EGF)对角膜上皮创伤修复的作用 ,并探讨其量效关系。方法　采用兔角膜碱烧伤后上皮缺损模型 ,分别给予 0 .5、1、2 g· L- 1m EGF滴眼液治疗 ,生理盐水作对照组 ,每日荧光染色裂隙灯观察、记录 ,疗程 1周。结果　 2 g· L - 1m EGF治疗组与其他 3组有显著性差异 ,0 .5及 1g· L- 1m EG F与对照组之间无显著性差异。结论　尽管量效关系复杂 ,2 g· L- 1m EGF对角膜碱烧伤后上皮缺损的修复起到一定的促进作用。     

表皮生长因子对猫角膜内皮细胞DNA合成的影响

目的　观察人表皮生长因子 (EGF)对体外培养的猫角膜内皮细胞损伤愈合速度及DNA合成的影响。方法　猫角膜内皮细胞体外培养传一代融合后 ,定量损伤直径 3mm范围内的细胞 ,培养液中加入 1、10、5 0和 10 0ng/mlEGF ,对照组不加EGF ,损伤后 1、3、5天倒置显微镜下照相转入计算机测量未愈合面积 ,作为判断不同浓度EGF影响角膜内皮细胞损伤愈合速度的指标。培养液中加入3 H 胸腺嘧啶核苷 ( 3 H -TdR) ,应用液体闪烁计数仪测量3 H TdR的掺入量 ,反映不同质量浓度EGF对角膜内皮细胞DNA合成的影响。结果　一定质量浓度的EGF加快猫角膜内皮细胞损伤愈合速度并促进DNA合成 ,显示剂量依赖性 ,10～ 5 0ng/ml时加快愈合速度作用达高峰 ,10ng/ml时促进DNA合成作用达高峰 ,浓度再增高时作用下降。结论　一定质量浓度的EGF能促进体外培养的猫角膜内皮细胞损伤愈合速度 ,并促进其DNA合成。     

表皮生长因子对人角膜内皮细胞损伤修复的影响

目的　观察人表皮生长因子 (epidermal growth factor,EGF)对人角膜内皮细胞损伤修复的影响 ,检测人角膜内皮细胞表皮生长因子受体 (epidermal growth factor recep-tor,EGFR)的表达。方法　胎儿角膜内皮细胞体外培养传一代融合后 ,定量损伤细胞 ,倒置显微镜下观察不同浓度 EGF对角膜内皮细胞损伤修复的影响 ,并于损伤前及损伤后 1、3、7、14 d用间接免疫荧光的方法检测角膜内皮细胞 EGFR的表达。结果　 EGF促进人角膜内皮细胞损伤愈合 ,并显示剂量依赖性 ,EGF在 10 μg· L- 1时促进作用达高峰 ,浓度再增高促进作用下降。人角膜内皮细胞损伤前及损伤后均在细胞膜上表达 EGFR,表现为细胞膜上绿色荧光 ,在未损伤区的细胞及缺损区修复的细胞均见表达。结论　 EGF促进人角膜内皮细胞损伤修复 ,人角膜内皮细胞表达 EGFR     

水蛭素对血小板源性生长因子及受体的影响

目的 通过观察水蛭素对血小板源性生长因子(PDGF)及受体(PDGF-R)的影响,深入探讨水蛭素防治增生性玻璃体视网膜病变(PVR)形成的机制。方法 利用穿孔性眼外伤的动物模型,分别给予10U/ml和20U/ml的水蛭素于玻璃体腔内,用酶联免疫法(ELISA)测定玻璃体中PDGF的含量,用免疫组织化学法观察玻璃体腔内细胞增殖相关抗原(Ki-67)、白介素1β转换酶(interlukin 1-β converting enzyme,ICE)和PDGFR的表达。结果 造模后3d和28dPDGF的检测结果显示生理盐水对照组(434.88±56,75,457.17±74.39)与剂量Ⅰ组之间(285.95±54.04,322.50±106.93)差异有显著性(P<0.01);PDGF-R的检测结果显示生理盐水对照组(147.82±14.95,141.05±19.03)与剂量Ⅰ组(87.27±20.80,2.57±16.75)和剂量Ⅱ组(97.67±11.37,68.26±5.6)之间差异有显著性(P<0.01);ICE的检测结果显示生理盐水对照组(38.51±3.04,39.74±3.78)与剂量Ⅰ组(57.01±10.02,57.61±9.04)和剂量Ⅱ组(56.22±4.95,57.45±8.25)之间差异有显著性(P<0.01)。Ki-67检测结果显示造模后28d生理盐水对照组(127.83±128.72)与剂量Ⅰ组(51.67±18.61)和剂量Ⅱ组(51.50±31.55)之间差异有显著性(P<0.01和P<0.05)。结论 水蛭素通过抑制PDGF的分泌和PDGF-R的激活而抑制玻璃体腔内细胞的     

Nerve growth factor and corneal wound healing in dogs

Nerve growth factor in the tear film and corneal epithelium is hypothesized to play an important role in ocular surface maintenance and corneal wound healing. The purpose of this study was to determine the expression of nerve growth factor and its high affinity (trkA) receptor in tears, cornea, and lacrimal glands of normal dogs, the modulation of nerve growth factor and its trkA receptor during corneal wound healing, and the effect of topical nerve growth factor application on canine corneal epithelial wound healing. In the first of three experiments, the nerve growth factor content of tears, corneal epithelium, lacrimal gland, and 3rd eyelid gland was determined in normal dogs by enzyme-linked immunosorbent assay and the expression of nerve growth factor and its trkA receptor were evaluated in the cornea and lacrimal glands by immunohistochemistry. In a second experiment, unilateral corneal epithelial defects were created, and tissues were evaluated for changes in nerve growth factor or trkA expression for 1 week. In a third experiment, bilateral corneal epithelial defects were created and the right eyes in each animal were treated 4 times daily with either recombinant human nerve growth factor, murine nerve growth factor, or nerve growth factor-blocking antibody. The results of this study showed that nerve growth factor levels in normal dog tears, corneal epithelium, third eyelid gland and lacrimal gland were 15.4+/-4.6 ng ml(-1), 33.5+/-12.3, 52.4+/-17.4 and 48.8+/-9.4 ng g(-1), respectively. NGF and trkA receptors were identified by immunohistochemistry in all tissues examined. After unilateral corneal wounding, nerve growth factor concentration increased in the tears bilaterally for 3 days, especially in the wounded eye, and then returned to pre-wounding values. Nerve growth factor content, and immunohistochemical staining for nerve growth factor and trkA, increased significantly in the ipsilateral cornea epithelium following unilateral wounding. Nerve growth factor concentrations in lacrimal and third eyelid glands also increased bilaterally (p<0.01) after unilateral wounding. Time to wound closure and rate of epithelial migration did not differ significantly between nerve growth factor-treated, nerve growth factor antibody-treated, and control eyes. In conclusion, nerve growth factor is present under resting physiologic conditions in normal canine tears, and nerve growth factor and its trkA receptor are present under resting conditions in normal canine corneal epithelium, lacrimal gland and third eyelid gland. Nerve growth factor is elevated in the tears, cornea, and lacrimal glands after corneal epithelial wounding; however, topical application of nerve growth factor, or its blocking antibody does not modulate corneal wound healing in the normal dog eye.