肝细胞癌ZIC1基因启动子区甲基化与临床病理特征的关系

目的:探讨肝细胞癌ZIC1基因启动子区甲基化与临床病理特征的关系.方法:采集2008年8月至2014年8月武警陕西总队医院63例肝细胞癌患者手术切除的肿瘤组织标本,通过Real-time PCR法检测肝细胞组织及癌旁组织中ZIC1 mRNA表达水平;用甲基化特异性PCR (methylation specific polymerase chain reaction,MSP)法检测癌组织及癌旁组织中ZIC1基因启动子区甲基化状态.结果:ZIC1 mRNA在肝细胞癌组织中呈低表达与其启动子区甲基化有关;ZIC1基因在肝细胞癌中频发甲基化(P＜0.05),并与肿瘤分化程度及分级显著相关(均P＜0.05).结论:启动子区甲基化是ZIC1基因失活的重要机制,ZICI基因启动子区异常甲基化可能参与了肝细胞癌的发生发展.     

RIT1基因在肝细胞癌中的扩增及其临床意义

背景与目的:已有的研究显示肝细胞癌的染色体1q有高频扩增,1q21-22是最小的高频扩增区带之一,可能存在肝细胞癌相关的候选癌基因。RIT1基因位于1q21.3区带,是Ras的亚家族成员,RIT1蛋白在分子结构和功能方面与Ras蛋白非常相似,推测RIT1基因可能是肝细胞癌的候选癌基因之一。因此,本研究通过检测肝细胞癌RIT1基因的扩增情况,并与临床指标相联系,探讨该基因对肝细胞癌发生和发展的可能作用。方法:建立荧光定量PCR的方法,在PEABI7000型荧光定量PCR仪上检测43例肝细胞癌患者手术切除的癌组织及远癌肝组织RIT1基因的拷贝数,并用癌组织与癌旁肝组织基因拷贝数的比值作为RIT1基因的扩增倍数。结果:在43例肝细胞癌患者中,11例有RIT1基因的扩增,扩增率为25.6%;将基因扩增组与非扩增组比较,基因扩增组的生存期(平均15个月)明显短于非扩增组(平均34个月),P=0.0009,且在病理分级和肝硬化程度方面也具有明显的差异,P<0.01。结论:基因扩增可能是癌基因RIT1在肝细胞癌的激活方式之一,该基因的扩增可能对肝细胞癌的发生发展起一定的作用。     

Pim-1在原发性肝细胞癌组织中的表达情况及其临床意义

目的 明确Pim-1在原发性肝细胞癌(PHC)组织中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组织化学染色(IHC)方法检测122例PHC、相应的癌旁及85例正常肝组织中Pim-1蛋白的表达情况。回顾性分析Pim-1蛋白表达水平与临床病理指标的关系。Kaplan-Meier法计算不同Pim-1表达水平对PHC患者生存情况的影响。采用Cox比例风险回归模型分析影响PHC患者生存期的危险因素。结果 Pim-1蛋白在PHC组织中的总阳性率为88.5%, 显著高于癌旁组织(73.0%)和正常肝组织(69.4%)(P＜0.05)。单因素分析表明, Pim-1蛋白高表达患者的术前肝功能较差、肿瘤数目较多、肿瘤直径较大、淋巴结转移发生率较高且TNM分期较高(P＜0.05)。生存分析提示与Pim-1高表达组患者相比, 低表达组患者的生存期延长(P＜0.05)。多因素分析表明, 高表达Pim-1蛋白是影响PHC患者生存时间的独立危险因素(P＜0.001)。结论 Pim-1在PHC组织中的表达水平显著升高, 与PHC的临床进展和患者生存时间有一定的关联性, 其过表达提示PHC患者的预后较差。     

WFDC-1基因在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义

目的检测WFDC-1基因在肝癌和正常肝组织的表达差异并探讨其临床意义。方法采用荧光实时定量PCR（FQ-RT-PCR）法检测30例肝癌组织及相应远端正常肝组织WFDC-1mRNA的表达,分析其表达与肝癌患者临床特征的相关性。结果 WFDC-1mRNA在肝癌组织中的表达水平（0.050±0.026）明显低于远端正常肝组织（0.113±0.040）,两者差别有统计学意义（P〈0.05）。WFDC-1mRNA在肝癌中的表达水平与HBsAg水平有关,合并HBsAg阳性的肝细胞癌（HCC）中的表达低于HBsAg阴性HCC组（P〈0.05）,而与年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、AFP及有无肝硬化无关（P〉0.05）。结论肝癌组织中WFDC-1基因表达水平明显低于相应正常肝组织,提示WFDC-1表达与降低肿瘤发生有一定的相关性,为潜在的抑癌基因。     

WFDC-1基因在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义

目的检测WFDC-1基因在肝癌和正常肝组织的表达差异并探讨其临床意义。方法采用荧光实时定量PCR(FQ-RT-PCR)法检测30例肝癌组织及相应远端正常肝组织WFDC-1mRNA的表达,分析其表达与肝癌患者临床特征的相关性。结果 WFDC-1mRNA在肝癌组织中的表达水平(0.050±0.026)明显低于远端正常肝组织(0.113±0.040),两者差别有统计学意义(P<0.05)。WFDC-1mRNA在肝癌中的表达水平与HBsAg水平有关,合并HBsAg阳性的肝细胞癌(HCC)中的表达低于HBsAg阴性HCC组(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、AFP及有无肝硬化无关(P>0.05)。结论肝癌组织中WFDC-1基因表达水平明显低于相应正常肝组织,提示WFDC-1表达与降低肿瘤发生有一定的相关性,为潜在的抑癌基因。     

Aberrant TIG1 methylation associated with its decreased expression and clinicopathological significance in hepatocellular carcinoma

Recently, it has been reported that tazarotene-induced gene 1 (TIG1) methylation was frequently detected in a variety of human cancers. However, the relationship between the TIG1 methylation and the characteristics of hepatocellular carcinoma (HCC) remains unknown. The aim of present study was to observe the promoter methylation of TIG1 in HCC tissues and assess its prognostic significance for HCC. Real-time quantitative polymerase chain reaction and methylation-specific polymerase chain reaction were used, respectively, to examine the mRNA expression and methylation status of TIG1 in 91 pairs of HCC and adjacent noncancerous tissues. The mRNA expression level of TIG1 was significantly lower in HCC tissues than in adjacent noncancerous tissues. The rate of TIG1 promoter methylation was significantly higher in HCC tissues than in adjacent noncancerous tissues (P?<?0.001). A strong correlation between downregulation and promoter methylation was found in these tumors (P?<?0.001). More importantly, TIG1 methylation status was related to tumor size (P?=?0.015), histological differentiation (P?=?0.004), and tumor stage (P?<?0.001). Kaplan–Meier survival analysis showed that TIG1 promoter hypermethylation was associated with a worse outcome in patients with HCC. Further, Cox multivariate analysis indicated that TIG1 methylation status was an independent prognostic factor for the overall survival rate of HCC patients. In conclusion, our data suggested that epigenetic silencing of TIG1 gene expression by promoter hypermethylation may play an important role in HCC.     

Fibronectin patterns in hepatocellular carcinoma and its clinical significance

Fibronectin, a high molecular weight glycoprotein component of the extracellular matrix, was localized extracellularly and intracellularly in the nuclei and the cytoplasm of hepatocellular carcinomas (HCC) by the use of the biotin-avidin method on paraffin-embedded, pepsin-treated tissue. The specificity of the staining was confirmed by absorbing the antibodies with purified fibronectin. Twenty HCC were investigated (7 were autopsy specimens and 13 biopsy and surgical specimens). The fibronectin was either increased or decreased. When increased the fibronectin consisted of thin or thick feathery strands and was either pericellular, sinusoidal, periglandular, or stromal. Marked increase of fibronectin was seen in fibrolamellar HCC, clear cell HCC, and encapsulated HCC, correlating with the better prognosis. Decreased fibronectin was seen in two undifferentiated HCC. HCC obtained at autopsy displayed nuclear and cytoplasmic fibronectin staining. Nuclear fibronectin may be an expression of the DNA binding ability of fibronectin which becomes demonstrable in cells with increased membrane permeability.     

survivin与HIF-1α在肝细胞癌组织中的表达及意义

目的 探讨凋亡抑制蛋白生存素(survivin)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在人肝细胞癌组织中的表达及相关性,分析其与肝细胞癌转移复发的关系.方法 应用免疫组化S-P法检测80例肝细胞癌组织和癌旁组织中survivivn和HIF-1α蛋白的表达情况.结果 80例肝细胞癌组织中survivivn和HIF-1α蛋白表达的阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05),两者的表达与门脉癌栓、术后复发、肝外转移、肿瘤大小、肿瘤分化程度表达密切相关,HIF-1α的表达还与临床分期有关(P<0.05).survivivn和HIF-1α的表达有显著相关性(r=0.349,P=0.001).结论 survivivn和HIF-1α与肝细胞癌侵袭转移的发生有密切关系.     

肝细胞癌多基因甲基化异常及其临床意义

目的 探讨肝细胞癌中多基因甲基化异常的发生率,研究肝细胞癌中多基因甲基化异常的临床意义.方法 收集60例肝细胞癌及相应的癌旁组织、16例肝炎后肝硬化组织、5例慢性肝炎和5例正常肝组织,筛选消化道肿瘤中APC、RASSF1A、p16、GSTP1、MGMT、DAPK、SOCS-1和RIZ18个甲基化异常频率高的肿瘤抑制基因,应用甲基化特异件聚合酶链反应(MSP)检测8个肿瘤抑制基因在所有标本中的甲基化状态.比较不同基因甲基化与非甲基化肝细胞癌患者的临床病理特征和生存情况.结果 肝细胞癌组织中,RASSF1A、APC、GSTP1、p16、RIZ1和MGMT基因的甲基化率分别为95.0%、90.0%、73.3%、65.0%、61.6%和60.0%,均高于相应的癌旁组织(均P＜0.05);癌旁组织中,MGMT、GSTP1和RIZ1基因的甲基化率分别为41.6%、40.0%和25.0%,均高于肝硬化组织(均P＜0.05).p16基因甲基化的肝细胞癌患者的平均年龄大于非甲基化者;巨块性肝细胞癌中,MGMT基因甲基化者的比例高于非甲基化者;MGMT基基甲基化者的无瘤生存期短于非甲基化者.结论 不同基因在肝细胞癌、癌旁和肝硬化组织中的甲皋化率差异显示了肝细胞癌发生中渐进的表观遗传学改变;GSTP1、RIZ1和MGMT基因的甲基化异常具有肿瘤风险评估和早期诊断价值,而MGMT基因的甲基化异常同时具有预后评估价值.     

肝癌中c-fms癌基因突变及其临床意义

目的探讨c-fms癌基因与肝癌的关系及意义,为进一步阐明肝癌的发生机制提供依据.方法通过PCR-SSCP方法检测肝癌c-fms第301密码子的突变,并对肝癌组织行Ed-mondson分级来探讨与肝癌的临床关系.结果 PCR扩增产物长度与预期一致,特异性高.SSCP检测发现18例肝癌组织第301位密码子DNA单链出现泳动变位,第969位密码子片段未出现异常泳动单链.测序示CSF-IR第301位密码子发生亮氨酸Leu(TTG)→丝氨酸Ser(TCG)置换,发生该位点突变的肝癌组织学分类为EdmondsonⅢ级11例、Ⅳ级7例,具有恶性程度高、发病年龄轻的特点.结论 c-fms癌基因第301位密码子突变是肝癌发生发展的一种分子机制.     

OCT4在肝细胞癌中的表达及其临床意义

背景与目的:近年关于肝癌干细胞问题备受关注,已发现部分干细胞标志物在肝细胞癌中表达并与预后有关,其中OCT4基因是POU转录因子的重要组员,是维持胚胎干细胞自我更新能力和分化潜能的关键因子。本研究旨在检测OCT4A在肝细胞癌中的表达情况,并探讨其与病理因素和预后的关系。方法:用半定量RT-PCR检测5株人肝癌细胞系和1株永生化肝细胞系,以及107例肝细胞癌组织、相应的癌旁肝组织和20例正常无肝硬化肝组织中OCT4A mRNA的表达,并结合肝癌临床病理因素及预后进行分析。结果:OCT4A mRNA在人肝癌细胞系SMMC-7721、BEL-7402、Hep-G2、MHCC-97L、MHCC-97H中均表达,而在永生化肝细胞系L-02中无表达。OCT4A mRNA在肝癌组织中表达率为72.0%,明显高于癌旁肝组织的30.8%(P<0.001),在正常无肝硬化肝组织中无表达。肝癌组织中OCT4A mRNA的表达与肿瘤大小、血管侵犯及TNM分期有关(P<0.05)。OCT4A mRNA阳性肝癌患者及阴性患者的3年总生存率分别为48.0%和83.7%,3年无瘤生存率分别为34.1%和58.0%,差异均有统计学意义(P<0...     

tktl1在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

目的：研究转酮醇酶样基因1（tktl1）在肝细胞肝癌（HCC）中的表达及其与临床病理的关系。方法：RT-PCR法检测转酮醇酶基因家族各成员（tkt、tktl1、tktl2）mRNA在42例HCC及癌旁组织中的表达并研究其与临床病理参数间的关系。结果：HCC组织中tktl1阳性表达率明显高于tkt和tktl2的阳性表达率（P〈0.05）。tktl1在HCC中的阳性表达率明显高于癌旁组织（P〈0.05）;而tkt和tktl2阳性表达率在肝癌及癌旁组织间无明显差异（P〉0.05）。 HCC中tktl1的高表达同肿瘤分化程度,静脉癌栓,CLIP评分有关（P〈0．05）,而与性别、年龄、肿瘤大小、肝内及淋巴转移、AFP水平无关（P〉0．05）。结论：tktl1与HCC的发生发展有关,影响肝癌的分化、转移及患者预后,有望成为HCC治疗的新靶点。     

tktl1在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

目的:研究转酮醇酶样基因1(tktl1)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及其与临床病理的关系.方法:RT-PCR法检测转酮醇酶基因家族各成员(tkt、tktl1、tktl2)mRNA在42例HCC及癌旁组织中的表达并研究其与临床病理参数间的关系.结果:HCC组织中tktl1 阳性表达率明显高于tkt和tktl2的阳性表达率 (P＜0.05).tktl1在HCC中的阳性表达率明显高于癌旁组织(P＜0.05);而 tkt和tktl2阳性表达率在肝癌及癌旁组织间无明显差异(P＞0.05). HCC中tktl1的高表达同肿瘤分化程度,静脉癌栓,CLIP评分有关 (P＜0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小、肝内及淋巴转移、AFP水平无关(P＞0.05).结论:tktl1与HCC的发生发展有关,影响肝癌的分化、转移及患者预后,有望成为HCC治疗的新靶点.     

Plac1在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨胎盘特异基因1（placenta-specific 1,Plac1）在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测97例HCC组织及10例非肝癌的正常肝组织中Plac1的表达,并分析其与HCC临床病理特征及与患者预后的关系。结果:97例肝癌组织中,Plac1阳性表达51例,阳性表达率为52.6%,而在10例非肝癌的正常肝组织中不表达。Plac1蛋白的表达水平与患者的年龄、性别、血清AFP水平、肿瘤大小、是否有肝硬化及HBsAg阳性与否无关（P>0.05）,但与癌栓的形成及肿瘤转移相关（P<0.05）。Plac1阳性表达组HCC患者的术后生存时间明显低于Plac1阴性表达组HCC患者（P<0.05）,提示Plac1的表达可能与HCC患者的预后有关。结论:Plac1表达升高可能与HCC的发生发展密切相关。     

CD133在肝细胞癌表达的临床意义

目的 检测肿瘤干细胞标志物CD133在原发性肝细胞癌患者癌组织和外周血中的表达,分析CD133+表达与肿瘤进展的关系.方法 采集65例肝癌患者癌组织和外周静脉血,免疫组织化学SP法检测癌组织中CD133表达,流式细胞术检测外周血CD45-CD133+细胞百分数,另采集10例正常肝组织和外周血作对照.结果 肝癌组织中CD133阳性表达率为6.4%,外周血中CD45-CD133+细胞百分数为2.0%,正常肝组织和外周血中未见CD133阳性表达.差片有统计学意义(P<0.01);CD133阳性细胞含量与门静脉癌栓、肿瘤包膜完整性、病理组织分级、TNM分期显著相关(P值均<0.01).与肿瘤直径、AFP值无相关性(P值均0.05);CD133在癌纽织和外周血中的表达有相关性,二者挈正相关(r=0.36,P<0.01).结论 肝癌CD133+细胞数与肿瘤进展密切相关,检测肝癌组织和外周血的CD133表达对肝癌诊断和预后评估有临床实用价值.     

YEATS2在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨YEATS2在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）中的表达及其与预后的关系。方法 收集我院2010年1月至2014年1月112例手术切除的HCC癌组织和癌旁组织石蜡标本，采用Real-time PCR检测HCC癌组织及癌旁组织中YEATS2 mRNA的表达，Western blot和免疫组化染色检测YEATS2蛋白水平，免疫荧光染色检测YEATS2在HCC癌组织中的表达定位，并分析YEATS2与HCC患者临床病理特征和预后的关系，同时采用TCGA数据库数据验证。结果 Real-time PCR结果显示，YEATS2 mRNA在HCC癌组织中的表达较癌旁组织上调（P<0.001）；Western blot检测结果显示，YEATS2在约66.67%（12/18）的HCC癌组织表达升高；免疫组化染色分析发现，约71.43%（80/112）的HCC患者中YEATS2表达上调，其表达与TNM分期明显相关（P<0.001）；YEATS2主要在HCC癌组织细胞核中表达；多因素分析结果显示YEATS2高表达是患者不良预后的独立危险因素（HR=2.204，95%CI：1.388~3.500，P=0.001）。TCGA中HCC队列分析也表明YEATS2高表达的患者OS更差（HR=1.751，95%CI:1.107~2.770，P=0.017）。 结论 YEATS2在HCC组织中高表达，且与患者不良预后相关。     

转酮醇酶在肝癌中的表达及临床意义

目的:研究转酮醇酶基因家族在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中的表达及其与临床病理特征之间的相关性.方法:检测42 例HCC组织及对应癌旁组织中转酮醇酶活性;采用RT-PCR法检测转酮醇酶基因家族各成员[转酮醇酶(transketolase, TKT)基因、转酮醇酶样基因1(transketolase-like1, TKTL1)和转酮醇酶样基因2(transketolase-like2, TKTL 2)] mRNA在HCC及癌旁组织中的表达,并研究其与临床病理特征之间的相关性.结果: HCC组织中的转酮醇酶活性明显高于癌旁组织(P＜0.05);TKTL1 mRNA的阳性表达率明显高于TKT和TKTL 2 mRNA的阳性表达率(P＜0.05),HCC中TKTL1 mRNA的表达率及表达量均明显高于癌旁组织(P＜0.05),且TKTL1 mRNA的表达同肿瘤分化程度,是否有静脉癌栓,肝内有无卫星灶以及5年生存情况有关(P＜0.05).结论:转酮醇酶在HCC的发生发展中起重要作用,而TKTL 1 mRNA的高表达是HCC转酮醇酶活性增高的主要原因.HCC中TKTL1 mRNA的高表达预示着肝癌的分化差,易于转移以及预后不佳.     

CD133在肝细胞癌表达的临床意义

目的 检测肿瘤干细胞标志物CD133在原发性肝细胞癌患者癌组织和外周血中的表达,分析CD133+表达与肿瘤进展的关系.方法 采集65例肝癌患者癌组织和外周静脉血,免疫组织化学SP法检测癌组织中CD133表达,流式细胞术检测外周血CD45-CD133+细胞百分数,另采集10例正常肝组织和外周血作对照.结果 肝癌组织中CD133阳性表达率为6.4%,外周血中CD45-CD133+细胞百分数为2.0%,正常肝组织和外周血中未见CD133阳性表达.差片有统计学意义(P<0.01);CD133阳性细胞含量与门静脉癌栓、肿瘤包膜完整性、病理组织分级、TNM分期显著相关(P值均<0.01).与肿瘤直径、AFP值无相关性(P值均0.05);CD133在癌纽织和外周血中的表达有相关性,二者挈正相关(r=0.36,P<0.01).结论 肝癌CD133+细胞数与肿瘤进展密切相关,检测肝癌组织和外周血的CD133表达对肝癌诊断和预后评估有临床实用价值.     

CD133在肝细胞癌表达的临床意义

目的 检测肿瘤干细胞标志物CD133在原发性肝细胞癌患者癌组织和外周血中的表达,分析CD133+表达与肿瘤进展的关系.方法 采集65例肝癌患者癌组织和外周静脉血,免疫组织化学SP法检测癌组织中CD133表达,流式细胞术检测外周血CD45-CD133+细胞百分数,另采集10例正常肝组织和外周血作对照.结果 肝癌组织中CD133阳性表达率为6.4%,外周血中CD45-CD133+细胞百分数为2.0%,正常肝组织和外周血中未见CD133阳性表达.差片有统计学意义(P<0.01);CD133阳性细胞含量与门静脉癌栓、肿瘤包膜完整性、病理组织分级、TNM分期显著相关(P值均<0.01).与肿瘤直径、AFP值无相关性(P值均0.05);CD133在癌纽织和外周血中的表达有相关性,二者挈正相关(r=0.36,P<0.01).结论 肝癌CD133+细胞数与肿瘤进展密切相关,检测肝癌组织和外周血的CD133表达对肝癌诊断和预后评估有临床实用价值.