血浆中降钙素基因相关肽与糖尿病大鼠早期肾损害的相关性研究

目的：观察糖尿病大鼠血浆中CGRP的含量变化与24h尿微量白蛋白的关系，为早期防治DN提供理论依据。方法：Wistar大鼠，体重160-200g，于造成糖尿病大鼠模型后第6、8、10、12、14周测定血浆中的CGRP和24h尿微量白蛋白。结果：血浆中的CGRP在造模后第6周无明显改变，第8周开始呈进行性下降，并与24h尿微量白蛋白呈显著负相关，结论：动物观察血浆中CGRP的变化对于DN的早期发现及分析病情有重要意义。     

肾组织中降钙素基因相关肽与糖尿病大鼠早期肾损害的相关性研究

目的：观察糖尿病大鼠肾组织中CGRP的含量变化与24h尿微量白蛋白的关系，为早期防治DN提供理论依据。方法：Wistar大鼠，体重160-200g，于造成糖尿病大鼠模型后第6、8、10、12、14周测定肾组织中的CGRP和24h尿微量白蛋白。结果：肾组织中的CGRP在造模后第6周无明显改变，第8周开始呈进行性下降，并与24h尿微量白蛋白呈显著负相关。结论：动态观察肾组织中CGRP的变化对于DN的早期发现及分析病情有重要意义。     

葛根素干预对糖尿病肾病大鼠降钙素基因相关肽的影响研究

目的研究葛根素对糖尿病肾病（DN）大鼠降钙素基因相关肽（CGRP）的影响。方法链脉佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病组（D组）、葛根素治疗组（S组）,同时另设正常对照组（CN组）,给药干预14周后,测定空腹血糖（FBG）、尿微量白蛋白（U—mAIb）、血浆内皮素（ET）和CGRP含量。结果糖尿病大鼠UAER增加,ET升高,CGRP下降,给予葛根素治疗14周后,S组DN大鼠U—mAIb较D组显著降低,ET显著下降,CGRP明显升高。结论葛根素对糖尿病大鼠肾脏病变有一定的保护作用,其部分机制可能是通过上调CGRP含量而实现的。     

降钙素基因相关肽在早期糖尿病肾病中的作用

目的通过检测降钙素基因相关肽(CGRP)在2型糖尿病及早期糖尿病肾病患者血中的含量及其与内生肌酐清除率(Ccr)之间的相关关系,探讨CGRP在糖尿病肾病中的变化及作用。方法选取健康对照组(NC)30名,2型糖尿病组(DM)30例,早期糖尿病肾病组(DN)30例为研究对象,采用放射免疫法测定CGRP,采用方差分析比较各组CGRP水平,采用直线相关分析CGRP与Ccr之间的关系。结果NC组CGRP水平为154.59pg/ml,DM组为249.86pg/ml,DN组为354.78pg/ml。DM组,DN组CGRP水平与NC组比较明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。CGRP与Ccr呈明显负相关(r=-0.52,P<0.01)。结论在糖尿病患者中,随Ccr的下降,CGRP升高,CGRP在糖尿病肾病早期,促进肾脏的高滤过。     

心肌及蛛网膜下腔NGF基因转染对1型糖尿病大鼠心脏损伤的保护作用

目的 探讨以重组腺相关病毒（rAAV）为载体,评价心肌点注射和蛛网膜下腔注射转导神经生长因子（NGF）基因对1型糖尿病大鼠心脏损伤的保护作用。方法 全实验包括两个子实验。实验一：将12只SPF级雄性SD大鼠采用随机数字表法分为2组（n=6）：对照组、糖尿病（DM）组,DM组大鼠通过注射链脲佐菌素（STZ）建立1型糖尿病模型,2组大鼠于注射STZ前1 d及后第1、2、4、6、8、9周测甩尾反射潜伏期,并在第9周时通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组织中的NGF、降钙素基因相关肽（CGRP）含量。实验二：24只SPF级雄性SD大鼠随机分为4组（n=6）：糖尿病心脏转染对照组（MC）组、糖尿病心脏转染（ME）组、糖尿病脊髓转染对照（SC）组、糖尿病脊髓转染（SE）组,采用2×2析因设计,4组糖尿病模型建模方法同DM组,成模后第4周,MC组和ME组以心脏点注射分别转染滴度为0.8×1013 μg/L携带绿色荧光蛋白（GFP）基因的重组腺相关病毒（rAAV9-GFP）和相同滴度的携带NGF基因的rAAV-GFP（rAAV9-NGF-GFP）,各100 μL;SC组和SE组以蛛网膜下腔注射分别转染滴度为0.8×1012 μg/L的rAAV2-GFP和相同滴度的rAAV2-NGF-GFP,各25 μL。5周后,测各组大鼠心功能指标。取心肌、T1-T5段脊髓及背根神经节组织,荧光显微镜下观察GFP的表达情况;采用ELISA测各组织中的NGF、CGRP含量。结果 实验一中,与对照组相比,DM组的甩尾反射潜伏期在第4周后明显延长（P＜0.05）,心肌组织中的NGF、CGRP明显下调（P＜0.05）。实验二中,心肌点注射法转染rAAV9-NGF-GFP可改善大鼠的各项心功能指标（P＜0.05）,上调心肌组织中NGF、CGRP蛋白含量（P＜0.05）;且实验过程中的转染物与转染途径之间存在交互效应,两者联用改善心功能和上调心肌组织中NGF、CGRP的效果更显著（P＜0.05）。结论 心肌点注射rAAV-NGF-GFP可以更有效地提高1型糖尿病大鼠心肌组织中NGF的表达,产生更有效的心脏保护作用。     

TnT和pro—BNP在糖尿病肾病中过度表达的意义和机理探讨

目的探讨心脏生物标志物肌钙蛋白T（TnT）和β型钠尿肽前体（pro-BNP）在糖尿病肾病（DN）过度表达的意义和机理。方法将符合标准的2型糖尿病患（DM）者183例按肾功能分级分成二组,即DM组（90例）、DN组（93例）,分别检测两组患者血清中TnT和pro-BNP水平,并加以比较。结果DN组患者中的TnT和pro-BNP水平比DM组患者明显升高。结论TnT和pro-BNP在DN患者中过度表达,可作为2型糖尿病进展为DN的早期诊断指标,其机理可能是糖尿病肾病时TnTpro—BNP产生过多,而由于肾功能下降导致排泄减少,共同导致TnT和pro-BNP血清水平升高。     

ADM、NO及ADMR表达在糖尿病肾病中的变化及作用

目的探讨肾上腺髓质素（ADM）、一氧化氮（NO）及肾上腺髓质素受体（ADMR）在大鼠糖尿病肾病（DN）中的变化及作用。方法采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制备糖尿病大鼠动物模型,随机分为对照组、糖尿病2周和4周组;采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测肾皮质的AD-MRmRNA和蛋白的表达;同时检测大鼠的血糖、尿白蛋白排泄率（UAER）、尿量、肾重/体质量,以及肾皮质ADM与NO水平。结果注射STZ诱导糖尿病发生2周、4周后,与同批正常对照组比较,糖尿病组大鼠肾皮质的ADM、NO水平显著升高（P〈0.01）,肾皮质的ADMRmRNA和蛋白表达显著升高（P〈0.05）。结论糖尿病大鼠早期就有ADM、ADMR和NO的异常改变。提示ADM、ADMR以及NO可能参与糖尿病肾病的发生、发展过程。     

内皮素与糖尿病大鼠早期肾损害的相关性研究

目的：观察糖尿病大鼠血浆和肾组织中ET的含量变化与24h尿微量白蛋白的关系,为早期诊治DN提供理论依据。方法：Wistar大鼠,体重160～200g,于造模后第6、8、10、12、14周测定血浆和肾组织中的ET和24h尿微量白蛋白。结果：血浆和肾组织中的ET在造模后第6周无明显改变,从第8周开始呈进行性增高,并与24h尿微量白蛋白呈正相关。结论：动态观察血浆和肾组织中ET的变化对于早期发现DN有意义。     

糖尿病肾病不同时期的血栓前状态分子标志物水平

目的：了解2型糖尿病（DM）患血栓前状态的变化，以及此变化是否与糖尿病肾病（DN）有关，是否与DN的病变程度有关。方法：正常对照组（20例），2型糖尿病患共118例，按尿白蛋白排泄率（UAER）分为3组，尿白蛋白阴性组（DMI）伴微量白蛋白尿组（DM2），伴明显白蛋白尿组（DM3），分别测定血栓前状态分子标志物GMP－140，D－D，PAI，tPa,vWF水平。结果：所有DM患GMP－140，D－D，PAI均较正常对照组明显升高，提示DM患体内存在血栓前状态，其中GMP－140、D－D、，PAI在伴白蛋白尿的DM组明显高于不伴白蛋白尿的DM组，提示高凝及纤溶活性异常与DN的发生有关，GMP－140，D－D在明显白蛋白尿组又显高于微量白蛋白尿组，提示随DN病变程度的加重，血液高凝状态及纤溶系统紊乱更加明显，结论：2型糖尿病患体内存在血液高凝状态和纤溶系统紊乱，并且与DN的发生有关，与DN病变的严重程度有关。     

骨形态蛋白2在糖尿病肾病大鼠肾内小动脉中表达的意义

目的观察骨形态蛋白2（BMP-2）在糖尿病肾病（DN）大鼠肾实质内小动脉上的表达及其变化规律,探讨其对糖尿病肾病血管病变的影响。方法设对照组（N组）、DN组两组,建立STZ诱导的DN大鼠模型。茜素红染色观察肾实质内小动脉周围钙盐沉积,并分别采用免疫组化及mRNA原位杂交法检测BMP-2在肾实质内小动脉上的蛋白表达及基因定位。结果 （1）茜素红染色DN组第4~12周时偶见肾内小动脉少许点状红色钙盐沉积,第24周时可见肾实质内小动脉及周围组织有较多红色点片状沉积;N组茜素红染色为阴性。（2）DN组肾实质内小动脉BMP-2蛋白及mRNA在4周时已有表达,随时间延长表达逐渐增强,各时间点均明显高于N组;N组各时间点表达差异无统计学意义。结论 （1）DN大鼠肾内小动脉钙化前即已有BMP-2的表达;（2）BMP-2可能是糖尿病血管钙化的重要转录因子及早期生物学标志之一;（3）肾内小动脉上BMP-2的表达变化可能参与DN进展。     

糖尿病心肌组织中NOS的改变与糖尿病心肌病关系探讨

目的探讨实验性糖尿病(DM)大鼠模型心肌组织中一氧化氮(NO)浓度和一氧化氮合酶(NOS)活性改变在DM心肌病发生和发展中的作用.方法SD大鼠一次注射链脲佐菌素(STZ)建立DM模型,成模后36只DM大鼠分批每两周检测空腹血糖和NO浓度,2、6、10周时进行心肌组织NOS活性检测.结果(1)DM大鼠血清中NO的浓度与对照组相比显著升高(P＜0.01),并随着血糖浓度的升高及时间的延长而升高.(2)DM组大鼠心肌组织NO浓度和NOS的活性均较对照组明显升高(P＜0.05).结论高血糖状态激活了心肌组织中的NOS,使心肌组织中NO过度增加,加上血液中过度升高的NO,损伤了心肌细胞的结构及其功能,可能是DM心肌病产生的重要机制之一.     

NO和iNOS在大鼠糖尿病早期肾脏中的变化

目的:观察糖尿病大鼠早期肾脏中一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量和诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide syn-thase,iNOS)活性变化,探讨NO/iNOS在糖尿病早期肾脏损害中的作用机制。方法:取成年健康SD大鼠60只,随机分成糖尿病组(DM组)和正常对照组(NC组),每组30只。DM组大鼠采用一次性腹腔内注射STZ制造糖尿病大鼠模型,成模后和NC组分别于第1、2、4周麻醉取左肾,用硝酸还原酶法和吸光光度法测定肾组织中NO含量、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)和iNOS活性。所有数据用SPSS11.5统计软件进行统计学处理。结果:①DM组大鼠肾组织中NO含量、NOS和iNOS活性分别较同批NC组有显著性差异(P<0.05);②各组大鼠中NO含量与NOS活性、iNOS活性呈正相关。结论:糖尿病大鼠早期肾脏中iNOS活性增强,催化生成的NO在糖尿病早期肾脏损害中发挥重要作用。     

Effect of Lycium barbarum polysaccharide on the improvement of antioxidant ability and DNA damage in NIDDM rats

The effects of polysaccharide extracted from Lycium barbarum (LBP) on blood glucose, oxidative stress and DNA damage in rats with non-insulin dependent diabetes mellitus (NIDDM) were studied. The results show that LBP treatment (10 mg/kg.d) for 4 weeks led to decreased levels of blood glucose, malondialdehyde (MDA) and nitric oxide (NO) in serum of fasting rats; and to increased serum level of superoxidedismutase (SOD). Furthermore, LBP could reduce cellular DNA damage in peripheral lymphocytes of NIDDM rats. The DNA damage was determined by using the single cell gel (comet) assay with alkaline electrophoresis and was quantified by measuring tail length and tail moment. These results suggest that LBP can control blood glucose and modulate the metabolism of glucose, leading to significant improvement of oxidative stress markers (SOD, MDA) in rats with NIDDM. And that, LBP decreases DNA damage possibly via a decrease in oxidative stress levels. In conclusion, LBP as a dietary supplement may prevent the development of complications or even tendency to carcinogenesis in NIDDM rats.     

高脂喂养法建立大鼠胰岛素抵抗模型

目的建立大鼠胰岛素抵抗模型。方法采用高脂饲料喂养雄性SD大鼠,6周后分别进行葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验,并测定血清胰岛素、总胆固醇及甘油三脂含量,求算胰岛素敏感性指数。结果与正常对照组相比,3周后喂以高脂饲料的大鼠体重显著增加（P〈0．05,n=15）,6周后葡萄糖耐量和胰岛素耐量明显异常,胰岛素水平显著升高（P〈0．01,n=15）,胰岛素敏感性明显下降（P〈0．01,n=15）,但空腹血糖、血清中总胆固醇和甘油三脂含量无显著改变（P〈0．05,n=8）。结论高脂饲料喂养大鼠6周可出现明显的胰岛素抵抗特征。     

降糖素对实验性Ⅱ型糖尿病大鼠的降血糖作用

目的:探讨降糖素(黄芪复方制剂)对实验性Ⅱ型糖尿病大鼠的降血糖作用。观察方法:于Ⅱ型糖尿病大鼠胃饲降糖素3周,观察血糖、胰岛素含量变化。结果:降糖素能明显降低实验性Ⅱ型糖尿病大鼠的高血糖,增加血清胰岛素的含量。结论:提示降糖素能改善糖尿病症状,对治疗Ⅱ型糖尿病有一定作用。     

Activity of the Chinese prescription Hachimi-jio-gan against renal damage in the Otsuka Long-Evans Tokushima fatty rat: a model of human type 2 diabetes mellitus

Currently, in Japan, approximately 95% of patients with diabetes mellitus have non-insulin-dependent (type 2) diabetes mellitus (NIDDM), and diabetic nephropathy is a major cause of patients requiring chronic haemodialysis. A previous study showed that Hachimi-jio-gan has a protective effect in rats subjected to subtotal nephrectomy plus streptozotocin injection, a model of insulin-dependent (type 1) diabetic nephropathy. In this study, we used the Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty (OLETF) rat, a model of human NIDDM, to investigate whether long-term administration of Hachimi-jio-gan affects glycaemic control and renal function in NIDDM. Male OLETF rats, aged 22 weeks, were divided into 4 groups of 10 and given Hachimi-jio-gan (50, 100 or 200 mg kg(-1) daily) orally or no treatment for 32 weeks. Male Long-Evans Tokushima Otsuka (LETO) rats (n = 6) were used as non-diabetic normal controls. Hachimi-jio-gan reduced hyperglycaemia dose-dependently from 16 weeks of the administration period. Urinary protein excretion decreased significantly from an early stage, and creatinine clearance levels improved at 32 weeks. In addition, the levels of serum glycosylated protein and renal advanced glycation end-products were effectively reduced. Hachimi-jio-gan also significantly reduced the levels of thiobarbituric acid-reactive substances in renal mitochondria, although it showed only a tendency to reduce these in serum. Furthermore, long-term administration of Hachimi-jio-gan reduced renal cortical expression of proteins, such as transforming growth factor-beta1 (TGF-beta1), fibronectin, inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2. The 100- and 200-mg kg(-1) daily doses of Hachimi-jio-gan significantly reduced TGF-beta1 and fibronectin protein expression to levels below those of LETO rats. These data suggest that Hachimi-jio-gan may have a beneficial effect on the progression of diabetic nephropathy in OLETF rats by attenuating glucose toxicity and renal damage.     

血糖波动对自发性2型糖尿病GK大鼠肾脏病变的影响

目的 研究血糖波动对糖尿病GK大鼠肾脏病变的影响。方法 5只♂ Wistar大鼠作为正常组,10只♂ GK大鼠按体质量、血糖值随机分为糖尿病组、血糖波动组,每组5只。血糖波动组每日错时腹腔注射葡萄糖及皮下注射胰岛素造成日间血糖波动模型,正常组和糖尿病组每日错时腹腔注射等剂量生理盐水,连续6周。每日观察大鼠一般体征;每周称大鼠体质量;第6周末检测全天9个时间点的血糖值;第3,6周末检测糖化血红蛋白值（glycosylated hemoglobin,GHb）;收集第6周末24 h尿液,生化法检测尿肌酐（urine creatinine,U-CREA）、尿白蛋白总量（total urine albumin,U-ALB）,计算24 h尿蛋白排泄率（urinary protein excretion rate,UAER）;6周末,麻醉处死大鼠,心脏取血,生化法检测血清中血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）,手工法检测血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malonaldehyde,MDA）及谷胱甘肽过氧化酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）;取双肾,称重,计算肾肥大指数,将肾脏置中性甲醛,PAS染色,光镜下观察病理变化。结果 与糖尿病组相比,血糖波动组大鼠GHb、U-CREA、UAER、血清BUN及MDA、肾肥大指数均显著升高（P<0.05）,体质量增长速度、血清SOD及GSH-Px均显著降低（P<0.05）,大鼠肾脏组织形态出现的肾小球损伤及结构改变更加明显。结论 血糖波动会加重糖尿病GK大鼠肾脏病变,其机制可能与升高MDA水平,降低SOD、GSH-Px水平有关。     

姜黄素对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及血清microRNA的影响

目的：探究姜黄素对2型糖尿病模型大鼠糖脂代谢影响的特点,并探讨其对糖尿病大鼠血清microRNA（miRNA）的影响。方法：将造模成功的2型糖尿病SD大鼠分为正常对照组、模型组、姜黄素低、中、高剂量组（剂量分别为50,150,250 mg·kg^-1）,连续给药8周。每隔2周于给药前后测定空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（2PBG）;给药前后测糖化血红蛋白水平（HbA1c）;8周末测血脂水平,并对血清中7个miRNA分子的表达量进行检测,以期探讨姜黄素对糖尿病大鼠降血糖的机制。结果：给药8周内,模型组FBG和2PBG值不断升高。姜黄素对糖尿病大鼠FBG和2PBG的显著影响在4周后出现。高剂量组FBG水平在给药4周后开始显著低于模型组（P<0.05）,在给药6周后和8周后所有姜黄素剂量组的FBG水平均显著低于模型组（P<0.01）;在给药4周后3个姜黄素治疗组中2PBG水平明显下降,与模型组比较均有统计学意义（P<0.01）。给药8周后,模型组大鼠HbA1c水平显著高于正常对照组,姜黄素中、高剂量组的HbA1c水平显著低于模型组（P<0.05）,低剂量组HbA1c水平较模型组降低,但无统计学意义;给药8周后,姜黄素各剂量组对TC水平均较模型组明显降低（P<0.01）;姜黄素中、高剂量组对TG水平较模型组明显降低（P<0.01）;姜黄素中、高剂量组对LDL-C水平较模型组也明显降低（P<0.01,P<0.05）;姜黄素组HDL-C水平有一定的升高,但只有高剂量组与模型组比较具有统计学意义（P<0.05）。姜黄素可显著降低模型组大鼠血清中7种miRNAs的表达水平（P<0.01）,以高剂量组效果更加明显。结论：姜黄素给药8周后能够显著降低2型糖尿病大鼠空腹血糖和餐后血糖水平;并明显改善2型糖尿病大鼠的HbA1c的水平和血脂异常;并对糖尿病大鼠血清中7种miRNAs具有调节作用。