胚肺成纤维细胞对肺癌细胞增殖及MMP-2表达的影响

目的：研究体外胚肺成纤维细胞对肺癌H460细胞增殖及MMP-2的影响。方法：在单层平面培养条件下,H460细胞和与胚肺成纤维细胞条件培养基共同培养;单层平面及三维立体培养条件下,H460细胞和胚肺成纤维细胞共同培养,MTT或明胶酶谱法测定H460细胞的增殖活力及MMP-2的表达。结果：胚肺成纤维细胞条件培养基不能促进肺癌H460细胞的增殖和MMP-2的表达。胚肺成纤维细胞与肺癌H460细胞共同培养时出现了MMP-2的表达明显增强。结论：胚肺成纤维细胞能通过促进H460细胞MMP-2的表达影响肺癌的侵袭和转移。     

MMP-2、MMP-9与脑出血的研究进展

基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases,MMPs）是-组同源的酶活性依赖钙离子和锌离子的中性蛋白酶基因家族,是广泛参与降解全身各种组织细胞外基质（ECM）的蛋白酶类,现发现20多种,其中MMP-2和MMP-9是MMPs家族的两个最主要的成员。由于MMP-2和MMP-9的作用使细胞外基质降解的正常平衡被破坏,从而导致多种病理过程的发生,如髓鞘脱失、血脑屏障损伤等。近年来的研究认为MMP-2和MMP-9与脑血管病的关系密切,其参与了脑出血后脑水肿及炎症反应以及继发性脑损伤的病理过程,并发挥重要作用。本文着重对其与脑出血的关系及研究进展作简要综述。     

Ⅳ型胶原、MMPs和TIMPs在放射性肺损伤重建中的作用

目的探讨Ⅳ型胶原、基质金属蛋白酶（MMPs）及其组织基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）在放射性肺损伤早期重建中的作用。方法用20研Gy^60Coγ射线照射大鼠右胸部，建立放射性肺损伤模型，1、2、4周后分别取材；用实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法，从基因表达和蛋白质合成水平结合图像分析对肺组织Ⅳ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2 mRNA进行定量分析。结果实时定量PCR基因检测：Ⅳ型胶原表达于1周时升高，2周时下降；MMP-2在2周时达高峰，与Ⅳ型胶原成相反变化趋势；MMP-9呈明显的升高、下降、再升高趋势，与Ⅳ型胶原变化趋势相同；TIMP-1表达较低，各时间点之间无明显差异；TIMP-2呈现略升高、降低、升高趋势，与MMP-2表达相反。免疫组化-图像分析：肺组织Ⅳ型胶原含量于1周即明显增加，2周开始下降；MMP-2在2周时下降，随后升高，后期与Ⅳ型胶原呈相反趋势；MMP-9变化趋势同Ⅳ型胶原，但程度明显高于后者；TIMP-1于2周时轻度升高，与MMP-9趋势相反。结论Ⅳ型胶原、MMP-2和MMP-9及其组织抑制物参与放射性肺损伤早期的无效重建过程，MMP-2和MMP-9具有降解Ⅳ型胶原作用；Ⅳ型胶原降解障碍可能与肺纤维化启动有一定关系。     

不同种类细胞外基质材料对胰岛细胞活力和功能的影响

目的　比较在不同细胞外基质材料上培养胰岛细胞对胰岛细胞活力和功能的影响。方法　采用胶原酶Ⅴ型消化法 ,经Fi coll密度梯度离心法纯化获得的胰岛细胞 ,按 10 0 0胰岛当量单位 /ml密度分别在I型胶原、I型和Ⅳ型胶原、Matrigel3种不同细胞外基质材料包被的 2 4孔培养板上培养 ,以不包被组为对照。培养 7天时进行丫啶橙 碘化丙啶 (AO PI)染色。放免法检测培养第 2、4、6、8、10天时胰岛素基础分泌水平及培养 4天时胰岛素刺激分泌水平。结果　AO PI染色显示 :Matrigel包被组和I型与Ⅳ型胶原混合包被组胰岛细胞的活力优于I型胶原包被组和对照组 ,I型胶原包被组的胰岛细胞活力优于对照组 ,Matrigel包被组的胰岛细胞活力最好。糖敏感性和分泌特性检测表明 :Matrigel包被组胰岛细胞的糖敏感性和胰岛素分泌活性最好。Matrigel包被组和I型与Ⅳ型混合胶原包被组中培养的胰岛细胞胰岛素刺激分泌水平优于对照组 (P <0 0 5 ) ,而Ⅰ型胶原包被组和对照组比较差异无统计学意义(P >0 0 5 )。结论　将胰岛细胞在Matrigel和I型与Ⅳ型混合胶原上培养能够改善胰岛细胞的活力和功能。     

基质金属蛋白酶9及其基因多态性与急性冠脉综合征易损斑块

基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）是一组同源的以无活性酶原形式分泌的Zn^2=依赖性肽链内切酶,需在中性pH条件下,由Ca^2＋参与,经酶切断N-末端而激活发挥作用,在体内主要参与细胞外基质（ECM）的降解或重构、炎症反应、肿瘤的扩散转移、缺血缺氧损伤、动脉粥样硬化、粥样斑块破裂等各种生理及病理过程。基质金属蛋白酶9（MMP-9）是明胶酶的一种,     

N-乙酰半胱氨酸等对基质金属蛋白酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病模型气道细胞外基质重塑中的作用

53只Wistar大鼠随机分为对照组、慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型组及N－乙酰半胱氨酸（NAC）组、蛋白激酶C（PKC）抑制剂H7组及转移生长因子（TGF）-β单抗组；研究基质金属蛋白酶（MMPs)及其组织抑制(TIMP－1）有COPD模型气道细胞外基质（ECM）重塑中的作用及NAC、H7及TNF－β单抗等干预因素的影响。结果表明，模型组气道壁以Ⅰ型胶原为主的细胞外基质及脯氨酸（Hy)含量、粘膜下成纤维细胞（Fb )数、MMP－9、TIMP－1及TNF－βⅠ、Ⅱ受体在支气管肺组织中蛋白和（或）mRNA表达较对照组显著增高，72kDMMP-2及92kD MMP-9酶活性亦显著增高，NAC组及TNF－β单抗组Hy含量及Fb数较模型组显著降低，H7组Hy含量则显著增高，三个干预组MMP－2、9及TIMP－1和MMP－9、2酶活性表达均较模型组显著减弱，三个干预组TNF－βⅠ、Ⅱ受体亦有不同程度减弱。MMP－9、2及TIMP－1表达增强表明COPD大鼠模型ECM降解及合成代谢异常活跃，与气道ECM重塑密切相关。拮抗氧自由基或TNF－β对MMPs，TIMP－1及气道重塑具有调节和减轻作用，为探索防治气道细胞外基质重塑的途径提供了一定依据。H7由于具有强抑制胶原酶作用而使胶原沉积增多。     

MEBO对糖尿病溃疡大鼠创面组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2动态表达的影响

目的 探讨分析湿润烧伤膏（MEBO）对糖尿病溃疡大鼠创面组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）及基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）表达水平的影响。方法 从160只健康雄性SD大鼠中随机选取120只制备大鼠糖尿病模型,其余40只正常喂养;最终选取90只造模成功大鼠随机分为模型组、MEBO组与bFGF组,每组30只,与此同时随机选取未予特殊处理的30只大鼠作为空白组,所有大鼠均做全层皮肤缺损创面,空白组与模型组大鼠创面予以凡士林油纱换药处理、MEBO组大鼠创面予以MEBO药纱换药处理、bFGF组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子（rb-bFGF）药纱换药处理,对比观察各组大鼠干预第4、6、12天时创面愈合率以及MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2与胶原蛋白水平变化情况。结果 （1）干预第4、6、12天,模型组大鼠创面愈合率均明显低于其他各组（P均＜0.05）,空白组大鼠创面愈合率均明显高于其他各组（P均＜0.05）,而MEBO组与bFGF组间无明显差异（P均＞0.05）。（2）干预第4、6、12天,模型组大鼠创面组织中MMP-9及MMP-2 mRNA表达水平均明显高于其他各组（P均＜0.05）,TIMP-1及TIMP-2 mRNA表达水平均明显低于其他各组（P均＜0.05）;除干预第6天MEBO组大鼠创面组织中TIMP-1 mRNA表达水平明显高于bFGF组（P＜0.05）外,其余各时间点MEBO组与bFGF组大鼠创面组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2 mRNA表达水平均无明显差异（P均＞0.05）。（3）干预第4、6、12天,模型组大鼠创面组织中胶原蛋白水平明显低于其他各组（P均＜0.05）;除干预第4天MEBO组大鼠创面组织中胶原蛋白水平明显高于bFGF组（P＜0.05）外,其余各时间点MEBO组与bFGF组大鼠创面组织中胶原蛋白水平均无明显差异（P均＞0.05）。结论 MEBO可通过调控糖尿病溃疡大鼠创面组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平改善胶原蛋白过度降解,维持细胞外基质代谢平衡,进而促进创面愈合,调节MMP-9/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2的比例失衡可能是其促进糖尿病溃疡创面愈合的作用靶点。     

阿托伐他汀对心脏成纤维细胞MMP-9/TIMP-1表达的影响

目的：观察阿托伐他汀（atorvastatin）对心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶-9/组织型基质金属蛋白酶抑制因子-1（MMP-9/TIMP-1）表达的影响。方法：体外培养乳鼠心脏成纤维细胞（CF）,做细胞形态观察和心脏成纤维细胞标志性波形蛋白免疫荧光组化检测,明胶酶谱法测定MMP-9的活性,RT-PCR检测MMP-9和TIMP-1mRNA的表达。结果：AngⅡ增加MMP-9的活性及mRNA的表达（P〈0.05）,同时TIMP-1的mRNA表达减少（P〈0.05）,阿托伐他汀在某种程度上可逆转上述变化（P〈0.05）。结论：Aorvastatin通过对MMP-9/TIMP-1表达的影响作为预防和治疗房颤的重要机制之一。     

犬快速肺静脉起搏心房颤动模型中基质金属蛋白酶在肺静脉肌袖表达的实验研究

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和组织型基质金属蛋白酶抑止因子-1（TIMP-1）在持续性房颤发生和维持中的作用。方法：30只犬随机分为对照组和房颤组，建立犬快速肺静脉起搏持续性心房颤动模型。取组织标本，用RT—PCR和Western印记法分别检测各组MMP-9和TLMP-1mRNA和蛋白的表达情况。结果：与对照组相比，房颤组肺静脉肌袖组织MMP-9mRNA与蛋白质水平均增高（P均〈O．05），TIMP-1mRNA与蛋白质表达水平均降低（P均〈O．05）。结论：MMP-9／TIMP-1平衡失调可能是房颤时肺静脉肌袖细胞外基质重构的因素之一，参与了房颤的发生和维持。     

基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1与子宫内膜异位症的相关性研究

目的研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其组织抑制物-1（TIMP-1）是否与子宫内膜异位症（EMs）有关。方法将11例EMs轻度和32例重度患者分别作为观察组1和2,41例卵巢畸胎瘤患者作为对照组。通过ELISA法测定腹水中MMP-9及TIMP-1值,比较各组两者及其比值的差异。结果与对照组比较,EMs轻度组MMP-9、TIMP-1差异无统计学意义（P〉0.05）,EMs重度组MMP-9、TIMP-1差异有统计学意义（P〈0.05）;3组的MMP-9/TIMP-1差异均有统计学意义（P〈0.05）;EMs轻度组与重度组相比较,MMP-9差异有统计学意义（P〈0.05）,TIMP-1差异无统计学意义（P〉0.05）。结论随着疾病的加重,MMP-9升高、TIMP-1降低、MMP-9/TIMP-1比值升高,MMP-9、TIMP-1与子宫内膜异位症发生、发展有相关性,特别是两者的比值,具有重要诊断价值。     

NF-KB和MMP-1在子宫内膜异位症中的表达及其相关性研究

目的：检测核转录因子（NF-kB）及基质金属蛋白酶-1（MMP-1）在子宫内膜异位症（EM）中的表达,探讨其与EM发病机制的相关性。方法：采用免疫组化SP法分别检测NF—KB及MMP-1在35例正常子宫内膜、48例EM在位内膜及76例EM异位内膜中的表达,并对检测结果进行统计学分析。结果：NF—KB和MMP-1主要定位于3组内膜腺上皮细胞的胞质中,其中异位内膜表达强度最强,正常子宫内膜的表达强度最弱（P〈0．05）。在位内膜和正常子宫内膜NF—KB和MMP-1的表达强度随月经周期发生一定的变化,分泌期高于增殖期,差异有显著性（P〈0．05）。NF—KB与MMP-1之间在正常子宫内膜、异位内膜和在位内膜中的表达具有正相关性,相关系数分别为0．819,0．884和0．914（P〈0．01）。结论：NF—KB和MMP-1在EM患者的在位及异位内膜的高表达及二者之间的正相关性提示其在EM发病机制中起一定的作用。     

甲磺酸加替沙星对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系的影响

目的研究甲磺酸加替沙星对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系的影响。方法将Wistar大鼠分为空白对照组、甲磺酸加替沙星高、中、低剂量组（240、160、80mg·kg^-1）,ip,qd,共7d。采用差速离心法制备大鼠肝微粒体;BAC法测定蛋白浓度;分光光度法检测肝微粒体细胞色素P450酶含量及活性;单因素方差分析进行统计。结果给药组大鼠的肝重、微粒体细胞色素P450含量均明显降低,细胞色素b5的含量增高,但增高的趋势随剂量增加有所抑制;对NADPH-Cytc还原酶的影响：低、中剂量组与对照组比较有显著性差异（P〈0.01）,高剂量组与对照组比较无显著性差异（P〉0.05）,组间比较有显著性差异（P〈0.05）;对氨基比林-N-脱甲基酶和红霉素-N-脱甲基酶的影响：给药组与对照组比较有显著性差异（P〈0.01）,组间比较也有显著性差异（P〈0.05,P〈0.01）。另外,在中、高剂量组大鼠出现肝硬度增加、腹水等现象。结论甲磺酸加替沙星对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶具有一定的影响,对NADPH-Cytc还原酶有诱导作用,对氨基吡啉-N-脱甲基酶和红霉素-N-脱甲基酶有抑制作用。可能引起肝药酶对某些药物代谢的改变。     

蛋白酶体抑制剂MG132联合X射线对人肺腺癌细胞生长迁移和周期的影响及作用机制

目的 研究蛋白酶体抑制剂MG132联合X射线对人肺腺癌A549细胞生长、迁移、侵袭、细胞周期分布的影响及机制。方法 MTT法检测不同MG132浓度处理后不同时间肺腺癌A549细胞的增殖;克隆形成实验检测A549细胞的存活能力;划痕实验测定A549细胞的迁移能力;Transwell小室测定其侵袭能力;流式细胞术测定细胞周期分布的改变;Western blot法测定蛋白表达水平。结果 MG132明显抑制人肺腺癌A549细胞的生长,并呈现剂量-效应和时间-效应关系。MG132联合X射线对A549细胞克隆存活能力有显著抑制作用（F=554.78、954.64,P<0.01）,且加MG132组克隆存活率均低于照射组（t=4.44、12.41、3.52、6.72,P<0.05）。MG132在无毒性剂量下联合X射线可显著抑制A549细胞的迁移及侵袭能力（t=12.79,P<0.01）,并明显增加G₁期细胞阻滞（t=4.29,P<0.05）;MG132联合X射线明显降低A549细胞中基质金属蛋白酶-2,-9和G₁期相关蛋白Cyclin D1的表达水平,同时增加细胞中P53的表达。结论 MG132可以显著抑制人肺腺癌A549细胞的生长,且在无毒性剂量下联合X射线可以明显降低其转移和侵袭能力,显著增加肿瘤细胞的G₁期阻滞。     

COPD患者MMP-9和TIMP-1水平变化及其与IL-8和IL-2相关性研究

目的：观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重期患者血清基质金属蛋白酶9（MMP-9）、金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP-1）、IL-2和IL-8含量变化。同时观察COPD患者血清MMP-9、TIMP-1与IL-2及IL-8含量的相关性。方法：选取AECOPD患者42例,健康对照者15例,采用双抗夹心ELISA法测定血清MMP-9、TIMP-1、IL-2及IL-8含量。结果：AECOPD患者血清MMP-9、TIMP-1及IL-8水平明显高于健康对照者,IL-2水平低于健康对照者,差异有统计学意义（P〈0.05）,AECOPD患者血清MMP-9、TIMP-1含量均与IL-8呈正相关,与IL-2呈负相关。结论：COPD患者血清MMP-9/TIMP-1失衡,导致肺组织降解与沉积紊乱,参与了肺气肿的发生发展。     

幽门螺杆菌感染者胃IL-4和IFN-C表达的免疫组织化学研究

摘要目的：探讨幽门螺杆菌（HP）感染与未感染的十二指肠溃疡（DU）、胃溃疡（GU）,慢性胃炎（CO）患者的胃白介素-4（IL-4）和γ-干扰素（γ-IFN）的原位分布,观察其间的差异。方法：选取接受胃镜检查并活检的门诊病人的胃黏膜标本97例进行H．pylori感染的评定,免疫组织化学染色观察IL-4和γ-IFN在胃的原位分布。结果：,γ-IFN、IL-4在感染组与未感染组均有表达,IL-4主要分布于固有层的淋巴细胞和单核细胞以及少量的胃上皮细胞,γIFN布于部分上皮细胞、固有层单核细胞和淋巴细胞。HP感染者中DU、CG患者γ-IFN的染色阳性率高于GU,差异有统计学意义（P=0．019）;Hp感染者IL-4染色阳性率在DU、CG、GU问无差别（P〉0．05）。结论：无论是否存在HP感染,胃黏膜都有IL-4和γ-IFN表达,染色阳性率与是否感染无关;γ-IFN的表达在CG、GU的表达较明显,提示其与CG、GU的关系更为密切。     

MMP-1、MMP-13在大鼠骨关节炎软骨中的表达

目的观察MMP-1和MMP-13在大鼠前交叉韧带切断加内侧半月板切除的骨关节炎模型中的表达,探讨MMP-1和MMP-13表达与骨关节炎（OA）进程的关系。方法将25只SD大鼠右膝行前交叉韧带切断加内侧半月板切除术（ACLT＋MMx）,对侧作为空白对照,分别于术后1周、2周、4周、6周、10周处死,每次随机处死5只,另取5只SD大鼠仅行右膝关节切开术作为假手术组,于术后10周处死,对膝关节软骨标本进行大体和组织学切片观察及评分,用ELISA法检测MMP-1、MMP-13在关节软骨中的表达。结果 ACLT＋MMx组Mankin评分由1周的1.0分到4周的6.2分发展到10周的13.6分,与假手术组及空白对照组相比有显著差异（P〈0.01）。ACLT＋MMx组MMP-13的表达在OA早期增高,中重度期后出现明显下降趋势（P〈0.01）;MMP-1的表达则随着病程持续升高,与病变严重程度呈正相关性（P〈0.01）。假手术组及空白对照组软骨细胞几乎不表达MMP-1及MMP-13。结论 MMPs在OA的发病机制中有重要作用,MMPs各亚型在OA进程中的表达各不相同。     

食管鳞状细胞癌FDG PET/CT显像SUVmax与肿瘤增殖、侵袭和血管生成的关系

目的 探讨食管鳞状细胞癌(简称鳞癌)FDG PET/CT显像SUVmax与肿瘤细胞Ki67、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和微血管密度(MVD)的相关性,以评估SUVmax是否可作为术前反映肿瘤增殖活性、侵袭性和微血管生成的指标.方法 选择术后病理证实的食管鳞癌患者47例,术前1周内行18F-FDG PET/CT检查;术后对患者肿瘤标本行Ki67、MMP-2和MVD免疫组织化学染色,用Pearson 直线相关分析病灶SUVmax与上述指标的相关性.结果 47处病灶SUVmax为1.9 ～24.0,平均为12.504±6.805.免疫组织化学检查:Ki67平均指数为(67.837±29.798)％,MMP-2平均指数为(71.551 ±27.126)％,MVD平均为(18.429±9.603)个.SUVmax与Ki67指数、MMP-2指数间呈正相关,r值分别为0.581和0.594,P均＜0.05;而SUVmax与MVD之间不具有相关性,r=0.167,P＞0.05.结论 SUVmax可反映食管鳞癌肿瘤增殖活性和侵袭性,不能反映肿瘤血管生成.     

螺内酯对急性心肌梗死患者基质金属蛋白酶水平的影响

目的观察螺内酯对急性心肌梗死（AMI）患者血清基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平的影响。方法将68例未经溶栓或者溶栓未成功的AMI患者随机分为常规治疗组（32例）和螺内酯治疗组（36例）,持续观察12周。比较24小时内、1周后、4周后、12周后血清基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9的水平。结果较常规治疗组而言,螺内酯治疗能降低1周及此后的基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9的水平（P〈0.05）。结论螺内酯治疗能够降低心肌梗死后1周以后的基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9水平。     

原发性胆汁性肝硬化外周血Toll样受体和细胞因子信号转导抑制分子mRNA水平的表达及意义

 目的 探讨cytokine-TLR-SOCS通路在原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)发病机制中的作用.方法 研究对象分为3组:32例PBC,30例慢性乙肝(chronic hepatitis B,CHB)和32例健康人(healthy controls,HC).ELISA测定血清IL-6和IFNγ的变化,RT-PCR测定外周血单个核细胞的TLR和SOCS的表达.结果 与HC组相比,PBC组的IL-6和IFNγ水平显著升高;PBC组的TLR4、TLR9、SOCS1和SOCS3 mRNA的水平均显著性高于HC,为HC组的1.48、2.51、3.43和1.48倍,TLR9和SOCS1的mRNA水平是CHB组的6.85倍和2.99倍(P＜0.05).结论 PBC患者处于炎性状态;TLR的过度激活可能与PBC的发生和发展有一定关系,SOCS作为通路的负调控蛋白可作为疾病免疫治疗的靶点.