大鼠半乳糖性白内障晶状体上皮细胞的病理变化

目的　探讨半乳糖性白内障大鼠晶状体上皮细胞的改变。方法　２４只ＳＤ雌性大鼠,分为正常对照组和白内障组,每组１２只。白内障组大鼠用半乳糖饲料喂养,正常对照组大鼠用普通颗粒饲料喂养。裂隙灯显微镜下观察大鼠晶状体混浊程度变化,观察至３０ｄ处死大鼠后取晶状体,在光镜和电镜下观察晶状体病理组织和超微结构改变。结果　观察至３０ｄ时,正常对照组大鼠晶状体保持透明,白内障组大鼠９眼（３７．５％）出现均一的皮质性混浊,１５眼（６２．５％）出现核混浊。白内障组光镜下可见晶状体皮质和核部大量纤维细胞水肿、崩解,前囊膜下及后囊膜下出现纤维细胞样的有核细胞堆积;透射电镜下可见晶状体上皮细胞变性、增生并突破晶状体上皮层向浅层皮质移行。结论　半乳糖性白内障不仅有晶状体纤维细胞水肿及结构破坏,还存在晶状体上皮细胞的异常增生、分化和移行。     

老年性和糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构改变

目的 观察正常人，老年性白内障、糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构，探讨细胞凋亡在白内障发生中的作用。方法 收集正常人、老年性白内障、糖尿病性白内障晶状体前囊膜送透射电镜扫描，取老年性白内障和糖尿病性白内障前囊膜各15例，用脱氧核苷酸末端转移酶缺口标记原位细胞检测法，检测晶状体上皮细胞的凋亡细胞。结果 老年性和糖尿病性白内障晶状体上细胞的超微结构在形态上为扁平状，胞浆出现空泡变性，胞核出现固缩，染色质边聚，浓缩等改变。糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的胞浆空泡变性更加严重。在光镜下老年性和糖尿病性白内障的晶状体上皮均有凋亡细胞。结论 老年性白内障和糖尿病性白内障的发生与晶状体上皮的细胞凋亡密切相关。     

老年性和糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构改变

目的 观察正常人,老年性白内障、糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构,探讨细胞凋亡在白内障发生中的作用。方法 收集正常人、老年性白内障、糖尿病性白内障晶状体前囊膜送透射电镜扫描,取老年性白内障和糖尿病性白内障前囊膜各15例,用脱氧核苷酸末端转移酶缺口标记原位细胞检测法,检测晶状体上皮的凋亡细胞。结果 老年性和糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构在形态上为扁平状,胞浆出现空泡变性,胞核出现固缩,染色质边聚,浓缩等改变。糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的胞浆空泡变性更加严重。在光镜下老年性和糖尿病性白内障的晶状体上皮均有凋亡细胞。结论 老年性白内障和糖尿病性白内障的发生与晶状体上皮的细胞凋亡密切相关。     

年龄相关性白内障晶状体上皮细胞的超微结构研究

目的:研究年龄相关性白内障晶状体上皮的超微结构变化。方法:用日本产HU-12A型电镜对8例年龄相关性白内障及3例正常透明晶状体上皮细胞的超微结构进行观察。结果:7例年龄相关性白内障晶状体前囊上皮细胞形状不规则,相邻细胞间以许多复杂的指状突超紧密镶嵌,部分上皮细胞内水肿,细胞间隙亦水肿呈较大的空泡状,细胞内线粒体等细胞器肿胀,个别区域上皮细胞坏死脱落,1例年龄相关性白内障晶状体前囊上皮细胞体积固缩,细胞核染色质分裂并出现凝聚的凋亡小体。结论:晶状体上皮细胞超微结构的病理形态学改变是年龄相关性白内障发生发展的重要原因之一。     

老年性白内障晶状体上皮细胞超微结构观察

目的 研究老年性白内障晶状体上皮细胞的超微结构,探讨老年性白内障与晶状体上皮细胞凋亡关系。方法 用透射电镜对20例老年白内障及10例正常透明晶状体上皮细胞的超微结构进行观察,拍照。结果 老年白内障组晶状体上皮细胞中发现了典型的凋亡小体,正常对照组未见凋亡细胞。结论 老年性白内障的发生与晶体上皮细胞的凋亡有关。     

老年性白内障晶状体上皮细胞超微结构观察

目的 研究老年性白内障晶状体上皮细胞的超微结构。探讨老年性白内障与晶状体上皮细胞凋亡关系。方法 用透射电镜对20例老年白内障及10例正常透明晶状体上皮细胞的超微结构进行观察。拍照。结果 老年白内障组晶状体上皮细胞中发现了典型的凋亡小体。正常对照组未见凋亡细胞。结论 老年性白内障的发生与晶体上皮细胞的凋亡有关。     

骨桥蛋白在白内障晶状体上皮细胞中的表达

目的：探讨骨桥蛋白（osteopontin，OPN）在白内障晶状体上皮细胞中的表达水平及作用。方法：采用免疫组织化学法检测22例前囊下性白内障、17例核性白内障、14例皮质性白内障患者和11例正常晶状体上皮细胞中OPN的表达，并进行阳性细胞计数和各组间比较。结果：OPN在前囊下白内障患者晶状体上皮细胞中的表达明显增多，其阳性表达率与核性白内障、皮质性白内障及正常人晶状体比较，差异有显著意义（P〈0．01）。结论：OPN在前囊下性白内障晶状体上皮细胞中表达阳性，在前囊下白内障的形成过程中可能起重要作用。     

人及小鼠白内障晶状体上皮细胞凋亡的超微结构

目的 探讨人老年性白内障及小鼠先天性白内障与其晶状体上皮细胞凋亡的关系。方法 用透射电镜观察４例老年性白内障患者及２例先天性白内障小鼠晶状体上皮细胞凋亡的超微结构,并分别与同类正常晶状体上皮细胞超微结构进行比较。结果 老年性白内障患者及先天性白内障小鼠晶状体上皮细胞中均可见凋亡细胞,而正常晶状体未见凋亡细胞。结论 人老年性白内障及小鼠先天性白内障的发生均与其晶体上皮细胞的凋亡有关。     

骨桥蛋白及其受体CD44在白内障及正常晶状体上皮细胞中的表达

目的探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及其受体CD44在白内障患者及正常晶状体上皮细胞中的表达规律及意义。方法采用免疫组织化学法检测22例前囊下白内障1、7例核性白内障、14例皮质性白内障患者和11例正常晶状体上皮细胞中OPN和CD44的表达,并进行阳性细胞计数和各组间比较。结果OPN与CD44在前囊下白内障晶状体上皮细胞中的阳性表达率为56.48%±4.14%和45.55%±5.52%,在皮质性白内障为4.36%±1.12%和3.05%±1.02%,在核性白内障和正常晶状体中表达为阴性。前囊下白内障组中OPN及CD44的阳性表达率与核性白内障、皮质性白内障及正常人晶状体比较,差异有显著性(P<0.01),经Spearman等级相关分析,前囊下白内障患者晶状体上皮细胞中OPN和CD44的阳性表达率呈正相关(r=0.866)。结论OPN及CD44在前囊下白内障及皮质性白内障晶状体上皮细胞中均表达为阳性,在前囊下白内障晶状体上皮细胞中表达明显增强,两者在前囊下白内障的形成过程中可能起重要作用。     

大鼠钝挫伤白内障模型的建立及其晶状体上皮细胞的超微结构观察

目的 建立钝挫伤白内障大鼠模型及探讨钝挫伤白内障与其晶状体上皮细胞凋亡的关系。方法 50只SD大鼠分成A、B、C、D、E共5组：分别用不同重量的小球，以不同次数连续从不同高度落下打击大鼠的左眼。裂隙灯下观察大鼠品状体的变化，用透射电镜观察晶状体上皮细胞凋亡的超微结构，并与自身对照眼比较。结果 实验开始1周后，5组实验眼的晶状体即出现不同程度的混浊，但是只有D组出现典型的、持续的环状混浊，其晶状体上皮细胞出现明显细胞凋亡的超微结构改变。各组自身对照眼晶状体上皮细胞超微结构无明显改变。结论 20cm高度20g重量的外力持续打击可以使大鼠较快产生典型的、持续的白内障。钝挫伤白内障的发生与晶状体上皮细胞凋亡有关。     

年龄相关性白内障晶状体上皮细胞的Smac、caspase-3表达及死亡方式

目的探讨年龄相关性白内障晶状体上皮细胞（LECs）中Smac、caspase-3的表达和LECs超微结构变化及死亡方式。方法收集皮质性（30例）、核性（24例）、后囊下性（28例）年龄相关性白内障患者晶状体前囊片,以12例高度近视摘出的透明晶状体的晶状体前囊片为对照,应用免疫组织化学链酶菌抗生素蛋白-过氧化物酶法检测Smac、caspase-3蛋白在LECs中的表达,并采用透射电镜观察LECs超微结构的改变及死亡方式。结果Smac、caspase-3蛋白在年龄相关性白内障组LECs中的阳性表达率分别为81.71%、78.05%,与透明晶状体组比较染色阳性率及染色强度差异均有统计学意义（P〈0.05）。3种类型年龄相关性白内障透射电镜下均可见LECs多表现为肿胀,线粒体嵴缺失、空泡变、髓样化,粗面内质网扩张、颗粒融合和脱颗粒现象,仅1例核性白内障中可见到核膜皱缩向外呈锐角凸起,部分双层核膜融合,模糊不清,细胞核内染色质浓缩,未见凋亡小体。结论Smac、caspase-3蛋白可能参与了年龄相关性白内障的形成。年龄相关性白内障LECs存在凋亡、胀亡等多种细胞死亡方式,细胞凋亡与细胞胀亡的发生可能存在部分分子机制的重叠。LECs超微结构的改变表明线粒体形态改变和功能异常在年龄相关性白内障发生中起重要作用。     

不同类型白内障晶状体上皮细胞的组织病理学观察

背景 白内障的发生与晶状体上皮细胞（LECs）结构和功能的受损有直接关系,而白内障LECs的特征性形态学变化是目前证实细胞结构和功能受损最有力的证据,了解不同类型白内障的LECs形态变化对于研究不同环境或不同疾病对LECs的生物学行为有重要意义. 目的 观察不同类型白内障LECs的形态学变化.方法 在白内障摘出手术过程中分别收集年龄相关性白内障、糖尿病性白内障及高度近视并发性白内障的晶状体前囊膜各15片,各种类型白内障的前囊膜分别进行锥虫蓝-茜素红（TB-AR）染色和苏木精-伊红染色,评估LECs的活性和形态,并在透射电子显微镜下观察各种类型白内障LECs的超微结构改变,对不同类型白内障的LECs生物学行为进行比较.结果 TB-AR染色结果表明,年龄相关性白内障LECs大小不等,呈多边形,镶嵌样排列,少量细胞死亡,细胞膜模糊不清,细胞核呈圆形;糖尿病性白内障LECs水肿,体积增大,细胞大小不等;而高度近视并发白内障LECs体积较小,大部分细胞死亡.苏木精-伊红染色显示,年龄相关性白内障晶状体囊膜为一均质膜,LECs层呈单层排列,多数细胞结构完整,紧密贴附于前囊膜上;糖尿病性白内障前囊膜部分区域LECs与囊膜间有空隙,细胞核大小不等;高度近视并发性白内障LECs较小,形态不规则,细胞着色深.透射电子显微镜下观察发现,年龄相关性白内障前囊膜及多数LECs形态正常,细胞间以及细胞与囊膜间连接尚可;糖尿病性白内障LECs之间以及细胞与囊膜间也可见紧密连接,但显示细胞水肿,细胞间隙扩大,高度近视并发性白内障LECs可见细胞质嵌合突起,细胞质内有空泡变性.结论 年龄相关性白内障、糖尿病性白内障和高度近视并发性白内障均以LECs的变性、坏死、凋亡为共同的细胞学基础,但糖尿病性白内障和高度近视并发性白内障的LECs改变明显重于年龄相关性白内障.     

白内障患者晶状体上皮细胞中Fas蛋白的表达

目的:了解不同类型白内障患者晶状体上皮细胞(lens epi-thelial cell,LECs)的凋亡情况及其与Fas蛋白(CD95)的关系。方法:取年龄相关性白内障、糖尿病性白内障及高度近视并发性白内障患者超声乳化手术中取下的前囊膜标本共73例。应用光镜、透射电镜及TUNEL标记法观察LECs的凋亡情况。同时应用免疫组化和流式细胞分别定性、定量检测Fas蛋白(CD95)在LECs中的表达。结果:光镜下3种白内障患者的LECs都呈透明样变性,细胞内有空泡。电镜下可见正常以及变性、坏死的LECs。部分LECs细胞内染色质凝集并边缘化,呈早期细胞凋亡改变。TUNEL检测发现3种白内障患者的LECs中均有TUNEL阳性细胞存在,LECs的凋亡率分别为(32.20±7.91)%、(31.00±9.43)%、(28.20±8.04)%,3种白内障间未见统计学差异。免疫组化结果表明在3种白内障患者的LECs中均有Fas蛋白(CD95)表达。流式细胞定量检测年龄相关性、糖尿病性及高度近视并发性白内障患者LECs中Fas蛋白(CD95)的表达量分别为(65.72±9.95)%、(63.46±13.30)%、(31.46±17.25)%,高度近视并发性白内障LECs中Fas蛋白(CD95)的表达与其他两种白内障间存在统计学差异(t检验,P<0.05)。结论:年龄相关性白内障、糖尿病性白内障及高度近视并发性白内障患者的LECs均出现凋亡,LECs的凋亡很可能是非先天性白内障发病的细胞病理学基础。Fas蛋白(CD95)介导的LECs的凋亡在年龄相关性白内障及糖尿病性白内障的形成中起重要的作用,而在高度近视并发性白内障LECs凋亡中可能存在其他通路。     

Effect of ophthalmic viscosurgical devices on lens epithelial cells: a morphological study

PURPOSE: To investigate the morphological effects of Viscoat (sodium hyaluronate 3.0%-chondroitin sulfate 4.0%) on lens epithelial cells (LECs). SETTING: Department of Ophthalmology, University of Texas Southwestern Medical Center, Dallas, Texas, USA, and the Laboratory of Ultrastructural Morphology, Zoological Institute, University of Liège, Liège, Belgium. METHODS: Human LECs collected via capsulorhexis were examined by light microscopy (LM) and transmission electron microscopy (TEM). Lens epithelial cells from rabbit capsulorhexis samples were studied by LM and TEM following exposure to Provisc (sodium hyaluronate 1.0%) or Viscoat ophthalmic viscoelastic device (OVD). Since Viscoat is hypertonic (340 mOsm), hypertonic, isotonic, and hypotonic solutions were compared to investigate a possible mechanism for the observed effects. The effects of Provisc and Viscoat on rabbit LECs in the intact lens were also compared. RESULTS: Human LECs gathered via capsulorhexis following exposure to Viscoat were generally thinner than control samples and often had condensed nuclei and increased intracellular vacuolization. Rabbit capsular tissue exposed in situ to Viscoat demonstrated changes similar to those seen in humans. Cells exposed to Provisc were similar to cells in untreated controls in humans and rabbits. Corneal endothelial cells exposed to either agent were unaffected. Experiments with hypertonic and hypotonic buffers induced some of the changes noted with Viscoat, but the effects were less severe. Lens epithelial cells in intact rabbit lenses exposed to Viscoat appeared similar to LECs in the control samples. CONCLUSIONS: Light microscopy and TEM of human lens capsule tissue suggest that Viscoat induces significant morphological changes in LECs during cataract surgery. The changes may underlie the improved visualization of these cells that has been reported during cataract surgery. Corneal endothelial cells were unaffected by exposure to Viscoat. Studies in a rabbit model suggest that the hyperosmolarity of Viscoat may play a partial role in the LEC changes.     

晶状体上皮细胞转分化对老年性白内障形成的影响研究

目的 :为研究晶状体上皮细胞转分化对老年性白内障形成的影响。方法 :对 14例老年性白内障晶状体前囊上皮细胞进行角质蛋白 -8、波形纤维蛋白和纤维粘连蛋白表达的免疫组化研究。结果 :皮质性白内障晶状体上皮的波形纤维蛋白表达明显强于核性白内障 (P <0 0 5 ) ;角质蛋白 -8在皮质性白内障晶状体上皮的表达比核性白内障弱 ((P <0 0 1) ;纤维粘连蛋白在皮质性白内障晶状体上皮的表达明显强于核性白内障 ,而在正常晶状体上皮不表达。结论 :晶状体上皮细胞具有转分化为成纤维样细胞的双向化潜能。晶状体上皮获得转分化能力后而失去原来的细胞学特性。在老年皮质性白内障中 ,晶状体上皮细胞转分化成为成纤维样细胞 ,伴随波形纤维蛋白的过度表达和角质蛋白表达下降。同时合成包括纤维粘连蛋白在内的细胞外基质增多 ,而纤维粘连蛋白能促进晶状体上皮的增殖、迁移及粘附 ,因而晶状体上皮细胞转分化对老年性白内障形成及后囊混浊的形成发挥重要作用。     

不同类型年龄相关性白内障晶状体上皮细胞衰老标记蛋白30的表达及与细胞凋亡的关系

背景 随着人口的老龄化,白内障的发病率逐年上升,研究表明,衰老标记蛋白30( SMP-30)与白内障的发生发展关系密切. 目的 了解不同类型白内障晶状体上皮细胞( LECs)中SMP-30的表达及LECs的凋亡情况,探讨不同类型年龄相关性白内障的发病机制. 方法 收集2010年3-10月在武汉大学中南医院眼科行白内障超声乳化摘出术的年龄相关性皮质性白内障59例80眼和核性白内障53例70眼,2个组患者年龄匹配(P＞0.05).白内障手术中环形撕取晶状体前囊膜,应用免疫组织化学法和实时荧光定量聚合酶链反应( real-time PCR)技术分别定性、定量检测SMP-30蛋白及其mRNA在2个组白内障LECs中的表达.用TUNEL标记法观察LECs的凋亡情况,对比分析两种类型白内障晶状体前囊膜中SMP-30的表达及细胞凋亡的差异.结果 免疫组织化学法检测表明,SMP-30主要表达于晶状体囊膜的细胞质中,在晶状体囊膜中央部表达较弱,越近周边表达越强,差异均有统计学意义(核性:45.21±2.79 vs 76.42±11.21,P=0.042;皮质性:108.32±4.32 vs 206.34±15.67,P=0.037).核性白内障LECs中SMP-30 mRNA的表达少于皮质性,差异有统计学意义(60.02±9.08 vs 157.33±13.01,P=0.034).TUNEL染色显示,2个组白内障LECs凋亡百分率中央部明显高于周边部,差异均有统计学意义(核性:19.34％±0.11％vs 8.32％±0.57％,P=0.025;皮质性:42.07％±0.86％vs 13.55％±0.64％,P=0.010),细胞凋亡百分率低于皮质性,差异有统计学意义(14.05％±0.22％vs 27.70％±0.81％,P=0.007). 结论 两种类型年龄相关性白内障的发生均与LECs凋亡有关,SMP-30的表达与其密切相关.     

人8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1与年龄相关性白内障关系的临床研究

目的探讨与年龄相关性白内障（ARC）患者晶状体上皮细胞（LECs）中参与DNA损伤后碱基清除修复途径的氧化损伤修复基因—人8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1（HOGG1）水平与ARC的关系。方法收集三种ARC（皮质性、核性、后囊下性）LECs样本,以透明晶状体LECs为对照组,用免疫组化、RT-PCR方法测定HOGG1在LECs的表达情况。结果对照组LECs中可见HOGG1的表达,三种ARC患者LECs中可见HOGG1表达较对照组增高（F=107.62,P〈0.01）,但三种ARC之间没有统计学差异。对照组与ARC组HOGG1均位于细胞质和细胞核。说明ARC LECs的细胞核和细胞质中HOGG1的表达量上调。结论 HOGG1表达上调参与ARC的发生发展。     

A study of human lens epithelial cells by light and electron microscopy and by immunohistochemistry in different types of cataracts

PURPOSE: To evaluate the characteristics of cataract changes in lens epithelial cells (LECs), in different types of human cataract. MATERIAL AND METHODS: Anterior capsules for the study were obtained from patients with different types of cataracts during extracapsular cataract extraction, or phacoemulsification using continuous curvilinear capsulorhexis. LECs attached to the anterior capsules were analyzed for morphological changes by light and electron microscopy, and for cellular characteristics by immunohistochemistry. The reactivity to cytokeratins 5,6,8,17 and 19 (arker for epithelial cells) and to vimentin (arker for mesenchymal cells) was determined. RESULTS: The consecutive degenerative changes were observed in most of the cells: multilayered cells, nuclei of abnormal diameters and shapes, vacuolation of nuclei and cytoplasm. LECs were immunohistochemically positive for cytokeratin and vimentin, or only for vimentin in all types of cataract. Some of LECs showed morphological and immunohistochemical characteristics of mesenchymal cells. CONCLUSIONS: Lens epithelial cells show similar degenerative changes in different types of cataract and may have the ability to transdifferentiate into mesenchymal cells.     

Degeneration and transdifferentiation of human lens epithelial cells in nuclear and anterior polar cataracts.

PURPOSE: To study the possible mechanisms of cataractogenesis by evaluating the characteristics of cataractous lens epithelial cells (LECs) in different types of human cataract. SETTING: Kangnam St. Mary's Hospital, The Catholic University of Korea, Seoul, Korea. METHODS: Lens epithelial cells attached to the anterior capsules in eyes with nuclear or anterior subcapsular were analyzed for morphological characteristics by electron microscopy and for cellular characteristics by immunohistochemistry. RESULTS: Human LECs beneath the anterior capsule were degenerated in nuclear cataracts and were transdifferentiated in anterior polar cataracts. In senile nuclear cataractous lenses, LECs beneath the anterior capsule showed degenerative changes in morphology. In nuclear cataracts, LECs were immunohistochemically positive for cytokeratin and vimentin, while those in anterior polar cataracts were positive for vimentin only. The LECs of anterior subcapsular cataracts were transdifferentiated into spindle-shaped fibroblast-like cells without cellular junctions and embedded within a fibrillar meshwork mass. The extracellular matrixes in the anterior capsule of anterior subcapsular cataracts were immunohistochemically positive for fibronectin, laminin, collagen type I, and collagen type IV. CONCLUSIONS: Lens epithelial cells in different types of cataracts have distinct cellular characteristics and may possess a bipotential nature with the ability to transdifferentiate into mesenchymal cells. This may be an underlying mechanism for the development of cataract and capsule opacification.