榆林大骨节病区水中黄腐酸对培养软骨细胞作用的观察

目的；本实验观察黄腐酸（ＦＡ）对软细胞，结构，生长，代谢和功能的影响，方法：用大骨节病病区水中ＦＡ，以不同浓度（５ｍｇ／Ｌ，１０ｍｇ／Ｌ，２０ｍｇ／Ｌ）作用于体外培养的兔关节软骨细胞，检测结果作Ｆ检验进行统计学处理，结果：显示实验组织细胞膜功能，蛋白质，ＤＮＡ，蛋白聚糖等不低于对照组或高于对照组，结论：ＦＡ对培养软骨细胞的ＤＮＡ合成，分裂增殖和细胞结构等没有影响。     

FA促进培养软骨细胞及其质发生异常矿化

采用视酸（Ｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ，ＲＡ）、抗坏血酸（ＶｉｔａｍｉｎＣ，Ｖｃ）比较研究大骨节病病区黄腐（Ｆｕｌｖｉｃａｃｉｄ，ＦＡ）对体外培养肥大软骨细胞及基质的作用，发现病区ＦＡ可促进贴壁单层培养的软骨细胞形成异常的胞外基质，促进异常矿化。病区ＦＡ刺软骨细胞产生的活性氧使近细胞膜的软骨囊内蛋白颗粒减少，细胞白纤维消失；粗长的胶原蛋白变细，胶原蛋白连接方式滨束状排列变炒杂乱的网状；造成蛋白多糖结构     

FA促进培养软骨细胞及基质发生异常矿化

采用视黄酸（Retinoicacid，RA）、抗坏血酸（VitaminC，Vc）比较研究大骨节病病区黄腐酸（Fulvicacid，FA）对体外培养肥大软骨细胞及基质的作用，发现病区FA可促进贴壁单层培养的软骨细胞形成异常的胞外基质，促进异常矿化。病区FA刺激软骨细胞产生的活性氧[1]使近细胞膜的软骨囊内蛋白颗粒减少，细蛋白纤维消失；粗长的胶原蛋白变细，胶原蛋白连接方式由正常的束状排列变为杂乱的网状；造成蛋白多糖结构散乱，使矿化位点混乱，而在伤损基质上发生片状不均匀较大量的钙化区。这种异常矿化过程与大骨节病人软骨损伤及修复性的病理矿化有相似之处，支持了大骨节病的自由基致病机理。     

大骨节病区患儿血清对体外培养兔软骨细胞影响的扫描电镜和透射电镜观察

本文研究了11例大骨节病患儿血清对培养兔软骨细胞的影响。传代兔关节软骨细胞在含5%病人血清的培养液内培养生长48小时及96小时、然后作扫描电镜和透射电镜观察。软骨细胞表面出现许多囊泡。粗面内质网扩张,线粒体肿胀和嵴断裂。胞浆内见到大量脂滴和髓鞘样结构。发生上述改变的原因有待进一步研究。     

大骨节病患者血清对培养软骨细胞蛋白多糖代谢的影响

观察了大骨节病（ＫＢＤ）患者血清对培养软骨细胞蛋白多糖（ＰＧ）合成代谢和分解代谢的影响。实验结果表明：（１）在１０％ＫＢＤ血清存在下培养的静止软骨细胞其ＰＧ合成明显低于非病区健康对照组（Ｐ＜０．０１）；（２）培养液中添加ＫＢＤ血清（５％）培养的肥大软骨细胞其释放到培养液中的ＰＧ含量显著高于非病区健康对照组（Ｐ＜０．０１），其中低分子量ＰＣ的含量增加，缺乏透明质酸结合区，不能与透明质酸结合形成ＰＧ聚合体，以上结果指出ＫＢＤ患者血清中存在干扰ＰＧ代谢的物质。     

硒对体外培养大骨节病软骨细胞生长及凋亡的影响

目的 观察硒对体外培养大骨节病(KBD)患者和正常人关节软骨细胞增殖和凋亡的影响,探索补硒防治KBD的作用,并为硒对正常软骨细胞生长的影响提供依据.方法 依据<大骨节病临床诊断标准>(GB 16003-1995),选择Ⅱ度和Ⅲ度KBD患者5例和非病区正常人意外事故者5例的关节软骨进行体外分离、培养.KBD组和对照组分别给予不同剂量的硒(0、0.0125、0.0250、0.0500、0.1000、0.2500、0.5000、1.0000 mg/L)进行干预,采用四氮唑蓝(MTT)法、流式细胞仪和免疫组化法观察细胞生长和凋亡情况.结果 对照组第6天时各剂量组的细胞增殖率(0.086±0.025、0.077±0.012、0.073±0.027、0.071±0.017、0.058±0.028、0.052±0.028和0.046±0.037)比0 mg/L组(0.138±0.026)明显降低(P均＜0.05);0.1000～1.0000 mg/L剂量组的平均细胞增殖率为负值(-0.001±0.001、-0.003±0.000、-0.003±0.001和-0.004±0.001),显著低于0 mg/L组(0.025±0.003,P均＜0.05);KBD组,与0 mg/L组(0.115±0.011)比较,0.2500 mg/L剂量组促进细胞增殖(0.128±0.037,P＜0.05),1.0000 mg/L剂量组细胞生长受到抑制(0.071±0.019,P＜0.05).对照组0.0500～1.0000mg/L剂量组的细胞凋亡率[(18.88±0.02)%、(17.58±0.01)%、(17.09±0.04)%、(56.00±0.02)%、(57.85±0.03)%]比0 mg/L组[(13.51±0.01)%]增高(P均＜0.05);KBD组,与0 mg/L组[(25.84±0.02)%]比较,0.0250～0.2500 mg/L剂量组的细胞凋亡率[(13.69±0.02)%、(15.96±0.03)%、(16.68±0.03)%、(16.67±0.02)%]降低,0.5000、1.0000 mg/L剂量组的细胞凋亡率[(59.58±0.03)%、(73.48±0.04)%]明显增高(P均＜0.05).KBD组0.0500～0.2500 mg/L剂量组的Fas表达[(41.2±1.5)%、(40.3±2.0)%、(50.2±2.5)%]低于同剂量硒干预的对照组[(52.4±1.0)%、(67.2±4.0)%、(75.1±5.0)%,P均＜0.05],0.0500、0.1000 mg/L剂量组的Caspase-3表达[(40.8±1.1)%、(45.1±2.1)%]低于同剂量硒干预的对照组[(68.0±3.0)%、(70.6±3.5)%,P均＜0.05].结论 适宜的补硒剂量(0.1000～0.2500 mg/L)具有促进KBD软骨细胞生长的作用,降低细胞凋亡率,但补硒剂量＞0.5000 mg/L时具有损伤作用;促进KBD软骨细胞生长的硒剂量并非也能促进正常人活体软骨细胞的生长.     

大骨节病病区饮水中有机物对体外培养兔软骨细胞DNA合成量的影响

饮水有机物学说是目前大骨节病三大病因学说之一。本研究首先对陕西省榆林市大骨节病病区马家兔村及非病区长海则村和陕西省彬县大骨节病病区韩家村的饮用水采水２００Ｌ，经ＸＡＤ－７高效吸附树脂富集，甲醇－丙酮洗脱后，进行体外培养兔关节软骨细胞损伤实验。病区组反映细胞分裂增殖能力的细胞ＤＮＡ合成量明显低于非病区组和正常对照组，并且存在显著的负的剂量－反应关系。     

透明质酸对体外培养大骨节病软骨细胞增殖与凋亡的影响

目的 通过观察透明质酸(HA)对体外培养的大骨节病(Kashin-Beck disease,KBD)软骨细胞增殖、凋亡的影响,为临床上HA治疗KBD提供实验依据.方法 依据<大骨节病诊断标准>(GB 16003-1995)收集KBD患者和遭遇意外事故的病人(对照组)关节软骨,分离、体外培养关节软骨细胞.选用第2代细胞进行实验.两组软骨细胞分别给予不同剂量的HA,按HA剂量分为0、100、500 mg/L组.通过二苯甲唑溴盐(MTT)实验,测定第2、4、6天HA对KBD组、对照组软骨细胞增殖的影响.并通过流式细胞检测观察HA对软骨细胞凋亡的影响.结果 对照组在第4天时,500 mg/L组(0.140 ±0.049)促软骨细胞增殖作用大于0 mg/L组(0.116±0.021);KBD组在第6天时,500 mg/L组(0.179±0.081)与0 mg/L组(0.128 ±0.017)比较,显示了明显的促增殖作用(P<0.05).KBD组细胞凋亡率100、500 mg/L组(10.458±1.143、7.877±1.346)均较0 mg/L组(12.860±2.159)下降(P<0.05);对照组500 ms/L组(4.045±1.204)较0 mg/L组(7.128±1.244)细胞凋亡率下降(P<0.05).结论 HA对KBD软骨细胞具有促进增殖和抑制软骨细胞凋亡的作用,其中500 mg/L的HA改善KBD软骨细胞代谢的作用较100 mg/L明显.     

大骨节病主题文献分析研究

运用文献计量学方法对《中文科技资料目录（医药卫生）》１９８０～１９９３年收录的有关大骨节病的全部文献量的分布，析出了核心著者、核心机构及核心期刊．并通过文献类别和主题词词频分析总结出近１４年大骨节病研究的重点和今后发展趋势。     

不同地区儿童大骨节病骨碱性磷酸酶的测定

１９９６年至１９９７年，使用骨碱性磷酸酶试剂盒（ＢＡＬＰＫｉｔ）对表示省和河北省大骨节病区的７～１２岁儿童进行了骨碱怀磷酸酶测定，结果在青海省病区，Ｘ线查出大骨节病人４６．３２％，ＢＡＬＰＫｉｔ查出阳性率５６．６２％，Ｘ线诊断与ＢＡＬＰＫｉｔ诊断符合率为９２．０６％，河北省病区Ｘ线查出大骨节病２．１３％，ＢＡＬＰＫｉｔ查出阳性率２４．２４％，Ｘ线诊断与ＢＡＬＰ诊断符合率１００％，两地区ＢＡＬＰＫｉ     

榆林病区水黄腐酸拟复制大骨节病动物模型的实验报告

在低硒饲料条件下，以５０ｍｇ／Ｌ榆林大骨节病区黄腐酸（ＦＡ）饮水和ＫＢＤ新发户井水１０倍浓缩饮水分别致雏鸡ＫＢＤ模型实验３７天。前一组鸡每只每天摄入ＦＡ２．０ｍｇ，等于１０．０ｍｇ·ＦＡ／ｋｇ ＢＷ·ｄ，该剂量约为该病区儿童每公斤体重摄入量的１０００倍。上述两类饮水对两实验组的全身一般状况，部分相关生化指标，肝、心、肾等乃至骨软骨都未能显示任何有害作用，即未能导致雏鸡类似ＫＢＤ的任何病变，另以１０     

大骨节病区低硒粮饲料对大鼠心,肝组织蛋白酶D活性的影响

用大骨节病区低硒粮和加硒粮喂养大鼠60天,观察到低硒组大鼠心、肝溶酶体组织蛋白酶D活性高于加硒组,该酶活性与血硒含量呈非常显著的负相关关系,提示酶活性的增高可能与低硒导致溶酶体膜稳定性遭到破坏有关。     

从对软骨超微结构研究看大骨节病的病因及发病机理

本文应用透射电镜、重金属示踪法进行了大骨节病软骨超微结构研究及动态观察。用软骨细胞培养及动物实验看铊中毒对软骨细胞的影响。并与大骨节病软骨超微结构变化比较,考虑大骨节病软骨坏死可能来自中毒为主的因素。     

榆林病区水黄腐酸对大鼠的急性毒性实验报告

报告了榆林大骨节病新发户水黄腐酸（ＦＡ）对大鼠急性毒性实验结果。以４００ｍｇ·ＦＡ／ｋｇＢＷ一天灌胃于组Ⅲ的４只鼠观察了７天，以３００ｍｇ·ＦＡ／ｋｇ ＢＷ·ｄ灌胃于组Ⅱ的５只鼠，其中１只连续３天，１只４天，１只６天，余２只连续７天。全部动物于实验第８天取材处死。实验结果：未见两组大鼠ＦＡ致死的鼠，未见两组大鼠主要生命器官和骨软骨病理形态变化。组Ⅲ鼠摄ＦＡ量是病区儿童每公斤体重等效剂量的６８００倍     

大骨节病儿童发中化学元素含量与病情的相关性研究

陕西省彬县炭店乡大骨节病儿童发中元素含量大小顺序 Ca>>P>Zn>Mg>A(?)>Fe>>Cu>Mn>Pb≈Sr>Ba>>Mo>Se。Ca、Mg、Sr、Zn 男女发中含量差异非常明显(P<0.001)。发中 Se、Sr、Mn 的含量非常明显低于非病区,但是 Mo 明显高于非病区(P<0.001)。发 Se 含量愈低病情愈重。     

腐殖酸对鼠胶原脯氨酸及赖氨酸羟化的影响

目的探讨腐殖酸对NMRI鼠皮肤、肋骨及骨胶原合成,胶原分子中脯氨酸及赖氨酸羟化程度的影响.方法用含300×10-6腐殖酸的饮水饲养二代NMRI鼠,应用生物化学及分子生物学方法对子代鼠皮肤、肋骨及骨组织中胶原含量、脯氨酸及赖氨酸羟化程度进行观察.结果与对照组相比,实验组皮肤、肋骨及骨中胶原含量未见明显变化,胶原分子中脯氨酸羟化程度未见明显差异,而赖氨酸羟化程度则有明显增高(P＜0.05).结论胶原赖氨酸羟化程度的增高与腐殖酸对胶原合成过程中细胞内转录后修饰过程的调节作用有关.     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）对培养软骨细胞生长代谢的影响

本文报告了脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）对培养软骨细胞生长代谢的影响。结果显示：在一代兔关节软骨细胞培养２４ｈ时，仅在培养液中加入１．０μｇ／ｍｌ的ＤＯＮ，即对软骨细胞产生致命性的损伤。在培养１２０ｈ时加ＤＯＮ，其毒性作用随ＤＯＮ浓度升高而损伤加重。在培养２１６ｈ时加入２．５μｇ／ｍｌ以下的ＤＯＮ，对软骨细胞的生长代谢没有明显的影响。简单讨论了ＤＯＮ与大骨节病的关系。