硫代反义bcl—2脱氧寡核苷酸对U937细胞凋亡的影响

为研究硫代反义ｂｃｌ－２脱氧寡核苷酸（ＡＮ－Ｓ－ＯＤＮｓ）对单核细胞病细胞系Ｕ９３７细胞株凋亡的影响,采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ、ＤＮＡ电泳、电镜和流式细胞计数技术检测了单核细胞白血病细胞系Ｕ９３７细胞株ｂｃｌ－２基因的表达和ＡＮ－Ｓ－ＯＤＮｓ时Ｕ９３７细胞凋亡的影响。结果发现Ｕ９３７细胞有大量ｂｃｌ－２基因表达：适当浓度（３０μｍｏｌ／Ｌ）ＡＮ－Ｓ－ＯＤＮｓ使Ｕ９３７细胞出现凋亡ＤＮＡ电泳梯     

Bcl-2、c-myc基因在急性白血病中的表达及其意义

为探讨凋亡调控基因ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ对白血病的发生、疗效及预后判定的意义,采用免疫组化法检测ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ在７２例急性随系白血病患者骨髓细胞中的表达。结果发现初治和复发者ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ的表达比完全缓解组和对照组明显增高（Ｐ〈０．０１％）;初治组和复发组之间差异无显著性（Ｐ〉０．０５）;ｂｃｌ－２与ｃ－ｍｙｃ的表达呈正相关（Ｐ〈０．０１）;ｂｃｌ－２和／或ｃ－ｍｙｃ高度表达的患者     

高碘对小鼠肾脏形态和机能影响的实验研究

为了解高碘能否对甲状腺以外的组织造成损伤，用高碘水喂养小鼠，复制成高碘性甲状腺肿后，除观察甲状腺的组织形态变化外，还研究了高碘对肾脏的组织形态和机能的影响。结果发现，用３０００μｇ／Ｌ的高碘水喂动物２１０天后，除形成了以甲状腺滤泡内胶质大量增生为特点的高碘性甲状腺肿外，肾脏的组织形态和机能都有明显的损伤，突出地表现为肾脏以新月体形成为主要表现的病理形态变化和微粒体膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性受抑制的代谢改变。对照组（适碘组）Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性为２１．９５±７．５０μｍｏｌＰｉ／ｍｇＰｒ·ｈ，而高碘组该酶活性为１７．６４±６．６３μｍｏｌＰｉ／ｍｇＰｒ·ｈ，高碘组Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性显著低于适碘组。提示，高碘对机体的损伤，不仅仅限于甲状腺组织，而可能是全身性的     

杂色曲霉素单克隆抗体的研制与特性鉴定

杂色曲霉素（ＳＴ）衍生后偶联到牛血清白蛋白（ＢＳＡ）或血蓝蛋白（Ｈ）上，制得复合抗原ＢＳＡ－ＳＴ和Ｈ－ＳＴ。将ＢＳＡ－ＳＴ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合。筛选到一株稳定分泌抗ＳＴ抗体的单克隆杂交瘤细胞株，该株细胞诱导的小鼠腹水及血清中均富含抗ＳＴ单克隆抗体（ＭｃＡｂ－ＳＴ）。经鉴定，ＭｃＡｂ－ＳＴ属于ＩｇＧ＿１，与Ｈ－ＳＴ反应之亲和力常数为１．２９ｘ１０￣９Ｌ／ｍｏｌ，其分子量为１６８０００（重链５３０００，轻链３１０００）。ＭｃＡｂ－ＳＴ的结构类似物的相对交叉反应下超过２％。应用ＭｃＡｂ－ＳＴ及Ｈ－ＳＴ建立的ＩＣ一ＥＬＩＳＡ法测定ＳＴ的线性范围是０．１～１０ｎｇ／ｍｌ，最低检测量是０．５ｐｇ／　２５μｌ，为快速检测粮食中ＳＴ提供厂重要手段。     

南充市饮用水挥发性卤代烃污染水平研究

为了解南充市饮用水挥发性卤代烃（ＶＨＨ）污染水平,于１９９２￣１９９８年采集市政供水和自备集中式供水样１２８件,以气相色谱法分析氯仿（ＣＨＣｌ３）和四氯化碳（ＣＣｌ４）含量。结果表明全部水样均检出ＣＨＣｌ３（０．０６￣２２．１３μｇ／Ｌ）和ＣＣｌ４（０．０２￣２．５μｇ／Ｌ）。管网水ＶＨＨ含量（４．４５μｇ／Ｌ）为源水（２．５２μｇ／Ｌ）的１．８倍,地面水（３．７２μｇ／Ｌ）为地下水（２．９６μｇ     

非小细胞肺癌中bcl—2、p53蛋白表达和相互关系及临床意义

为探讨ｂｃｌ－２和ｐ５３蛋白在非小细胞肺癌中表达之间的关系及意义,应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法对６２例非小细胞肺癌组织进行检测。结果发现：（１）ｂｃｌ－２蛋白阳性２０例,其中鳞癌１５例,腺癌５例;ｐ５３蛋白阳性４９例,其中鳞癌３４例,腺癌１５例。两者比较差异非常显著。（２）ｂｃｌ－２和ｐ５３的表达强度与肺癌的分化程度密切,但两者之间的表达相反;４８例随访患者发现ｐ５３表达阳性率与生存期有关,而与ｂｃｌ     

HCl—NaBH4—K3Fe（CN）6体系气态原子吸收光谱法测定饮料中铅

采用ＶＡ－９０气态原子化装置与ＷＦＸ－１Ｄ原子吸收分光光度计联用测定饮料中铅，采用ＨＣｌ－ＮａＢＨ４－Ｋ３Ｆｅ（ＣＮ）６体系，经Ｌ９（３４）正交试验选择最佳实验条件为：ＮａＢＨ４２０ｇ／Ｌ，Ｋ３Ｆｅ（ＣＮ）６１００ｇ／Ｌ，ＨＣｌ１．５ｍｌ，氩气流量为０．８Ｌ／ｍｉｎ。在０～１００μｇ／Ｌ范围内，相关系数ｒ＝０．９９９６，回收率为９４．１％～１０７．５％，Ｒ·Ｓ·Ｄ％＝３．３～５．２特征浓度和检出限分别为１．２９μｇ／Ｌ／１％和０．０４９μｇ／Ｌ。干扰试验表明，Ｓｎ、Ｈｇ、Ｃｒ、Ｃｕ、Ｍｎ在５００μｇ／Ｌ以下，Ｚｎ、Ａｓ、Ｆｅ、Ｎｉ、Ａｇ在１０００μｇ／Ｌ以下，不干扰测定     

石棉诱导细胞凋亡改变的研究

目的探讨石棉诱导的细胞凋亡及其相关基因ｂｃｌ２及ｂａｘ表达的改变。方法大鼠石棉染尘。收集石蜡包埋的石棉作业工人肺癌组织块。ＴＵＮＥＬ法（ｔｅｒｍｉｎａｌｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｍｅｄｉａｔｅｄｄＵＴＰｎｉｃｋｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇｍｅｔｈｏｄ，末端脱氧核糖核酸转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记法）观察凋亡细胞分布及数量。生物素抗生物素蛋白ＤＣＳ（ａｖｉｄｉｎＤｃｅｌｓｏｒｔｅｒ）间接免疫荧光法观察ｂｃｌ２及ｂａｘ表达改变，琼脂糖凝胶电泳进行ＤＮＡ梯状电泳分析。结果大鼠染尘后４０天，细胞凋亡增强、ｂｃｌ２表达减少、ｂａｘ蛋白含量升高，可见ＤＮＡ特征性梯度电泳条带；大鼠染尘后７０天，细胞凋亡明显减弱。在石棉作业工人肺癌组织中未见明显细胞凋亡。结论石棉可诱导肺组织细胞凋亡发生改变，这种改变有时段性。凋亡相关基因表达也有相应变化。     

高碘和儿童智力发育研究进展

高碘和儿童智力发育研究进展于志恒我国大陆基本属于碘缺乏区，但由于地质地貌等多种原因，碘的分布十分不均，在大片缺碘地区间存在着相当多的高碘区（水碘２００μｇ／Ｌ以上，尿碘１０００μｇ／Ｌ以上）。高碘是否会像低碘那样引起甲状腺肿、克汀病？会影响儿童智力发...     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉毒素G_1对体外培养人外周血淋巴细胞凋亡影响的研究

以细胞培养、流式细胞仪ＤＮＡ含量分析及ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳方法研究了我国食管癌高发区磁县居民粮食中优势污染霉菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）和黄曲霉毒素Ｇ１（ＡＦＧ１）对人淋巴细胞凋亡的影响。流式细胞术（ＦＣＭ）检测结果显示,ＤＯＮ、ＡＦＧ１处理组淋巴细胞出现了典型的亚二倍体凋亡细胞峰,凋亡百分率与毒素作用时间（ＤＯＮ：２～７２小时;ＡＦＧ１：２～２４小时）及剂量（ＤＯＮ：５０～２０００μｇ／Ｌ;ＡＦＧ１：３．１２～２０００μｇ／Ｌ）呈正相关关系。ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳结果表明,ＤＯＮ（１０００μｇ／Ｌ）、ＡＦＧ１（１０００μｇ／Ｌ）处理２４小时淋巴细胞出现特征性的ＤＮＡ＂Ｌａｄｄｅｒ＂条带。因此表明,ＤＯＮ、ＡＦＧ１可诱导和促进体外培养的人外周血淋巴细胞发生凋亡。     

铝作用下大鼠海马神经细胞凋亡与bcl-2和bax基因转录的关系

目的探讨铝引起大鼠海马神经细胞凋亡与bcl2、baxmRNA表达变化的关系。方法健康雄性SD大鼠40只,按体重随机分为4组:生理盐水组、Al3+2.5、5.0、10.0mgkg组。染毒60天后处死,用TUNEL法检测细胞凋亡,RTPCR法检测bcl2、baxmRNA的表达,用凝胶成像系统进行结果分析。结果与对照组相比,Al3+5.0mgkg、10.0mgkg组大鼠海马神经细胞凋亡率显著升高(P<005),而Al3+2.5mgkg组与对照组相比凋亡率升高,但差异无显著性;3个染毒组bcl2mRNA表达均显著下降(P<0.05);3个染毒组baxmRNA表达显著升高(P<0.05);海马神经细胞凋亡指数与bcl2mRNA表达呈负相关(r=-0.909,P<0.01),与baxmRNA表达呈正相关(r=0.871,P<0.01)。结论铝可以诱导大鼠海马神经细胞凋亡,其机制与bcl2mRNA表达下调,baxmRNA表达上调有关。     

醋酸铅对大鼠脑细胞凋亡及bcl-2、bax基因表达的影响

目的：探讨醋酸铅对大鼠脑细胞凋亡的诱发作用及对bcl-2,bax基因表达的影响。方法：24只SD大鼠腹腔注射醋酸铅5d,剂量分别为25,50,100mg/kg体重,第6天取其大脑皮层,海马,小脑组织,用流式细胞仪分别测定其细胞凋亡率和bcl-2 bax基因的表达产物Bcl-2蛋白,Bax蛋白。结果：各染铅组大鼠皮层,海马,小脑细胞亡率明显升高,与对照组相比差异具有显著性,并具有良好的剂量－反应关系;bcl-2基因表达（FI指数）明显降低,而bax基因表达则明显增加,与对照组相比差异均具有显著性（P＜0．01）,并具有良好的剂量－反应关系,Bcl-2/Bax明显下降,与对照组相比差异具有显著性,并具有良好的剂量－反应关系,相关分析表明,大鼠大脑皮层,海马和小脑细胞凋亡率与Bcl-2含量呈负相关,而与Bax含量正相关,与Bcl-2/Bax呈负相关。结论：铅可以诱发大鼠脑细胞凋亡,其机制可能与脑组织内bcl-2基因表达下调,bax基因表达上调以及Bcl-2/Bax下降有关。     

苯并[a]芘对大鼠脑组织中神经细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因表达的影响

目的 观察苯并[a]芘(B[a]P)染毒大鼠神经细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达,以探讨B[a]P对大鼠神经毒性及其作用机制.方法 32只SD大鼠,按体重随机分为4组,每组8只,染毒组分为高、中、低3个剂量组(126.2、63.1、31.5 μg/kg的B[a]P溶液),并设溶剂对照组(50 μl/kg橄榄油),均采用侧脑室微量注射染毒处理,每周1次,连续3周;在染毒3周后采用原位末端缺口标记(TUNEL)法和免疫组织化学法分别对各组大鼠脑组织凋亡细胞的分布及Bcl-2、Bax免疫反应阳性细胞进行观察和检测.结果 TUNEL染色结果显示,在大鼠大脑皮质及海马区的细胞核中可以见到棕黄色的凋亡小体,而且随着染毒剂量的增高,出现凋亡小体的细胞数逐渐增多.与溶剂对照组相比,高剂量组大鼠大脑皮质及海马神经细胞凋亡指数(AI)均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).免疫组化染色结果显示,与溶剂对照组相比,中、高剂量染毒组大鼠大脑皮质及各剂量组海马区神经细胞的Bcl-2蛋白表达均明显下降,Bax蛋白表达均明显升高,各组大鼠皮质及海马神经细胞的Bcl-2/Bax比值均下降,差异均有统计学意义(P＜0.05或(P＜0.01).大鼠大脑皮质及海马区神经细胞AI与Bel-2呈负相关(r=-0.927,P＜0.01;r=-0.934,P＜0.01),AI与Bax呈正相关(r=0.858,P＜0.01;r=0.874,P＜0.01),AI与Bcl-2/Bax比值呈负相关(r=-0.939,P＜0.01;r=-0.942,P＜0.01).结论 B[a]P可引起大鼠大脑皮质及海马区神经元细胞的凋亡,且调控凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达,在B[a]P致神经细胞凋亡的过程中发挥了重要的作用.     

不同碘摄入量对大鼠碘代谢及甲状腺功能影响

目的观察不同碘酸钾（KIO3）摄入量的大鼠模型碘代谢及甲状腺功能的变化并探讨KIO3的安全性。方法Wistar大鼠随机分为6组,分别给予低碘、适碘和高碘（分别为适碘组的5,10,50,100倍）饮食,检测3、6和12个月时尿碘水平和甲状腺含碘量,分析碘代谢变化;分别检测血清总三碘甲腺氨酸（TT3）、总甲状腺素（TT4）、游离三碘甲腺氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）浓度及甲状腺组织中三碘甲腺氨酸（T3）、甲状腺素（T4）含量来衡量甲状腺功能。结果LI组尿碘水平和甲状腺含碘量,以及血清、甲状腺组织中的甲状腺激素水平均显著低于适碘组,呈明显甲状腺功能低下;各HI组尿碘排泄量显著增加,增加幅度与碘摄入量的倍数相一致,但与适碘组比较,各HI组甲状腺含碘量最高仅2倍左右;另外,HI组随着碘摄入的增加,血清和甲状腺组织中的甲状腺激素水平也出现降低趋势,呈现一定的甲状腺功能低下。结论长期碘缺乏和碘过量均可导致大鼠甲状腺功能低下,但以碘缺乏所致的甲状腺功能低下更为明显。同时大鼠存在适应高碘的机制,对高碘摄入具有更强的耐受性,并证实KIO3的安全性。     

海马硬化型颞叶癫痫患者神经细胞凋亡的研究

目的探讨海马硬化型颞叶癫痫患者海马神经细胞的凋亡及凋亡相关基因的表达。方法癫痫组为15例颞叶癫痫患者手术切除的颞叶病灶,对照组为6例脑外伤内减压术中切除的颞叶脑组织,应用HE染色、原位末端标记（TUNEL）染色及免疫组织化学染色等方法来检测神经细胞凋亡状态及凋亡相关基因bcl-2、bax及半胱氨酸蛋白酶（caspase）-3蛋白的表达。结果对照组及癫痫组HE染色均未发现凋亡的神经细胞;TUNEL染色对照组未见阳性细胞,而癫痫组发现较多的染色阳性细胞,100个染色细胞中阳性细胞数为（4．39±2．04）个。免疫组织化学染色结果表明,对照组患者脑组织内bcl-2蛋白无表达,癫痫组15例均可见bcl-2蛋白表达明显增强[100个染色细胞中阳性细胞数为（6．72±3．36）个],两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;bax蛋白在癫痫组与对照组中均轻微表达,两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。对照组有2例检测到caspase-3蛋白的表达,而癫痫组有14例caspase-3蛋白表达明显,100个染色细胞中阳性细胞数分别为（1．07±0．43）,（9．54±3．68）个,两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论神经细胞凋亡是导致海马硬化的重要原因,bcl-2、caspase-3参与了这一过程并发挥了重要作用。     

氟化钠对肾小管上皮细胞骨桥蛋白与bax、bcl-2基因表达的影响

目的　研究氟化钠对肾小管上皮细胞骨桥蛋白与bax、bcl- 2基因表达的影响,以探讨氟对肾损害的发生机制。方法　采用原代肾小管上皮细胞的培养技术,利用逆转录 聚合酶链式反应测定bax、bcl -2基因和骨桥蛋白在氟处理的情况下细胞的mRNA表达水平的变化。结果　氟处理48h后 7 5、12 5mg/L组的肾小管上皮细胞bax的mRNA水平 (吸光度比值分别为 2. 37±0 .18和2. 64±0. 19)比对照组(吸光度比值为 1 .26±0. 16)有升高;在 5、7 5mg/L组的bcl 2的mRNA表达水平(吸光度比值分别为 0 .80±0. 22和 0. 71±0 .22)比对照组(1. 19±0. 03)下降。与对照组 (骨桥蛋白吸光度比值 1 49)比较,氟处理 48h后肾小管上皮细胞的骨桥蛋白mRNA水平随着染氟量 (≤7. 5mg/L)的增加而逐渐升高,在 7 5mg/L染氟量处理下,骨桥蛋白mRNA水平 (吸光度比值 2.01±0. 40)与对照组比较,差异有统计学意义。结论　氟化钠可促进bax和抑制bcl-2的表达使细胞凋亡,随着氟浓度的升高,凋亡率逐渐升高;在一定的氟剂量下骨桥蛋白表达增多,发挥保护肾脏作用。     

溴氰菊酯对大鼠神经细胞胞内游离钙浓度及凋亡的影响

目的　观察溴氰菊酯 (DM )对神经细胞游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)及凋亡的影响。方法　Wistar大鼠随机分为对照组与 3个染毒组 ,染毒组腹腔注射 1 2 .5mg/kg的DM ;以Fura 2 /AM为荧光指示剂 ,RF 530 1PC荧光分光光度计测定染毒后 5、2 4、48h后大鼠神经细胞 [Ca2 + ]i浓度的变化 ;FACS42 0型流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果　PM染毒 5、2 4、48h组大鼠海马及皮层细胞 [Ca2 + ]i分别为 :5h组海马 :(389.94± 43 .64)nmol/L、皮层 :(449.33± 2 3 .2 3)nmol/L ;2 4h组海马 :(340 .47±32 .36)nmol/L、皮层 :(31 1 .62± 2 5 .48)nmol/L ;48h组海马 (2 87.1 3± 2 4 .2 9)nmol/L、皮层 :(346 .55±36 .87)nmol/L ,均高于对照组 [海马 :(2 0 3 .2 4± 1 8.53)nmol/L、皮层 :(2 2 6 .85± 1 4 .81 )nmol/L] ,差异有显著性 (P <0 .0 1 )。染毒 48h组大鼠此二项指标值较 5h组明显下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。染毒 2 4、48h组大鼠神经细胞凋亡率 [海马 :(8.45± 1 .0 2 ) %、(9.44± 1 .1 4 ) % ,皮层 :(7.90± 0 .49) %、(8.0 1± 0 .87) % ]均明显高于对照组 [海马 :(2 .97± 0 .36) %、皮层 :(3 .50± 0 .48) % ] ,差异有显著性 (P<0 .0 1 ) ,且有时间 反应关系 (r=0 .940、0 .893)。结论　DM可影响大鼠神     

苯巴比妥促癌过程中细胞凋亡与bcl-2和bax mRNA表达的变化

目的 研究苯巴比妥（PB）促肝癌过程中细胞凋亡与相关基因bcl-2和bax mRNA表达,探讨PB促肝癌的分子机制。方法 建立大鼠肝癌启动／促进模型,采用TUNEL法检测促癌过程中肝细胞凋亡,提取总RNA用RT-PCR检测bcl-2和bax mRNA在促癌过程中的表达。结果 经DEN启动诱发的大鼠肝癌前病灶细胞凋亡率显著高于正常组。高、低剂量PB组和启动组随时相点延长细胞凋亡率降低,且各时相点间凋亡率差异显著（P〈0．05）。经DEN启动的各组（高、低剂量组和启动对照组）bcl-2 mRNA表达显著高于正常对照组,高剂量组随时相点延长bcl-2 mRNA表达呈增高趋势。经启动处理的各组bax mRNA表达高于正常对照,高剂量组bax mRNA表达随时间延长而降低。结论 在促癌阶段,促癌物PB能抑制凋亡,诱导抗凋亡基因bcl-2 mRNA轰达上调和俚凋亡基因bax mRNA轰达下调．提示凋亡抑制可能是促癌的机制之一。     

慢性铅暴露小鼠海马细胞凋亡相关基因的表达

目的探讨发育期慢性铅暴露对小鼠海马B-细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcelllymphoma/leukemia-2,bcl-2)和bcl-2相关X基因(bcl-2associateX,bax)mRNA表达的影响。方法用RT-PCR法检测慢性铅暴露时小鼠海马bcl-2和baxmRNA表达水平。结果慢性铅暴露可使小鼠脑海马bcl-2mRNA表达水平明显下降,而baxmRNA表达水平明显增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性铅暴露可使小鼠脑海马bcl-2mRNA表达水平显著下降,而baxmRNA表达水平显著增加。     

苯与甲醛对小鼠睾丸细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨苯和甲醛联合染毒对小鼠睾丸细胞凋亡的影响及其相关作用的机制。方法按3×3析因设计方法，108只昆明种雄性小鼠随机等分为9个组，每组12只，甲醛和苯染毒剂量分别为0、5、10mg／kg和0、100、400mg／kg，连续灌胃染毒5d，35d后处死，每组6只鼠睾丸做常规病理学切片观察睾丸的形态学变化，并采用免疫组织化学法检测bcl-2、bax的表达。另6只鼠睾丸匀浆离心，取沉渣观察睾丸细胞的凋亡率。结果甲醛和苯各染毒组小鼠睾丸组织结构损伤，染毒浓度越高，病理损害越明显；睾丸细胞bcl-2下调，bax表达上调，并有量-效关系，甲醛和苯染毒各组bcl-2和bax表达的相对灰度值较对照组均有差异（P〈0．01），甲醛和苯的联合效应为协同作用（P〈0．05）；各染毒组睾丸细胞凋亡率高于对照组（P〈0．01），并有量-效关系，二者合用的效应为相加作用（P〉0．05）。结论甲醛和苯可损伤小鼠睾丸的结构，使睾丸细胞凋亡增加、bcl-2表达下调、bax表达上调，bcl-2和bax表达的变化可能是诱导凋亡的机制。