人扁桃体细胞体外培养及诱生原发性免疫反应的研究

本文提告了人扁桃体细胞在体外培养和诱生原发性抗SRBC反应的实验条件。发现比较合适的培养细胞密度是0.5～1.0×10~7个有核细胞/ml在添加混合的牛血清和马血清的培基中,比单独使用牛血清或马血清的培基能诱生出更多的抗体形成细胞(即空斑形成细胞PFC)。适当剂量的胰岛素、脂多糖或胸腺嘧啶核苷和次黄嘌呤都有增加PFC数的作用。人扁桃体细胞在体外培养中诱生出的抗SRBC PFC数一般是100～300个PFC/10~6个有核细胞。     

自身混合淋巴细胞反应并非主要由于异种抗原刺激所致

自身混合淋巴细胞反应(AMLR)是T细胞与自身的非T细胞体外培养而发生的增殖反应。这一现象是反映了体内免疫学网络的复杂相互作用,抑或反映了分离培养过程中绵羊红细胞(SRBC)、小牛血清(FCS)等异种抗原引起的假象?作者就这一问题进行了实验。选用8名正常受试者的外周血单核细胞,经SRBC花结法或非SRBC法分离细胞,去除粘附细胞,用丝裂霉素C处     

分泌抗体细胞空斑检测方法的改进

作者用一种特制的毛细微玻片代替载玻片,来进行形成空斑细胞(PFC)的检侧。这种微玻片的规格为0.22mm×4mm×10mm,其容量为88μl。使用时只需将微玻片的一端放入微孔板中配好的反应混合液内,由于毛吸作用,微玻片即可被充满。用石蜡封口,放37℃孵育1—2小时后,即可用低倍光镜或自动电子计数器计数结果。通过小鼠脾细胞PFC检侧实验表明,此方法重复性很好,与Gunningham玻片法比较,PFC/10~6脾细胞;SRBC免疫小鼠后不同时间脾细胞PFC     

羧甲基淀粉对小鼠产生抗体和免疫器官的影响

本实验研究了国产羧甲基淀粉(CMS)对小鼠产生 IgE及 IgM抗体和对小鼠胸腺及脾脏重量的影响,结果证明,无论给予或不给予小剂量环磷酰胺(Cy),CMS均能显著或非常显著地抑制小鼠体内诱生抗绵羊红细胞(SRBC)的 IgM直接空斑形成细胞(PFC)数及显著降低小鼠产生抗 SRBC的凝集抗体效价;卵清蛋白致敏的小鼠如加注 Cy能促进IgE产生,但若使用CMS,即使给 Cy仍能非常显著地抑制抗卵清蛋白的 IgE产生。单用CMS能显著增高胸腺的重量,但对脾脏重量无明显影响。机理可能与该药能促进胸腺发育而产生或激活较多的T抑制细胞有关,提示 CMS可能具有免疫调节效应。     

鼠腹腔巨噬细胞诱生TNF的条件探讨

本文研究了用鼠腹腔巨噬细胞诱生TNF的适合条件。结果显示LFS刺激8～30h内TNF的产量最高,5～10μg/ml的LPS为合适的刺激剂量;较好的巨噬细胞浓度在2×10~6/ml左右和静止的腹腔定居巨噬细胞不能产生明显的TNF。特别引人注意的是有效的TNF诱生有赖于巨噬细胞培养中LPS的持续存在以及培养液中的小牛血清对TNF的产生有明显的抑制作用。本实验为进一步研究TNF及巨噬细胞的免疫学提供了有用的数据。     

类淋巴细胞干扰素的研究——Ⅰ.干扰素诱生条件

在静止培养条件下,对 Namalwa 细胞诱生干扰素的条件进行了研究。先对单项因素进行试验,包括诱生病毒,细胞密度,促进剂处理,制备液种类和制备温度;然后进行多因素正交优选法试验,寻找最适诱生条件。结果表明,Namalwa 细胞密度为4～6x10~6/ml,NDV-F 和仙台病毒诱生干扰素能力良好,如用前者则细胞宜先用1mM 丁酸钠处理48小时,再用 NDV-F 诱生,用仙台病毒诱生则细胞不须先作处理,诱生后加入不含血清的1640液作为制备液,在36℃培养18℃20小时后,离心收取上清,即为粗制干扰素,效价平均10,000～20,000国际单位/ml,最高可达60,000国际单位/ml。     

Con A诱生小鼠不同功能T调节细胞的简易方法

<正> 小鼠T调节细胞(即Th,Ts细胞)的诱生可采用体内方法和体外方法。但用不同浓度Con A进行体外诱生时,Con A浓度难以掌握,故有可能出现双向作用而影响实验结果的分析。吴易元等用Con A与人外周血淋巴细胞共同培养不同时间诱导人类T调节细胞。本文在此基础上,建立了一种同时诱生小鼠T调节细胞的简易方法。     

体外诱生抗体系统及溶血空斑技术的研究进展

体外诱生抗体和溶血空斑技术是研究特异性体液免疫应答机理的可信方法。本法比最初使用的体内诱生抗体的溶血空斑法有更多优点,它可选用特定的离体细胞,加一定量抗原刺激,在体外培养的条件下诱生抗体,而用凝胶局部溶血技术检测产生抗体的空斑形成细胞(PFC)数,并可分辨免疫球蛋白的类     

关于E玫瑰花形成和抑制机制的研究

人胸腺依赖淋巴细胞在一定条件下,与绵羊红细胞(SRBC)能形成自然玫瑰花。但是,发现SRBC与淋巴细胞的比例不同及培养时间不同能影响玫瑰花形成细胞(RFC)的检查结果。本文作者就玫瑰花形成条件与抗淋巴细胞血清(ALS)抑制RFC的敏感性之间的关系做了研究。淋巴细胞是采用Ficoll-Hypaque分层液分离的。用对乳胶颗粒的吞噬来识别单核     

创伤对小鼠抗体分泌细胞的抑制作用及其纠正实验观察

<正> 本实验利用空斑形成细胞(简称PFC)测定法检测SRBC免疫小鼠脾细胞的抗体分泌细胞数,观察创伤对B细胞系统的抑制作用及抗体生成素对该抑制作用的纠正效应。 重18～22g的雄性昆明小鼠随机分为创伤组、创伤治疗(简称洽疗)组和对照组,每组10只,在实     

培养板法体外诱生抗体

<正> 现有多种体内外诱生抗体的方法,本文对国外晚近采用的培养板法诱生抗体作一简要介绍。 材料和方法 一、常规法制备SRBC悬液,并用Earle's液配成1×10~8细胞/ml。二、用无糖Hanks液常规     

有机锗(Ge-401)对小鼠B淋巴细胞产生抗体的调节

本文报道了有机锗(Ge-401)对Balb/C小鼠产生抗SRBC抗体能力的调节。Balb/C小鼠先经SF_1(人精浆经Sephadex G-100分离得到的第一组分)抑制其免疫功能,然后实验小鼠经腹腔注射Ge-401,每天一次连续7天,对照组小鼠则以等量生理盐水代替。在实验第7天用SRBC免疫小鼠,于免疫后第4天进行溶血空斑试验和血清抗SRBC抗体凝集效价测定。结果表明,Ge-401能明显提高实验组小鼠的溶血空斑数和抗体凝集效价,与对照组相比,p<0.01。提示Ge-401能增强免疫功能抑制状态下小鼠的免疫应答能力——B细胞产生特异性抗体的能力。     

SRBC致敏对大鼠脾脏淋巴细胞β—受体的影响

用受体结合实验测定大鼠脾脏淋巴细胞β-受体Bmax和Kd。5×10~9个SRBC ip大鼠后,d1 Bmax比对照组明显升高,d2达峰值,以后逐渐下降,d6降至对照水平。 d1- d3 β-受体Bmax与72h后血清IgM量高度正相关(r=0.86),ipl.8 mg/kg普萘洛尔后, d2 Bmax和 d5血清IgM量平行降低。在体外诱生抗体中,10μmol/LNE显著提高诱生的IgM量。可被1μmoI/L普萘洛尔阻断。上述结果表明:(1)SRBC致敏上行调节大鼠脾脏淋巴细胞β-受体密度;(2)脾脏淋巴细胞β-受体Bmax的上行调节可能促进其IgM的合成;(3)NE促进脾淋巴细胞IgM合成通过β-受体介导。     

静脉药瘾者辅助性T细胞功能的研究

目的　探讨静脉药瘾者辅助性T细胞的变化及与病毒感染的关系。方法　采集381例静脉药瘾者和10 2例健康体检者静脉血,用酶联免疫吸附法、放射免疫测定法检测外周血单个核细胞诱生的IFN γ和IL 4 ,血清中IL 2和IL 4 ,以及HBV和HCV感染的血清学指标。结果　①静脉药瘾者单个核细胞诱生的IFN γ、IL 4以及血清IL 2比对照组减低;血清IL 4增高,差异具有显著性意义(P <0 .0 1)。②静脉药瘾者HBV和HCV感染率增高,与对照组比较差异具有显著性意义;发生HBV和HCV感染时,静脉药瘾者单个核细胞诱生的IFN γ进一步降低。结论　静脉药瘾者Th1 Th2细胞失衡,机体抗病毒能力减弱,而病毒感染又加重细胞免疫功能紊乱。     

活性氧及能量代谢障碍在体外培养肝细胞脂肪变性中的作用

目的：探讨细胞活性氧（ROS）及线粒体能量代谢障碍在乙醇和小牛血清诱导的体外培养肝细胞脂肪变性中的作用。方法:将人肝细胞株L02进行细胞培养,加入不同浓度的乙醇,采用MTT法确定乙醇作用的最佳浓度；用2%乙醇和50%小牛血清(A+CS)诱导L02细胞，以油红O染色观察细胞内脂滴形成状况,并检测细胞TG的含量；用流式细胞仪（FCM）测定细胞活性氧及线粒体膜电位的改变；采用反相高效液相色谱分析法测定细胞ATP含量。结果:2%乙醇和50%小牛血清作用36 h,肝细胞内有典型的脂滴形成,与对照组相比，细胞内TG含量及ROS水平明显增加；而细胞线粒体膜电位及肝细胞ATP的含量则显著降低(P<0.01)。结论:在乙醇和小牛血清诱导肝细胞脂肪变过程中，细胞ROS的增加及线粒体能量代谢障碍可能发挥了重要的作用。     

大鼠淋巴细胞对绵羊红细胞的破坏作用

大鼠的淋巴细胞在含Ca~(2 )、Mg~(2 )的Hanks液中,在37℃下和绵羊红细胞(SRBC)进行反应,能将SRBC裂解并释出血红蛋白(Hb),可用721—型分光光度计测定Hb的量(以OD值表示)。淋巴细胞溶解红细胞的能力还可以用半数溶血值(HC50)表示。能引起SRBC溶解的淋巴细胞可能是自然杀伤(NK)细胞。     

S-O_2-1菌苗诱生干扰素的研究 Ⅰ小鼠体内诱生

本文研究了免疫增强剂——S-O_2-1菌苗在小鼠体内诱生干扰素的能力。结果表明,给(57BL/6小鼠注射菌苗1.5×1O~9菌/只后,血清中干扰素活性明显升高,于尾静脉注射后2小时,干扰素滴度达高峰(9.06±0.34log_2U/ml)。该干扰素具有小鼠I-型干扰素相同的理化特性。实验还表明,由S-O_2-1菌体提取的核糖体和脂多糖(LPS)亦均具有诱生干扰素的活性。因此我们推测,s-O_2-1菌苗诱生干扰素的能力可能对其抗肿瘤活性的发挥起一定的怍用。     

红花多糖的免疫活性作用

用SRBC免疫的C57BL小鼠脾脏作试验,观察到红花多糖制剂有增强免疫应答作用。动物用SRBC致敏后,连续4天分别以三种不同剂量(15、45、135毫克/公斤体重)的红花多糖制剂作腹腔注射,第5天取各鼠脾细胞做溶血空斑试验。结果表明:红花多糖均有刺激PFC的作用,其促进作用随剂量增加而明显增加,在剂量增加至135毫克/公斤时,PFC值比对照组高58％。用安配常数统计法     

应用ELISA方法检测抗呼吸道合胞病毒免疫核糖核酸免疫活性的研究

本文报导在小鼠模型系统中,应用ELISA方法对兔抗呼吸道合胞病毒(RSV)免疫核糖核酸(i-RNA)诱生血清特异性抗体及抗体生成的动态进行观察。实验结果表明:抗呼吸道台胞病毒免疫核糖核酸(RSV-i-RNA)在小鼠体内具有诱生血清特异性抗体能力。RSV-i-RNA常规致敏后24h抗体水平明显增高,72h达高峰,11天左右降至正常水平,RNase处理使RSV-i-RNA诱生血清特异性抗体能力明显减低,而DNase、Pronase对其则无明显影响。     

人外周血淋巴细胞对绵羊红细胞的破坏作用

人外周血淋巴细胞,在含Ca~(2 )、Mg~(2 )的Hanks液中与绵羊红细胞(SRBC)共育,能将SRBC破坏释出血红蛋白(Hb),半数溶血值为0.1921±0.06,经胰蛋白酶抑制后淋巴细胞破坏SRBC的能力明显减弱,半数溶血值为0.0348±0.03。经尼龙棉柱法及E-玫瑰花法把淋巴细胞分离为T、B和NK等各个亚群。引起溶血作用最强的是NK细胞。对同一血源标本,同时用~(125)IUdR释放法测定NK活性和溶血分光光度法测定溶血活性,其结果呈明显正相关。本文认为人外周血淋巴细胞有破坏绵羊红细胞的能力,有这种能力的淋巴细胞是NK细胞。可望用本实验的溶血分光光度法测定NK细胞的活性。