大鼠可逆性全脑缺血再灌流过程中几个脑区磷脂含量及组分的变化

应用高效液相色谱－紫外检测技术检测了大鼠全脑缺血１５ｍｉｎ及再灌流１ｈ～７ｄ海马、皮层下（丘脑和纹状体）、新皮层突触体（Ｚａｌｅｓｋａ方法）主要磷脂组分含量变化。结果显示，短暂缺血再灌流后各脑区存在着磷脂代谢的异常，再灌流期磷脂的降解甚于缺血期。磷脂组分中以ＰＥ、ＰＣ的减少为著，在ＰＥ、ＰＣ显著减少时也存在ＰＳ的减少；而ＳＭ无明显减少，随再灌流的延长有升高趋势。３个脑区磷脂含量的减少存在差别，反映了激动剂依赖性磷脂降解以及Ｃａ￣２＋依赖性磷脂酶活化的区域性，是选择性神经元损伤的生化基础。ＰＣ／ＳＭ比值的缩小可能更敏感地提示了膜损害或修复过程中膜结构的变化。     

大鼠局灶性脑缺血再灌流后HSP70表达及其mRNA变化

目的 探讨热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）在局灶脑缺血再灌流后的变化和作用。方法 采用线栓法制备大脑中动脉缺国知再灌流模型。应用免疫组化方法观察ＨＳＰ７０的组织学分布,利用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测缺血皮层与基底节区脑组织ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ相对含量。结果 基底节区ＨＳＰ７０阳性细胞较少,持续时间短,眼层区ＨＳＰ７０阳性细胞较多,持续时间长。ＲＴ－ＰＣＲ结果表明ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ相对含量与免疫组化结果相一致。     

缺血性脑卒中患者红细胞膜磷脂组分的改变及其与红细胞流变学的关系

目的探讨缺血性脑卒中患者红细胞膜磷脂各组分的改变及其对红细胞流变功能的影响。方法采用高效液相色谱法对５８例缺血性脑卒中、２３例有脑动脉硬化症状的患者和２６名健康人的红细胞膜磷脂各组分含量进行测定，并同时检测红细胞膜胆固醇含量、膜微粘度及红细胞变形能力。结果缺血性脑卒中患者红细胞膜总磷脂（ＴＰＬ）、磷脂酰胆碱（ＰＣ）、磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）含量低于对照组；胆固醇（ＣＨＯ）、胆固醇与总磷脂比值（ＣＨＯ／ＴＰＬ比值）高于对照组；红细胞膜流动性、红细胞变形能力降低。直线相关分析，ＰＣ与红细胞膜微粘度、红细胞滤过指数呈负相关；ＰＥ与红细胞膜微粘度呈负相关；神经鞘磷脂（ＳＭ）与红细胞膜微粘度呈正相关。有脑动脉硬化症状的患者红细胞变形能力降低，膜胆固醇、胆固醇与总磷脂比值升高，但膜总磷脂及磷脂各组分无明显改变。结论缺血性脑卒中患者红细胞膜存在以ＰＣ、ＰＥ变化为主的磷脂代谢障碍，并对红细胞流变特性产生影响。     

脑缺血和再灌注后脑组织内皮素－1基因表达及丹参的影响

为研究脑缺血和再灌注后脑组织内皮素－１（ＥＴ－１）基因表达的变化以及丹参对它的影响，采用线栓法制成大鼠大脑中动脉缺血和再灌注模型，并用地高辛精标记ＥＴ－１基因进行原位杂交。结果显示，缺血组（缺血２４ｈ）和再灌注组（缺血１．５ｈ再灌注２４ｈ）缺血侧皮层及尾壳核ＥＴ－１基因表达均显著高于健侧相应的脑区（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），经丹参治疗后缺血或再灌注鼠缺血侧皮层及尾壳核ＥＴ－１基因表达均显著低于生理盐水（ＮＳ）对照组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），但仍比健侧脑区显著增高。本实验表明，缺血和再灌注均可诱导脑组织ＥＴ－１基因的异常表达，进一步加重缺血和再灌注引起的脑损伤，丹参对缺血诱导的ＥＴ－１基因表达有部分抑制作用，这可能是丹参防治缺血性脑血管病的分子机理之一。     

大鼠全脑缺血再灌流过程中几个脑区的自由基体外自旋捕捉ES…

本研究采用自由基自旋捕捉剂ａ－ｐｈｅｎｙｌ－ｔ－ｂｕｔｙｌ ｎｉｔｒｏｎｅ（ＰＢＮ）进行体外自旋捕捉，用电子自旋共振波谱仪（ＥＳＲ）测定其加合物含量。动物模型采用ｗｉｓｔａｒ大鼠４血管阻断造成全脑缺血１０ｍｉｎ再灌流模型，分别于缺血１０ｍｉｎ、再灌５、１０、１５、３０、６０、１２０ｍｉｎ，１２、２４、４８、７２、１２０ｈ处死动物，分别取小脑、新皮层、海马、丘脑和纹状体等５个脑区进行体外自旋捕捉。测     

大鼠可逆性全脑缺血再灌流过程中几个脑区Na~＋K~＋－ATP酶活性的动态变化

应用大鼠４血管关闭（４ＶＯ）方法制作全脑缺血再灌流模型，观察海马、新皮层及皮层下结构在缺血及再灌流不同时相Ｎａ＋Ｋ＋─ＡＴＰ酶活性变化。缺血时即刻出现海马Ｎａ＋Ｋ＋─ＡＴＰ酶活性降低（Ｐ＜０．０５），再灌流后新皮层及皮层下酶活性有暂时性降低，海马的酶活性在再灌流１６８ｈ时仍未恢复（Ｐ＜０．０５）。Ｎａ＋Ｋ＋─ＡＴＰ酶活性的降低与自由基对酶结构的直接破坏、膜磷脂降解以及不饱和脂肪酸过氧化引起界面脂或膜流动性改变有关。     

急性缺血性大鼠脑乳酸含量变化的实验观察

本研究通过四血管闭塞的非禁食动物脑缺血模型，旨在观察缺血再灌流不同时期大鼠脑乳酸含量的变化。结果再灌流１小时和再灌流２小时后大鼠脑乳酸含量无差异（Ｐ＞０．２）。提示再灌流后第一小时是脑乳酸产生的关键时期，这与此期出现的皮层神经元膜结构的病理改变密切相关。     

大鼠脑缺血再灌流脑区一氧化氮变化的研究

目的研究大鼠脑缺血及再灌流后脑部一氧化氮的变化。方法采用荧光法和放射免疫法测定４个脑区一氧化氮（ＮＯ）代谢产物ＮＯ２和环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）。结果脑缺血１０ｍｉｎ,各脑区ＮＯ２和ｃＧＭＰ含量明显增高;脑缺血３０ｍｉｎ,各脑区ＮＯ２和ｃＧＭＰ含量开始下降。缺血１０ｍｉｎ再灌流１５ｍｉｎ以及缺血３０ｍｉｎ再灌流１５ｍｉｎ,各脑区ＮＯ２和ｃＧＭＰ含量再次增加,与单纯脑缺血组相比,有显著差异性（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。结论ＮＯ参与了脑缺血再灌流的损伤过程     

热耐受对鼠脑海马缺血后细胞凋亡的保护

目的　观察热耐受对鼠脑海马缺血再灌流后细胞凋亡的保护作用，并探讨迟发神经元死亡（ Ｄ Ｎ Ｄ） 与细胞凋亡的关系。方法　大鼠前脑缺血１０ ｍｉｎ ，以及在缺血前反复３ 次高热处理，应用 Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ 技术检测海马缺血区凋亡细胞，并用免疫组化法检测该区 Ｈ Ｓ Ｐ７０ 表达水平。结果　缺血再灌流后，细胞凋亡在 Ｄ Ｎ Ｄ 形态学改变前出现。热耐受后可显著减轻缺血损害导致的细胞凋亡。结论　细胞凋亡是 Ｄ Ｎ Ｄ 的死亡方式之一，热耐受诱导的 Ｈ Ｓ Ｐ７０ 表达增强是其保护细胞、减少凋亡的主要机制。     

MCAO后鼠脑Glu.GluR变化规律及意义

为探索谷氨酸受体（GluR）在介导谷氨酸（Glu）对缺血神经元损伤的作用机制，本实验建立大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）局部脑缺血实验模型，应用受体的放射配基结合分析（RBA）等技术动．态监测了缺血及再灌流期缺血灶、海马和下丘脑Glu、GluR含量及其亲和力的变化。结果发现：缺血30min，各脑区Glu含量达高峰，再灌流6h，Glu含量回降至基线水平，再灌流48h后，Glu含量再次中等程度升高，并持续至再灌流72h。GluR和KD值与Glu含量密切相关。结果提示，缺血再灌流早期，GluR在高浓度Glu的作用下发生同种特异性反向调节，GluR亲和力为增敏反应；再灌流中晚期，GluR的变化属于同种特异性正向调节，而GluR亲和力测为减敏反应。     

大鼠脑缺血和再灌流过程脑组织一氧化氮合成酶表达的变化

目的　探讨大鼠脑缺血再灌流海马及皮层一氧化氮合酶（ＮＯＳ） 的变化。方法　用线栓法建立大脑中动脉梗死（ＭＣＡＯ） 模型,用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶（ＮＡＤＰＨｄ） 染色法观察ＮＯＳ阳性细胞的变化。结果　海马及皮层ＮＯＳ阳性细胞在缺血１５ 分明显增多,１ 小时减少,６ 小时有所恢复;再灌流１５ 分又显著减少,１ 小时渐增多,２４ 小时皮层出现较多ＮＯＳ阳性的毛细血管和大量胶质细胞。结论　本实验结果符合ＮＯ 在缺血早期增加和再灌流后期大量增加的变化,支持ＮＯ参与脑缺血再灌流损害的观点。     

缺血性脑卒中患者红细胞膜磷脂组分的改变及其与红细胞流变 …

目的 探讨缺血性脑卒中患者红细胞磷脂各组分的改变及其对红细胞流变功能的影响。方法采用主效液相色谱法对５８例缺血性脑卒中，２３例有脑动脉硬化症状的患者和２６名健康人的红细胞膜膦脂各组分含量进行测定，并同时检测红细胞膜胆固醇含量，膜微粘度及红细胞变形能力。结果 缺血性脑卒中患者红细胞膜总磷脂（ＴＰＬ），磷脂酰胆碱（ＰＣ），磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）含量低于对照组，胆固醇（ＣＨＯ）胆固醇与总磷脂比值（ＣＨＯ／     

脑缺血时大鼠大脑皮层乙酰胆碱含量变化的动态观察

本实验采用双侧颈总动脉夹闭（ＣＣＡＯ）和大脑中动脉闭塞（ＭＣＡＯ）两种脑缺血动物模型，分别用乙酰胆碱（ＡＣｈ）生物测定法检测皮层ＡＣｈ含量，ＡＣｈ离子选择性微电极（ＡＣｈ－ＩＳＭｓ）检测皮层ＡＣｈ释放量，乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）生化测定法检测皮层ＡＣｈＥ活性，观察脑缺血时皮层ＡＣｈ含量的动态查化。结果发现：脑缺血可诱发皮层ＡＣｈ活度急剧上升，示ＡＣｈ突然大量释放，在ＣＣＡＯ组于缺血１０ｍｉｎ达到高峰（净增１．４４４ｍｍｏｌ／Ｌ），而ＭＣＡＯ组于缺血２ｍｉｎ即达高峰（净增１．５５３ｍｍｏｌ／Ｌ），随着缺血延长，二者均逐渐下降，于缺血３０ｍｉｎ时，虽较峰值要低，但明显高于缺血前水平，此时，ＡＣｈＥ活性巳明显低于缺血前，ＡＣｈ含量在ＣＣＡＯ组下降０．２５６μｇ／ｇ（Ｐ＞０．０５），在ＭＣＡＯ组则显著下降１．０１４μｇ／ｇ（Ｐ＜０．０１）。结果提示：皮层ＡＣｈ含量变化对缺血是敏感的；脑缺血时ＡＣｈ含量下降、释放增加、降解减弱，推测ＡＣｈ可能在缺血性脑损伤中起重要作用。     

Wistar鼠全脑反复缺血再灌流6脑区中精氨酸加压素含量…

精氨酸加压素（ＡＶＰ）是脑内重要的神经递质，本研究采用４血管关闭的方法，制造Ｗｉｓｔａｒ大鼠全脑反复缺血再灌流长期生存动物模型，然后利用放免方法测定了缺血后存活不同时间大鼠额叶，颞叶，海马，丘脑，纹状体，脑干６个脑区的ＡＶＰ含量。发现缺血即刻各脑区ＡＶＰ无显变化（Ｐ＞０．０５），缺血后１５天显著下降（Ｐ＜０．０１），３０天时继续下降（Ｐ＜０．０１），６０时变化方趋稳定，９０天和１８０天时和对照组比     

应用SPECT进行帕金森病患者rCBF相对定量的初步研究

本文用ＳＰＥＣＴ测定１４例正常人和２１例帕金森病患者ｒＣＢＦ相对定量值（ＲＱ值），发现患者组左侧额叶下部皮层、左侧枕叶皮层和双侧丘脑区ＲＱ值较对照组明显减少，说明帕金森病患者存在局部脑血液供应障碍。而帕金森病患者轻重两组间上述部位的ＲＱ值无显著性差异。     

脑缺血及再灌流期间生物膜磷脂代谢特点

本文利用大白鼠４血管结扎法建立脑缺血再灌流模型，同时制备脑组织线粒体和微粒体组织，检测假手术组，缺血１５ｍｉｎ，再灌１ｈ和３ｄ各组生物膜主要磷脂的含量变化，发现再灌流时磷脂代谢变化比缺血期幅度大，并且线粒体主要组成磷脂和微粒体主要组成磷脂代谢变化规律并不一致，证明磷脂代谢异常导致了生物膜功能丧失，造成了神经元的损伤。     

Wistar鼠全脑反复缺血再灌流6脑区中精氨酸加压素含量的动态研究

精氨酸加压素（ＡＶＰ）是脑内重要的神经递质，本研究采用４血管关闭的方法，制造Ｗｉｓｔａｒ大鼠全脑反复缺血再灌流长期生存动物模型，然后利用放免方法测定了缺血后存活不同时间大鼠额叶、颞叶、海马、丘脑、纹状体、脑干６个脑区的ＡＶＰ含量。发现缺血即刻各脑区ＡＶＰ无显著变化（Ｐ＞０．０５），缺血后１５天显著下降（Ｐ＜０．０１），３０天时继续下降（Ｐ＜０．０１），６０天时变化方趋稳定，９０天和１８０天时和对照组比较仍有显著差异（Ｐ＜０．０１）。结果提示ＡＶＰ下降与脑对缺血选择易损伤性有关，ＡＶＰ参与了脑缺血病理生理的全过程。     

二氯醋酸钠对大鼠缺血性脑乳酸含量影响的实验研究

本研究结果发现大鼠前脑完全性缺血３０分钟，分别再灌注１小时和２小时后，脑乳酸均明显高于对照组（Ｐ＜０．００１）。而无论缺血前或后应用二氯醋酸钠２５ｍｇ／ｋｇ后，均可显著降低不同灌流期的脑乳酸含量（Ｐ＜０．００１）。且脑乳酸与相应时期的皮层神经元细胞直径呈明显正相关（ｒ＝０．８１）。这表明二氯醋酸钠易于透过血脑屏障，改善脑内乳酸代谢。     

大鼠全脑缺血再灌流后脑组织P53及P21蛋白的表达

目的　探讨大鼠全脑缺血再灌流后Ｐ５３、Ｐ２１蛋白的表达及其与迟发性神经元死亡（ＤＮＤ）的关系。方法　在４ 血管闭塞法全脑缺血模型上,采用ＨＥ及ＬＳＡＢ染色法,观察脑组织病理改变,检测脑组织Ｐ５３、Ｐ２１蛋白的表达,以及蛋白合成抑制剂放线菌酮对其的影响。结果　全脑缺血１５ ｍ ｉｎ 再灌流后,脑组织Ｐ５３、Ｐ２１蛋白表达增加,且两者分布接近。海马结构、丘脑、下丘脑等白质区（再灌流后６ ｈ）较皮层、海马的神经细胞核（２４ ｈ）先检测到Ｐ５３、Ｐ２１蛋白,７２ ｈ 表达达高峰。并且以缺血损伤最严重的海马ＣＡ１ 区Ｐ５３、Ｐ２１蛋白表达为强。另外,放线菌酮可抑制脑组织Ｐ５３、Ｐ２１蛋白的表达,并对ＤＮＤ具有一定的保护作用。结论　全脑缺血再灌流损伤后,脑组织Ｐ５３、Ｐ２１蛋白表达增加,放线菌酮可抑制其表达,并对ＤＮＤ起保护作用,提示Ｐ５３、Ｐ２１蛋白参与了全脑缺血后ＤＮＤ的凋亡机制,并对其起促进作用     

缺血性中风红细胞膜流动性与膜脂质及血脂关系的研究

目的探讨改变红细胞膜流动性的原因。方法对５８例缺血性中风患者及２６名健康对照者红细胞膜流动性、膜胆固醇、膜磷脂各组分及血浆脂质进行了测定。结果患者红细胞膜流动性、膜磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）、膜磷脂酰胆碱（ＰＣ）显著降低，膜胆固醇、血浆总胆固醇、甘油三脂和神经鞘磷脂显著升高。相关分析，患者红细胞膜微粘度与膜ＰＥ、ＰＣ呈显著负相关，与膜神经鞘磷脂呈显著正相关，与血浆胆固醇、磷脂无显著相关性。结论缺血性中风患者红细胞膜存在胆固醇和磷脂组分代谢异常，并对红细胞膜流动性产生了影响