大肠杆菌合成的HBcAg转化为HBeAg的研究及其应用

乙型肝炎e抗原(HBeAg)是乙型肝炎病毒(HBV)感染的血清学标志之一,同时又是乙型肝炎诊断上的一种重要的生物制剂。HBV感染之后,血清中最早出现的是乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和HBeAg。HBeAg的出现表明HBV仍进行活跃地复制,此时传染性最强。HBeAg一般在HBsAg消失之前消失,如果持续阳性达8至10周以上,说明已经转变成慢性肝病。HBeAg相应抗体抗-HBe的出现,表明病毒复制已经停止,传染     

大肠杆菌合成的HBcAg转化为HBeAg的研究及其应用(摘要)

乙型肝炎e抗原(HBeAg)是乙型肝炎病毒(HBV)感染的血清学标志之一,同时又是乙型肝炎诊断上的一种重要的生物制剂。HBV感染之后,血清中最早出现的是乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和HBeAg。后者的出现表明HBV仍在活跃地复制,此时传染性最强。HBeAg一般在HBsAg消失之前消失,如果持续阳性达8到10周以上,说明已转变成慢性肝病。HBeAg相应抗体抗-HBe的出现表明病毒复制已停止,传染力低,也是HBV感染将过的征兆。因此对于HBsAg阳性患者,为了了解HBV感染的状况及将来可能的发展,同时检查HBeAg和抗-HBe具有重要的意义。日前用于临床诊断的HBeAg主要是从病人血浆中提取的,由于材料缺乏,远远不能满足实际需要。     

大肠杆菌合成HBcAg的制备及其在乙型肝炎诊断上的应用

以HBcAg的基因重组到能表达的大肠杆菌MM206株,制备了大肠菌HBcAg的粗提物。用酶联免疫吸附检测时只与抗-HBc发生特异的免疫学反应,与人肝HBcAg进行对比性平行检测78份血清标本,结果完全一致,与Abbott药盒检测抗-HBc的结果相比较,总符合率为97.3％。用于筛选献血员,阳性检出率较只测HBsAg高8.9％,对临床肝炎病人的阳性检出率也较只测HBsAg高16.5％。粗制HBcAg经亲和层析可一步纯化到电泳一条主带上。对该抗原应用情况和纯化问题进行了讨论。     

应用大肠杆菌合成的HBcAg检测抗-HBc的结果

本文报告了应用大肠杆菌合成的乙型肝炎核心抗原(E Coli HBcAg)作血清学检测的初步结果。用ELISA对它与从肝脏提取的HBcAg同时作对比试验,结果这两种抗原制品的特异性是一致的。用这两种抗原以ELISA同时检测36份血清标本的乙型肝炎核心抗体(抗-HBc),二者的符合率为91.7％。表明E Coli HBcAg可代替从肝脏提取的HBcAg,作为检测抗-HBc的诊断试剂,具有实际应用价值。     

大肠杆菌合成的乙肝病毒核心抗原转化为e抗原的探索

在一些乙肝表面抗原(HBsAg)阳性的乙肝患者血清中出现e抗原(HBeAg)与血清中存在有大量Dane颗粒、高活力DNA聚合酶有关,说明乙肝病毒(HBV)的复制活跃,传染性强。凡血清中无HBeAg或有抗-HBe的人,一般来讲循环病毒较少,即其传染性较弱,所以检查HBeAg和抗-HBe在临床上具有重要的意义。科学家们对HBeAg的重视不仅在于它在临床和流行病学上的意义,同时也对它的结构与功能的关系感到兴趣。至今为止,HBeAg基因在HBV DNA序列上的位置尚未确定,HBeAg与核心抗原(HBcAg)结构间     

ABC法检测慢性肝病患者骨髓细胞HBsAg、HBcAg和HBeAg的染色观察

用ABC法检测118例慢性肝病患者骨髓细胞HBsAg、HBcAg和HBeAg,阳性56例(47.5％)。其中单阳性31例(26.3％)、双阳性12例(10.2％)、3阳性13例(11.0％)。慢性乙型肝炎与肝硬变阳性率差异不显著,P>0.05,而肝癌与肝硬变、慢性乙型肝炎阳性率差异显著,P<0.05。结果表明骨髓细胞HBV感染与肝癌的发病率有密切关系。骨髓细胞分类计数,阳性骨髓细胞均在晚幼粒、杆状核及分叶核粒细胞系,其它骨髓细胞系均为阴性。     

肝组织HBcAg检测应用价值的探讨

为探讨肝组织HBcAg检测的应用价值，笔者应用免疫组化技术检测了慢性乙型肝炎（慢乙肝）90例的肝组织HBcAg（简称HBcAg）；其中24例在相隔3～6个月作了第二次检测，以观察动态变化。对象和方法90例慢乙肝全为男性，年龄18～39岁。均经临床、病理和病原学诊断确诊，包括慢性活动性肝炎（慢活肝）69例，慢活肝伴肝硬变7例，慢性迁延性肝炎（慢迁肝）14例。HBCAg检测用ABC法，同份肝组织作HE染色观察病变。同步用ELISA法检测血清乙型肝炎病毒标志物（HBVM）。血清HBV－DNA检测用斑点杂交。结果一、病原学诊断价值90例慢乙肝中HB…     

前—S2蛋白与HBeAg,HBV—DNA及肝组织内HBcAg,HBsAg的初步研究

本文对各型HBV感染者50例的同份血清作了Pre-S_2蛋白与HBeAg、HBV-DAN检测,并与同期肝组织内HBcAg,HBsAg的关系进行了初步研究。50例HBV感染者均系1984～1988年收治的患者,其中重型肝炎9例,慢性活动性肝炎(CAH)18例,无症状HBsAg携带者(AsC)18例,甲乙型肝炎重叠感染者5例。 检测方法:(1)血清Pre-S_2蛋白ELISA检测药盒及血清HBV-DVA(斑点杂交试验)药盒均(?)北京医科大学肝病研究所提供。(2)HBeAg(?)-HBe药盒由302医院免疫室提供(ELISA)     

转化生长因子β的临床应用及其前景

转化生长因子β是多功能的细胞因子，参与了体内多种病理和生理过程，并在创伤愈合，免疫抑制等方面具有重要的临床应用前景。局部或全身应用的ＴＧＦβ已被用于软组织修复，骨修复和缺血损伤修复，全身应用的ＴＧＦβ还可用于自身免疫疾病的防治；而ＴＧＦβ拮抗剂则可望应用于慢性炎性纤维化，艾滋病和其他疾病。     

分泌抗HBeAg单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和检测HBeAg抗-HBe中的应用

应用亲和层析纯化的HBeAg免疫接种BALB/C小鼠,收获脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞株融合,对淋巴细胞杂交瘤细胞生长孔上清用ELISA法进行检测,发现两个分泌特异性抗-HBe的细胞株(IB_8;2G_(11))。经有限稀释法亚克隆3次以上,扩大培养后腹腔注射同系小     

肠毒素大肠杆菌LTh-STⅠb二价基因探针的克隆及其应用研究

肠毒素大肠杆菌(ETEC)是急性感染性腹泻的病原,它以质粒编码的热敏肠毒素(LT)和热稳定肠毒素(ST)致病。根据来源不同,LT分为LTh和LT_p;ST分为STⅠ和STⅡ。STⅠ又可分为STⅠa和STⅠb。笔者在LTh-STⅠa-STⅠb三价基因探针的基础上构建了LTh-STⅠb二价基因探针,并用国产增强型化学发光检测系统,建立了辣根过氧化物酶(HRP)标记二价基因探针及通过化学发光(ECL)在普通X线胶片上自显影检测ETEC的方法(CPD)。现报告如下。     

肠毒素大肠杆菌LTh—STIb二价基因探针的克隆及其应用研究

在肠毒素大肠杆菌（ETEC）LTh-STIa-STIb三价基因探针的基因上，用限制性内切酶EcoRI酶切，回收片段，重新构建LTh-STIb二价基因探针的克隆株，用辣根过氧化物酶复合物（HRP）直接标记二价基因探针，建立了增强型化学发光反应（ECL）检测ETEC的方法，其敏感性可测到0.1pg的质粒DNA或由10个菌体培养面来的ETEC细胞，与同位素标记杂交方法的敏感性一致，且此探针仅与产STIb，LTh肠毒素的人源性ETEC菌株杂交，与STIa肠毒素菌株及其它非ETEC菌株均无杂交信号，该探针与三价探针及LTh单价探针联合使用，能间接将LTh,STIa和STIb三种肠毒素分型，结果表明该方法简便快速，特异敏感，无放射性污染，是ETEC实验室诊断及分子流行病学调查的有效工具。     

鲑鱼降钙素类似物的合成及其研究

鲑鱼降钙素类似物的合成及其研究杨彬张其楷丁振军事医学科学院毒物药物研究所北京１００８５０降钙素（ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ，ＣＴ）是一个含３２个氨基酸残基的多肽激素，主要生物作用是抑制骨吸收，降低血钙水平。本研究在降钙素现有研究的基础上，设计合成了鲑鱼降...     

没食子酸抗HBsAg/HBeAg的实验研究

从青果(Canarium album Raeusch)中提取分离没食子酸,采用酶联免疫吸附检测技术(ELISA)进行抗HBsAg/HBeAg实验研究,以云芝肝泰、乙肝宁和乙肝冲剂作对照,结果认为没食子酸是一种抗HBsAg/HeAg的有效成分。     

重叠PCR合成蓖麻毒素B链基因及其在大肠杆菌中表达和抗原性分析

目的:表达蓖麻毒素B(RTB)链蛋白,为制备RTB特异性抗体奠定基础。方法:采用密码子优化软件对RTB编码基因序列重新优化设计,以18条长片段寡核苷酸引物经两步重叠PCR合成RTB基因片段,并在RTB的C端引入6×H is标签序列,插入表达载体pBV220,转化E.coliDH5α获得表达工程菌株,并对诱导表达条件和纯化条件进行优化。利用W estern印迹和间接ELISA方法鉴定重组RTB蛋白的抗原性。结果:表达工程菌株E.coliDH5α在42℃经诱导3 h后获得包涵体形式表达的目的蛋白,约占菌体总蛋白的65.48%,SDS-PAGE分析显示表达的蛋白区带与RTB相对分子质量相符,为29×103左右。表达产物经N i-NTA亲和层析法一步纯化,蛋白纯度达96.21%,并可得到约25 mg/L重组RTB蛋白。结论:在国内首次应用重叠PCR合成RTB基因并实现高表达,纯化重组RTB蛋白可被抗天然蓖麻毒素多抗所识别,为制备特异性抗体及建立快速检测方法打下了基础。     

赖氨酸脱羧酶试验筛检侵袭性大肠杆菌的应用研究

观察、比较了１３００株大肠杆菌的赖氨酸脱羧酶试验、动力、产气以及ＥＩＥＣ血清凝集和豚鼠角膜之间的关系，发现有９６．８％分离的大肠杆菌为赖氨酸脱羧酶试验阳性，无侵袭力，只有赖氨酸脱羧酶试验阴性、无动力的菌株才可产生角膜炎。从而使９６．８％的受检大肠杆菌免作血清学和动物试验。因此，作者认为赖氨酸脱羧酶试验、动力和产气三项试验可作为检测ＥＩＥＣ的初筛试验。     

青果中抗HBsAg/HBeAg成分的研究

青果（ＣａｎａｒｉｕｍａｌｂｕｍＲａｅｕｓｃｈ）经去果核，脱脂，酸水解，水解液回收溶剂后碱萃取，萃取液酸化，再以溶剂提取，回收溶剂，经柱层析，洗脱，重结晶，得纯品，得率０．５％。经测试：ｍｐ＝２３９℃，Ｍ＝１７０，经１ＨＮＭＲ、１３ＣＮＭＲ、ＩＲ、ＭＳ检测，鉴定为没食子酸，理化性质与标准品或图谱基本一致。用ＥＬＩＳＡ法检测，抗ＨＢｓＡｇ／ＨＢｅＡｇ均有效，其效果与没食子酸对照品基本相同，认为没食子酸是青果中抗乙肝病毒的有效成分之一。     

转化生长因子-β及其在运动损伤治疗中的应用

基因治疗的研究在世界各地广泛开展 ,迄今已取得了许多令人瞩目的成绩。一些在运动中极易受伤的组织如关节软骨、韧带、半月板等都是边缘性血管化或无血管组织 ,自发修复能力低下 ,临床治疗棘手 ,研究证实 ,基因治疗能有效地诱发和加速这些组织的损伤修复[1] 。通过基因转移 ,特别是导入生长因子的靶细胞 ,能明显提高治疗的特异性和时效性。目前转化生长因子 -β(transforminggrowthfactor-β,TGF -β)的应用研究方兴未艾。1　转化生长因子 -β的结构和生物学特点TGF -β是一类多功能的蛋白多肽 ,最初合成的TGF -β是以无活性的前体蛋白…     

国内外转化医学的主要转化模式与途径及其启示

回顾国内外转化医学目前初步形成的主要转化模式与途径,从T1~T4的4个阶段转化,通过学术路径转化到研究中心路径及基金资助路径进行分析,提出整合基金来源、规划转化医学基金、鼓励多学科合作,并对我国未来的转化医学发展进行探讨与建议。