套式聚合酶链反应及限制酶分析检测婴儿巨细胞病毒感染

人类巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)感染极为普遍 ,多数是隐性感染 ,但在免疫功能尚未健全的新生儿感染后可引起严重的巨细胞包涵体病 (ＣＩＤ) ,早期诊断对指导临床治疗及预后判断很重要。我们应用ｎＰＣＲ及ＥＬＩＳＡ方法 ,对 2 15例临床疑有巨细胞病毒感染的婴儿进行检测 ,现将结果报告如下。1　对象与方法1 1　对象　选自 1998年 10月～ 1999年 12月我院门诊及住院病人中早产儿、小于胎龄儿、黄疸、肝脾肿大、先天性巨结肠、先心、脑发育不良的患儿 2 15例 ,男 12 6例 ,女 89例 ,年龄为出生 2小时～ 3个月 ,测血清ＨＣＭＶ -ＩｇＭ、ＩｇＧ抗体…     

应用套式聚合酶链反应检测小儿白血病巨细胞病毒感染

目的：探讨巨细胞病毒（ＣＭＶ）与急性白血病（ＡＬ）的关系。方法：应用套式聚合酶链反应技术，分别对白血病患儿、应用免疫抑制剂和（或）输血的免疫抑制患儿、呼吸道感染患儿和正常小儿行晨尿中ＣＭＶ的检测。结果：白血病患儿ＣＭＶ的感染率为５２．７％ ，明显高于应用免疫抑制剂和（或）输血的免疫抑制患儿（３０％ ）、呼吸道感染患儿（８％ ）及正常小儿（５％ ）。结论：白血病患者ＣＭＶ感染率增高可能与其免疫功能低下有关，至于与白血病发生是否有关，值得进一步研究     

套式聚合酶链反应及限制酶分析对孕早期孕妇巨细胞病毒感染的研究

在人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）－ＡＤ１６９株直接早期基因的ＥｃｏＲＩＪ片段内，自行设计二对引物，建立套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）加限制酶分析检测ＨＣＭＶＤＮＡ，经实验证明有高度的特异性与敏感性，对其它疱疹类病毒及正常人基因组ＤＮＡ无交叉反应，一次性ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ－ＡＤ１６９株基因组的最小检出量为１００ｆｇ，而套式ＰＣＲ可达１０ｆｇ，经ＰｓｔＩ酶切后，得到的片段与设计相符，对５８名孕早期孕妇外周静脉血     

应用聚合酶链反应快速诊断巨细胞病毒感染

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测学龄前儿童尿标本中的巨细胞病毒（ＨＣＭＶ），并和常规细胞培养（ＣＣＣ）、早期抗原检测（ＤＥＡ）两法进行了比较。结果表明，１０５份尿标本中有４１份ＣＣＣ出现ＨＣＭＶ特征性细胞病变（ＣＰＥ），其中３８份标本ＰＣＲ检测为阳性，敏感性为９２．７％，其余６４份ＣＣＣ阴性，有６份ＰＣＲ检测阳性，特异性为９０．６％，与ＤＥＡ相比，ＰＣＲ检测的特异性和敏感性分别为９３．６％，９５．     

荧光定量聚合酶链反应在巨细胞病毒感染检测中的应用

目的 为了探讨巨细胞病毒检测的新途径及FQ-PCR技术在巨细胞病毒DNA诊断中的实用价值。方法 运用FQ-PCR技术对100例怀疑巨细胞病毒感染的患者进行DNA测定，并与微粒子发光法定量检测抗-CMV及金标免疫斑点法检测抗-CMV进行比较。结果 FQ-PCR技术阳性率为90％，微粒子发光法阳性率86％，金标法阳性率为62％。结论 FQ-PCR技术不但具有明显高于微粒子发光法及金标法的阳性率，而且具有准确定量分析的优点，为病人早期诊断与药物疗效观察提供了更为精确的病原学依据，具有更大的实用价值。     

定量PCR监测骨髓移植患者人巨细胞病毒感染

目的：用定量PCR方法监测骨髓移植患者中人巨细胞病毒（human cytomegalovirus HCMV)活动性感染。方法：用双标记探针水解的荧光定量PCR方法，检测4例骨髓移植患者移植前，后随访的血标本140份（其中血浆与外周血多形核细胞各50％）中HCMV，DNA拷贝数，并作动态分析，血浆标本中HCMV DNA的检出与HCMV IgG和IgM作平行比较。结果：4例患者除病例4外，均在术后30－50d间HCMV DNA拷贝数增加，同一时间外周血多形核细胞中HCMV DNA的拷贝数高于血浆，当给予适量更昔洛韦，则能抑制其继续升高，4例患者血清中HCMV IgM始终呈阴性，IgG始终呈阳性。结论：荧光定量PCR方法是用以监测髓移植患者中HCMV活动情况，指导临床适时用药的一种快速有效的方法。     

应用聚合酶链反应快速诊断巨细胞病毒感染

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测学龄前儿童尿标本中的巨细胞病毒（ＨＣＭＶ），并和常规细胞培养（ＣＣＣ）、早期抗原检测（ＤＥＡ）两法进行了比较。结果表明，１０５份尿标本中有４１份ＣＣＣ出现ＨＣＭＶ特征性细胞病变（ＣＰＥ），其中３８份标本ＰＣＲ检测为阳性，敏感性为９２．７％；其余６４份ＣＣＣ阴性，有６份ＰＣＲ检测阳性，特异性为９０．６％。与ＤＥＡ相比，ＰＣＲ检测的特异性和敏感性分别为９３．６％，９５．２％；提示ＰＣＲ检测临床标本中ＨＣＭＶ，不仅敏感特异，而且与ＣＣＣ，ＤＥＡ两法相比快速简便。     

聚合酶链反应检测人巨细胞病毒感染的研究近况

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaclion,PCR)已广泛用于人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)感染的诊断、预测HCMV病的发生、HCMV的免疫学研究,监测抗病毒治疗     

聚合酶链反应监测人巨细胞病毒感染

应用ＰＣＲ技术对疑为先天性ＨＣＭＶ感染的患儿及其母亲血、尿标本分别进行了ＨＣＭＶ－ＤＮＡ检测。开展了稳定的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ检测方法。患儿及其母亲尿标本经基因扩增后均测到１５１ｂｐＨＣＭＶ－ＤＮＡ片段，考虑患儿为先天性ＨＣＭＶ感染。     

聚合酶链反应在临床巨细胞病毒感染检测中的应用和研究

本文用聚合酶链反应(PCR)技术检测76份患儿尿标本中巨细胞病毒(CMV)DNA,其中32份尿标本做了病毒分离,另44例同时做血清CMV IgM抗体检测。结果PCR和病毒分离阳性符合率为100％,与CMV IgM抗体检出率无显著差异(P>0.05)。证明PCR方法具有特异性高、敏感性好、操作简便、检测周期短等优点,适用于临床进行CMV感染的快速诊断。     

套式聚合酶链反应检测丙肝病毒核酸

对７０例血清谷丙转氨酶（ＡＬＴ）异常、疑是丙型肝炎（ＨＣＶ）患者血清标本，用ＨＣＶ基因５＇非编码区引物作套式聚合酶链反应（套式ＰＣＲ），扩增产物为２６０ｂｐ，结果显示５２例丙型肝炎病毒核酸（ＨＣＶ－ＲＮＡ）阳性，１８例阴性，阳性率为７４．２％。１０例助血员血样ＨＣＶ－ＲＮＡ均为阴性。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析，阳性ＰＣＲ产物为ＨＣＶ－ＲＮＡ所特异。作者认为，采用高保守区核苷酸序列引物作套式ＰＣＲ检测ＨＣＶ－ＲＮＡ，可提高实验的敏感性和特异性。     

应用套式聚合酶链反应技术检测婴儿：肝炎综合症巨细胞病毒感染

婴儿肝炎综合症是一组由多种病毒引起，见于婴儿时期肝内病变的综合症，人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）是最重要的病因之一，可造成严重的先天畸形，对优生优育威胁极大。我们应用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对６４例临床诊断婴儿肝炎综合症患儿及其母亲进行尿ＨＣＭＶ检测...     

人巨细胞病毒的PCR检测

①目的 寻找早期快速检测人类巨细胞病毒（HCMV）感染的敏感方法。②方法 用HCMV即刻早期（IE）基因和晚期（LA）基因的7对待异性引物分别进行普通聚合酶链的反应（PCR），套式PCR（nPCR)和双重PCR，检测血清中的HCMV DNA，比较不同引物及不同PCR方法的灵敏度。③结果 同一基因的不同引物扩增HCMV DNA灵敏度差别无显著意义；LA基因的引物扩增灵敏度高于IE基因的引物；3种方法中以nPCR灵敏度最高，其次为双重PCR，普通PCR最低。④结论 用LA基因的特异性引物进行nPCR是早期快速检测HCMV感染的敏感方法。     

荧光定量聚合酶链反应在患儿巨细胞病毒感染检测中的应用

本文通过荧光定量聚合酶链反应在小儿巨细胞病毒感染检测中的应用，认为其是检测小儿先天性或获得性感染的重要手段。     

肾移植受者巨细胞病毒感染的诊治

巨细胞病毒 (cytomegalovirus,CMV)于 195 6年首次从 2例死亡婴儿的唾液腺及肾脏中被分离出来 ,刚开始被命名为“唾液腺病毒”。 196 0年 ,Weller等建议以巨细胞病毒来命名 ,并延用至今。CMV属于 β疱疹病毒家族 ,为双链DNA病毒。自 196 4年Hill等发现CMV是肾移植受者术后感染的重要致病原以来 ,CMV逐渐为肾移植界所关注 ,并越来越多地认识到CMV感染是降低肾移植受者人 /肾存活率的重要因素。本文就CMV感染对肾移植受者的影响 ,以及肾移植受者CMV感染的诊断和防治等方面进行简要综述。1　CMV感染对肾移植受者的影响肾移植受者术…     

聚合酶链反应检测新生儿巨细胞病毒

聚合酶链反应检测新生儿巨细胞病毒肇庆市第一医院（５２６０２０）蔡定邦，郭亮，李誉成，张传顺，陈享，陈伟红巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染后引起巨细胞包涵体病（ＣＩＤ），致全身多个器官损害并出现临床症状，使受损器官组织内出现巨细胞包涵体改变，多见于小婴儿。人巨...     

聚合酶链反应测定巨细胞病毒在移植术后的临床价值

目的用聚合酶链反应（PCR）诊断移植受着术后巨细胞病毒（CMV）的感染状况，建立一种新的快速诊断巨细胞病毒感染的方法并初步用于移植爱着。方法应用酶链免疫吸附法（ELISA）及PCR法分别测定230例移植术患者血清中巨细胞抗体（CMV-Ab）及巨细胞抗原（CMV-Ag）。结果ELISA法测得IgG和IgM阳性率分别为99.35％和15．42％，而PCR测得抗原阳性率为9．45％，两组在统计学上无显著性差异（P〉0．05）。结论移植术后存在不同程度的CMV感染，临床上应用PCR技术检测对早期诊断移植术后受者CMV感染具有重要意义。     

聚合酶链反应诊断婴儿肝炎综合征巨细胞病毒感染

采用ＰＣＲ及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）,对６８ 例婴儿肝炎综合征患儿进行晨尿ＣＭＶ－ ＤＮＡ 和血清ＣＭＶ－ＩｇＭ测定,并对其喂养方法进行调查。结果６８ 例中ＣＭＶ－ ＤＮＡ阳性２５ 例,ＣＭＶ－ＩｇＭ 抗体阳性１６ 例,两种检测方法均为阳性１０例;ＣＭＶ 肝炎患儿中纯母乳喂养率５２ ％ ,人工喂养２８．６ ％ ,混合喂养２７ ．３ ％ 。提示,ＰＣＲ诊断ＣＭＶ 感染具有很高的特异性,且敏感、方便、快速,可推广使用;ＣＭＶ 感染在病毒所致的婴儿肝炎综合征中占首位;虽然母乳喂养是ＣＭＶ 感染的途径之一,但围产期感染的致病率低,母乳仍为婴儿最佳食品。