氟哌啶醇对氯胺酮诱导的热休克蛋白70在大鼠海马中表达的影响

目的 研究氟哌啶醇对于氯胺酮诱导的热休克蛋白70（HSP70）在大鼠海马中表达的影响,探讨氟哌啶醇能否预防或治疗氯胺酮导致的脑损害。方法 选择48只大鼠,随机分为8组,分别在腹腔注射氯胺酮80．0mg/kg前后给予不同剂量氟哌啶醇（1．0,5．0,10．0mg/kg),24h后取鼠脑,应用HSP70单克隆抗体免疫组化染色检测大鼠海马中HSP70的表达,并用MIAS－2000图文分析系统分析大鼠海马HSP70阳性细胞百分率、阳性细胞密度和灰度值。结果 单独应用氯胺酮可在大鼠海马表达HSP70;预先给予氟哌啶醇能抑制氯胺酮诱导的HSP70表达,且随着剂量的增加,其抑制作用增强;在使用氯胺酮后给予氟哌啶醇,不能减少HSP70的表达。结论 氯胺酮可诱导HSP70在海马的表达,提示海马的神经元可能受到损害;氟哌啶醇可以预防氯胺酮所致的神经元损害,但对已造成的神经元损害无治疗作用。     

异丙酚对氯胺酮诱导的热休克蛋白70基因在大鼠后扣带回皮质区表达的影响

目的：观察异丙酚对氯胺酮诱导的热休克蛋白70（HSP70）基因在大鼠后扣带回皮质区表达的影响，探讨异丙酚抑制氯胺酮所致精神症状和神经损害的机制。方法：雄性Wistar大鼠30只，随机分为生理盐水5ml组、氯胺酮100mg/kg组、异丙酚100mg/kg组、异丙酚50mg/kg-氯胺酮100mg/kg组、异丙酚100mg/kg-氯胺酮100mg/kg组。于用药后24h，大鼠断头取脑，用半定量RT－PCR技术和免疫组织化学方法检测各组HSP 70 mRNA和HSP 70蛋白在大鼠后扣带回皮质区的表达。结果：氯胺酮可明显诱导HSP 70 mRNA与HSP 70蛋白在大鼠后扣带回皮质区的表达；异丙酚自身不能诱导HSP 70基因的表达；预先给予异丙酚可显著抑制氯胺酮诱导的HSP 70 mRNA和HSP 70蛋白在这一区域的表达，且抑制效应呈剂量依赖性。结论：异丙酚可抑制氯胺酮的HSP 70 mRNA与HSP 70蛋白在大鼠后扣带回皮质区的表达，这可能是其预防或减轻氯胺酮所致精神症状和神经损害的机制之一。     

氯胺酮对严重烧伤大鼠心肌HSP 70表达的影响

目的 评价氯胺酮对严重烧伤大鼠心肌HSP 70表达的影响,探讨其心肌保护的机制.方法 雄性Wistar大鼠72只,随机分为正常对照组(C组,n=8)、烧伤组(BI组,n=32)和氯胺酮组(K组,n=32).K组或BI组于烧伤模型制备成功后15 min分别肌肉注射氯胺酮20 mg/kg或等容量生理盐水,于给药后3、6、12和24 h分别随机处死8只大鼠,取心肌组织,采用Western blot方法检测心肌HSP 70的表达,电镜下观察给药后3 h时心肌细胞的病理学结果.结果 与C组相比,K组和BI组给药后3、6、12及24 h时HSP 70表达上调(P<0.05);与B组相比,K组给药后3、6 h时HSP 70表达上调(P<0.05).K组较BI组给药后3 h时心肌病理损伤减轻.结论 氯胺酮通过上调心肌HSP 70表达,减轻严重烧伤早期大鼠心肌损伤.     

异丙酚及地西泮对氯胺酮引起的大鼠大脑皮质c-fos基因表达及神经元损害的影响

目的 观察异丙酚和地西泮对氯胺酮诱导的大鼠大脑皮质Glu(谷氨酸)释放和c-fos基因表达的影响,探讨异丙酚抑制氯胺酮中枢神经系统副作用的基因机制。方法 将28只Wistar大鼠随机分为生理盐水3 ml-生理盐水1 ml组,生理盐水3 ml-氯胺酮 100 mg/kg组,异丙酚100 mg/kg-氯胺酮100 mg/kg组,地西泮10 mg/kg-氯胺酮:100 mg/kg组。于用药后30 min,检测c-fos mRNA水平。另取大鼠,用药注射后2 h取大脑皮质检测Glu含量、组织含水量和Fos蛋白阳性细胞率。结果 氯胺酮注射后30 min引起大脑皮质c-fos mRNA表达增高,2 h时大脑皮质Glu、水含量和Fos阳性细胞率与生理盐水组相比增加(P<0.01)。异丙酚和地西泮预处理抑制了c-fos基因表达以及组织谷氨酸、水含量的增加,且抑制程度不同。结论 c-fos基因参与了异丙酚和地西泮抑制氯胺酮引起的精神症状和神经元损害的基因机制;异丙酚抑制作用强于地西泮。     

丙泊酚对缺氧原代胎鼠大脑神经元热休克蛋白70表达的影响

目的 探讨丙泊酚的脑保护机制.方法 培养12 d的胎鼠大脑神经元,随机分为丙泊酚组(n=12)、缺氧组(n=6)和对照组(n=6).丙泊酚组于缺氧前1 h换入含有14 μmol/L和56 μmol/L丙泊酚的培养液,随后缺氧30 min.于缺氧后1、3、6、8、24、48 h分别用原位杂交法和免疫组化法观察三组热休克蛋白70(HSP70)mRNA、热休克同源蛋白70(HSC70)mRNA及HSP70的表达.结果 缺氧30 min可诱导神经元HSPT0 mRNA、HSC70 mRNA和HSPT0表达,表达高峰分别为24、24和48h.14 μmol/L和56 μmol/L丙泊酚可诱导缺氧鼠脑神经元HSP70 mRNA和HSC70 mRNA表达高峰提前至8和6 h;56 μmol/L丙泊酚可使缺氧鼠脑神经元HSP70表达高峰提前至24 h.结论 丙泊酚可从转录和翻译两个水平促进缺氧鼠脑神经元HSP70的表达,产生延迟神经保护作用.     

咪唑安定对氯胺酮诱导的c-fos基因在大鼠后扣带回皮质区表达的影响

目的 观察咪唑安定对氯胺酮诱导的c-fos基因在大鼠后扣带回皮质区表达的影响，探讨咪唑安定预防或减轻氯胺酮所致精神症状及神经损害的机制。方法 雄性Wistar大鼠30只，随机分为生理盐水5ml组、咪唑安定15mg／kg组、氯胺酮100mg／kg组、咪唑安定15mg／kg加氯胺酮100mg／kg组、氯胺酮100mg／kg加咪唑安定15mg／kg组。咪唑安定与氯胺酮两药间隔15min给药，所用药物均由腹腔注射。各组动物于用药后2h开胸经心脏灌流脑固定，用免疫组织化学方法检测后扣带回皮质区c-fos蛋白的表达，用彩色病理图像分析系统测定c-fos阳性细胞的百分率和阳性细胞的密度。结果氯胺酮可明显诱导c-fos蛋白在大鼠后扣带回皮质区的表达；咪唑安定自身不能诱导c-fos的表达；咪唑安定预处理可显著抑制氯胺酮诱导的c-fos在这一区域的表达；先用氯胺酮后给予咪唑安定仅能部分抑制c-fos的表达。结论 咪唑安定预处理可抑制氯胺酮诱导的c-fos基因在大鼠后扣带回皮质区的表达，这可能是其预防或减轻氯胺酮所致精神症状和神经损害的机制之一。     

参附注射液预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤后HSP70和HSP90表达的影响

目的探讨参附注射液(SF)单次预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用。方法30只雄性SD大鼠随机均分为单纯缺血-再灌注组(MCAO组)、SF预处理组(SF组,缺血前30 min经腹腔注射SF 10 ml/kg)和假手术组(Sham组)。MCAO组和SF组采用颈内动脉尼龙线线栓法致右侧大脑中动脉栓塞120 min。观察再灌注后24 h时脑组织病理学改变,检测热休克蛋白(HSP)70和HSP90表达。结果再灌注24 h后,SF组脑组织病理学损害轻于MCAO组。Sham组未见HSP70及HSP90表达。MCAO组可见到较多的HSP70免疫阳性细胞,明显高于Sham组(P<0.01);SF组HSP70免疫阳性细胞分布较MCAO组广泛,数量明显增多,胞浆及胞核都可见HSP70免疫阳性细胞[(1.341±0.464)vs.(0.856±0.574)](P<0.05),而SF组HSP90的表达与MCAO组相仿[(0.006±0.013)vs.(0.005±0.007)]。结论SF预处理可通过增加HSP70表达而对大鼠脑缺血-再灌注损伤起保护作用。     

经高温处理后大鼠肝中热休克蛋白70的表达

目的　研究热休克蛋白 70 (HSP 70 )在高温处理后大鼠肝中不同时段的表达。方法　SD大鼠随机分成A组 (对照组 )和B组 (高温组 ,42℃ ,2 0min)。A组分别在麻醉后 4,8,2 0 ,3 6,72h取肝脏组织 ;B组置于自行设计的加热装置分别热处理后 4,8,2 4,3 6,72h取肝脏组织。用免疫组织化学、原位杂交方法检测A ,B两组不同时段HSP70表达 ,并对比其差异。结果　高温处理组各时段HSP70的表达差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;8～ 2 4h达最高峰 (P <0 .0 1)。高温处理后HSP70的表达明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论　高温可诱导HSP70在大鼠肝中的高表达 ,处理后不同时段表达的量不同。     

O-ClcNAc修饰在谷氨酰胺诱导内毒素休克大鼠心肌组织HSP70表达中的作用

目的 探讨O位-N-乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)修饰在谷氨酰胺诱导内毒素休克大鼠心肌组织热休克蛋白70(HSP70)表达中的作用.方法 健康雄性SD大鼠32只,随机分为4组(n=8),正常对照组(C组)仅静脉输注乳酸钠林格氏液;LPS组、G+LPS组和A+G+LPS组均静脉注射LPS10 mg/kg,G+LPS组给予LPS前1 h静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg,A+G+LPS组给予LPS前1h依次静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg和O-位-N-乙酰葡萄糖胺糖基转移酶抑制剂四氧嘧啶50 mg/kg.注射LPS后6 h处死大鼠,取心肌组织,测定O-GlcNAc和HSP70的表达水平.结果 与C比较,其他各组心肌O-GlcNAc和HSP70的表达水平均上调(P＜0.05);与LPS组比较,G+LPS组心肌O-GlcNAc和HSP70的表达水平上调(P＜0.05);与G+LPS组比较,A+G+LPS组心肌O-GlcNAc和HSP70的表达水平下调(P＜0.05).结论 O-GlcNAc修饰参与了谷氨酰胺诱导内毒素休克大鼠心肌HSP70表达上调.     

亚高温盆腔区域热疗诱导原位的大鼠浸润性膀胱肿瘤HSP70表达的研究

目的 研究亚高温盆腔区域热疗能否诱导原位的大鼠浸润性膀胱肿瘤热休克蛋白70(HSP70)表达增加.方法 制备原位的大鼠浸润性膀胱肿瘤动物模型,分为对照组(A组)、单次热疗组(B组)、间隔24 h再次热疗组(C组)、间隔72 h再次热疗组(D组).从体外加热大鼠盆腔至41℃,持续1 h.用胶体金免疫电镜、免疫组化、蛋白芯片检测肿瘤细胞HSP70表达.结果 A组HSP70定位于肿瘤细胞质,B、C、D组HSP70均定位于肿瘤细胞核、线粒体和细胞质.B、C、D组HSP70阳性表达率均高于A组,差异有统计学意义(P(0.01),但B、C、D组组间差异无统计学意义(P=0.101).B、C、D组HSP70表达量高于A组,差异有统计学意义(P＜0.01);C、D组HSP70表达量均高于B组,差异有统计学意义(P＜0.01);C组HSP70表达量高于D组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 不同方案的亚高温盆腔区域热疗均能诱导原位的大鼠浸润性膀胱肿瘤发生热休克反应,上调HSP70表达;亚高温盆腔区域热疗是一种温和的加热方法,它不能使全部肿瘤细胞发生热休克反应;HSP70表达率与热疗次数无关,但表达量与热疗次数呈正相关;间隔24 h再次热疗的HSP70表达量最高.     

氯胺酮对法洛四联症手术患者血浆HSP70表达的影响

目的观察氯胺酮对法洛四联症矫治术患者血浆热休克蛋白70(heat shock proteins 70,HSP70)表达的影响。方法 20例择期行法洛四联症矫治术的患者,ASAⅢ~Ⅳ级,随机分为氯胺酮组(K组)和对照组(C组),每组各10例。K组于麻醉诱导和转流开始时静脉注射氯胺酮2 mg/kg,C组予等容量的生理盐水。分别于麻醉诱导前即刻(T0)、CPB开始后30 min(T1)、主动脉开放后30 min(T2)、停机后1 h(T3)采桡动脉血5 ml,以酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中的HSP70浓度。结果组内与T0时比较,两组患者T1、T2、T3时HSP70水平均升高(P0.05或P0.01);组间比较,K组在T1、T2、T3时血浆HSP70水平均高于C组(P0.05或P0.01)。结论氯胺酮可增加血浆HSP70水平,改善心肌缺血再灌注损伤,提高TOF矫治术的麻醉质量。     

Central nuclei and spinal pathways in feedback inhibitory spinal cord potentials in ketamine-anaesthetized rats

It has been suggested that heterosegmentally activated slow positive potentials (HSP), recorded from the spinal cord of rat and humans, are feedback inhibitory potentials. The present study was carried out to define ascending and descending spinal tracts and the sites of central nuclei involved in the production of these HSP, and the effects of ketamine on these central nuclei. The spinal cords in ketamine- anaesthetized rats were transected to determine the ascending and descending tracts involved in the production of hindpaw (HP) and forepaw (FP) HSP, respectively. Lesions of the brain at various levels were performed stereotactically during ketamine anaesthesia. Dorsal one- third resection of the cord at the T8-9 level did not affect HSP significantly, while contralateral lesion of the dorsal two-thirds of the cord decreased FP-HSP but not HP-HSP during ketamine. Bilateral transection of the ventral one-third of the cord abolished both HSP. Ablation of the cerebral cortex, cerebellum, thalamus, midbrain and pons did not affect HSP significantly. However, transection of the middle medulla decreased, while transection of the most caudal part of the medulla completely abolished both HSP. Ketamine decreased HSP even in the medulla-spinal cord preparation and the segmental slow positive wave in spinalized animals. In ketamine-anaesthetized rats, ascending and descending spinal tracts involved in the production of HP-HSP and FP-HSP are located bilaterally in the ventrolateral quadrant and in the contralateral lateral funiculus and ventrolateral quadrant, respectively. Principal central nuclei feeding back HSP might be situated diffusely in the medulla down to the caudal part. Ketamine is suggested to suppress these inhibitory feedback potentials predominantly at, and partly even below, the level of the medulla.      

Ketamine reduces mortality of severely burnt rats, when compared to midazolam plus fentanyl

Ketamine can provide protective effects, through its anti-inflammatory properties, as shown in animal models of septic shock and endotoxemia, and has elicited the heat-shock response (HSR) in experimental studies. The HSR has reduced the mortality after severe burns in rats. This study has tested the hypothesis that ketamine could be protective in experimental burns and that it could generate the HSR. One hundred and twenty adult male Fischer rats were randomly divided into five groups. Rats in the first group (n = 20) were sham-anesthetized. In the second group (n = 20), rats were anesthetized with ketamine and shaved. In the third group (n = 20) rats were anesthetized with midazolam plus fentanyl and shaved. In the fourth group (n = 30), rats were anesthetized with ketamine, shaved and submitted to 29% body surface third-degree burns using a brass bar. In the fifth group (n = 30), rats were anesthetized with midazolam plus fentanyl, shaved and submitted to 29% body surface third-degree burns using a brass bar. Mortality rates were measured at 1, 2, 3, 5, 7, 10, 15 and 25 days. Liver and lung samples were collected from all groups for heat-shock protein 70 (HSP70) detection. No animals died in the first, second or third group. Animals anesthetized with ketamine showed significantly decreased mortality, as compared to those anesthetized with midazolam plus fentanyl, from day 2 to day 10 (P < 0.01, Fischer's exact test) and from day 10 to day 25 (P < 0.05). HSP70 was positive in the lungs of animals from all groups, without any differences among them, and was found in none of the liver samples. In conclusion, the mortality was significantly lesser in ketamine-anesthetized burnt rats than in burnt animals anesthetized with midazolam plus fentanyl. Ketamine has not elicited the HSR in this model of experimental burns and, therefore, its protective effects were not shown to be mediated through this mechanism.     

氯胺酮对大鼠不同脑区NOS活性和NO产量的影响

目的：了争氯胺酮对大鼠脑ＮＯＳ活性和ＮＯ产量的影响。方法：１６只ＳＤ大鼠,随机分为二组,分别ｉｐ生理盐水１０ｍｌ／ｋｇ（对照组）和氯胺酮１００ｍｇ／ｋｇ。用分光光度法测定ＮＯＳ活性和ＮＯ产量。结果：大鼠ｉｐ氯胺酮１００ｍｇ／ｋｇ能明显抑制小脑、大脑皮层、海马的ＮＯＳ活性和减少ＮＯ的产量（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）,脑干的ＮＯ产量亦较对照组减少（Ｐ〈０．０１）,ＮＯＳ活性下降,但无统计学意义。结论     

氯胺酮对脑冷冻伤后自由基和脑水肿的影响

目的 探讨N-甲基-D-天门冬氨酸(N—methyl—D-aspartate，NMDA)受体非竞争性拮抗药氯胺酮对鼠脑冷冻伤后脑内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)和脑水肿的影响。方法 49只SD大鼠随机分为假手术组、未治疗组和氯胺酮治疗组。采用液氮局部冷冻左侧鼠脑30s制作冷冻伤模型，分别于2、6、24h处死动物后，用分光光度法测10％脑组织匀浆中SOD活性和MDA产量。结果 脑组织含水量在冷冻伤后显著升高，并随时间延长而加重。氯胺酮治疗后脑组织含水量没有明显减少；脑组织SOD活性在2、6h高于未治疗组，但24h后SOD活性无显著差异。MDA含量比未治疗组在相应时段显著减少。结论 自由基是脑水肿形成的重要因素，氯胺酮能减轻冻伤脑组织中SOD活性的抑制，减少MDA生成，但对脑水肿无明显治疗作用。     

氯胺酮联合亚低温对窒息性心跳骤停大鼠复苏后脑缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨氯胺酮联合亚低温对窒息性心跳骤停大鼠复苏后脑缺血再灌注损伤的影响.方法 健康Wistar大鼠50只,4.0～4.5个月,雌雄各半,体重410～510 g,随机分为5组(n=10):假手术组(S组)仅经动、静脉穿刺置管;窒息性心跳骤停组(ACA组)制备窒息性脑缺血模型;氯胺酮组(K组)窒息前5 min腹腔注射氯胺酮100 mg/kg;亚低温组(MH组):窒息开始后维持直肠温30～35℃;氯胺酮+亚低温组(K+MH组):窒息前5 min腹腔注射氯胺酮100 mg/kg,窒息开始后维持直肠温30～35 ℃.成功复苏后,取脑组织,测定脑含水量和海马神经元p-caspase-3的表达水平.结果 与S组比较,ACA组和K组脑含水量升高,p-caspase-3表达上调,MH组和K+MH组p-caspase-3表达上调(P＜0.01),脑含水量差异无统计学意义(P＞0.05);与ACA组比较,MH组和K+MH组脑含水量降低,p-caspase-3表达下调,K组p-caspase-3表达下调(P＜0.01),脑含水量差异无统计学意义(P＞0.05);与K组比较,K+MH组脑含水量降低,p-caspase-3表达下凋,MH组脑含水量降低(P＜0.01),p-caspase-3表达差异无统计学意义(P＞0.05);与MH组比较,K+MH组p-caspase-3表达下调(P＜0.01),脑含水量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 氯胺酮联合亚低温可减轻窒息性心跳骤停大鼠复苏后的脑缺血再灌注损伤,该效应较两者单独应用时增强.     

热休克蛋白70抑制大鼠颅脑损伤诱生型一氧化氮合酶mRNA的表达

目的 探讨热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）对大鼠感染性脑损伤（感脑）诱生型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）的表达及一氧化氮（ＮＯ）合成的影响。方法 将大鼠７２只随机分为正常对照组、感染性脑损伤组和热休克处理组,每组又ｈ共３个时间点。采用百日咳菌液通过左颈内动脉注入制成大鼠感染性脑损伤模型,用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交技术检测各组各时间点的ＨＳＰ７０的表达,同时用原位杂交方法检测各组ｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达及Ｇｒｉｅｓｓ法测定各组的ＮＯ含量的变化。结果 Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交分析结果表明,大鼠感脑各组及正常组有一定量的ＨＳＰ７０表达,而热休克处理组的ＨＳＰ７０的量明显高于感脑组（Ｐ〈０．０１）。原位杂交结果提示ｉＮＯＳ在感脑的大脑皮质神经细胞４、８、２４ｈ开始表达,可见明显的杂交信号,而休克处理组仅有少量的阳性颗粒。ＮＯ含量在感脑