不同剂量氯胺酮对大鼠脑组织热休克蛋白70表达的影响

氯胺酮为脑组织中兴奋性氨基酸受体NMDA型的非竞争性受体拮抗药,实验证实有神经保护作用[1]。热休克蛋白70(heatshockprotein,HSP70)的主要功能是维持细胞蛋白自稳,提高细胞对应激的耐受,使细胞耐受缺血能力增强[2]。本文采用腹腔注射氯胺酮,研究大鼠脑组织海马热休克蛋白的表达,探讨氯胺酮神经保护的机理。材料与方法一、动物分组　由湖北医科大学动物中心提供健康、雄性Wistar大鼠20只,体重(200～250)g。随机分成2组:生理盐水对照组(A组,n=6);氯胺酮组(n=14),再按不同剂量分成2小组,即B组(50mg/kg)(n=7)、C组(100mg/kg)(n=7)。根据大…     

异丙酚对氯胺酮诱导的热休克蛋白70基因在大鼠后扣带回皮质区表达的影响

目的：观察异丙酚对氯胺酮诱导的热休克蛋白70（HSP70）基因在大鼠后扣带回皮质区表达的影响，探讨异丙酚抑制氯胺酮所致精神症状和神经损害的机制。方法：雄性Wistar大鼠30只，随机分为生理盐水5ml组、氯胺酮100mg/kg组、异丙酚100mg/kg组、异丙酚50mg/kg-氯胺酮100mg/kg组、异丙酚100mg/kg-氯胺酮100mg/kg组。于用药后24h，大鼠断头取脑，用半定量RT－PCR技术和免疫组织化学方法检测各组HSP 70 mRNA和HSP 70蛋白在大鼠后扣带回皮质区的表达。结果：氯胺酮可明显诱导HSP 70 mRNA与HSP 70蛋白在大鼠后扣带回皮质区的表达；异丙酚自身不能诱导HSP 70基因的表达；预先给予异丙酚可显著抑制氯胺酮诱导的HSP 70 mRNA和HSP 70蛋白在这一区域的表达，且抑制效应呈剂量依赖性。结论：异丙酚可抑制氯胺酮的HSP 70 mRNA与HSP 70蛋白在大鼠后扣带回皮质区的表达，这可能是其预防或减轻氯胺酮所致精神症状和神经损害的机制之一。     

氟哌啶醇对氯胺酮诱导的热休克蛋白70在大鼠海马中表达的影响

目的 研究氟哌啶醇对于氯胺酮诱导的热休克蛋白70（HSP70）在大鼠海马中表达的影响,探讨氟哌啶醇能否预防或治疗氯胺酮导致的脑损害。方法 选择48只大鼠,随机分为8组,分别在腹腔注射氯胺酮80．0mg/kg前后给予不同剂量氟哌啶醇（1．0,5．0,10．0mg/kg),24h后取鼠脑,应用HSP70单克隆抗体免疫组化染色检测大鼠海马中HSP70的表达,并用MIAS－2000图文分析系统分析大鼠海马HSP70阳性细胞百分率、阳性细胞密度和灰度值。结果 单独应用氯胺酮可在大鼠海马表达HSP70;预先给予氟哌啶醇能抑制氯胺酮诱导的HSP70表达,且随着剂量的增加,其抑制作用增强;在使用氯胺酮后给予氟哌啶醇,不能减少HSP70的表达。结论 氯胺酮可诱导HSP70在海马的表达,提示海马的神经元可能受到损害;氟哌啶醇可以预防氯胺酮所致的神经元损害,但对已造成的神经元损害无治疗作用。     

次声作用后脑皮层组织热休克蛋白70的表达及其意义

次声是频率低于 2 0Ｈｚ的声波。近年来 ,次声作为工业、交通及住宅环境等污染因素已逐渐引起人们的关注[1] 。次声作用于机体最为首要的是引起脑的损害。次声作用后中枢神经系统的功能紊乱 ,尤其是思维及记忆功能障碍[2 ] 是否与次声影响了额、颞叶脑皮层功能与结构有关 ?这是我们拟探讨的问题。一、材料与方法1.分组与模型制作 :上海产雄性成年ＳＤ大鼠 40只 ,体重 (2 0 0± 15 ) ｇ。随机分为正常对照、次声作用 1次、7次及14次组 ,每组各 10只。采用本校次声压力仓。实验用 8Ｈｚ 12 0ｄＢ的次声 ,除对照组每日按规定次数在次声压力仓内…     

氯胺酮-咪唑安定对感染性休克大鼠心肌HSP70表达的影响

目的 探讨氯胺酮（KTM）-咪唑安定（M）在感染性休克中的心肌保护作用及可能的作用机制。方法 选择健康成年SD大鼠112只,随机分入对照组（NS组、E组）和试验组（EM组、EK组、EKM组）。NS组为正常对照组,E组给予LPS 20mg/kg ip,EK组、EKM组、EM组在同E组处理前分别给予KTM 80mg/kg ip,KTM 80mg/kg M 0.5mg/kg ip,M 0.5mg/kg ip,1h后追加半剂。在LPS处理2h后及E组大鼠临终时取心肌用免疫组化方法测HSP70的表达,并观察各组大鼠存活时间。结果 E组HSP70表达强于NS组,EK、EKM组HSP70 表达强于E组,存活率也高于E组,且随时间延长HSP 70表达呈增强趋势;E组、EM组和HSP 70表达及存活率无明显差异。结论 氯胺酮可增强感染性休克时大鼠心肌HSP 70的表达,可能是氨胺酮保护感染心肌的机制之一;咪唑安定-氯胺酮复合应用不影响氨胺酮保护感染心肌的作用。     

氯胺酮-咪唑安定对感染性休克大鼠心肌环磷酸腺苷及热休克蛋白70表达的影响

目的：探讨氯胺酮-咪唑安定在感染性休克中的心肌保护作用及作用机制。方法：选择健康成年SD大鼠104只，随机分为对照组(NS组、E组)和试验组(EM组、EK组、EKM组)。NS组为正常对照组，E组给予LPS20mg／kg ip，EK组、EKM组、EM组同级处理前分别给KTM80mg／kg ip、KTM80mg／kg M0．5mg／kgip、M0．5mg／kg ip，1h后追加半剂。临终时取各组大鼠心肌放免法测cAMP水平及免疫组化方法测HSP70的表达，并观察各组大鼠存活时间。同时监测EK、EKM组KTM血药浓度。结果：E组cAMP水平显著低于NS组及EK、EKM组，E组HSP70表达强于NS组，EK、EKM组HSP70表达强于E组，E，EM组、EK、EKM组cAMP、HSP70表达无明显差异。结论：氯胺酮可升高感染性休克时心肌cAMP水平，保护感染心肌，其机制可能为增强心肌HSP70的表达。咪唑安定-氯胺酮复合应用不影响氯胺酮保护感染心肌作用。     

氯胺酮—咪唑安定对感染性休克大鼠血清肿瘤坏死因子—α及心肌热休克蛋白70表达的影响

目的 探讨氯胺酮-咪唑安定对感染性休克大鼠的心肌保护作用及可能的使用机制。方法 选择健康成年SD大鼠112只，随机分为对照组（NS组和E组）和实验组（EM组、EK组及EKM组）。NS组为正常对照组，E组给予内毒素（LPS）20mg/kg，ip；EK组、EKM组及EM组同E组，但给LPS前分别给予KTM80mg/kg,ip,KTM80mg/kg M0.5mg/kg ip,M0.5mg/kg ip，1小时后追加半剂。在LPS处理2小时后及E组大鼠临终时测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及心肌热休克蛋白70（HSP70）的表达，并观察各组大鼠存活时间。结果 E组TNF-α显著高于NS组、EK和EKM组，E组HSP70表达强于NS组，但弱于EK及EKM组，E组与EM组，EK与EKM组的TNF-α、HSP70表达无明显差异。结论 氯胺酮可降低感染性休克时血清TNF-α，减轻其心肌损害。其机制可能为增强心肌HSP70的表达。咪唑安定-氯胺酮复合应用不影响氯胺酮保护感染心肌的作用。     

创伤性休克患者血浆热休克蛋白70表达及其意义

目的　　检测创　伤性休克患者外周血中热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）的表达水平并探讨其与创伤性休克发生发展　的关系。方法　　采用Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ法分别测定３６例创伤性休克患者　（观察组）及３０例正常人（对照组）血浆ＨＳＰ７０表达水平。结果　　ＨＳ　Ｐ７０在创伤性休克组为（４　３０１．３±１　１５５．３），与正常对照组（６　０９２．３±１　２３３．５）比较，差异　有高度显著性（Ｐ＜０．０１）；２２例休克得到控制者ＨＳＰ７０为（６　１０２．２±１　２９１．６）较入院时　（４　２７３．６±１　０９９．３）明显升高，差异有极显著意义（Ｐ＜０．０１）。结论　　创伤性休克患者血浆ＨＳＰ７０表达水平明显下降，可能是创伤后休克发生发展的一个　重要因素，而且与预后有密切关系。     

缺血缺氧性脑损伤中热休克蛋白70的表达及其意义

缺血缺氧可引起多种生化改变，最终结果是导致蛋白质的变性。在细胞内变性和异常蛋白质增加的同时，热休克蛋白70（HSP70）的表达也相应增加。HSP70的特殊改变在缺血缺氧性脑损伤的病理生理过程中发挥着重要作用。     

丙泊酚对缺氧原代胎鼠大脑神经元热休克蛋白70表达的影响

目的 探讨丙泊酚的脑保护机制.方法 培养12 d的胎鼠大脑神经元,随机分为丙泊酚组(n=12)、缺氧组(n=6)和对照组(n=6).丙泊酚组于缺氧前1 h换入含有14 μmol/L和56 μmol/L丙泊酚的培养液,随后缺氧30 min.于缺氧后1、3、6、8、24、48 h分别用原位杂交法和免疫组化法观察三组热休克蛋白70(HSP70)mRNA、热休克同源蛋白70(HSC70)mRNA及HSP70的表达.结果 缺氧30 min可诱导神经元HSPT0 mRNA、HSC70 mRNA和HSPT0表达,表达高峰分别为24、24和48h.14 μmol/L和56 μmol/L丙泊酚可诱导缺氧鼠脑神经元HSP70 mRNA和HSC70 mRNA表达高峰提前至8和6 h;56 μmol/L丙泊酚可使缺氧鼠脑神经元HSP70表达高峰提前至24 h.结论 丙泊酚可从转录和翻译两个水平促进缺氧鼠脑神经元HSP70的表达,产生延迟神经保护作用.     

热休克大鼠缺血肾脏诱导型热休克蛋白的表达

目的研究在热休克预处理大鼠整体后,大鼠肾脏在冷缺血环境下诱导型HSP70的表达.方法用热休克方法和药物川芎嗪分别对动物整体进行预处理后,通过组织切片和免疫组化方法观察诱导型HSP70的表达情况,利用计算机图像灰度分析法测定不同缺血时间下大鼠肾脏组织的灰度值,以间接量化反映诱导型HSP70的表达.结果在非缺血状态下处理组的灰度值较对照组有明显增强(P<0.001);在不同的缺血时间下,肾脏诱导型HSP70的表达有一定规律性对照组在缺血30min时表达最高;热休克两组表达更高,时间持续到60min;川芎嗪组较热休克组次之,但高于对照组.结论热休克、缺血和川芎嗪均可以诱导肾脏组织诱导型HSP70的表达,并且在时间和量上有一定规律性.     

热休克蛋白70对肾脏缺血预处理保护作用的研究

目的 :研究缺血预处理对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用 ,观察热休克蛋白 70 (HSP70 )的表达变化并探讨其作用机制。方法 :建立大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型并进行缺血预处理 ,实验分组 :假手术组 (S组 )、缺血再灌注组 (IR组 )和缺血预处理组 (PC组 )。各组再灌注后检测血清肌酐 (Scr)、肾组织丙二醛 (MDA)含量 ,肾组织石蜡切片苏木精伊红染色以及免疫组化染色。结果 :PC组Scr值、肾小管病理评分、肾组织中MDA含量明显低于IR组 (P <0 .0 5 ) ,PC组与S组比较差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;HSP70免疫组化染色 :S组未见明显的阳性反应产物 ,PC组和IR组肾小管上皮细胞胞质可见棕黄色阳性反应产物。计算机图像分析显示PC组灰度值显著高于IR组 (P <0 .0 1)。结论 :缺血预处理对肾脏缺血再灌注损伤有明显保护作用 ,其作用机制可能与HSP70本身的细胞保护作用及HSP70的细胞内抗氧化作用有关     

氯胺酮对应激大鼠脑组织不同区域c-fos mRNA表达的影响

目的检测氯胺酮对应激大鼠c-fos基因表达的影响,从基因水平探讨药物防治应激反应的分子机制。方法21只Wistar大鼠随机分成3组对照组(C组)、单纯电刺激组(S组)腹腔分别注入生理盐水2ml、氯胺酮处理组腹腔分别注入氯胺酮lOOmg·kg     

热休克蛋白70 mRNA在膀胱癌中的表达及与细胞凋亡的关系

目的　探讨热休克蛋白 70 (HSP 70 )mRNA在膀胱移行细胞癌中的表达及与细胞凋亡的关系。　方法　应用原位杂交法对 6 0例膀胱癌组织中HSP 70mRNA进行检测 ,原位DNA末端标记法 (TUNEL)检测细胞凋亡情况。　结果　 6 0例标本中 ,HSP 70mRNA阳性表达率为 5 6 .7% (34/ 6 0 )。HSP 70mRNA表达随肿瘤分级增高而增加 (P <0 .0 5 ) ;G1,G2 和G3 各级间两两比较 ,HSP 70mRNA表达差异也有显著性意义 (P <0 .0 5 )。随着肿瘤分期增高 ,HSP 70mRNA表达随之增加 (P <0 .0 5 ) ;Ⅰ ,Ⅱ和Ⅲ各期间两两比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。肿瘤细胞凋亡指数 (AIs)随恶性程度的增高显著降低 (P <0 .0 5 ) ;HSP 70mRNA表达率和AIs呈负相关 (rs=- 0 .6 85 ,P <0 .0 5 )。　结论　HSP 70mRNA表达随膀胱癌恶性程度增加显著增高 ,细胞凋亡则显著降低 ,提示HSP 70表达能够抑制膀胱癌细胞的凋亡。     

热激活蛋白70识别蛋白在脊髓缺血再灌注损伤后表达变化及其意义

目的:探讨热激活蛋白70识别蛋白(heat shock cognate protein 70,HSC70)在兔脊髓缺血再灌注损伤(spinal cord ischemia-reperfusion injury,SCIRI)后表达变化及其意义。方法:随机将36只新西兰白兔分成6组(每组6只),采用Zivin法建立兔SCIRI模型。A组只显露腹主动脉而不阻断血流,30min后关闭腹腔,取材(L3~L5段脊髓);B组阻断腹主动脉血流30min后关闭腹腔,取材;缺血再灌注组(C、D、E、F组)阻断腹主动脉血流30min后停止夹闭,再灌注6、12、24、48h时采用改良Tarlov评分分别进行运动功能评价后取材。应用差异蛋白质组学技术荧光差异双向凝胶电泳联合质谱分析筛选出应激相关蛋白HSC70,利用免疫印迹对质谱进行印证,结合免疫组化研究其在脊髓内的时空变化特点。结果:成功建立SCIRI兔模型,SCIRI后实验动物后肢功能逐渐好转,C~F组改良Tarlov评分分别为1.167±0.753、1.667±0.516、2.668±0.516和2.167±0.752分,再灌注24h达SCIRI早期最好水平,再灌注48h略有下降。应激相关蛋白HSC70在A组印迹清晰,B组印迹轻微加强,C组和D组印迹再次加强,E组印迹显著减弱至最低,F组印迹灰度回归至再灌注6~12h水平。A组灰质中部体积较小中间神经元胞浆见轻度免疫反应;B组灰质各部位神经元胞浆免疫反应程度与A组相当;C组胶质细胞核免疫反应加重;D组神经元免疫反应减轻,但胶质细胞及雪旺细胞核免疫反应较强烈;E组神经元免疫反应进一步减弱,低于A组水平;F组神经元胞浆免疫反应加重,胶质细胞及雪旺细胞核免疫反应仍强烈。结论:HSC70参与SCIRI发生和发展过程,可作为SCIRI预防、诊断和治疗的靶点。     

氯胺酮对严重烧伤大鼠心肌HSP 70表达的影响

目的 评价氯胺酮对严重烧伤大鼠心肌HSP 70表达的影响,探讨其心肌保护的机制.方法 雄性Wistar大鼠72只,随机分为正常对照组(C组,n=8)、烧伤组(BI组,n=32)和氯胺酮组(K组,n=32).K组或BI组于烧伤模型制备成功后15 min分别肌肉注射氯胺酮20 mg/kg或等容量生理盐水,于给药后3、6、12和24 h分别随机处死8只大鼠,取心肌组织,采用Western blot方法检测心肌HSP 70的表达,电镜下观察给药后3 h时心肌细胞的病理学结果.结果 与C组相比,K组和BI组给药后3、6、12及24 h时HSP 70表达上调(P<0.05);与B组相比,K组给药后3、6 h时HSP 70表达上调(P<0.05).K组较BI组给药后3 h时心肌病理损伤减轻.结论 氯胺酮通过上调心肌HSP 70表达,减轻严重烧伤早期大鼠心肌损伤.     

丙泊酚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注时脑组织热休克蛋白70基因和蛋白表达的影响

目的观察丙泊酚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注时脑组织热休克蛋白(HSP)70 mRNA和HSP70蛋白表达的影响,以探讨其脑保护的机制。方法采用大脑中动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型。60只雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(I-R组)和丙泊酚组(P组),每组20只。大鼠脑缺血2 h,然后进行再灌注。在再灌注3、6、24、72 h断头取脑组织,采用原位杂交法和免疫组织化学染色检测大鼠脑组织HSP70 mRNA和HSP70蛋白的表达。结果局灶性脑缺血-再灌注后,HSP70 mRNA和HSP70蛋白的表达增加(P<0.01),但HSP70 mRNA表达较早,分布范围较广泛,而HSP70蛋白表达以半暗带区为主。应用丙泊酚能显著地促进脑缺血-再灌注后脑组织中HSP70 mRNA和HSP70蛋白的表达(P<0.01),与脑缺血-再灌注组相比较,HSP70 mRNA和HSP70蛋白不仅表达增多、范围增加,而且还能延缓下降(P<0.05)。结论丙泊酚能促进大鼠局灶性脑缺血-再灌注时HSP70的表达,这可能是其脑保护作用的部分机制。