银杏叶对脑梗死新西兰兔内质网应激-c-JunN末端激酶相关通路的影响

目的 探讨银杏叶提取物在兔脑梗死中的作用。方法 用血栓注入法建立兔脑梗死模型。将模型新西兰兔随机分为模型组和低、中、高剂量实验组,每组12只;另取12只正常新西兰兔只进行血管分离,作为假手术组。低、中、高剂量实验组分别按25,50和100 mg·kg^-1·d^-1的剂量灌胃给予银杏叶提取物溶液;假手术组和模型组均灌胃给予等量0.9%NaCl。5组新西兰兔每天给药1次,连续给药4周。干预4周后,用改良Zea Longa法进行神经功能缺陷评分,用蛋白质印迹法检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、增强子结合蛋白（CHOP）和c-Jun N末端激酶（JNK）的表达水平。结果 干预4周后,低、高剂量实验组和模型组、假手术组的神经功能缺陷评分分别为（3.42±0.59）,（2.75±0.48）,（3.97±0.64）和0分,GRP78蛋白相对表达量分别为1.57±0.10,1.13±0.07,1.95±0.08和0.95±0.12,CHOP蛋白相对表达量分别为1.88±0.14,1.20±0.08,2.52±0.49和1.02±0.11,JNK蛋白相对表达...     

纳洛酮对七氟醚诱导的胎鼠神经干细胞凋亡的影响

目的 探讨纳洛酮对七氟醚诱导的胎鼠神经干细胞（NSCs）凋亡的影响。方法 将NSCs分为空白组、对照组和低、中、高剂量实验组。空白组给予正常培养;对照组通入含3%七氟醚的混合气体培养48 h;低、中、高剂量实验组均通入含3%七氟醚的混合气体,并分别加入含0.1,1.0和10.0μmol·L^-1纳洛酮溶液的DMEM-12F培养基共培养48 h。用流式细胞仪检测NSCs的凋亡情况,用蛋白质印迹法检测沉默信息调节因子1（SIRT1）、磷脂肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）和哺乳动物西罗莫司靶蛋白（mTOR）蛋白的表达水平。结果 低、高剂量实验组和对照组、空白组的NSCs凋亡率分别为（32.25±4.83）%,（16.77±2.52）%,（43.59±6.53）%和（8.66±1.29）%;SIRT1蛋白表达水平分别为0.50±0.08,0.99±0.15,0.20±0.03和1.27±0.19;p-PI3K/PI3K蛋白相对表达水平分别为0.85±0.13,0.47±0.04,1.06±0.16和0.25±0.03;p-AKT/AKT蛋白相对表达水平分别为0...     

钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ在非霍奇淋巴瘤中的功能和作用研究

目的 探讨钙离子-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）在非霍奇淋巴瘤中的功能及作用机制。方法 人Burkitt’s淋巴瘤Raji细胞随机分为空白组、对照组、实验组和联合组。空白组给予RPMI1640培养基进行培养；对照组先给予pCaMKⅡshRNA-1和pCaMKⅡshRNA-2转染后，再给予RPMI1640培养基进行培养；实验组先给予pcDNA3.1/CaMKⅡ真核表达质转染后，再给予RPMI1640培养基培养；联合组先用pcDNA3.1/CaMKⅡ真核表达质粒转染后，再给予含20μmol·L^-1 SP600125的RPMI1640培养基进行培养。干预48 h后，用流式细胞仪检测细胞凋亡率，用Western blot法检测淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、磷酸化即刻早期原癌基因（p-c-Jun）和磷酸酸化c-Jun N末端激酶（p-JNK）蛋白的表达情况。结果 干预48 h后，实验组、对照组、联合组和空白组的细胞凋亡率分别为（29.57±4.38）%,（5.23±0.89）%,（21.24±0.97）%和（11.85±1.24）%,Bcl-2蛋白相对表达量分别为0....     

硼替佐米联合5-杂氮胞苷抑制JAK/STAT信号通路对T细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响北大核心CSCD

目的研究硼替佐米联合5-杂氮胞苷对T细胞淋巴瘤细胞增殖、凋亡及机制。方法对照组Jurkat细胞以3μmol·L^(-1)5-杂氮胞苷处理,低、中、高剂量实验组以10,30,50 nmol·L-1的硼替佐米+3μmol·L^(-1)5-杂氮胞苷处理,空白组加等量生理盐水。用噻唑蓝(MTT)法及流式细胞术检测细胞增殖、凋亡,用蛋白免疫印迹法检测细胞JAK/STAT信号通路蛋白表达。结果干预72h后,对照组和低、中、高剂量实验组细胞增殖抑制率分别为(39.05±2.63)%,(31.26±2.43)%,(60.12±3.05)%,(72.16±3.64)%。干预24,48,72 h后,中、高剂量实验组细胞增殖抑制率均高于对照组,且随硼替佐米浓度增大及作用时间延长逐渐升高(P<0.05)。干预48 h后,对照组和低、中、高剂量实验组细胞凋亡率均显著高于空白组。对照组和低、中、高剂量实验组细胞增殖指数低于空白组,凋亡率高于空白组(均P<0.05);且实验组增殖指数均低于对照组,细胞凋亡率均高于对照组(均P<0.05)。空白组、对照组和低、中、高剂量实验组Janus激酶1(JAK1)蛋白相对表达量为2.68±0.22,2.15±0.31,1.82±0.25,1.53±0.15,0.89±0.14,TYK2蛋白相对表达量为3.84±0.56,2.25±0.46,2.37±0.39,2.26±0.33,1.28±0.26;对照组和低、中、高剂量实验组Janus激酶1(JAK1)、TYK2蛋白相对表达量均低于空白组(均P<0.05),低、中、高剂量实验组JAK1蛋白及高剂量实验组TYK2蛋白相对表达量低于对照组(均P<0.05)。结论硼替佐米可协同增强5-杂氮胞苷抑制T细胞淋巴瘤细胞的增殖,并促其凋亡,其作用机制与显著抑制JAK/STAT信号通路中蛋白表达有关。     

GRP78、GRP94及CHOP在亚砷酸钠致肝损伤过程中的表达变化

目的 观察亚砷酸钠致肝损伤过程中肝脏内GRP78、GRP94及CHOP的表达变化并探讨其在亚砷酸钠致肝损伤中的可能作用.方法 Wistar大鼠20只,随机分为正常组及亚砷酸钠组,每组各10只.亚砷酸钠组大鼠自由饮用含200 mg/L的NaAsO2自来水制备砷中毒致肝损伤模型,正常组大鼠则自由饮用自来水,时间为8周.采用免疫组织化学技术检测肝组织中GRP78、GRP94及CHOP蛋白的表达变化;采用PCR技术检测肝脏中GRP78、GRP94及CHOP mRNA的变化;同时应用TUNEL法检测肝细胞凋亡.结果 免疫组织化学技术检测发现亚砷酸钠组大鼠肝脏中GRP78、GRP94及CHOP在蛋白水平的表达较正常组大鼠显著增加(P＜0.05);PCR检测结果显示亚砷酸钠组大鼠肝脏中GRP78、GRP94及CHOP mRNA的表达也较正常组显著增加(P＜0.05);此外与正常组比较,亚砷酸钠组大鼠肝脏中肝细胞凋亡明显增多(P＜0.05).结论 GRP78、GRP94及CHOP在基因及蛋白水平表达上调可能参与了亚砷酸钠致肝损伤的发生发展过程.     

阿托伐他汀对2型糖尿病大鼠心肌GRP78和CHOP表达的影响

探讨阿托伐他汀对2型糖尿病大鼠心肌组织内质网应激相关因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）和葡萄糖调节蛋白78（GRP78）表达的影响。将Wistar大鼠随机分为正常对照组（NC组）、糖尿病心肌病模型组（DCM组）和阿托伐他汀治疗组（DCM+Ato组）。采取高脂肪饲料喂养加一次性腹腔注射链脲佐菌素的方式制备2型糖尿病心肌病大鼠模型,DCM+Ato组大鼠予阿托伐他汀干预8周。采用左室插管评估大鼠心功能,HE染色观察心肌组织病理学改变,TUNEL法测定心肌细胞凋亡水平,Western blot检测心肌组织的GRP78和CHOP蛋白表达量。DCM组较NC组细胞肥大,排列紊乱,形态不规则,DCM+Ato组较DCM组改善。与NC组比较,DCM组左室舒张末期压（LVEDP）显著升高,左室收缩压（LVSP）和左室压力上升或下降最大速率（LV±dp/dt max）显著降低,细胞凋亡率升高,GRP78、CHOP表达明显升高（P＜0.05）;与DCM组比较,DCM+Ato组LVEDP显著降低,LVSP和LV±dp/dt max显著升高,细胞凋亡率降低,GRP78、CHOP表达明显下降（P＜0.05）。阿托伐他汀能有效减轻2型糖尿病大鼠的心肌病理损伤及改善心功能,可能与下调内质网应激相关因子GRP78、CHOP的表达,减少心肌细胞凋亡有关。     

葛根素基于内质网蛋白核心 /信号分子 /C/EBP同源蛋白通路对脂多糖诱导成骨细胞骨保护素及核因子 -κB受体 mRNA表达的影响

目的 探讨基于内质网蛋白核心/信号分子/C/EBP同源蛋白(GRP78/PERK/CHOP)通路研究葛根素对脂多糖(LPS)诱导成骨细胞骨保护素(OPG)和核因子-κB受体(RANKL)mRNA表达的影响.方法 体外培养小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1,采用随机数字表法分为对照组、模型组、4-苯基丁酸钠盐(内质网应激抑制剂,4-PBA)组、葛根素组、葛根素+4-PBA组,除对照组,其余各组以LPS处理MC3T3-E1细胞建立成骨细胞炎症模型,以茜素红染色、碱性磷酸酶(ALP)试剂盒分别检测各组细胞矿化结节相对比例、ALP活性,判定细胞成骨分化情况;以酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测各组细胞培养基上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;以实时荧光定量(qRT-PCR)检测各组细胞成骨相关基因(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)mRNA水平及OPG、RANKL mRNA水平;以免疫印迹检测细胞GRP78、PERK、CHOP蛋白表达.结果 与对照组相比,模型组MC3T3-E1细胞矿化结节相对比例[(8.23±1.18)％比(100.00±0.00)％]、ALP活性[(0.49±0.12)U/mgprot比(1.57±0.35)U/mgprot]、细胞Runx2[(0.41±0.05)比(1.01±0.13)]、OPN[(0.39±0.04)比(1.02±0.15)]、OCN[(0.40±0.03)比(0.99±0.14)]及OPG mRNA[(0.41±0.11)比(1.03±0.17)]水平明显降低(P<0.05),细胞培养基上清液中TNF-α[(602.43±20.01)pg/mL比(381.86±18.16)pg/mL]及IL-6水平[(483.63±16.61)pg/mL比(280.15±11.18)pg/mL]、细胞RANKL mRNA[(3.03±0.62)比(0.99±0.13)]水平及GRP78[(1.31±0.24)比(0.19±0.05)]、PERK[(1.23±0.27)比(0.33±0.08)]、CHOP蛋白[(1.21±0.28)比(0.31±0.07)]表达明显升高(P<0.05).与模型组相比,4-PBA组、葛根素组、葛根素+4-PBA组MC3T3-E1细胞矿化结节相对比例、ALP活性、细胞Runx2、OPN、OCN及OPG mRNA水平均升高(P<0.05),细胞培养基上清液中TNF-α及IL-6水平、细胞RANKL mRNA水平及GRP78、PERK、CHOP蛋白表达均降低(P<0.05).与4-PBA组、葛根素组分别相比,葛根素+4-PBA组MC3T3-E1细胞矿化结节相对比例、ALP活性、细胞Runx2、OPN、OCN及OPG mRNA水平均升高(P<0.05),细胞培养基上清液中TNF-α及IL-6水平、细胞RANKL mRNA水平及GRP78、PERK、CHOP蛋白表达均降低(P<0.05),4-PBA组与葛根素组上述各项指标比较均差异无统计学意义(P>0.05).结论 葛根素可上调OPG mRNA水平,下调RANKL mRNA水平,降低LPS诱导的成骨细胞炎症反应,拮抗LPS对成骨细胞成骨分化的抑制作用,可能是通过下调GRP78/PERK/CHOP通路实现的.     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠肝组织GRP78及CHOP表达的影响

目的：观察银杏叶提取物（GbE）对肝纤维大鼠内质网应激通路相关分子GRP78、CHOP表达的影响,探讨GbE抗肝纤维的作用机制。方法：采用40％的CCl4皮下注射（3mL.Kg-1.d-1,2次/周,首剂加倍） 6周诱导大鼠肝纤维化模型,同时分别以200、100、50mg.Kg-1.d-1的GbE灌胃干预6周,空腹取肝组织,RealTime-PCR及免疫组化法分别检测肝组织GRP78及CHOP基因的mRNA及蛋白表达。结果：肝组织GRP78和CHOP的mRNA及蛋白的表达较正常组明显增加（P〈0.05 P〈0.01）;应用高、中、低剂量GbE干预后,大鼠肝组织GRP78和CHOP基因的mRNA及蛋白表达显著下降（P〈0.05 P〈0.01）。结论：肝纤维化大鼠肝脏发生了ERS反应,GbE下调肝纤维化大鼠肝组织内质网应激通路相关分子GRP78和CHOP的mRNA及蛋白的表达可能是其抗肝纤维化作用的机制之一。     

单酰基甘油脂肪酶抑制药通过磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶信号通路对胃癌细胞生物学活性的影响北大核心CSCD

目的 探究单酰基甘油脂肪酶(MAGL)抑制药对胃癌细胞侵袭、迁移及磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路的影响。方法 体外培养人胃癌细胞系MKN-45,分为空白组和低、中、高剂量实验组。空白组给予正常DMEM培养基培养,不作任何处理;低、中、高剂量实验组分别用含1,10和20μmol·L^(-1) MAGL抑制药的DMEM培养基进行培养。用噻唑蓝法、划痕实验、Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移、侵袭能力,用蛋白质印迹法检测PI3K/AKT信号通路蛋白的表达情况。结果 中、高剂量实验组和空白组的细胞抑制率分别为(9.12±0.48)%,(23.78±0.65)%和0.00%,侵袭细胞数分别为(221.64±28.66),(118.58±18.75)和(308.21±36.36)个,划痕愈合率分别为(18.36±2.88)%,(11.03±1.72)%和(27.05±4.10)%,PI3K蛋白相对表达水平分别为0.64±0.05,0.48±0.07和1.18±0.08,p-AKT蛋白相对表达水平分别为0.74±0.06,0.45±0.09和0.97±0.07。中、高剂量实验组的上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 MAGL抑制药可能通过调控PI3K/AKT信号通路,抑制胃癌MKN-45细胞增殖、侵袭及转移。     

Apelin-13对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用

摘要: 目的 观察 Apelin-13 对大鼠脑缺血-再灌注损伤（CIRI）的保护作用并探讨其机制。方法 50 只 SD 雄性大鼠随机分为假手术组、 CIRI 模型组及低剂量(0.1 μg/kg)、 中剂量(1.0 μg/kg)和高剂量(10.0 μg/kg) Apelin-13 处理组。线栓法建立大鼠脑 CIRI 模型, 在缺血 2 h 后再灌注 72 h, Apelin-13 处理组于再灌注前 30 min 侧脑室注射 Apelin-13。对各组大鼠神经功能进行评分, TTC 染色观察并计算脑梗死体积百分比, Western blot 检测损伤侧大脑皮质中内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白 78 （GRP78） 和 C/EBP 同源蛋白 （CHOP） 的表达。结果 与假手术组比较, CIRI 模型组大鼠神经功能评分显著增加 （P < 0.05）, 脑梗死体积百分比达到 （47.63 ± 5.81） %; 损伤侧大脑皮质中 GRP78 和 CHOP 的表达量显著升高（均 P < 0.05）。与 CIRI 模型组相比, 低剂量组差异无统计学意义（P > 0.05）; 中剂量和高剂量 Apelin-13 处理组大鼠神经功能缺损明显改善, 肌力明显增强, 脑梗死体积百分比显著降低, 损伤侧大脑皮质中 GRP78 和 CHOP 的表达显著降低（均 P < 0.05）。结论 Apelin-13 对大鼠 CIRI 有保护作用, 其机制可能与抑制内质网应激有关。     

莪术醇对肝星状细胞内质网应激和凋亡的作用研究

目的 探究莪术醇对肝星状细胞内质网应激和凋亡的作用，阐明其抗肝纤维化作用的机制。方法 将肝星状细胞分为对照组(正常培养)、模型组(1μg·mL^-1脂多糖)和低、中、高剂量实验组(在模型组基础上分别使用12.5、25.0和50.0 mg·L^-1莪术醇处理)组。用噻唑蓝法检测莪术醇对肝星状细胞活力的影响；用流式细胞术检测各组细胞凋亡发生情况和各组活性氧(ROS)的表达；用蛋白质印迹法检测各组B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、内质网应激相关蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶RNA样内质网激酶p-PERK)、半胱氨酸蛋白酶12(caspase12)蛋白表达情况；用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ型(collagenⅠ)、胶原蛋白Ⅲ型(collagenⅢ)mRNA表达情况。结果 对照组、模型组、高剂量实验组细胞ROS表达水平分别为(21.09±4.51)%、(32.78±2.90)%和(72.81±6.89)%; GRP78蛋白相对表达水...     

GRP78在胃癌、慢性萎缩性胃炎及浅表性胃炎组织中的表达及临床意义

目的研究葡萄糖调节蛋白78（GRP78）在胃癌、慢性萎缩性胃炎及浅表性胃炎组织中的表达及临床意义。方法 RT‐PCR法检测胃癌、慢性萎缩性胃炎和浅表性胃炎各25例新鲜组织中GRP78基因表达;免疫组化法检测胃癌、慢性萎缩性胃炎和浅表性胃炎各60例组织中GRP78蛋白表达。分析GRP78蛋白表达与临床病理参数间的相关性。结果胃癌组织中GRP78 mRNA的表达水平高于慢性萎缩性胃炎和浅表性胃炎（1.26±0.18 vs ．0.89±0.25和0.29±0.09）（ P＜0．01）。胃癌组织中GRP78蛋白的阳性表达率亦高于慢性萎缩性胃炎和浅表性胃炎（78.3％ vs ．46.6％和6.7％）（P＜0．01）。胃癌组织中GRP78蛋白表达与胃癌分化程度、分期、淋巴结转移等明显相关（P＜0．05或P＜0．01）。结论 GRP78在胃癌中呈高表达;检测GRP78的表达可能有助于预防及早期诊断胃癌。     

摄食抑制因子对2型糖尿病大鼠胰岛素的影响

目的 研究摄食抑制因子（Nesfatin-1）对2型糖尿病（T2DM）模型大鼠中胰岛素的影响。方法 用高糖高脂饲料喂养SD大鼠和腹腔注射链脲佐菌素制备T2DM模型大鼠。将模型大鼠随机分为模型组和低、高剂量实验组，每组3只；另取9只正常大鼠随机分为空白组、低剂量对照组和高剂量对照组，每组3只。空白组和模型组在第三脑室注射人工脑脊液（aCSF）10μL;低剂量对照组和低剂量实验组注射Nesfatin-1（5 pmol）10μL,高剂量对照组和高剂量实验组注射Nesfatin-1（50 pmol）10μL。用酶联免疫吸附法检测胰岛素含量，用实时荧光定量聚合酶链反应检测蛋白激酶B（AKT）、磷酸烯醇式丙酮酸激酶（PEPCK）和葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-pase）mRNA的表达水平。结果 低、高剂量对照组和低、高剂量实验组及模型组的血清胰岛素含量分别为（24.39±1.44）,（22.95±1.90）,（19.51±0.97）,（20.28±1.43）和（17.84±2.33）mU·L^-1,AKT mRNA表达量分别为0.90±0.11,0.91±0.27,0.71±0....     

淫羊藿苷对脂多糖诱导成骨细胞凋亡及GRP78/PERK/CHOP通路的影响

摘 要 目的：探讨淫羊藿苷（ICA）对脂多糖（LPS）诱导成骨细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白78/蛋白激酶R样内质网激酶/C/EBP同源蛋白（GRP78/PERK/CHOP）通路的影响。 方法: 采用大鼠骨髓基质干细胞定向诱导分化为成骨细胞的方法,将成骨细胞随机分成5组：对照组（只含成骨细胞）、LPS组（成骨细胞中加入终浓度为500 ng·ml-1 LPS）、ICA低、中、高剂量组（分别在LPS组基础上加入终浓度为1,10,100 μmol·L-1 ICA）。采用CCK 8法检测细胞增殖情况,采用对硝基苯棕榈酸酯（PNPP）法检测成骨细胞碱性磷酸酶（AKP）活性的变化情况,采用ELISA法检测成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白表达情况,采用AnnexinV/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用Western blot检测凋亡及GRP78/PERK/CHOP通路相关蛋白表达情况。 结果: 骨髓基质干细胞经定向诱导后,符合成骨细胞形态学表现,AKP染色呈阳性反应,Ⅰ型胶原蛋白免疫组织化学染色结果显示：细胞质染色呈棕黄色;与对照组相比,LPS组细胞48 h时的吸光度（A）值、AKP活性、Ⅰ型胶原蛋白和B淋巴细胞瘤 2基因（Bcl 2）蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,细胞凋亡率、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 3（cleaved caspase 3）、Bax、GRP78、磷酸化的PERK（p PERK）、磷酸化α亚基的真核起始因子2（p eIF2α）、CHOP蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）;与LPS组相比,ICA各剂量组细胞48 h时的A值、AKP活性、Ⅰ型胶原蛋白和Bcl 2蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）,细胞凋亡率、cleaved caspase 3、Bax、GRP78、p PERK、p eIF2α、CHOP蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,且呈剂量依赖性（P＜0.05）。     

三七皂苷R1对CD34^+人急性髓系白血病细胞的增殖抑制作用及对线粒体相关通路的影响北大核心CSCD

目的研究三七皂苷R1对CD34^+人急性髓系白血病(AML)细胞的增殖抑制作用及对线粒体相关通路的影响。方法将CD34^+AML细胞Kasu-mi-1分为对照组和低、中、高剂量实验组。低、中、高剂量实验组分别用10,20,40μmol·L^(-1)三七皂苷R1处理,对照组加等量生理盐水处理。分别用溴化四唑蓝(MTT)法、JC-1染色法检测细胞增殖及细胞线粒体膜电位,用蛋白免疫印迹法测定细胞中线粒体通路相关蛋白表达。结果培养12,24,36,48 h后,实验组细胞存活率明显低于对照组(P<0.05),且随三七皂苷R1浓度的升高细胞存活率逐渐降低(P<0.05)。低、中、高剂量实验组细胞线粒体膜电位较对照组降低(均P<0.05);中、高剂量实验组细胞线粒体膜电位较低剂量实验组降低(均P<0.05)。对照组和低、中、高剂量实验组Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.96±0.15,0.67±0.22,0.41±0.12,0.22±0.09,Bcl-2相关X蛋白(Bax)相对表达量分别为0.72±0.26,1.33±0.35,1.71±0.39,2.09±0.53,低、中、高剂量实验组细胞Bcl-2蛋白相对表达量低于对照组,Bax蛋白相对表达量均高于对照组(均P<0.05),实验组随三七皂苷R1浓度的升高Bcl-2蛋白相对表达量逐渐降低,Bax蛋白相对表达量逐渐升高(P<0.05)。结论三七皂苷R1可抑制CD34^+人AML细胞增殖,可能是通过激活线粒体通路促进细胞凋亡而发挥作用的。     

芹菜素对丙烯腈致大鼠肝内质网应激的影响

目的探讨芹菜素(apigenin,AP)对丙烯腈(acrylonitrile,ACN)致大鼠肝内质网应激(ERS)信号通路的影响。方法 40只雄性SD大鼠随机分为对照组(玉米油)、ACN组(50 mg/kg·bw ACN)、低AP干预组(234 mg/kg·bw AP+50 mg/kg·bw ACN)和高AP干预组(468 mg/kg·bw AP+50 mg/kg·bw ACN),灌胃量均为5 ml/kg·bw,1次/d,每周6 d,共13周。末次染毒结束后,次日处死大鼠。分光光度法测定肝组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活力;RT-PCR检测ERS相关基因GRP78、CHOP和Caspase-12 mRNA表达水平;Western blot检测ERS相关蛋白GRP78、CHOP和Caspase-12表达水平。结果 ACN组大鼠肝SOD活力、GSH-Px活力和GSH含量均低于对照组,MDA含量高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);低、高AP干预组大鼠肝SOD活力、GSH含量均高于ACN组,GSH-Px活力低于ACN组,差异有统计学意义(P0.05)。ACN组大鼠肝组织GRP78、CHOP和Caspase-12 mRNA及蛋白表达水平均高于对照组(P0.05)。低AP干预组大鼠肝组织GRP78、CHOP和Caspase-12 mRNA相对表达水平均低于ACN组(P0.05),差异有统计学意义。高AP干预组大鼠肝组织GRP78和CHOP mRNA相对表达水平均低于ACN组(P0.05),GRP78、Caspase-12蛋白表达水平均低于ACN组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ACN可致大鼠肝氧化损伤,激活ERS信号通路,AP可减轻ACN引起的ERS。     

槲皮素对婴幼儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响

目的 研究槲皮素对婴幼儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响和机制。方法 分离婴幼儿血管瘤内皮细胞,分成对照组、实验低剂量组(80μmol·L^-1槲皮素)、实验中剂量组(160μmol·L^-1槲皮素)、实验高剂量组(320μmol·L^-1槲皮素)、实验高剂量+pcDNA组(转染阴性对照载体,320μmol·L^-1槲皮素)、实验高剂量+高迁移率蛋白1(HMGB1)组(转染HMGB1过表达载体,320μmol·L^-1槲皮素处理)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析细胞增殖情况,用流式细胞术分析细胞凋亡情况,用蛋白质印迹法检测HMGB1、剪切的胱天蛋白酶3(C-caspase-3)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达。结果 对照组、实验低剂量组、实验中剂量组、实验高剂量组、实验高剂量+pcDNA组、实验高剂量+HMGB1组细胞中HMGB1蛋白表达水平分别为0.89±0.09,0.76±0.08,0.63±0.06,0.55±0.05,0.56...     

砷及MPST过表达对SH-SY5Y细胞GRP78/CHOP通路的影响

目的探讨内质网应激是否参与亚砷酸钠(NaAsO2)神经毒性损伤,明确3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)过表达是否调节砷诱导的内质网应激。方法通过构建MPST基因慢病毒表达载体来获得稳定表达外源MPST基因的SH-SY5Y细胞株作为SH-MPST过表达组,另设空载体转染细胞为SH-PEB组,染砷组(NaAsO2组),内质网应激阻断剂TUDCA组,TUDCA预处理染砷组。Western blot法分别检测过表达MPST、染砷及TUDCA预处理后细胞内GRP78和CHOP蛋白表达的变化。结果单纯MPST过表达不影响SH-SY5Y细胞内GRP78、CHOP蛋白的表达水平;经NaAsO2处理后,SH-PEB细胞内GRP78、CHOP蛋白明显上调(P<0.01),而被内质网应激阻断剂TUDCA所拮抗;MPST过表达则抑制砷对GRP78、CHOP蛋白的上调(P<0.01);然而,TUDCA预处理则明显逆转MPST过表达对GRP78、CHOP蛋白的影响(P<0.01)。结论GRP78/CHOP内质网应激通路参与了砷诱导的神经毒性损伤;MPST过表达可降低砷诱导的内质网应激水平。     

川楝素对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响

目的研究川楝素对体外卵巢癌细胞恶性生物学行为的作用及其可能的作用机制。方法体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,分为低、中、高剂量实验组和对照组,分别以50,60,70μmol·L^-1川楝素与等量生理盐水干预,分别干预24,48和72 h。用活细胞计数(CCK-8)法检测人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制情况;用细胞划痕实验检测人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力;用Transwell小室实验检测人卵巢癌SKOV3细胞的侵袭能力;用蛋白质印迹(Wb)法检测人卵巢癌SKOV3细胞LIM激酶1(LIMK-1)、丝切蛋白(cofilin)和磷酸化cofilin(p-cofilin)蛋白的表达水平。结果干预72 h时,低、中、高剂量实验组人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制率分别为(56.41±2.69)%,(68.37±3.56)%和(79.51±4.64)%;干预72 h时,对照组和低、中、高剂量实验组人卵巢癌SKOV3细胞的迁移率分别为(92.43±3.51)%,(47.32±4.11)%,(36.25±3.42)%和(18.62±2.69)%;侵袭率分别为(91.48±3.73)%,(76.56±4.12)%和(34.51±3.22)%,(10.36±2.91)%;LIMK-1蛋白相对表达量分别为0.86±0.11,0.59±0.14,0.53±0.12和0.28±0.09;cofilin蛋白相对表达量分别为0.79±0.08,0.82±0.12,0.80±0.10和0.81±0.11;p-cofilin蛋白相对表达量分别为0.90±0.10,0.82±0.12,0.55±0.08和0.24±0.07。随川楝素作用浓度增大,低、中、高剂量实验组人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制率逐渐升高;与对照组比较,低、中、高剂量实验组人卵巢癌SKOV3细胞迁移率、侵袭率及LIMK-1和p-cofilin蛋白相对表达量均显著降低,且呈剂量依赖性(均P<0.05)。结论川楝素具有体外抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭的作用,其作用机制可能与抑制人卵巢癌SKOV3细胞LIMK-1/cofilin信号通路有关。     

德都红花-7味散对四氯化碳所致慢性肝损伤大鼠凋亡蛋白表达的影响

目的 观察德都红花-7味散对四氯化碳（CCl₄）所致肝纤维化大鼠B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA表达的影响。方法 将40只SD雄性大鼠按体质量分层随机分为空白组、模型组、对照组和实验组,每组10只。用腹腔注射CCl₄的方法建立肝纤维化模型。空白组和模型组均灌胃给予等量蒸馏水;对照组灌胃给予21.0 mg·kg^-1水飞蓟宾;实验组灌胃给予0.3 g·kg^-1德都红花-7味散。4组大鼠每天给药1次,连续给药7周。用Masson染色法观察肝纤维化的情况,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠肝组织中Bcl-2和Bax mRNA的表达水平。结果 实验组、对照组、模型组和空白组的胶原百分比分别为（7.99±1.71）%,（8.82±2.63）%,（14.84±4.45）%和（0.80±0.29）%,Bcl-2 mRNA表达量分别为0.64±0.13,0.78±0.18,1.07±0.43和0.48±0.16,Bax mRNA表达量分别为0.95±0.10,0.98±0.26...