灵芝酸D通过调控p53/Bax通路对人结直肠肿瘤细胞的作用机制研究

目的 探究灵芝酸D（GAD）对人结直肠肿瘤细胞凋亡的影响及其分子机制。方法 将直肠癌细胞系SW620分为6组：空白对照组（完全培养基）、低(5μmol·L^-1 GAD)、中(10μmol·L^-1 GAD)、高(20μmol·L^-1 GAD)3个剂量实验组、Pifithrin-α组(3μg·mL^-1 Pifithrin-α)和联合组(3μg·mL^-1 Pifithrin-α+20μmol·L^-1 GAD)。用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测细胞增殖能力,用Caspase-3/Caspase-8/Caspase-9检测试剂盒检测相应蛋白活性,用蛋白质印迹法检测抑癌蛋白p53（p53）,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）的蛋白质的表达水平。结果 空白对照组和低、中、高3个浓度实验组细胞增殖活性分别为（96.33±2.62）%,（95.00±1.63）%,（70.33±5.91）%和（49.00±3.56）%;4组Caspase-...     

三氧化二砷对胃癌细胞凋亡与自噬的影响北大核心CSCD

目的探讨三氧化二砷对HGC-27胃癌细胞凋亡与自噬的影响,联用自噬抑制剂氯喹后进一步观察三氧化二砷的抗癌作用。方法取对数生长期的HGC-27胃癌细胞,分为对照组(正常培养的细胞)、不同浓度实验组(三氧化二砷浓度为2,4,8,16μmol·L-1)、氯喹组(氯喹6.25μg·ml-1)、联合用药组(三氧化二砷4μmol·L-1+氯喹6.25μg·mL-1)。以噻唑蓝(MTT)法检测三氧化二砷对HGC-27胃癌细胞的影响,以Annexin V-FITC/PI双染法检测药物对胃癌细胞凋亡的影响,以透视电镜观察胃癌细胞的结构,以Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力,以蛋白质印迹(Western Blot)法检测凋亡与自噬相关蛋白。结果药物干预48 h, 2,4,8,16μmol·L-1实验组HGC-27胃癌细胞抑制率分别为(68.40±0.18)%,(61.33±0.39)%,(29.35±1.28)%,(6.00±0.72)%,氯喹组与联合用药组细胞抑制率分别为(87.57±4.22)%,(31.13±1.39)%;药物干预48 h,对照组和2,4,8,16μmol·L-1实验组细胞凋亡率分别为(6.23±1.45)%,(8.97±1.44)%,(14.50±1.39)%,(34.23±2.85)%,(69.07±1.27)%,氯喹组与联合用药组细胞凋亡率为(5.43±1.33)%,(28.33±0.50)%;药物干预48 h,对照组、氯喹组、4μmol·L-1实验组与联合用药组穿过Transwell小室的细胞数分别为60.00±8.04,33.25±3.86,24.00±1.83,6.00±2.16。药物干预48 h,与对照组相比,三氧化二砷能增加细胞中自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ的表达量,降低p62蛋白的表达量;增加细胞中凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Cleaved-PARP及Bax的表达,减少PARP及Bcl-2蛋白表达;与对照组和4μmol·L-1实验组相比,联用自噬抑制剂氯喹后,胃癌细胞中自噬相关蛋白p62及LC3B-Ⅱ表达量显著增加,凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Cleaved-PARP及Bax表达明显增加,而PARP及Bcl-2蛋白表达显著减少(均P<0.05)。结论三氧化二砷通过降低胃癌细胞的增殖活性,增加胃癌细胞的凋亡率,抑制胃癌侵袭力来发挥抗肿瘤作用,同时三氧化二砷能诱导胃癌细胞产生自噬,而抑制自噬能进一步增强三氧化二砷对胃癌细胞的抗癌作用。     

顺铂联合食管癌相关基因2蛋白对人食癌EC9706细胞的增殖抑制研究

目的研究顺铂(DDP)联合食管癌相关基因2(ECRG2)蛋白对人食管癌EC9706细胞增殖抑制作用及诱导其凋亡的机制。方法将人食管癌EC9706细胞分为空白对照组、阳性对照组和低、中、高3个质量浓度实验组。阳性对照组细胞用3 mg·L^-1顺铂处理,低、中、高3个质量浓度实验组细胞在阳性对照组的基础上用质量浓度为5.5,7.5,9.5μg·L^-1的ECRG2蛋白处理,空白对照组细胞不做任何处理。检测各组细胞的活性和细胞凋亡率,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测人食管癌EC9706细胞耐药基因的表达情况。结果空白对照组、阳性对照组和低、中、高3个质量浓度实验组人食管癌EC9706细胞活性分别为100.00%,(92.12±2.36)%,(88.62±3.22)%,(82.15±2.05)%,(78.41±2.16)%,阳性对照组和3个质量浓度实验组细胞活性显著低于空白对照组(P<0.05或P<0.01),中、高质量浓度实验组均显著低于阳性对照组(均P<0.05);且中、高质量浓度实验组细胞活性随ECRG2蛋白作用浓度增大逐渐降低(P<0.01)。阳性对照组和低、中、高3个质量浓度实验组人食管癌EC9706细胞凋亡率分别为(5.21±0.24)%,(11.45±0.66)%,(16.86±1.42)%,(22.62±2.12)%,均显著高于空白对照组的(2.89±0.32)%,低、中、高3个质量浓度实验组细胞凋亡率均明显高于阳性对照组(均P<0.01)。阳性对照组和低、中、高3个质量浓度实验组细胞谷胱甘肽巯基转移酶-π(GST-π)和多药耐药蛋白基因(MRP)mRNA相对表达量均低于空白对照组,且低、中、高3个质量浓度实验组低于阳性对照组(P<0.05或P<0.01)。结论顺铂可增强ECRG2蛋白对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制作用,并可促进细胞凋亡,其机制可能与顺铂联合ECRG2显著降低GST-π和MRP基因表达有关。     

巴西苏木素通过激活Wnt/β-catenin通路调控卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的研究

目的 探讨巴西苏木素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法 体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,随机分为空白组及低、中、高剂量实验组和联合组。低、中、高剂量实验组分别用20、30和40μmol·L^-1巴西苏木素处理细胞,联合组用40μmol·L^-1巴西苏木素和10 ng·mL^-1 DKK1共同处理细胞,空白组给予常规培养。用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用细胞划痕、Transwell小室实验分别检测细胞的迁移、侵袭能力,用蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白的表达水平。结果 中、高剂量实验组和空白组的凋亡率分别为(15.24±1.20)%、(25.13±1.46)%和(3.26±0.78)%,划痕愈合率分别为(20.55±3.16)%、(9.58±1.92)%和(45.76±2.24)%,侵袭细胞数分别为(100.00±4.00)、(44.66±10.44)和(207.66±15.11)个,Bax蛋白相对表达水平...     

阿帕替尼上调miR-324-5p表达抑制结肠癌细胞的研究

目的 探讨阿帕替尼对结肠癌细胞生物学行为的影响和机制。方法 将结肠癌细胞HCT116分为对照(NC)组,低、中、高剂量组(0.5,1.0和2.0μmol·L^-1阿帕替尼),转染1组(2.0μmol·L^-1阿帕替尼+anti-miR-NC),转染2组(2.0μmol·L^-1阿帕替尼+anti-miR-324-5p)。细胞计数试剂盒-8法检测细胞增殖率;Transwell法检测细胞迁移和侵袭;荧光定量聚合酶链反应法检测miR-324-5p表达。结果 NC组,低、中、高剂量组、转染1组、转染2组HCT116细胞增殖率分别为(100.00±2.79)%,(94.29±1.74)%,(76.48±1.65)%,(51.48±1.75)%,(51.58±0.88)%和(93.64±3.90)%;迁移细胞数分别为(206.27±9.30),(163.23±3.84),(133.83±4.26),(104.32±5.72),(107.93±3.14)和(194.51±3.96)个;侵袭细胞数分别为(153.47±4.37),(121.4...     

天竺葵色素通过激活Caspase-8诱导肺癌细胞凋亡作用研究

目的 探究天竺葵色素诱导肺癌细胞凋亡作用及其作用机制。方法 将肺癌A549和H460细胞分别分为6组：空白对照组、低、中、高3个浓度天竺葵色素实验组(细胞使用15,30和60μmol·L^-1天竺葵色素的完全培养基进行培养,各组均培养24 h)、Z-IETD-FMK实验组(细胞使用20μmol·L^-1Z-IETD-FMK的完全培养基培养2 h)和天竺葵色素联合Z-IETD-FMK实验组(细胞使用20μmol·L^-1Z-IETD-FMK的完全培养基培养2 h后,给予60μmol·L^-1天竺葵色素培养24 h)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞存活率;用流式细胞仪检测细胞凋亡水平;用蛋白质印迹法检测切割型胱天蛋白酶8(Caspase-8)蛋白的表达水平。结果 在A549细胞中,空白对照组、低、中、高3个实验组的细胞存活率分别为(100.00±9.87)%,(86.09±5.41)%,(55.45±6.36)%和(33.64±2.63)%;在H460细胞中,空白对照组、低、中、高3个实验组的细胞...     

核因子-κB抑制剂联合核因子E2相关因子2抑制剂对人结肠癌HCT116细胞凋亡的作用机制研究

目的探究核因子κB（NF-κB）抑制剂（BAY11-7082）联合核因子E2相关因子2（Nrf2）抑制剂（ML385）对人结肠癌细胞HCT116的作用机制。方法体外培养人结肠癌细胞HCT116,将细胞分为4组:空白对照组、NF-κB抑制剂组、Nrf2抑制剂和联合组。空白对照组以RPMI-1640培养基进行培养,NF-κB抑制剂组以10μmol·L^-1 BAY 11-7082干预,Nrf2抑制剂组以5μmol·L^-1 ML385干预,联合组以10μmol·L^-1 BAY 11-7082+5μmol·L^-1 ML385干预,干预时间为24 h。MTT法检测人结肠癌细胞HCT116增殖抑制率,以流式细胞术和Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡状况,以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白及Nrf2、NF-κB通路相关蛋白表达水平。结果 ML385、BAY 11-7082均能显著抑制人结肠癌细胞HCT116增殖（均P<0.05）;干预24 h,空白对照组、Nrf2抑制剂组、NF-κB抑制剂组和联合组的细...     

阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤的抑制作用及机制研究

目的探讨抗血管生成药物阿帕替尼与常用化疗药物阿霉素联合应用对外周T细胞淋巴瘤Hut78细胞株的抑制作用以及相关分子作用机制,为开发外周T细胞淋巴瘤治疗新方法提供实验依据。方法将Hut78细胞分为不同浓度药物处理组:阿帕替尼单药(10、20、40、60μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2、4μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1、(60+1)μmol·L^-1、(60+2)μmol·L^-1],分别作用72 h,采用CCK-8法检测药物对细胞的增殖抑制作用。采用流式细胞术检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]}作用24 h后对Hut78细胞凋亡的影响。采用流式细胞术检测不同浓度阿帕替尼(10、20、40μmol·L^-1)作用24 h后对Hut78细胞周期的影响。采用蛋白印迹法检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]}作用24 h后,Hut78细胞中PI3K/Akt信号转导通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt及凋亡相关蛋白Bcl-2、Casepase-3、Bax的表达变化。结果不同浓度(10、20、40、60μmol·L^-1)的阿帕替尼作用72 h后,细胞抑制率分别为(13.42±2.19)%、(19.52±4.16)%、(31.49±3.16)%、(52.88±3.37)%,72 h的IC₅₀值为(59.34±0.31)μmol·L^-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ²=10.116,P=0.018);不同浓度(1、2、4μmol·L^-1)的阿霉素分别作用72 h后,细胞抑制率分别为(15.82±3.23)%、(31.70±4.79)%、(42.34±5.23)%,72 h的IC₅₀值为(5.52±0.18)μmol·L^-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ²=10.532,P=0.015);阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1、(60+1)μmol·L^-1、(60+2)μmol·L^-1]作用72 h的细胞抑制率分别为(51.70±2.09)%、(56.62±4.83)%、(61.35±1.79)%、(65.13±3.88)%。两药的联合指数(CI)<1,说明二者具有药物协同作用。阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)作用24 h的细胞凋亡率分别为(15.65±0.75)%、(13.85±2.15)%、(23.60±1.30)%,阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]作用24h的细胞凋亡率分别为(27.00±1.90)%、(33.20±2.30)%,各药物处理组与对照组[(6.10±0.90)%]比较,差异有统计学意义(χ²=16.251,P=0.006)。不同浓度(10、20、40μmol·L^-1)的阿帕替尼作用24 h后,G₀/G₁期细胞比例随浓度升高而升高[(49.27±0.45)%、(50.34±1.24)%、(59.16±1.23)%],S期细胞比例随浓度升高而降低[(42.81±2.22)%、(39.19±2.71)%、(34.08±1.01)%],各药物处理组与空白对照组[G₀/G₁期(39.26±0.65)%,S期(49.40±2.52)%]比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)以及阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]作用24 h后,PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、p-Akt和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平呈下降趋势,促凋亡蛋白Casepase-3和Bax的表达水平呈上升趋势,Akt蛋白的表达水平无明显变化,各药物处理组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2、Casepase-3及Bax蛋白表达水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论阿帕替尼可抑制外周T细胞淋巴瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,同时具有细胞周期阻滞作用,其作用可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路激活实现的。阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤细胞具有协同抑制作用。     

复方木鸡颗粒联合顺铂对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的机制研究

目的探讨复方木鸡颗粒联合顺铂对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡的影响及其潜在的作用机制。方法体外培养人肝癌Hep G2细胞,取对数生长期细胞,将其消化后随机分为对照组,复方木鸡颗粒高、低(10、5mg/m L)剂量组,顺铂组(1mg/m L)和复方木鸡颗粒(5mg/m L)联合顺铂(1mg/m L)组,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用Hoehcst染色法检测细胞凋亡情况,采用免疫荧光联合激光共聚焦分别检测各组细胞中凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、蛋白天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)、细胞色素C氧化酶(Cyt-C)表达水平。结果与对照组比较,复方木鸡颗粒10、5 mg/mL组及顺铂组、联合组的细胞活力显著降低(P0.01),细胞凋亡显著增加,细胞内Bcl-2蛋白表达显著下调(P0.05、0.01),而Bax、Caspase-9、Cyt-C蛋白显著上调(P0.05、0.01),且联合组在抑制人肝癌Hep G2细胞增殖、促进其凋亡、调控凋亡相关蛋白表达的作用效果最佳。结论复方木鸡颗粒可显著抑制Hep G2细胞增殖并促进其凋亡,其与顺铂联合起到协同增效的效果,其作用机制可能与下调人肝癌Hep G2细胞内抑凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-9、Cyt-C表达水平有关。     

β-榄香烯对结肠癌SW480细胞放疗增敏作用

目的研究β-榄香烯对结肠癌细胞系SW480的放疗增敏作用,并分析其对磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路的影响。方法将细胞分为6组:空白对照组、辐照组(进行4 Gy辐照)、药物组(10μmol·L^-1β-榄香烯)、抑制剂组(50μmol·L^-1PI3K抑制剂,LY294002)、联合1组(4 Gy辐照+10μmol·L^-1β-榄香烯)、联合2组(4 Gy辐照+50μmol·L^-1LY294002)。用噻唑蓝法检测细胞增殖抑制率,用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,用免疫印迹法测定相关蛋白表达。结果抑制剂组、药物组、辐照组、联合2组和联合1组细胞凋亡率分别为(20. 39±1. 34)%,(21. 62±1. 23)%,(8. 94±1. 16)%,(31. 76±4. 22)%和(32. 83±4. 17)%;这5组的G0/G1期DNA含量分别为52. 68±4. 13,54. 36±4. 68,49. 20±4. 77,74. 63±6. 29和74. 92±6. 34;这5组的细胞集落形成数目分别为111. 19±15. 33,108. 74±15. 28,116. 67±14. 39,45. 32±9. 06和40. 08±8. 43;这5组的细胞内p Akt蛋白表达水平分别为0. 86±0. 04,0. 85±0. 04,0. 87±0. 05,0. 42±0. 03和0. 41±0. 03。上述指标,联合2组、联合1组与抑制剂组、药物组和辐照组相比,差异均有统计学意义(均P <0. 01)。结论β-榄香烯能够通过抑制PI3K/Akt信号通路激活,抑制周期相关蛋白表达引起G2/M期阻滞以抑制细胞增殖,同时促进细胞凋亡相关蛋白表达诱导细胞凋亡,从而提高SW480细胞的放射敏感性。     

川芎嗪注射液对高眼压大鼠视网膜神经节细胞凋亡的作用机制研究

目的 观察川芎嗪注射液通过磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)通路对高眼压大鼠模型视网膜神经节细胞凋亡的影响.方法 用前房注射羟丙基甲基纤维素的方法建立高眼压大鼠模型.按照体重将造模成功大鼠随机分为4组:模型组、川芎嗪组、激动剂组和抑制剂组;另取10只正常大鼠...     

柚皮素对Aβ25-35损伤PC12细胞丝裂原激活蛋白激酶/细胞外信号调节蛋白激酶通路的调控效应研究

目的探讨柚皮素对体外培养的Aβ_25-35损伤PC12细胞的保护作用及相关信号通路的调控机制。方法将生长至对数期的PC12细胞接种于培养瓶培养24 h,弃掉旧培养液后,随机分为空白组(培养液)、模型组(150μmol·L-1 Aβ_25-35)、实验组-1(4×10-1 μmol·L-1柚皮素+150μmol·L-1 Aβ_25-35)和实验组-2(10μmol·L-1 U0126+4×10-1 μmol·L-1柚皮素+150μmol·L-1 Aβ_25-35),使每组细胞浓度为20μmol·L-1(除空白组),给药24 h后,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法检测各组细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸-3(Caspase-3)和磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK1/2)的蛋白表达量。结果空白组、模型组、实验组-1、实验组-2的细胞总凋亡率分别为(4.13±0.55)%,(34.70±1.66)%,(11.26±0.77)%,(23.52±0.80)%;Bax蛋白表达量分别是0.24±0.06,0.76±0.03,0.21±0.02,0.68±0.04;Bcl-2蛋白表达量0.61±0.04,0.20±0.04,0.55±0.03,0.34±0.02;Caspase-3蛋白表达量0.13±0.03,0.40±0.03,0.21±0.04,0.31±0.02;p-ERK1/2蛋白表达量0.86±0.03,0.48±0.06,0.78±0.04,0.50±0.07。模型组与空白组、实验组与模型组和实验组-2与实验组-1比较,上述指标差异均有统计学意义(P<0.01)。结论柚皮素可通过丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)/细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular-signal regulated protein kinase, ERK)信号通路改变Bax、Caspase-3、Bcl-2和p-ERK1/2蛋白表达量,抑制细胞凋亡,对Aβ_25-35损伤的PC12细胞有保护作用。     

槲皮素通过靶向GAS5/Notch1信号通路促进乳腺癌细胞凋亡的研究

目的探讨槲皮素对乳腺癌细胞促凋亡作用的可能机制。方法用槲皮素处理乳腺癌MCF-7细胞后,采用MTT法检测细胞活力;平板克隆实验检测细胞增殖克隆能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;同时,分别采用槲皮素(40、80、160μmol·L^-1)、GAS5小干扰RNA(siGAS5)、槲皮素(80μmol·L^-1)协同siGAS5处理细胞后,qRT-PCR法和Western blot法检测GAS5、Notch1、Jagged1、Hes1、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果槲皮素(40、80、160μmol·L^-1)处理MCF-7细胞后,发现40μmol·L^-1槲皮素可明显抑制增殖,而80、160μmol·L^-1槲皮素不仅明显抑制增殖且诱导凋亡;槲皮素(40、80、160μmol·L^-1)可上调GAS5、Bax和Caspase-3的表达,下调Notch1、Jagged1、Hes1和Bcl-2的表达;细胞转染siGAS5后,与sncRNA组相比,GAS5、Bax和Caspase-3表达下调,Notch1、Jagged1、Hes1和Bcl-2表达上调;当siGAS5与槲皮素(80μmol·L^-1)共处理细胞后,与sncRNA加槲皮素对照组相比,GAS5、Bax和Caspase-3表达下调,Notch1、Jagged1、Hes1和Bcl-2上调。结论槲皮素通过靶向GAS5/Notch1信号通路促进乳腺癌细胞凋亡。     

姜黄素对结核小鼠复发及p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的研究姜黄素对结核小鼠复发及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响。方法将45只C57BL/6小鼠随机分为模型组(n=15)、实验组(n=15)和对照组(n=15),所有小鼠均尾静脉注射结核分枝杆菌H37RV(1×10⁷ CFU·mL^-1)0.1 mL。4周后,实验组腹腔注射异烟肼10 mg·kg^-1+姜黄素60 mg·kg^-1,对照组腹腔注射异烟肼10 mg·kg^-1,模型组腹腔注射等量生理盐水,qd,连续干预4周。4周后各组小鼠均每周腹腔注射肿瘤坏死因子-α(TNF-α)抗体50μg,每天1次,连续4周。分别于药物干预结束后及诱导结束后用分枝杆菌中性罗氏培养管检测小鼠肺、脾组织荷菌量;以苏木精-伊红(HE)染色法观察各组小鼠肺组织病理学形态;以蛋白质印迹(WB)法检测小鼠肺组织中p-p38 MAPK蛋白的表达水平。结果药物干预结束后,模型组、对照组和实验组小鼠肺组织中荷菌量分别为(3.68±1.15),(1.13±0.12),(1.02±0.29)LgCFU·mL^-1,脾组织中荷菌量分别为(4.26±0.39),(2.12±0.13),(2.05±0.11)LgCFU·mL^-1,与模型组比较,实验组和对照组小鼠肺、脾组织中荷菌量均明显降低(均P<0.05),但实验组和对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。诱导结束后,模型组、对照组和实验组小鼠肺组织中荷菌量分别为(4.43±0.29),(4.03±0.10),(3.72±0.09)LgCFU·mL^-1,脾组织中荷菌量分别为(4.53±0.44),(3.97±0.22),(4.05±0.21)LgCFU·mL^-1,小鼠肺组织中小肉芽肿面积比分别为(8.65±0.32)%,(4.21±0.36)%,(3.98±0.52)%,小鼠肺组织中p-p38 MAPK蛋白相对表达量分别为1.47±0.33,1.13±0.35,0.76±0.25,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论姜黄素可通过降低p38 MAPK信号通路蛋白表达而抑制小鼠结核复发。     

1,25(OH)2D3对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞功能的影响

目的观察1,25-双羟维生素D3(1,25(OH)2D3)通过miR-124-3p调控磷脂酰肌醇3激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/AKT)通路对肺炎链球菌(SP)感染的肺泡上皮细胞功能的影响,探讨其作用机制。方法体外培养肺泡上皮细胞A549,肺炎链球菌刺激后,随机分为10,20,40,80,160 ng·mL^-11,25(OH)2D3组、Control组、1,25(OH)2D3组、1,25(OH)2D3+anti-miR-NC组、1,25(OH)2D3+anti-miR-124-3p组和1,25(OH)2D3+anti-miR-124-3p+LY294002组。以细胞计数(CCK-8)法试剂盒法、流式细胞仪检测各组细胞增殖、凋亡,以蛋白质印迹(WB)法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、PI3K/AKT通路的相关蛋白表达,以反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测miR-124-3p的表达。结果10,20,40,80,160 ng·mL^-11,25(OH)2D3处理A549细胞72 h,细胞活力分别为(83.20±1.92)%,(75.73±3.70)%,(64.40±5.10)%,(47.13±3.56)%,(33.93±5.27)%;细胞凋亡率分别为(8.14±0.96)%,(12.26±1.00)%,(14.37±0.88)%,(16.44±0.96)%,(18.12±1.15)%,最终选择160 ng·mL^-11,25(OH)2D3进行后续实验。Control组、1,25(OH)2D3组、1,25(OH)2D3+anti-miR-NC和1,25(OH)2D3+anti-miR-124-3p组的miR-124-3p相对表达量为1.00±0.11,1.69±0.05,1.71±0.13,1.12±0.09,细胞活力分别为(100.00±9.67)%,(34.83±2.44)%,(37.70±1.50)%,(68.80±2.45)%,细胞凋亡率分别为(7.20±0.85)%,(18.59±0.82)%,(19.06±0.60)%,(13.44±2.15)%。与Control组对比,其他组miR-124-3p、细胞活力和细胞凋亡率均有统计学意义,CyclinD1、Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Control组、1,25(OH)2D3组、1,25(OH)2D3+anti-miR-124-3p组和1,25(OH)2D3+anti-miR-124-3p+LY294002的细胞活力分别为(100.00±9.64)%,(40.13±7.13)%,(74.40±6.54)%,(42.93±1.82)%,细胞凋亡率分别为(5.51±1.11)%,(15.90±0.24)%,(9.35±0.86)%,(14.24±0.84)%,与Control组相比,1,25(OH)2D3对肺泡上皮细胞A549的增殖、凋亡及CyclinD1、Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达的作用,以及抑制下游PI3K/AKT通路的作用,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论1,25(OH)2D3通过抑制miR-124-3p负向调控PI3K/AKT通路,促进肺泡上皮细胞的增殖,并诱导凋亡。     

8-羟基鸟嘌呤核苷酸酶抑制剂TH588诱导人肺腺癌细胞凋亡研究

目的探讨8-羟基鸟嘌呤核苷酸酶(8-oxoguanine nucleoside triphosphatase,MTH1)抑制剂TH588对肺腺癌细胞A549和H1975凋亡的影响。方法将细胞分为空白组(正常培养的肺腺癌细胞)和低、中、高剂量实验组(8,16,32μmol·L-1 TH588处理肺腺癌细胞)。使用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测TH588对肺腺癌细胞A549和H1975增殖的影响。Transwell检测TH588对肺腺癌细胞A549和H1975的迁移能力的影响。AnixinⅤ-FITC/PI双染法检测TH588对肺腺癌细胞凋亡的影响。Western Blot检测TH588对肺腺癌细胞凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的影响。结果 TH588处理24 h后,A549和H1975细胞低、中、高剂量实验组存活率分别为(76.15±1.02)%,(70.63±4.16)%,(57.42±2.15)%;(78.05±2.06)%,(62.86±3.45)%,(58.47±2.70)%。TH588处理48 h后,A549和H1975低、中、高剂量实验组存活率分别为(62.26±3.84)%,(45.19±1.08)%,(36.03±2.95)%;(73.21±1.84)%,(57.96±3.18)%,(32.47±10.19)%。TH588处理72 h后,A549和H1975细胞低、中、高剂量实验组存活率分别为(59.16±1.15)%,(35.63±2.26)%,(28.56±3.60)%;(63.08±0.98)%,(50.27±2.15)%,(25.76±11.06)%。A549和H1975细胞对照组及低、中、高剂量实验组的相对迁移率分别为(100.00±2.15)%,(80.50±2.07)%,(65.25±3.83)%,(36.76±2.25)%;(100.00±4.05)%,(85.65±2.79)%,(72.48±2.96)%,(43.05±1.98)%。A549和H1975细胞对照组及低、中、高剂量实验组的凋亡率分别为(8.25±0.57)%,(23.17±3.40)%,(42.50±4.83)%,(49.02±8.15)%;(4.05±1.20)%,(6.46±1.85)%,(7.55±1.05)%,(14.87±4.46)%。A549和H1975细胞对照组及低、中、高剂量实验组Bcl-2/Bax值分别为1.18±0.01, 0.75±0.03, 0.68±0.03, 0.52±0.04;1.28±0.04, 1.05±0.04, 0.54±0.04,0.45±0.03。A549和H1975细胞低剂量组、中剂量组、高剂量组的细胞存活率、相对迁移率、凋亡率及Bcl-2/Bax值与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TH588显著促进了肺腺癌细胞A549和H1975的凋亡,其机制与调控Bcl-2和Bax的表达有关。     

羧甲基β-葡聚糖联合阿霉素抗乳腺癌以及减轻心脏毒性的实验研究

目的 研究羧甲基 β-葡聚糖(CMG)联合阿霉素(Dox)对乳腺癌的干预作用及其心脏毒性的作用.方法 (1)将乳腺癌细胞MCF-7分为8组:溶剂对照组(含0.5％胎牛血清的DMEM)、Dox组(2μmol·L-1 Dox溶液),低、中、高3个浓度(125,250,500μg·mL-1的CMG)CMG组和低、中、高3个浓...     

超滤法结合液质联用技术测定抗肿瘤化合物CJ-6在不同种属中的血浆蛋白结合率

目的:通过建立测定血浆中抗肿瘤化合物N-(4-((2-(环丙烷甲酰胺)吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-4-甲基-3,5-二氧基-2-苯基-2,3,4,5-四氢-1,2,4-三嗪-6-甲酰胺(CJ-6)的分析方法,测定CJ-6在不同种属(大鼠、猴、人)中的血浆蛋白结合率.方法:采取超滤法测定CJ-6在大鼠、猴、人血浆...     

注射用丹参多酚酸对周细胞增殖与迁移和凋亡的影响

目的 探讨注射用丹参多酚酸对周细胞(C3H/10T1/2)增殖、迁移和凋亡的影响.方法 C3H/10T1/2细胞采用氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型模拟缺血缺氧损伤.将细胞分为5组:正常组、模型组和低、中、高3个剂量的实验组(注射用丹参多酚酸的6.25,12.50,25.00μg·mL-1),正常组将培养液置换为新鲜的...