miR-149-5p对ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移的研究

目的 探究miR-149-5p在氧化低密度脂蛋白胆固醇(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)中的功能及其分子机制.方法 用不同浓度的ox-LDL(0,25,50,100μg·mL-1)处理VSMCs 24h,或用100 mg·mL-1的ox-LDL分别处理VSMCs 0,6,12,24 h,以实时荧光定量逆...     

钙敏感受体对高糖诱导的肾动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨钙敏感受体(CaSR)对高糖诱导的肾动脉平滑肌细胞增殖的影响,并分析其与细胞外调节蛋白激酶1,2(ERK1,2)信号通路的相关性.方法 将对数生长期的肾动脉平滑肌细胞随机分为4组:正常组、模型组、干预-1组、干预-2组及干预-3组.干预-1组、干预-2组和干预-3组分别加入GdCl3(钙敏感受体激动剂)30μ...     

Losartan和CGRP对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖作用的影响

目的比较非肽类血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型阻断剂氯沙坦(Losartan)和血管活性肽降钙素基因相关肽(CGRP)对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖作用的影响,为探讨此两类物质的降压机制提供实验依据。方法采用MTT,3H-参入法和流式细胞仪分别测定血管紧张素Ⅱ刺激下,Losartan或CGRP干预下血管平滑肌细胞的增殖变化,W est-ern b loting法测定不同状态下血管平滑肌细胞内ERK1/2的活性变化。结果Losartan或CGRP能抑制血管紧张素Ⅱ刺激下血管平滑肌细胞的生存率、DNA合成、细胞周期增殖指数,以及细胞内ERK1/2的活性,并呈剂量依赖性。而且,CGRP抑制作用强于Losartan。结论Losartan或CGRP能抑制血管紧张素Ⅱ刺激下血管平滑肌细胞增殖,其细胞内的信号传导途径与ERK1/2有关。     

miR-590-5p对PDGF诱导气道平滑肌细胞增殖和迁移的作用和机制北大核心CSCD

目的探讨微小RNA-590-5p(miR-590-5p)在人血小板来源生长因子(PDGF)诱导的气道平滑肌细胞(ASMCs)中的作用以及潜在机制。方法ASMCs随机分为对照组(不做处理),模型组(用40 ng·m L-1PDGF刺激24h),和实验组(转染miR-590-5p模拟物后用40 ng·m L-1PDGF刺激24 h)。以细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测ASMCs的增殖;细胞划痕愈合实验检测ASMCs的迁移;以蛋白印迹法检测各组ASMCs中酪氨酸激酶2(JAK2)的表达水平。结果对照组、模型组、实验组细胞增殖率分别为(57.28±4.39)%,(84.38±3.45)%,(60.86±4.40)%;细胞迁移率分别为(19.27±2.49)%,(38.16±5.32)%,(24.68±3.04)%;JAK2的相对表达分别为0.69±0.08,2.19±0.13,1.26±0.11。模型组与对照组比较,实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-590-5p在PDGF诱导的ASMCs表达下调,miR-590-5p通过靶向JAK2抑制PDGF诱导的ASMCs的增殖和迁移。     

油酰乙醇胺对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究油酰乙醇胺(OEA)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的抑制作用以及对p38信号通路的影响。方法分离大鼠胸主动脉,组织贴块法培养VSMCs,AngⅡ刺激VSMCs建立细胞增殖模型,不同浓度OEA(5,10,20μmol/L)作用后,用溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)掺入的方法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞周期变化;Western-bolt法检测对P-p38和p38蛋白表达的影响。结果与AngⅡ组比较,随着OEA浓度升高,VSMCs的增殖受到抑制、G0/G1比例显著升高,G2/M比例显著降低,且P-p38和p38蛋白的表达量降低并呈浓度依赖关系。结论 OEA对VSMCs的增殖有抑制作用,其机制可能是抑制了p38MAPK信号通路。     

葛根素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞增殖及凝血酶受体mRNA表达的影响

目的通过建立凝血酶诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖模型,观察葛根素对凝血酶诱导的VSMC增殖的影响,并进一步观察其对凝血酶受体(TR)mRNA的表达有何作用,旨在认识葛根素的作用的分子机制。方法以细胞计数法和流式细胞仪DNA含量测定法观察凝血酶及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。凝血酶及葛根素等各处理因素作用24h后,以半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TRmRNA的表达。结果凝血酶对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在24h末达峰,且凝血酶浓度在0.1U/L～1.0U/L之间有剂量依赖关系;葛根素呈剂量依赖性地抑制凝血酶诱导的细胞增殖、DNA合成;高浓度(1.5×10^-3mol/L)的葛根素可显著抑制凝血酶诱导的TRmRNA上调。结论葛根素抑制凝血酶诱导的VSMC增殖,这可能部分与其抑制TRmRNA表达有关。     

葛根素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞增殖及凝血酶受体mRNA表达的影响

目的通过建立凝血酶诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖模型,观察葛根素对凝血酶诱导的VSMC增殖的影响,并进一步观察其对凝血酶受体(TR)mRNA的表达有何作用,旨在认识葛根素的作用的分子机制。方法以细胞计数法和流式细胞仪DNA含量测定法观察凝血酶及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。凝血酶及葛根素等各处理因素作用24h后,以半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TRmRNA的表达。结果凝血酶对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在24h末达峰,且凝血酶浓度在0.1U/L~1.0U/L之间有剂量依赖关系;葛根素呈剂量依赖性地抑制凝血酶诱导的细胞增殖、DNA合成;高浓度(1.5×10-3mol/L)的葛根素可显著抑制凝血酶诱导的TRmRNA上调。结论葛根素抑制凝血酶诱导的VSMC增殖,这可能部分与其抑制TRmRNA表达有关。     

香青兰总黄酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖与迁移的影响

目的:研究香青兰总黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与迁移的作用。方法:采用贴壁法培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,以Ang Ⅱ为诱导剂,建立VSMC细胞增殖的模型,分别应用质量浓度为10^-7 mol·L^-1 Ang Ⅱ以及Ang Ⅱ+不同浓度香青兰总黄酮组(25,50,100 mg·L^-1)作用24 h,并设空白对照组进行比较。采用MTT法检测细胞的增殖;transwell法检测细胞的迁移;免疫组化法检测细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平。结果:与对照组比较,Ang Ⅱ组能显著刺激大鼠VSMC的增殖和迁移,香青兰总黄酮不同剂量组联合Ang Ⅱ可在一定程度上抑制Ang Ⅱ诱导的VSMC增殖,迁移以及细胞内PCNA的表达,且呈现一定的剂量依赖关系趋势。结论:香青兰总黄酮具有抑制Ang Ⅱ诱导VSMC增殖与迁移的作用。     

辣椒素对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨辣椒素对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）增殖和迁移的影响。方法 体外构建自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞系,分别采用20 μmol·L^-1辣椒素（高剂量组）、10 μmol·L^-1辣椒素（中剂量组）、5 μmol·L^-1辣椒素（低剂量组）和1 μmol·L^-1厄贝沙坦（厄贝沙坦组）直接处理细胞或特异性阻断CD36的表达后,再分别用20 μmol·L^-1辣椒素（高剂量组）、10 μmol·L^-1辣椒素（中剂量组）、5 μmol·L^-1辣椒素（低剂量组）和1 μmol·L^-1厄贝沙坦（厄贝沙坦组）处理细胞,采用MTT法检测VSMCs增殖情况,Boyden趋化小室检测VSMCs迁移情况,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和蛋白免疫印迹（Western blotting）检测平滑肌22a蛋白（smooth muscle 22a,SM22a）和调宁蛋白（Calponin）mRNA和蛋白的表达水平。结果 辣椒素和厄贝沙坦分别处理VSMCs后,与对照组相比,高、中、低剂量辣椒素组和厄贝沙坦组细胞增殖率和迁移率均有所降低,SM22a和Calponin的表达上调;与厄贝沙坦组相比,高剂量辣椒素组SM22a和Calponin的表达有所上调,中、低剂量辣椒素组SM22a和Calponin的表达均有所下调。特异性阻断CD36的表达后,与对照组相比,高、中、低剂量辣椒素组和厄贝沙坦组细胞增殖率降低,迁移率进一步降低,SM22a和Calponin表达上调;与厄贝沙坦组相比,高、中、低剂量辣椒素组SM22a的表达均有所上调,高、中、低剂量辣椒素组Calponin的表达有所下调。结论 高、中、低剂量辣椒素能够通过上调SM22a和Calponin的表达,抑制CD36的表达,来促进自发性高血压大鼠VSMCs由未分化表型向分化表型转化,从而抑制VSMCs的增殖及迁移和高血压血管重构的发生,促进其动脉管壁恢复正常的生理功能,有助于降低血压。     

下调血管生成素样蛋白7表达对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨下调血管生成素样蛋白7(Angptl7)表达对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 采用CCK-8法检测AngⅡ诱导的VSMC生长,流式细胞术检测下调Angptl7蛋白表达对细胞周期的影响。分别采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测转染后细胞中Angptl7 mRNA和Angptl7、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白E1、p21、Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果 采用1μg/mL的AngⅡ处理24 h能提高VSMC活力(0.63±0.06 vs.0.37±0.06)(P<0.01),促进Angptl7 mRNA和蛋白的表达(3.05±0.21 vs.0.97±0.06和1.61±0.14 vs.1.01±0.12)(P<0.01)。下调Angptl7蛋白表达可抑制CDK2、细胞周期蛋白E1和Bcl-2蛋白的表达,促进p21和Bax蛋白的表达(P<0.05)。结论 AngⅡ能促进VSMC增殖,上调Angptl7 mRNA和蛋白表达。下调Angptl7表达可抑制AngⅡ诱导的V...     

三七总皂甙对凝血酶诱血管平滑肌细胞增殖活性的影响

目的探讨三七总皂甙（totalspaoninsofpanaxnotoginseng,tPNS）对凝血酶诱大鼠血管平滑肌细胞（VascularsmoothmUSClecells．vsMcs）的促增殖作用的量效和时效关系。方法采用4～10代的vsMcs的单细胞悬液用于实验。通过MTS法和B—N-乙酰氨基己糖苷酶测定VSMCs细胞增殖率,观察tPNS对凝血酶诱大鼠VSMCs增殖的影响。结果（1）0．5u／ml和1．0u／ml两种浓度的凝血酶均有促VSMCs增殖作用（P〈0．05）。增殖曲线呈双峰样改变（峰值在1h和24h）;（2）不同tPNS浓度（300．0。600．0μg／m1）在24h时对0．5u／ml凝血酶刺激VSMCs都有明显抑制作用,且各浓度之间有显著性差异（P〈0．05）;（3）相对凝血酶组,tPNS（450．0μg／ml）有效地降低了凝血酶（0．5u／m1）诱导VSMCs增殖的1h峰值及24h峰值俨〈0．05）。结论（1）凝血酶促VSMCs的增殖在时间上呈双峰样改变;（2）不同浓度的tPNS对凝血酶诱大鼠血管平滑肌细胞增殖均有抑制作用：（3）tPNS不仅能抑制凝血酶早期快速促VSMCs增殖作用,而且能抑制凝血酶后期促VSMCs增殖作用。     

Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影响

目的观察Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及细胞周期的影响。方法组织贴块法培养大鼠VSMC细胞,采用TNF-α诱导其增殖,加入不同浓度的Roscovitine预处理15 h,将细胞分为:对照组、TNF-α组、Roscovitine 5、10、15、30μmol·L~(-1)组。MTT比色法检测细胞增殖活性;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA);流式细胞仪检测细胞周期;荧光定量RT-PCR及Western blot检测细胞周期蛋白(Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK4、CDK5)、细胞周期抑制蛋白(p53、p21、p27)的表达。结果 Roscovitine能抑制VSMC增殖;抑制细胞周期从G_0/G_1期向S期转化。与TNF-α组比较,Roscovitine 5、10、15、30μmol·L~(-1)组能降低细胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E蛋白表达,降低细胞周期蛋白依赖激酶CDK4、CDK5蛋白表达,升高细胞周期抑制蛋白p53、p21、p27蛋白表达(P<0.05)。结论 Roscovitine可抑制大鼠VSMC细胞周期进程及增殖活性。     

甲氨喋呤对血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的　观察甲氨喋呤 (MTX)对体外培养的血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法　体外培养兔胸主动脉血管平滑肌细胞 ,在培养基中加入不同浓度的MTX ,采用细胞计数及检测细胞周期的方法观察MTX对细胞增殖的影响 ,采用细胞刮片的方法观察MTX对细胞迁移的作用 ,采用检测DNA片断化的方法观察细胞凋亡现象。结果　①MTX在 2 5～ 10 0nmol·L-1的浓度范围内呈剂量依赖性地抑制VSMC增殖。② 2 5nmol·L-1及 5 0nmol·L-1MTX显著增加细胞周期中S期细胞的百分含量 ,减低G2 /M期细胞的百分含量 (P <0 0 5 ) ,10 0nmol·L-1MTX显著增加了G0 /G1期细胞的百分含量 (P <0 0 1)。③加入MTX的VSMC对血清刺激的迁移受到抑制。④ 10 0nmol·L-1及 2 0 0nmol·L-1的MTX作用于VSMC后 ,流式细胞仪检测亚二倍体的细胞数高于对照组 (P <0 0 1) ;DNA凝胶电泳可以见到梯形条带 ;TUNEL染色阳性细胞的百分数高于对照组 ,具有统计学差异 (P <0 0 1)。结论　甲氨喋呤能够抑制体外培养的血管平滑肌细胞增殖和迁移 ,并促进细胞凋亡。     

丹皮酚对动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究丹皮酚对动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞增殖的影响。方法高脂饮食法复制家兔动脉粥样硬化病理模型;HE染色并光镜观察主动脉病理学改变;MTT法分析体外培养的兔血管平滑肌细胞增殖水平;全自动生化分析仪测定主动脉组织中脂质含量;酶法测定SOD、MDA含量;放射免疫分析法测定IL-1β、TNF-α的含量;免疫组织化学法检测主动脉组织中PCNA的蛋白表达。结果丹皮酚(75、150 mg.kg-1)治疗给药(ig,6 wk)能减轻模型动物主动脉内膜增厚及泡沫细胞数量;使主动脉组织中脂质、脂质过氧化反应以及炎性细胞因子含量等方面得到显著改善;并能显著抑制主动脉组织中PCNA蛋白的表达强度;丹皮酚(100~300 mg.L-1)可明显抑制体外培养的血管平滑肌细胞增殖反应。结论丹皮酚对血管平滑肌细胞增殖有明显抑制作用,可能是其降脂、减轻脂质过氧化反应以及炎性细胞因子含量等协同作用结果,并可能通过抑制PCNA的表达而调控动脉粥样硬化病变中的血管平滑肌细胞增殖周期。     

中药调控血管平滑肌细胞增殖的研究进展

通过查阅国内近几年中医药对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的文献,综述了从中药复方、单味中药、中药有效组分等调控VSMC增殖的研究成果,探讨了中医药调控VSMC增殖及其机制,阐明了中医药通过调控血管平滑肌增殖治疗心血管病的机制。     

肝素十二糖对血管平滑肌细胞增殖作用的研究

目的:研究肝素十二糖(dp12)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖作用的影响,并分析其分子水平的作用机制。方法:通过以10%新生牛血清诱导牛胸主动脉血管平滑肌细胞增殖建立模型,然后考察实验室精制的不同浓度的肝素寡糖对血管平滑肌细胞增殖作用的影响;四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测dp12对VSMCs增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期分布;RT-PCR法检测ERK1/2转录变化情况;Western Blotting法检测ERK1/2和p-ERK1/2的表达。结果:MTT结果显示不同浓度的dp12可以明显抑制由10%新生牛血清诱导的血管平滑肌细胞的增殖;细胞周期实验揭示dp12抑制血清诱导的VSMCs从G1期进入S期,影响细胞周期;dp12通过下调ERK基因的转录进而下调ERK1/2的表达,此外dp12抑制ERK1/2的磷酸化进而影响细胞增殖。结论:dp12使VSMCs在G1期/S期阻滞,通过抑制ERK基因的转录和ERK蛋白的磷酸化抑制VSMCs增殖,可能是dp12抗VSMCs增殖的机制之一。     

S-亚硝基谷胱苷肽对内皮素诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察脂溶性一氧化氮（N0）前体药物S-亚硝基谷胱苷肽（GSNO）对内皮素（ET）诱导的SD大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响。方法体外培养SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞,并用ET诱导增殖,用不同浓度的GSNO干预,采用四唑盐比色试验法、5-溴-2脱氧尿嘧啶（BrdU）酶联免疫吸附试验掺入量测定其对增殖的影响,并以流式细胞技术观察细胞增殖周期的改变。结果ET对VSMC的DNA合成和增殖有显著的促进作用;不同浓度的GSNO干预后,吸光度（A值）和BrdU掺入量与单纯ET诱导对比均明显下降（P〈0．05）;S期及G2／M期细胞百分值明显低于ET组,而G0／G1期的细胞百分值增高（P〈0．05）,且随着浓度的增加,抑制作用越显著。结论在一定浓度范围内,GSNO呈剂量依赖性地抑制ET诱导大鼠VSMS增殖。     

宽叶缬草对兔血管平滑肌细胞增殖及迁移抑制作用的实验研究

血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖及迁移是造成冠状动脉狭窄的一个重要机制 ,实验探讨了宽叶缬草在这方面的作用。结果显示 ,用药组中血管平滑肌细胞数量、3H-TOR掺入试验中 CPM值及细胞迁移距离均小于对照组 (P<0 .0 1) ,具有明显抗 VSMC增殖及迁移的作用