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相似文献
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1.
目的 探讨人参皂苷对脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡、氧化应激的影响,及其对miR-654的调控作用。方法 用LPS诱导肾小管上皮细胞(HK-2细胞)建立脓毒症所致急性肾损伤模型。实验分组:空白组(正常培养的细胞)、模型组(5μg·mL-1 LPS干预24 h)和低、中、高剂量实验组(1,2和3μg·mL-1人参皂苷+5μg·mL-1 LPS共同干预24 h)、miR-NC组(转染miR-NC后,用5μg·mL-1 LPS干预24 h)、miR-654组(转染miR-654 mimics后,用5μg·mL-1 LPS干预24 h)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC后,用2μg·mL-1人参皂苷+5μg·mL-1 LPS共同干预24 h)、anti-miR-654组(转染anti-miR-654后,用2μg·mL-1人参皂苷+5μg·mL-1 LPS共同干预2...  相似文献   

2.
目的 探讨丹参素(DSS)对脂多糖(LPS)诱导的支气管上皮16HBE细胞损伤的影响及其机制。方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测DSS对16HBE细胞活力的影响以筛选无毒性的DSS作用浓度。用LPS诱导构建支气管上皮细胞损伤模型。将细胞分为空白组、模型组和低、中、高剂量实验组。空白组细胞正常培养,模型组以25μg·mL-1LPS诱导细胞24 h,低、中、高剂量实验组分别向LPS诱导的细胞中加入20,40,80μmol·L-1 DSS处理24 h。以MTT法检测细胞活力;以流式细胞术检测细胞凋亡情况;以酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞炎症因子分泌和氧化应激指标含量;以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(ROS)水平;以蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)蛋白的表达水平。结果 空白组、模型组和低、中、高剂量实验组细胞存活率分别为(96.11±5.14)%,(50.23±4.30)%,(51.12±4.08)%,(60.57±4.56)%和(...  相似文献   

3.
目的 探讨槲皮素对高渗透压诱导的人角膜上皮细胞HCE-2损伤的影响及其作用机制。方法 将HCE-2细胞随机分为对照组(正常渗透压)、模型组(高渗透压)、低剂量实验组(高渗透压+31.25μg·mL-1槲皮素)、中剂量实验组(高渗透压+62.50μg·mL-1槲皮素)、高剂量实验组(高渗透压+125.00μg·mL-1槲皮素)、Erastin组(高渗透压+125.00μg·mL-1槲皮素+30.00μmol·L-1铁死亡诱导剂Erastin)。用细胞计数试剂盒-8检测细胞存活率,用C11-BODIPY 581/591探针染色检测活性氧(ROS)水平,用试剂盒法测定细胞谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平,用实时荧光定量聚合酶链反应实验和蛋白质印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、二氢乳酸脱氢酶(DHODH)、铁死亡抑制蛋白1(FSP1)表达水平。结果 对照组、模型组、高剂量实验组、Erastin组细胞存活率分别为(100.00±3.97)%、(50.05±5.83)%、...  相似文献   

4.
目的 初步探讨参芪复方对高糖“代谢记忆”介导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的影响。方法 将HUVEC在高糖(30 mmol·L-1)中培养3 d,再转入正常糖(5.5 mmol·L-1)培养4 d,建立高糖“代谢记忆”细胞模型。将造模成功的细胞分为对照组和低、中、高剂量实验组;另取正常细胞作为空白组和模型组。对照组给予25 mmol·L-1白藜芦醇干预3 d;低、中、高剂量实验组分别给予100,200和400μL·mL-1参芪复方含药血清干预3 d;空白组给予5.5 mmol·L-1葡萄糖干预3 d;模型组给予30.0 mmol·L-1葡萄糖干预3 d。用CCK-8法检测细胞增殖活性,用酶联免疫吸附实验法检测细胞白细胞介素-6(IL-6)水平。结果 低、高剂量实验组和对照组、空白组、模型组在108 h时细胞活性(光密度值)分别为0.78±0.05,1.41±0.14,1.92±0.36,1.39±0.01和0.64±0.02,IL-6水平分别为21.29...  相似文献   

5.
目的 探讨大黄素对脂多糖(LPS)诱导的肝内胆管上皮细胞的影响及其作用机制。方法 用LPS方法建立肝内胆管上皮细胞炎症模型。将细胞随机分为对照组(正常培养),模型组(20μg·mL-1 LPS),低、中、高剂量实验组(20μg·mL-1 LPS+5、10、20μg·mL-1大黄素)和pcDNA-TLR4组(转染pcDNA-TLR4质粒+20μg·mL-1 LPS+20μg·mL-1大黄素)。用蛋白质印迹法检测Toll-样受体4(TLR4)、磷酸化核转录因子κB(p-NF-κB)、增殖细胞核抗原(PCNA)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)的表达情况,用细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测细胞增殖活性,用5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(Edu)实验检测细胞增殖情况,用酶联免疫吸附试验法检测炎性因子水平。结果 对照组、模型组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组和pcDNA-TLR4组的TLR4蛋白相对表达水平分别为0.21±0.02、0.92±0.11、0.74±0.0...  相似文献   

6.
目的 观察在脑电双频指数(BIS)监护仪下丙泊酚注射剂联合瑞芬太尼注射剂靶控输注用于宫颈癌根治术老年患者的临床疗效及安全性。方法 将72例择期进行宫颈癌根治术的老年患者随机分为对照组和试验组,每组36例。在肌松药起效后,对照组进行气管插管,给予3.5μg·mL-1丙泊酚+5.5 ng·mL-1瑞芬太尼进行麻醉维持;试验组连接BIS监护仪,当BIS<60进行气管插管,通过调节丙泊酚、瑞芬太尼靶控输注速度进行麻醉维持,2种药物浓度均以0.5μg·mL-1为递增或递减梯度,每个目标靶浓度输注1 min,使BIS维持在45~55。比较2组患者的血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,以及药物不良反应的发生情况。结果 术后,试验组和对照组的血清MCP-1分别为(221.11±18.34)和(663.04±53.42)pg·mL-1,血清GSH-Px分别为(1 711.94±113.42)和(1 972.64±110.52)U·mL-1,差异均...  相似文献   

7.
目的研究壁虎粗多肽(GCPs)对人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞增殖、凋亡能力的影响。方法用不同浓度GCPs(0,0.08,0.12,0.16,0.20,0.24,0.32 mg·mL-1)分别处理SH-SY5Y细胞24,48,72 h,用噻唑蓝(MTT)比色法检测SH-SY5Y细胞增殖能力的变化,根据MTT结果分组。将SH-SY5Y细胞分为空白组和低、中、高剂量实验组(GCPs:0,0.12,0.16,0.20 mg·mL-1)。用流式细胞仪检测SH-SY5Y细胞的凋亡率,用Hoechst 33258荧光染色检测细胞核变化,用蛋白质印迹法检测胱天蛋白酶-3(Caspase-3)和Caspase-9蛋白的表达水平。结果GCPs作用SH-SY5Y细胞24,48,72 h的半数抑制浓度(IC50)值分别为(0.23±0.01),(0.20±0.01)和(0.17±0.01)mg·mL-1。空白组和低、中、高剂量实验组的细胞凋亡率分别为(10.21±0.73)%,(20.93±2.07)%,(32.90±1.07)%和(57.71±8.51)%,低、中、高剂量实验组的凋亡率与空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在荧光显微镜下观察,低、中、高剂量实验组蓝色荧光分布不均,细胞核缩小,有较强荧光团出现。空白组和低、中、高剂量实验组的Caspase-3与GAPDH灰度值比值分别为0.25±0.05,0.43±0.06,0.52±0.07和0.59±0.06,低、中、高剂量实验组与空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);Caspase-9与GAPDH灰度值比值分别为0.17±0.01,0.19±0.02,0.23±0.02和0.26±0.02,高剂量实验组与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论GCPs可抑制SH-SY5Y细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与激活Caspase凋亡途径相关。  相似文献   

8.
目的 研究CXC趋化因子受体4(CXCR4)在二氢杨梅素诱导喉癌Hep-2细胞凋亡中的作用。方法 喉癌Hep-2细胞分成对照组(0μg·mL-1二氢杨梅素)、低剂量实验组(20μg·mL-1二氢杨梅素)、中剂量实验组(40μg·mL-1二氢杨梅素)、高剂量实验组(80μg·mL-1二氢杨梅素)、高剂量实验+Vector组(80μg·mL-1二氢杨梅素+pcDNA3.1)、高剂量实验+CXCR4组(80μg·mL-1二氢杨梅素+pcDNA3.1-CXCR4)。以蛋白质印迹法检测CXCR4、剪切的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)蛋白表达,以噻唑蓝(MTT)方法检测细胞存活率,以流式细胞术测定细胞凋亡。结果 对照组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组、高剂量实验+Vector组、高剂量实验+CXCR4组喉癌细胞中CXCR4蛋白表达水平分别为0.58±0.04,0...  相似文献   

9.
喻伟  李丽 《中国临床药理学杂志》2022,(10):1074-1077+1082
目的 探讨谷氨酰胺(Gln)对脂多糖(LPS)诱导结肠上皮细胞炎症损伤的保护作用。方法 培养结肠上皮细胞Caco-2,并随机分为Control组,LPS组和0.5,1,2 mmol·L-1 Gln组。Control组细胞正常培养,其余组细胞用10μg·mL-1 LPS处理24 h后加入0.5,1,2 mmol·L-1 Gln处理。2 mmol·L-1 Gln组再加入西罗莫司(RAPA)处理,为2 mmol·L-1 Gln+RAPA组。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;以流式细胞术检测谷氨酰胺对LPS诱导Caco-2细胞凋亡的影响以及激活雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路逆转谷氨酰胺对LPS诱导Caco-2细胞功能的影响;以酶联免疫吸附(ELISA)法检测谷氨酰胺对LPS诱导的Caco-2细胞白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-8(IL-8)影响;以蛋白质印迹法检测谷氨酰胺对LPS诱导Caco-2细胞mTOR信号通路的影响。结果 不同浓度的Gln能够促进正常结肠上皮细胞...  相似文献   

10.
目的 研究竹节参皂苷Ⅳa(CsⅣa)抑制THP-1源性巨噬细胞泡沫化的作用机制。方法 培养THP-1源性巨噬细胞,分为对照组、模型组和低、高剂量实验组。对照组常规培养,模型组细胞用50μg·mL-1氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理,低、高剂量实验组分别用25,50μmol·L-1的CsⅣa处理1 h,再用50μg·mL-1ox-LDL处理。用细胞计数法-8(CCK-8)检测THP-1源性泡沫细胞活力,用油红O法检测巨噬细胞泡沫化程度,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)、p62、Beclin1、TNF-α、IL-1β的mRNA水平,用蛋白质印迹法检测LC3、p62、Beclin1蛋白水平。结果 对照组、模型组和低、高剂量实验组TNF-α分别为(0.68±0.07),(1.24±0.13),(0.95±0.05)和(0.80±0.03)pg·mL-1,IL-1β为...  相似文献   

11.
目的 研究竹节参皂苷Ⅳa(CsⅣa)抑制THP-1源性巨噬细胞泡沫化的作用机制。方法 培养THP-1源性巨噬细胞,分为对照组、模型组和低、高剂量实验组。对照组常规培养,模型组细胞用50μg·mL-1氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理,低、高剂量实验组分别用25,50μmol·L-1的CsⅣa处理1 h,再用50μg·mL-1ox-LDL处理。用细胞计数法-8(CCK-8)检测THP-1源性泡沫细胞活力,用油红O法检测巨噬细胞泡沫化程度,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)、p62、Beclin1、TNF-α、IL-1β的mRNA水平,用蛋白质印迹法检测LC3、p62、Beclin1蛋白水平。结果 对照组、模型组和低、高剂量实验组TNF-α分别为(0.68±0.07),(1.24±0.13),(0.95±0.05)和(0.80±0.03)pg·mL-1,IL-1β为...  相似文献   

12.
目的 研究达格列净对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的保护作用。方法 将HK-2细胞随机分为空白组、对照组、模型组和实验组。空白组不进行任何干预;对照组加入5μmol·L-1达格列净;模型组加入25 mmol·L-1葡萄糖;实验组加入25 mmol·L-1葡萄糖和5μmol·L-1达格列净,各组细胞培养24 h后进行后续检测。用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况,用酶生化法和荧光显微镜法检测各组细胞内丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)水平,用酶联免疫吸附法检测各组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和转化生长因子-β1(TGF-β1)、肝细胞生长因子(HGF)水平。结果 空白组、对照组、模型组和实验组HK-2细胞的凋亡率分别为(4.73±0.46)%,(4.46±0.61)%,(35.42±2.37)%和(19.55±1.87)%;细胞增殖光密度值分别为0.52±0.09,0.49±0.07,0.13±0.03和0.29±0.05;细胞内MDA水平分别为...  相似文献   

13.
目的 观察丹皮酚是否能够影响巨噬细胞M1极化。方法 用Toll样受体7/8激动药雷西莫特(R848)刺激RAW264.7细胞建立M1型巨噬细胞模型。将细胞分为对照组、模型组、高剂量实验组。对照组细胞正常培养;模型组用2μg·mL-1的R848处理24 h,高剂量实验组用2μg·mL-1R848和30μmol·L-1丹皮酚处理24 h。以酶联免疫吸附(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌水平;以流式细胞术检测CD80阳性表达的巨噬细胞比例;以实时荧光定量多聚核苷酸链反应(Q-PCR)检测TNF-α、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA的表达水平;以蛋白质印迹法检测iNOS蛋白表达情况。结果 高剂量丹皮酚干预R848诱导的M1极化24 h后,对照组、模型组和高剂量实验组上清中TNF-α水平分别为(355.55±16.45)、(552.69±18.09)和(447.71±22.71)ng·L-1;CD80阳性细胞比例分别为(16.29±0.50)%、(43.57±3.78)%和(36.0...  相似文献   

14.
目的 探索三阴性乳腺癌细胞应用黄芪多糖(APS)处理后,细胞增殖和侵袭能力的变化,及其对Wnt/β-catenin通路的影响。方法 将BT-549细胞分为BT-549空白组(常规培养)和BT-549低、中、高剂量实验组(分别给予200、400、800μg·mL-1黄芪多糖处理);将MDA-MB-453细胞分为MDA-MB-453空白组(常规培养)和MDA-MB-453低、中、高剂量实验组(分别给予200、400、800μg·mL-1黄芪多糖处理)。以细胞计数试剂盒-8(CCK8)实验测定细胞增殖情况;以划痕实验检测细胞迁移情况;以Transwell法检测细胞侵袭情况;以蛋白质印迹法检测细胞β-连环蛋白(β-catenin)、c-myc、细胞周期素D1(Cyclin D1)蛋白表达水平。结果 BT-549细胞空白组和低、中、高剂量实验组的细胞存活率分别为(100.00±0.00)%、(91.24±3.61)%、(87.19±4.83)%和(84.45±2.66)%,迁移程度分别为(29.16±4.96)%、(25.69±4.14)%、(22.3...  相似文献   

15.
目的 探讨黄芪多糖(APS)如何影响荷腹水瘤小鼠的氧化应激功能。方法 取生长良好的S180细胞配成瘤细胞悬液接种于小鼠腹腔内,建立腹水瘤模型。将荷瘤小鼠随机分为模型组(腹腔注射0.9%NaCl 100 mL)、对照组(腹腔注射100 mg·kg-1环磷酰胺100 mL)和低、中、高剂量实验组(分别腹腔注射20,40和60 mg·mL-1 APS 100 mL),每组30只;另取18只正常小鼠作为空白组(腹腔注射0.9%NaCl 100 mL)。6组小鼠均每天给药1次,连续给药28 d。用比色法测定血清、肝和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮(NO)、髓过氧化物酶(MPO)和总抗氧化能力(T-AOC)的含量。结果 干预28 d后,APS使血清SOD水平由模型组中的(64.78±3.92)U·mL-1升高至高剂量实验组的(102.35±9.84)U·mL-1,其余CAT、GSH-Px、T-AOC水平同样明显升高,使MDA...  相似文献   

16.
目的 探究灵芝酸D(GAD)对人结直肠肿瘤细胞凋亡的影响及其分子机制。方法 将直肠癌细胞系SW620分为6组:空白对照组(完全培养基)、低(5μmol·L-1 GAD)、中(10μmol·L-1 GAD)、高(20μmol·L-1 GAD)3个剂量实验组、Pifithrin-α组(3μg·mL-1 Pifithrin-α)和联合组(3μg·mL-1 Pifithrin-α+20μmol·L-1 GAD)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖能力,用Caspase-3/Caspase-8/Caspase-9检测试剂盒检测相应蛋白活性,用蛋白质印迹法检测抑癌蛋白p53(p53),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白质的表达水平。结果 空白对照组和低、中、高3个浓度实验组细胞增殖活性分别为(96.33±2.62)%,(95.00±1.63)%,(70.33±5.91)%和(49.00±3.56)%;4组Caspase-...  相似文献   

17.
目的 考察甲泼尼龙片对泊沙康唑口服混悬液在大鼠体内药代动力学的影响。方法 将大鼠随机分为实验组和对照组,每组5只。实验组灌胃给予3.6 mg·kg-1甲泼尼龙灌胃液,qd,连续7 d;对照组灌胃给予等量纯化水,qd,连续7 d。第8天,2组大鼠分别给予甲泼尼龙或纯化水后,立即灌胃给予20 mg·kg-1泊沙康唑口服混悬液。于给药后不同时间点眼内眦取血,用HPLC法测定泊沙康唑血药浓度,用DAS 2.1.1软件拟合药代动力学参数。结果 实验组和对照组的AUC0-t分别为(12.20±4.16)和(22.63±4.33)μg·mL-1·h, AUC0-∞分别为(24.80±6.62)和(27.25±4.75)μg·mL-1·h,t1/2分别为(21.91±4.32)和(13.30±2.21)h,Cmax分别为(0.84±0.15)和(1.21±0.09)μg·mL-1,表观分布容积(V...  相似文献   

18.
目的 探讨马齿苋多糖对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及其机制。方法 水提醇沉法提取马齿苋多糖,配置浓度为10 mg·mL-1马齿苋多糖溶液。将小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组、低剂量实验组、高剂量实验组。低、高剂量实验组分别灌胃10和40 mg·kg-1·d-1马齿苋多糖溶液,阳性对照组灌胃2 mg·kg-1·d-1地塞米松,空白组和模型组灌胃等量蒸馏水。灌胃7 d后,除空白组外,其余各组均腹腔注射10 mg·kg-1 LPS制备急性肺损伤模型。24 h后眼眶取血及肺组织样本。用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;用比色法测定肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)和血清中超氧化物歧化酶(SOD)含量;用原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡情况;用蛋白质印迹法检测肺中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白88(MyD88)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)表达情况。结果 空白组、模型组、...  相似文献   

19.
目的 探讨川陈皮素(NOB)对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜细胞(hPDLCs)损伤的影响及其机制。方法 将体外培养的hPDLCs分为对照组(不做处理)、模型组(10μg·mL-1 LPS处理24 h)和低、中、高剂量实验组(模型组的基础上分别使用5,10和20μmol·L-1 NOB处理24 h),采用流式细胞术和酶联免疫吸附测定法(ELISA)分别检测各组细胞凋亡率和细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-6含量,以蛋白质印迹法检测细胞中微管相关蛋白1(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶(caspase)-1和IL-1β蛋白表达水平。结果 对照组、模型组和低、中、高剂量实验组细胞存活率分别为(96.13±5.33)%,(62.47±4.19)%,(68.25±4.83)%,(75.77±5.07)%和(83.60±5.88)%,凋亡率分别为(5.05±1.31)%,(33.86±2.27)%,(28.63±2.22)%,(2...  相似文献   

20.
目的 考察刺苋根不同部位提取物在体外对草酸钙致人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的保护作用。方法 以氯化钙和草酸钠损伤HK-2细胞模型体外筛选,以CCK-8法检测刺苋根不同部位提取物对草酸钙致HK-2细胞损伤的保护作用,并通过HE染色,观察HK-2细胞形态。结果 刺苋根不同部位提取物可不同程度提高草酸钙损伤后细胞的存活率,2、1、0.5、0.25 mg·mL-1醇提取液组细胞存活率分别为(105.80±0.08)%、(111.79±0.01)%、(121.43±0.20)%、(128.92±0.00)%;0.5、0.25 mg·mL-1石油醚提取液组细胞存活率分别为(112.72±0.45)%、(99.94±0.28)%;1、0.5、0.25 mg·mL-1乙酸乙酯提取液组细胞存活率分别为(14.04±0.03)%、(111.24±0.08)%、(121.37±0.03)%;1、0.5、0.25 mg·mL-1正丁醇提取液组细胞存活率分别为(103.14±0.14)%、(145.16±0.29)%、(...  相似文献   

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