人参皂苷通过调控miR-654对脂多糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的 探讨人参皂苷对脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡、氧化应激的影响,及其对miR-654的调控作用。方法 用LPS诱导肾小管上皮细胞(HK-2细胞)建立脓毒症所致急性肾损伤模型。实验分组：空白组(正常培养的细胞)、模型组(5μg·mL^-1 LPS干预24 h)和低、中、高剂量实验组(1,2和3μg·mL^-1人参皂苷+5μg·mL^-1 LPS共同干预24 h)、miR-NC组(转染miR-NC后,用5μg·mL^-1 LPS干预24 h)、miR-654组(转染miR-654 mimics后,用5μg·mL^-1 LPS干预24 h)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC后,用2μg·mL^-1人参皂苷+5μg·mL^-1 LPS共同干预24 h)、anti-miR-654组(转染anti-miR-654后,用2μg·mL^-1人参皂苷+5μg·mL^-1 LPS共同干预2...     

柚皮苷通过上调miR-628-5p抑制宫颈癌ME-180细胞增殖和周期进展

目的 探讨柚皮苷影响宫颈癌ME-180细胞增殖和周期的机制。方法 将宫颈癌ME-180细胞分成宫颈癌ME-180细胞分成对照组（正常培养）、实验组(64μmol·L^-1的柚皮苷处理)、实验组+Anti-miR-NC组(64μmol·L^-1的柚皮苷+转染inhibitor control处理)、实验组+Anti-miR-628-5p组(64μmol·L^-1的柚皮苷+转染miR-628-5p inhibitor处理)。转染前将对数期的ME-180细胞浓度调整为每毫升5×10⁴个,接种于无菌细胞培养板,细胞融合度至75%～85%时,用0.5%胰蛋白酶消化,用Lipofectamine^?2000转染试剂将inhibitor control、miR-628-5p inhibitor转染进细胞。用实时定量反转录聚合酶链反应方法检测miR-628-5p表达;用噻唑蓝法测定各组细胞增殖活力;用碘化丙啶单染法检测周期;用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;用蛋白质印迹法检测蛋白...     

龙葵碱通过调节miR-140和结肠癌转移相关基因1调控胃癌细胞增殖和凋亡

目的探讨龙葵碱对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及其潜在分子机制。方法转染前,将胃癌SGC-7901细胞分为4组:对照组(常规培养)、低、中、高剂量龙葵碱组(分别给予25,50,100μg·mL^-1龙葵碱处理48 h)。选用100μg·mL^-1龙葵碱进行后续实验。将miRNA模拟物(miR-mimics)、miRNA抑制剂(miR-inhibitor)阴性对照及miR-140-mimics、miR-140-inhibitor分别转染至SGC-7901细胞,分别命名为第1转染组、第2转染组、第3转染组、第4转染组。将第3转染组和第4转染组细胞分别给予100μg·mL^-1龙葵碱处理,分别命名为第5转染组和第6转染组。用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡情况,用实时荧光定量链式聚合酶反应(RT-qPCR)检测miR-140、结肠癌转移相关基因1(MACC1) mRNA相对表达量表达。结果对照组、高剂量龙葵碱组、第1转染组、第2转染组、第3转染组、第4转染组、第5转染组、第6转染组的细胞增殖率分别为(100.00±9....     

舒芬太尼对心肌细胞缺血/再灌注细胞损伤的影响

目的 研究舒芬太尼通过miR-199a-3p调节线粒体自噬减轻心肌细胞缺血/再灌注损伤的机制。方法 以缺氧/复氧处理体外构建缺血/再灌注心肌细胞H9c2模型,实验分成对照组、模型组、实验组(0.4 ng·mL^-1舒芬太尼)、实验+anti-miR-NC组(0.4 ng·mL^-1舒芬太尼、inhibitor control)、实验+anti-miR-199a-3p组(0.4 ng·mL^-1舒芬太尼、miR-199a-3p inhibitor)。以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法检测miR-199a-3p表达,以流式细胞术检测细胞凋亡情况,以蛋白质印迹法检测自噬蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1表达,以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯法检测活性氧（ROS）,以JC-1法检测线粒体膜电位。结果 对照组、模型组、实验组、实验+anti-miR-NC组、实验+anti-miR-199a-3p组心肌细胞中miR-199a-3p表达水平为1.00±0.09,0.56±0.05,0.92±0.06,0.90±0.07,0.42±0.02,细胞凋...     

雷公藤多苷对人支气管上皮细胞16HBE凋亡和炎症因子释放的影响

目的 研究雷公藤多苷对屋尘螨抗原Derp1诱导的人支气管上皮细胞16HBE凋亡和炎症因子释放的影响。方法 人支气管上皮细胞16HBE分成对照组、Derp1组（屋尘螨抗原Derp1处理）、实验-5μg·mL^-1组(5μg·mL^-1雷公藤多苷和屋尘螨抗原Derp1处理)、实验-10μg·mL^-1组(10μg·mL^-1雷公藤多苷和屋尘螨抗原Derp1处理)、实验-10μg·mL^-1+pcDNA组(转染pcDNA,10μg·mL^-1雷公藤多苷和屋尘螨抗原Derp1处理)、实验-10μg·mL^-1+pcDNA-高迁移率族蛋白B1（HMGB1）组(转染pcDNA-HMGB1,10μg·mL^-1雷公藤多苷和屋尘螨抗原Derp1处理)。用蛋白质印迹法检测HMGB1、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达,用流式细胞术检测细胞凋亡,用酶联免疫吸附法检测培养液上清液中白细胞介素-6（IL-6）、肿...     

二氢杨梅素诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的机制研究

目的 研究CXC趋化因子受体4(CXCR4)在二氢杨梅素诱导喉癌Hep-2细胞凋亡中的作用。方法 喉癌Hep-2细胞分成对照组(0μg·mL^-1二氢杨梅素)、低剂量实验组(20μg·mL^-1二氢杨梅素)、中剂量实验组(40μg·mL^-1二氢杨梅素)、高剂量实验组(80μg·mL^-1二氢杨梅素)、高剂量实验+Vector组(80μg·mL^-1二氢杨梅素+pcDNA3.1)、高剂量实验+CXCR4组(80μg·mL^-1二氢杨梅素+pcDNA3.1-CXCR4)。以蛋白质印迹法检测CXCR4、剪切的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)蛋白表达,以噻唑蓝(MTT)方法检测细胞存活率,以流式细胞术测定细胞凋亡。结果 对照组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组、高剂量实验+Vector组、高剂量实验+CXCR4组喉癌细胞中CXCR4蛋白表达水平分别为0.58±0.04,0...     

萝卜硫素通过调控OGG1基因抑制动脉粥样硬化相关巨噬细胞脂质积聚的研究

目的 探讨萝卜硫素对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞脂质积聚的影响和作用机制。方法 将细胞分为对照组、ox-LDL组(100μg·mL^-1 ox-LDL)、萝卜硫素低剂量组(100μg·mL^-1 ox-LDL+5μmol·L^-1萝卜硫素)、萝卜硫素高剂量组(100μg·mL^-1 ox-LDL+10μmol·L^-1萝卜硫素)、si-OGG1组(100μg·mL^-1 ox-LDL+10μmol·L^-1萝卜硫素+转染si-OGG1)。以蛋白质印迹法检测各组细胞蛋白表达水平,以酶联免疫吸附测定法检测各组细胞炎性因子及8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达水平,以氧化酶法检测细胞内胆固醇水平,以探针法检测活性氧(ROS)水平,以流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 对照组、ox-LDL组、萝卜硫素低剂量组、萝卜硫素高剂量组、si-OGG1组的8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶1(OGG1)蛋白相对表达水平分别为0.80±0.03、0.26±0....     

大黄素对脂多糖诱导的胆管上皮细胞炎症反应的影响

目的 探讨大黄素对脂多糖(LPS)诱导的肝内胆管上皮细胞的影响及其作用机制。方法 用LPS方法建立肝内胆管上皮细胞炎症模型。将细胞随机分为对照组(正常培养),模型组(20μg·mL^-1 LPS),低、中、高剂量实验组(20μg·mL^-1 LPS+5、10、20μg·mL^-1大黄素)和pcDNA-TLR4组(转染pcDNA-TLR4质粒+20μg·mL^-1 LPS+20μg·mL^-1大黄素)。用蛋白质印迹法检测Toll-样受体4(TLR4)、磷酸化核转录因子κB(p-NF-κB)、增殖细胞核抗原(PCNA)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)的表达情况,用细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测细胞增殖活性,用5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(Edu)实验检测细胞增殖情况,用酶联免疫吸附试验法检测炎性因子水平。结果 对照组、模型组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组和pcDNA-TLR4组的TLR4蛋白相对表达水平分别为0.21±0.02、0.92±0.11、0.74±0.0...     

三叶青总黄酮增强三阴性乳腺癌细胞对EGFR-TKI敏感性的机制研究

目的 探讨三叶青总黄酮（RTF）对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制药（EGFR-TKI）药物吉非替尼（GEF）敏感性的影响及其机制。方法 以不同浓度的RTF或RTF联合不同浓度的GEF处理MDA-MB-231细胞后,采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力;将细胞分为对照组（培养基处理）、RTF(25μg·mL^-1 RTF处理)组、GEF(10μg·mL^-1 GEF处理)组、GEF+RTF组(10μg·mL^-1 GEF和25μg·mL^-1 RTF共同处理)和GEF+RTF+RAPA组(10μg·mL^-1 GEF、25μg·mL^-1 RTF和10 nmol·L^-1 RAPA共同处理)。流式细胞仪检测细胞周期与凋亡;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）和自噬相关蛋白微管相关...     

山奈酚通过调控miR-21/SOX9对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨山奈酚(KAE)对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:将C28/I2细胞分为对照组(正常培养的C28/I2细胞)、模型组(100 ng·ml^-1 LPS)、山奈酚低(KAE-L组,25μmol·L^-1 KAE+100 ng·ml^-1 LPS)、中(KAE-M组,50μmol·L^-1 KAE+100 ng·ml^-1 LPS)、高(KAE-H组,100μmol·L^-1 KAE+100 ng·ml^-1 LPS)剂量组。利用Lipofectamine^TM2000转染试剂盒对C28/I2细胞进行转染,并分为：mimics NC组(转染mimics NC+100 ng·ml^-1 LPS)、miR-21 mimics组(转染miR-21 mimics+100 ng·ml^-1 LPS)、inhibitor NC组(转染inhibitor NC+100 ng·m...     

硫利达嗪调控长链非编码RNA癌症易感候选基因7对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制

目的 研究硫利达嗪调控长链非编码RNA癌症易感候选基因7（CASC7）对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法 膀胱癌T24细胞分成对照组、Vector组、CASC7组、实验组、实验组+sh-NC组、实验组+sh-CASC7组。Vector组转染阴性对照载体、CASC7组转染CASC7过表达载体。对照组正常培养,实验组给予48μmol·L^-1的硫利达嗪处理,实验组+sh-NC组先转染shRNA control再给予48μmol·L^-1的硫利达嗪处理,实验组+sh-CASC7组先转染CASC7 shRNA再给予48μmol·L^-1的硫利达嗪处理。转染前将对数期的T24细胞调整浓度为每毫升5×10⁴个,接种于无菌细胞培养板,细胞融合度至75%～85%时,使用0.5%胰蛋白酶消化,用Lipofectamine^? 2000转染试剂将阴性对照载体、CASC7过表达载体、shRNA control、CASC7 shRNA转染进细胞。以实时定量反转录聚合酶链反应检测CASC7表达水平;以细胞...     

黄芪对高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的 研究黄芪在高糖诱导的血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和迁移中的作用及其机制。方法 取VSMCs随机分为对照组（普通培养）、高糖组(25mmol·L^-1葡萄糖)、实验组(25 mmol·L^-1葡萄糖+40μg·m L^-1黄芪)、第1转染组(转染阴性对照寡核苷酸+25 mmol·L^-1葡萄糖+40μg·ml^-1黄芪)、第2转染组(转染miR-18a-5p模拟物+25 mmol·L^-1葡萄糖+40μg·m L^-1黄芪)。以细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测细胞的存活率;以划痕实验检测细胞迁移情况;以实时定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测miR-18a-5p的表达;以蛋白质印迹法检测线粒体融合蛋白2 （MFN2）蛋白的表达。结果 对照组、高糖组和实验组VSMCs存活率分别为（100.00±10.00）%,（188.24±18.17）%和（123.52±12.66）%;VSMCs迁移率分别为（15.16±1.64）%,（53...     

钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ在非霍奇淋巴瘤中的功能和作用研究

目的 探讨钙离子-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）在非霍奇淋巴瘤中的功能及作用机制。方法 人Burkitt’s淋巴瘤Raji细胞随机分为空白组、对照组、实验组和联合组。空白组给予RPMI1640培养基进行培养；对照组先给予pCaMKⅡshRNA-1和pCaMKⅡshRNA-2转染后，再给予RPMI1640培养基进行培养；实验组先给予pcDNA3.1/CaMKⅡ真核表达质转染后，再给予RPMI1640培养基培养；联合组先用pcDNA3.1/CaMKⅡ真核表达质粒转染后，再给予含20μmol·L^-1 SP600125的RPMI1640培养基进行培养。干预48 h后，用流式细胞仪检测细胞凋亡率，用Western blot法检测淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、磷酸化即刻早期原癌基因（p-c-Jun）和磷酸酸化c-Jun N末端激酶（p-JNK）蛋白的表达情况。结果 干预48 h后，实验组、对照组、联合组和空白组的细胞凋亡率分别为（29.57±4.38）%,（5.23±0.89）%,（21.24±0.97）%和（11.85±1.24）%,Bcl-2蛋白相对表达量分别为0....     

蟾毒灵通过抑制乏氧状态下的乳酸生成调节M2型巨噬细胞极化逆转结肠癌耐药

目的 探讨蟾毒灵(Bu)抑制乏氧状态下乳酸生成调节M2型巨噬细胞极化逆转结肠癌耐药的作用。方法 (1)将HCT116细胞分为常氧组(HCT116_N)、乏氧组(HCT116_H)和乏氧+BU组(HCT116_H+BU),常氧组给予RPMI1640培养基进行培养,乏氧组给予含200μmol·L^-1 CoCl₂的RPMI1640培养基进行培养,乏氧+BU组给予含25 nmol·L^-1 BU的RPMI1640培养基(含200μmol·L^-1 CoCl₂)进行培养。(2)用佛波酯(200 ng·mL^-1)将THP-1诱导48 h后成为M0巨噬细胞;将M0巨噬细胞分为空白组(M0)、常氧对照组(HCT116_N-Mφ)、乏氧模型组(HCT116_H-Mφ)、乏氧+乳酸抑制剂(Lactate inhibitor)实验组(HCT116_H+Lactat...     

金粉蕨素通过circ＿0136666/miR-370轴对肺癌A549细胞糖酵解、增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨金粉蕨素(ONY)对肺癌A549细胞糖酵解、增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法体外培养A549细胞,用不同浓度(5、10、20μg·mL^-1)ONY作用24 h,转染circ＿0136666的小干扰RNA至A549细胞,或将20μg·mL^-1 ONY作用于转染circ＿0136666过表达载体的A549细胞。酶联免疫吸附法检测细胞中的葡萄糖水平及细胞培养上清中的乳酸含量,CCK-8检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blotting检测Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达,RT-qPCR检测circ＿0136666和miR-370表达,双荧光素酶报告基因实验验证A549细胞中circ＿0136666和miR-370的调控关系。结果 经5、10、20μg·mL^-1 ONY干预后,A549细胞葡萄糖消耗量和乳酸产生量、细胞迁移数和侵袭数、Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平及circ＿0136666表达水平明显降低(P<0.05),而细胞增殖抑制率、miR...     

miR-195-3p在同型半胱氨酸诱导的肝氧化应激损伤中的调控作用研究

目的 探讨miR-195-3p在同型半胱氨酸(Hcy)诱导的肝氧化应激损伤中的作用。方法 小鼠分为CBS^+/+组、CBS^+/-组、Lv-miR-195-3p组(CBS^+/-小鼠经尾静脉注射病毒滴度为2×10⁷ TU·mL^-1的miR-195-3p重组慢病毒)、Lv-GFP组(CBS^+/-小鼠经尾静脉注射等体积病毒滴度为1×10⁸ TU·mL^-1的绿色荧光蛋白慢病毒)和PBS组(CBS^+/-小鼠经尾静脉注射等体积磷酸盐缓冲液),每组10只。体外培养人源肝细胞(HL-7702),分为对照组(0μmol·L^-1 Hcy)、Hcy组(100μmol·L^-1 Hcy)、mimic-NC组(转染模拟物对照组)、mimic-NC+Hcy组(转染模拟物对照组+100μmol·L^-1 Hcy)、miR-195-3p-mimic组(转染miR-1...     

姜黄素通过上调miR-34a抑制人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的恶性生物学行为

目的 探讨姜黄素对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞恶性生物行为的影响及其可能作用机制。方法 CCK8法检测姜黄素(0、6.25、12.5、25、50和100μmol·L^-1)作用下细胞活力并筛选出后续姜黄素处理浓度(0、6.25、12.5、25μmol·L^-1),流式细胞法、划痕实验、Transwell实验和Western blot分别检测细胞凋亡、迁移、侵袭及相关蛋白水平。使用qRT-PCR法检测SH-SY5Y细胞miR-34a表达水平,构架miR-34a低表达SH-SY5Y细胞系(miR-34a inhibitor组)及其阴性对照(NC组)、对照组(Control组),三组细胞系均给予姜黄素(25μmol·L^-1)处理分别记为黄素+miR-34a inhibitor组、姜黄素+NC组、姜黄素组,另设置空白对照组,采用上述相同方法检测各组细胞凋亡、迁移、侵袭及相关蛋白水平和p-p65、p-IκBα蛋白水平。结果 当姜黄素干预浓度达到12.5μmol·L^-1时,SH-SY5Y细胞存活率显著低于无姜黄...     

miRNA-21通过对血小板源性生长因子B和血管内皮生长因子的调控促进肝星状细胞活化的研究

目的 研究miRNA-21通过对血小板源性生长因子B（PDGF-B）和血管内皮生长因子（VEGF）的调控促进肝星状细胞（HSC）活化的分子机制。方法 将大鼠肝星状细胞HSC-T6分为正常组、酒精组、miRNA-21模拟物组和miRNA-21抑制剂组。正常组给予含有10%胎牛血清的DMEM培养基正常培养48 h;酒精组给予含有100 mmol·L^-1乙醇和10%胎牛血清的DMEM培养基培养48 h; miRNA-21模拟物组将miRNA-21模拟物用Lip3000转染试剂瞬时转染入细胞，再用含有100 mmol·L^-1乙醇和10%胎牛血清的DMEM培养基培养48 h; miRNA-21抑制剂组将miRNA-21抑制剂用Lip3000转染试剂瞬时转染入细胞，再用含有100 mmol·L^-1乙醇和10%胎牛血清的DMEM培养基培养48 h。用CCK-8实验检测细胞的增殖情况，用蛋白质印迹法检测PDGF-B和VEGF因子的表达情况。结果 正常组、酒精组、miRNA-21模拟物组和miRNA-21抑制剂组的细胞增殖率分别为0.17...     

金银花含药血清对脂多糖诱导的人牙周膜细胞活性及NLRP3/IL-1β通路的影响

目的 探讨金银花含药血清对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜细胞(HPDLCs)活性及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、白细胞介素1β(IL-1β)通路的影响。方法 将20只大鼠按随机数字表法分为对照组(生理盐水)和金银花组(5.0 g·kg^-1)，每组10只，灌胃给药，1次/d，持续14 d。将HPDLCs分为对照组(空白血清培养)、LPS组(10μg·mL^-1 LPS+空白血清培养)、金银花低浓度(HPDLCs+10μg·mL^-1 LPS+75μL空白血清培养+75μL 5%金银花含药血清)、中浓度(HPDLCs+10μg·mL^-1 LPS+75μL空白血清培养+75μL 10%金银花含药血清)、高浓度(HPDLCs+10μg·mL^-1 LPS+75μL空白血清培养+75μL 20%金银花含药血清)组。MTT检测HPDLCs细胞增殖率，Transwell小室检测HPDLCs细胞迁移，流式细胞仪检测HPDLCs细胞凋亡率，PCR检测HPDLCs中IL-1β、NLR...     

槲皮素介导铁死亡途径对高渗刺激诱导的干眼细胞模型的保护作用

目的 探讨槲皮素对高渗透压诱导的人角膜上皮细胞HCE-2损伤的影响及其作用机制。方法 将HCE-2细胞随机分为对照组(正常渗透压)、模型组(高渗透压)、低剂量实验组(高渗透压+31.25μg·mL^-1槲皮素)、中剂量实验组(高渗透压+62.50μg·mL^-1槲皮素)、高剂量实验组(高渗透压+125.00μg·mL^-1槲皮素)、Erastin组(高渗透压+125.00μg·mL^-1槲皮素+30.00μmol·L^-1铁死亡诱导剂Erastin)。用细胞计数试剂盒-8检测细胞存活率,用C11-BODIPY 581/591探针染色检测活性氧(ROS)水平,用试剂盒法测定细胞谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平,用实时荧光定量聚合酶链反应实验和蛋白质印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、二氢乳酸脱氢酶(DHODH)、铁死亡抑制蛋白1(FSP1)表达水平。结果 对照组、模型组、高剂量实验组、Erastin组细胞存活率分别为(100.00±3.97)%、(50.05±5.83)%、...