汉黄芩素调节炎症通路对膝骨关节炎大鼠炎性损伤的影响

目的 探讨汉黄芩素(wogonin,Wog)调节核因子(nuclear factor,NF)红系2相关因子(NF-erythroid 2-related factor,Nrf2)/Toll样受体(Toll like receptor,TLR)4/NF-κB通路对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠的影响。方法 将SD大鼠随机分为正常组、模型组、Wog低、中及高剂量(10、30及90 mg/kg)组,阳性对照组(塞来昔布,24 mg/kg),每组10只,用木瓜蛋白酶建立KOA大鼠模型,灌胃28 d。检测大鼠机械痛和冷痛阈值、软骨病理变化、细胞凋亡、炎症因子、氧化应激和蛋白表达水平。结果 在术后D7、D14、D21、D28,较模型组,Wog中、高剂量组和阳性对照组机械痛阈值、冷痛阈值显著上升;软骨病理损伤显著好转;细胞凋亡率、白介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、丙二醛、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3和caspase-9、基质金属蛋白酶(matrix meta...     

基于网络药理学研究汉黄芩素治疗糖尿病视网膜病变的机制

目的 基于网络药理学筛选汉黄芩素治疗糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy, DR)的特征靶点和分子通路,并通过细胞实验对关键靶点进行初步验证,阐述汉黄芩素治疗DR的作用机制。方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform, TCMSP)筛选出汉黄芩素的作用靶点,利用比较毒理学数据库(Comparative Toxicogenomics Database, CTD)、人类基因功能和网络分析数据库(Human Gene Function and Network Analysis Database, GenCLiP)、DisGeNET和GeneCards数据库筛选出DR的相关作用靶点,利用STRING数据库及Cytoscape 3.6.1软件构建蛋白相互作用网络(Protein-Protein-Interaction-Network, PPI),利用注释可视化和集成发现数据库(Database for Annotat...     

肾素-血管紧张素阻断剂对糖尿病视网膜病变的影响

糖尿病视网膜病变(DR)是最常见的糖尿病微血管并发症。肾素-血管紧张素系统(RAS)不仅存在于血循环中,眼组织局部也具有独立合成RAS的能力。RAS阻断剂可通过抑制全身及局部RAS活性,减少血管紧张素Ⅱ及醛固酮的产生,从而减少低氧所致的视网膜血管生成和血管内皮生长因子的表达,对DR具有延缓疾病进展的作用。本文综述RAS与DR的相关性及RAS阻断剂的应用。     

汉黄芩素调控TLR4/MAPK/NF-κB信号通路对糖尿病肾病大鼠肾纤维化的影响

目的研究汉黄芩素对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾纤维化的保护作用及其作用机制。方法构建DN大鼠模型。将大鼠随机分为对照组、模型组、汉黄芩素低剂量组、汉黄芩素中剂量组、汉黄芩素高剂量组、二甲双胍组,每组各10只。除对照组外,其余各组大鼠均采用腹腔注射链脲佐菌素65 mg·kg^-1联合高脂高糖喂养12周的方法构建DN大鼠模型。造模完成后,各组分别连续28 d灌胃给予相应药物或生理盐水,每天1次。给药前和给药后间隔1周分别检测各组大鼠空腹血糖(FBG)含量;28 d后,称大鼠体质量,生化分析法检测24 h尿蛋白量(24 h-Pro)和血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)含量,HE染色法观察肾组织病理学改变,Masson染色法观察肾组织纤维化状况,免疫组化检测各组大鼠肾组织相关蛋白表达,Western blot法检测肾组织蛋白TLR4、MAPK、NF-κB、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)表达。结果与对照组相比,模型组大鼠FBG含量、24 h-Pro和血清BUN、SCr含量均明显升高(P<0.01),体质量明显降低(P<0.01);肾组织出现肌束紊乱、炎性细胞浸润、弥漫性水肿、肾小球体积增大、系膜增生,肾小管扩张,肾间质大量炎性细胞浸润等病理学改变及肾小球、肾小管间质纤维化,胶原容积分数(CVF)升高(P<0.01);TLR4、MAPK、NF-κB、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ蛋白表达明显上调(P<0.01);与模型组相比,汉黄芩素各剂量组和二甲双胍组大鼠FBG含量、24 h-Pro和血清BUN、SCr含量均明显降低(P<0.01),体质量明显升高(P<0.01);肾组织纤维化明显改善,CVF明显降低(P<0.01);TLR4、MAPK、NF-κB、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论汉黄芩素可对DN大鼠肾纤维化有明显保护作用,其作用机制可能与TLR4/MAPK/NF-κB信号通路有关。     

抑制腱糖蛋白C对新生大鼠缺氧性肺动脉高压的改善功能

目的 研究抑制腱糖蛋白C(TNC)调控Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)对新生大鼠缺氧性肺动脉高压的影响。方法 将新生大鼠分成对照组、模型组(新生大鼠缺氧性肺动脉高压)、sh-NC组(新生大鼠缺氧性肺动脉高压,shRNA control慢病毒载体处理)、sh-TNC组(新生大鼠缺氧性肺动脉高压,TNC shRNA慢病毒载体处理)、sh-TNC+Vector组(新生大鼠缺氧性肺动脉高压,阴性对照慢病表达载体、TNC shRNA慢病毒载体处理)、sh-TNC+TLR4组(新生大鼠缺氧性肺动脉高压,TLR4过表达慢病表达载体、TNC shRNA慢病毒载体处理)。以免疫组化法检测TNC、TLR4、p65、内皮素-1 (ET-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X基因(Bax),以直接测压法检测平均右心室收缩压(RVSP),以苏木精-伊红(HE)染色分析中膜横截面积(MA)、中膜厚度(MT)。结果 对照组、模型组、sh-NC组、sh-TNC组、sh-TNC+Vector组和sh-TNC+TLR4组大鼠处理10 d后TLR4 I...     

自身酶解水提取黄芩中黄芩素及汉黄芩素的方法

目的建立黄芩中黄芩素及汉黄芩素的绿色环保提取方法。方法在适宜温度下,采用自身酶解法,以水为提取溶剂,借助于苷元类、黄芩药材碎块和黄芩苷的粒度和溶解度之差,分离得到黄芩苷元总提物。结果总提物中黄芩总苷元含量在70％以上,其中黄芩素含量为63％以上,汉黄芩素含量为7％以上。结论所用方法简便、快捷、成本低,是一条绿色的无污染环保提取工艺。     

肾素-血管紧张素系统与糖尿病视网膜病变

眼部组织具有独立的肾素-血管紧张素系统(RAS)。资料显示:RAS在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathyDR)发生发展过程中起着重要的作用。本文就RAS及作用于RAS的药物与糖尿病视网膜病变的关系作一概述。     

柴胡皂苷d对哮喘小鼠气道炎症及TLR4/NF-κB通路的影响

目的 探讨柴胡皂苷d(SSd)对哮喘小鼠气道炎症及Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)通路的影响.方法 健康BALB/c雌性小鼠40只,随机取6只作为对照组,除对照组外均在第1、13天腹腔注射20μg卵蛋白(OVA)和1 mg氢氧化铝[Al(OH)3]混悬液致敏,第14～30天用2％OVA 0....     

靶向调控表面活性物质蛋白B对新生大鼠胎粪吸入性肺损伤的影响

目的 研究表面活性物质蛋白B (SP-B)在胎粪吸入性肺损伤新生大鼠中的功能以及可能的作用机制。方法 将45只1日龄新生大鼠根据随机数字表法分为对照组、模型组、腺病毒对照(Ad-con)组、转染SP-B腺病毒(Ad-SP-B)组,每组10只大鼠。Ad-con组、Ad-SP-B组经口气管插管注入腺病毒Ad-con、Ad-SP-B,12 h后构建胎粪吸入性肺损伤模型;模型组构建胎粪吸入性肺损伤模型;对照组注入等量的生理盐水。造模后24 h动脉采血后处死大鼠,并取肺组织。用全自动血气分析仪检测动脉氧合指数;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达情况;用试剂盒检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;以苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化以及原位末端标记法(TUNEL)染色观察细胞凋亡;以蛋白质印迹法检测各组织中相关蛋白表达情况。结果 对照组、模型组、Ad-con组和Ad-SP-B组的动脉氧合指数分别为2.22±0.21、21.39±1.68...     

积雪草苷对哮喘幼鼠肺组织炎症和Toll样受体4/核因子-κB信号影响

目的 研究积雪草苷对哮喘幼鼠肺组织炎症和Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号影响.方法 幼鼠分成对照组、模型组(哮喘模型)、阳性对照组(地塞米松治疗)和低(10 mg·kg-1积雪草苷)、中(15 mg·kg-1积雪草苷)、高剂量实验组(20 mg·kg-1积雪草苷).以酶联免疫吸附(ELISA...     

自身酶解法测定黄芩药材中黄芩素和汉黄芩素的含量

目的 探讨一种黄芩药材中黄酮苷元类成分黄芩素和汉黄芩素定量测定方法.方法 通过黄芩自身所含的酶在适宜温度条件下将黄芩药材中的黄芩苷、汉黄芩苷等黄酮苷类成分酶解成黄芩素和汉黄芩素等黄酮苷元,再利用高效液相色谱法进行含量测定.结果 黄芩素酶解完全,色谱峰分离良好,且同一流动相下可同时测定黄芩素和汉黄芩素的含量.黄芩素的平均回收率为96.45%,RSD为1.34%(n=9);汉黄芩素的平均回收率为97.86%,RSD为1.89%(n=9).结论 所用测定方法简便、准确,为黄芩素和汉黄芩素的充分提取、分离提供了真实的基础含量数据.     

HPLC法同时测定黄芩中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定黄芩中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量.方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为277 nm;流速1.0 ml·min -1;进样量10 μl;柱温35℃.结果:黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的线性范围分别为0.059 ～ 1.175 μg,r=1.000 0(n =7)、0.010～0.204μg,r=1.000 0(n =7)和8.210×10-3～1.642×10-1 μg,r =1.000 0(n =7);提取回收率分别为99.08％,RSD=0.5％(n=6)、98.66％,RSD =0.5％ (n =6)和98.31％,RSD =0.7％ (n =6).结论:本法操作简便、快速、结果准确,可用于黄芩的质量控制.     

炎症相关信号通路在脓毒症中的研究现状

脓毒症是重症监护病房(ICU)患者常见的死亡原因,是宿主对感染的反应失调引起的危及生命的器官功能障碍.炎症反应是脓毒症的核心环节,胞(核)外感染信号通过信号转导通路传递至胞(核)内,诱导促炎因子的合成和释放,形成瀑布式级联反应,进而促进脓毒症的发生发展.本文重点阐述Toll样受体4(TLR4)/髓样分化蛋白88、TLR...     

汉黄芩素增强乙酰胆碱对大鼠胸主动脉血管的舒张作用研究

目的探讨汉黄芩素增强乙酰胆碱对大鼠胸主动脉血管的舒张作用及其作用机制。方法实验分为对照组和加药组,加药组使用含有不同浓度汉黄芩素的DMEM/F12培养基作用;对照组使用含有与加药组相同体积二甲基亚砜(DMSO)的DMEM/F12培养基作用。汉黄芩素孵育大鼠心脏微血管内皮细胞24 h,MTT法检测细胞活力;硝酸还原酶法检测细胞上清NO含量;ELISA法检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达。汉黄芩素孵育大鼠胸主动脉环24h,去甲肾上腺素(1×10~(-6) mol/L)收缩血管后应用乙酰胆碱(1×10~(-8)、1×10~(-7)、1×10~(-6)、1×10~(-5)mol/L)舒张血管,检测血管张力变化。结果与对照组比较,汉黄芩素处理细胞后,各组细胞活力没有显著变化。与对照组比较,汉黄芩素(5、20μmol/L)显著促进NO的产生(P0.01),但亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)可以抑制汉黄芩素的这种作用(P0.01)。汉黄芩素(0.5、5、20μmol/L)可以浓度相关性地促进心脏微血管内皮细胞eNOS蛋白表达,与对照组比较,汉黄芩素产生的eNOS蛋白水平差异非常显著(P0.01)。乙酰胆碱(1×10~(-8)、1×10~(-7)、1×10~(-6)、1×10~(-5)mol/L)能够浓度相关性地舒张离体大鼠胸主动脉环。与对照组比较,汉黄芩素(20μmol/L)孵育血管24h,能显著增加乙酰胆碱对大鼠胸主动脉血管环的舒张程度,降低胸主动脉血管环的收缩率(P0.01、0.05)。结论汉黄芩素可能通过促进血管内皮细胞eNOS蛋白表达和NO产生这一途径增强乙酰胆碱对血管的舒张作用。     

黄芩药材的高效液相色谱指纹图谱及黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素含量的同时测定

目的: 建立黄芩药材的HPLC指纹图谱,并同时测定不同产地商品中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量,全面评价黄芩药材质量。方法: 采用Aglient TC-C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱。采用梯度洗脱,流速为1.0 ml·min^-1;检测波长280 nm;柱温30℃。指纹图谱共有模式的建立采用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版"进行处理分析。结果: 在指纹图谱研究中,标定了9个共有峰,建立了对照指纹图谱,10批药材与共有模式之间相似性良好,相似度均在0.9以上;在所建立的分析条件下,黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素均达到了基线分离,且在线性范围内线性关系良好,3种成分的加样回收率分别为99.44%,99.71%和99.83%。结论: 本法灵敏、准确、简便,可用于黄芩药材的综合质量评价。     

用于治疗糖尿病视网膜病变的抗血管新生药物

糖尿病视网膜病变是糖尿病的主要并发症,也是中老年人失明的重要原因之一。血管新生被普遍认为是糖尿病视网膜病变的治疗靶点。综述可用于治疗糖尿病视网膜病变的抗血管新生药物,包括抗血管内皮细胞生长因子药物、皮质类固醇激素、蛋白激酶C-β抑制剂和色素上皮衍生因子等的研究进展,为该类药物的深入开发和临床应用提供思路。     

黄芪注射液对脂多糖诱导的内皮细胞炎症因子产生的影响及其机制研究

目的:观察黄芪注射液对脂多糖(LPS)诱导的内皮细胞炎症因子产生的影响,并初步探讨黄芪注射液的抗炎作用机制。方法:体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),待细胞生长到融合状态时加入不同浓度(10、20、40 mg/L)的黄芪注射液预处理2 h,然后加入LPS(1 mg/L)作用24 h。用四唑盐比色实验(MTT)检测细胞活力;半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测内皮细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达和其在上清液中的含量;实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达;凝胶电泳迁移率实验(EMSA)检测NF-κB活性。结果:LPS能明显降低细胞活力,并能显著增加ICAM-1I、L-8和TNF-αmRNA的表达和含量,同时TLR4 mRNA的表达和NF-κB的活性也显著升高,而预先应用不同浓度的黄芪注射液处理后,上述效应明显减弱。结论:黄芪注射液抑制炎症因子的产生可能与其抑制TLR-4/NF-κB信号通路有关。     

黄芩中千层纸素-A和汉黄芩素的分离鉴定与谱学研究

目的研究中药黄芩的化学成分。方法利用硅胶柱层析色谱对黄芩的氯仿部位分离,通过波谱方法进行结构鉴定。结果从黄芩的氯仿部位分离得到千层纸素-A（Ⅰ）、汉黄芩素（Ⅱ）。结论千层纸素-A（Ⅰ）和汉黄芩素的谱学特征有明显区别。     

原花青素对氧诱导视网膜病变新生血管形成及血管内皮生长因子表达的抑制研究

目的 探讨原花青素(PC)对C57小鼠氧诱导视网膜病变新生血管形成的抑制作用.方法 采用随机数字表法将105只7日龄C57小鼠随机分为正常组、氧诱导视网膜病变(OIR)组、阴性对照组(PBS)组、低剂量PC组、中剂量PC组、高剂量PC组和Lucentis组(阳性对照组),每组15只.将实验组小鼠在高氧分压环境下饲养5 ...     

汉黄芩素对大鼠致畸敏感期的毒性试验

目的：观察汉黄芩素对大鼠致畸敏感期的毒性反应。方法：将SD大鼠随机分为4组,每组16只,设空白对照组和汉黄芩素40,13．3,4．4mg·kg^-1剂量组,在受孕大鼠致畸敏感期（受孕第6～15d）给药,观察各组孕鼠的毒性情况。结果：汉黄芩素高剂量组孕鼠体重增长缓慢,躯干骨的胸骨数、骶尾椎数,前肢手掌骨的中手骨数、指骨总数和后肢脚掌骨的中足骨数、趾骨总数减少,与空白对照组相比差异也有显著性意义;高、中剂量组胎鼠的头顶骨、侧头骨和后头骨骨化不全数,与空白对照组相比差异有显著性意义（P〈0．01）。结论：未发现汉黄芩素对胎鼠有明显致畸作用。但该药高剂量可使胎鼠骨骼发育迟缓。