JQ-1联合小豆蔻明对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响北大核心CSCD

目的探讨JQ-1与小豆蔻明(CAR)联用对乳腺癌细胞MCF-7增殖和细胞凋亡的影响。方法将MCF-7细胞实验分为空白组(不给药)、对照组(10.00μmol·L^(-1)CAR)、实验组(25.00μmol·L^(-1)JQ-1)及联合组(10.00μmol·L^(-1)CAR+25.00μmol·L^(-1)JQ-1)。4组细胞均培养48 h。用CCK-8法检测细胞的增殖能力,用Annexin-V FITC/PI双染法检测细胞的凋亡情况,用蛋白质印迹法检测磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和活化后胱天蛋白酶7(Cleaved Caspase7)的表达水平。结果联合组、实验组、对照组和空白组的增殖率分别为(47.79±11.27)%、(66.75±26.56)%、(74.57±13.59)%和(100.00±0)%,细胞晚期凋亡率分别为(24.17±1.27)%、(7.07±0.80)%、(14.70±3.12)%和(4.98±2.98)%,p-PI3K蛋白相对表达水平分别为0.87±0.02、1.11±0.06、1.09±0.03和1.00±0.00,p-AKT蛋白相对表达水平分别为0.31±0.05、0.96±0.06、0.96±0.16和1.00±0.00,Cleaved Caspase7蛋白相对表达水平分别为2.70±0.04、1.51±0.03、1.28±0.01和1.00±0.00。联合组的上述指标与空白组、对照组、实验组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论JQ-1与CAR联用对乳腺癌细胞MCF-7具有增强抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用,其作用机制可能与调控PI3K/AKT通路相关。     

POLD1基因反义RNA对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用北大核心CSCD

目的研究DNA聚合酶δ催化亚基基因1(POLD1)反义RNA对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用及相应机制。方法将SMMC-7721细胞分为3组:实验组、阴性对照组、空白组。实验组及阴性对照组分别将POLD1基因反义RNA表达质粒及空质粒分别转染至SMMC-7721细胞,未经处理的SMMC-7721细胞为空白组。用聚合酶链反应法检测各组细胞POLD1基因表达情况;用细胞计数-8(CCK-8)法检测细胞增殖情况;用流式细胞术分析细胞凋亡率;用蛋白质印迹(Western blot)法检测p53、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)等凋亡相关蛋白表达量。结果实验组、阴性对照组和空白组肝癌细胞POLD1基因相对表达量分别为0.18±0.03,1.03±0.18和1.00±0.00;转染72 h增殖情况(OD_(450)值)分别为0.57±0.06,0.73±0.09和0.77±0.12;凋亡率分别为(23.43±4.12)%,(9.12±1.03)%,(1.24±0.14)%,实验组的上述指标与阴性对照组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论POLD1基因反义RNA可显著抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖,且能诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡。     

钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ在非霍奇淋巴瘤中的功能和作用研究

目的 探讨钙离子-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）在非霍奇淋巴瘤中的功能及作用机制。方法 人Burkitt’s淋巴瘤Raji细胞随机分为空白组、对照组、实验组和联合组。空白组给予RPMI1640培养基进行培养；对照组先给予pCaMKⅡshRNA-1和pCaMKⅡshRNA-2转染后，再给予RPMI1640培养基进行培养；实验组先给予pcDNA3.1/CaMKⅡ真核表达质转染后，再给予RPMI1640培养基培养；联合组先用pcDNA3.1/CaMKⅡ真核表达质粒转染后，再给予含20μmol·L^-1 SP600125的RPMI1640培养基进行培养。干预48 h后，用流式细胞仪检测细胞凋亡率，用Western blot法检测淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、磷酸化即刻早期原癌基因（p-c-Jun）和磷酸酸化c-Jun N末端激酶（p-JNK）蛋白的表达情况。结果 干预48 h后，实验组、对照组、联合组和空白组的细胞凋亡率分别为（29.57±4.38）%,（5.23±0.89）%,（21.24±0.97）%和（11.85±1.24）%,Bcl-2蛋白相对表达量分别为0....     

RNAi抑制MCF-7细胞survivin基因及对多西他赛敏感性影响

目的利用RNAi技术抑制乳腺癌细胞株MCF-7sur-vivin基因,观察MCF-7细胞株的细胞凋亡率、survivin蛋白表达及对多西他赛(docetaxel)药物敏感性的变化。方法以培养的乳腺癌MCF-7细胞株为体外研究模型,设对照组、空载体组及RNAi组进行实验。(1)半定量RT-PCR、Western blot法检测survivin mRNA、蛋白在各组细胞中的表达;(2)用流式细胞术分析各组细胞周期及细胞凋亡率的影响;(3)用MTT法分析多西他赛对各组细胞存活率作用的浓度。结果(1)RT-PCR检测结果显示,RNAi组survivin扩增条带(134bp)明显弱于空载体组及对照组,mRNA相对含量较空载体组明显下降(75.4%),差异有统计学意义(P<0.05);Western blot检测空载体组与对照组survivin蛋白条带明显存在,且基本一致,而RNAi组同样位置的条带基本消失(79.8%);(2)RNAi组细胞阻滞在G0/G1期,与空载体组和对照组分别比较,差异有统计学意义(P<0.05);(3)MTT比色法检测结果显示,不同浓度多西他赛处理后对照组、空载体组、RNAi组的IC50分别为(124.7±0.21)、(116.9±0.25)、(15.2±2.8)μg.L-1,RNAi组MCF-7细胞对多西他赛的药物敏感性增高(P=0.000)。结论RNAi明显抑制了survivin在转录及翻译水平的表达;RNAi抑制survivin基因表达,能明显提高乳腺癌MCF-7细胞对多西他赛的药物敏感性。     

黄芩苷对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响北大核心CSCD

目的研究黄芩苷对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡中的作用及其机制。方法将乳腺癌MCF-7细胞分为4组:空白组不给予任何处置;对照组给予200μmol·L^(-1)黄芩苷处理24 h;第1转染组和第2转染组分别转染inhibitor control和微小RNA-30a-5p(miR-30a-5p)inhibitor,并添加200μmol·L^(-1)黄芩苷处理24 h。用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-30a-5p的水平;用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖;用Transwell小室法检测细胞的侵袭;用流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果空白组、对照组、第1转染组、第2转染组细胞miR-30a-5p水平分别为0.98±0.05,2.51±0.37,2.32±0.28,1.27±0.18;增殖抑制率分别为(3.46±0.79)%,(31.65±2.38)%,(34.82±3.14)%,(12.53±1.62)%;侵袭的细胞数目分别为(53.67±3.12),(23.14±2.02),(25.67±1.87),(41.15±3.73)个;凋亡率分别为(6.72±0.48)%,(13.79±1.63)%,(12.65±0.78)%,(8.36±0.52)%。对照组与空白组比较,第2转染组与第1转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芩苷通过上调乳腺癌细胞中miR-30a-5p的表达,抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡。     

他莫昔芬对三阴乳腺癌细胞饥饿耐受的影响及其机制研究北大核心CSCD

目的探讨他莫昔芬(TAM)对三阴乳腺癌(TNBC)MDA-MB-468细胞耐受饥饿的影响,研究G蛋白偶联雌激素受体-自噬相关蛋白Beclin-1(GPER-Beclin-1)通路在其中的作用。方法用血清饥饿方法建立模型细胞,并分为对照组和实验组。另取常规培养的MDA-MB-468细胞作为空白组。对照组和实验组分别以1‰二甲基亚砜和5μmol·L^(-1)TAM处理48 h,空白组常规培养48 h。用siRNA转染技术沉默模型细胞中GPER表达,并分为GPER-NC组(空载转染)和GPER-si组(转染GPER)。GPER-NC组和GPER-si组均以5μmol·L^(-1)TAM处理8 h。用结晶紫染色法检测细胞贴壁存活率,用蛋白印迹法检测LC3B和Beclin-1蛋白表达,并评估自噬能力。结果血清饥饿48 h,实验组、对照组和空白组细胞的贴壁存活率分别为(128.77±6.66)%,(101.00±3.26)%和(177.25±4.45)%,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ相对蛋白表达量分别为(142.15±5.25)%,(100.33±4.55)%和(65.34±8.78)%,Beclin-1相对蛋白表达量分别为(156.22±7.88)%,(101.25±3.80)%和(97.97±8.90)%,实验组和对照组的上述指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。血清饥饿48h,GPER-NC组和GPER-si组细胞的贴壁存活率分别为(103.55±6.68)%和(49.74±5.15)%,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ相对蛋白表达量分别为(98.36±6.68)%和(64.54±5.25)%,Beclin-1相对蛋白表达量分别为(105.39±6.68)%和(31.03±8.76)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 TAM能增强TNBC MDA-MB-468饥饿耐受能力,该效应可能与GPER-Beclin-1通路激活自噬有关。     

人成纤维细胞生长因子受体1基因表达抑制通过线粒体途径影响血管瘤内皮细胞凋亡的研究

目的 探讨人成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)基因表达抑制通过线粒体途径影响血管瘤内皮细胞(hemangioendothelial cells, HemECs)凋亡。方法 将HemECs分为空白组(仅加入脂质体)、对照组(转染阴性对照siRNA)和实验组(转染靶向抑制FGFR1的siRNA)。转染48 h,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用蛋白质印迹法检测FGFR1、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B lymphoma-2 related X protein, Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-X基因长片段(B cell lymphoma/leukemia-X gene long fragment, Bcl-xl)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteine aspartate proteolytic enzyme 3,Caspase-3)和Caspase-9蛋白的表达水平。结果 干预细胞48 h,实验组、对照组和空白组的细胞凋亡率分别为(19.27±1.67)%,(3.47±0.21)%和(3.62±0.24)%,...     

MiR-497-5p对紫杉醇耐药乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响北大核心CSCD

目的探讨miR-497-5p对乳腺癌紫杉醇耐药细胞的影响,并探讨其作用机制。方法取乳腺癌紫杉醇耐药细胞系MCF-7/紫杉醇。将MCF-7/紫杉醇细胞,分别转染miR-497-5p模拟物(miR-497-5p mimics组)、miR-497-5p模拟物阴性对照(miR-NC组)、miR-497-5p抑制剂(miR-497-5p inhibitor组)及miR-497-5p抑制剂阴性对照(NC组)。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-497-5p表达,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,用流式细胞术检测细胞凋亡情况,用蛋白质印迹(Western blot)法检测程序性死亡配体1(PD-L1)蛋白的表达。结果miR-497-5p在MCF-7/紫杉醇细胞中表达水平0.44±0.02,显著低于MCF-7细胞的0.73±0.02,差异有统计学意义(P<0.05)。转染48 h后miR-NC组、miR-497-5p mimics组、NC组及miR-497-5p inhibitors组细胞增殖抑制率分别为(19.67±2.08)%,(46.33±5.86)%,(17.33±1.53)%,(9.33±3.51)%;细胞凋亡率分别为(4.18±0.07)%,(16.37±1.10)%,(5.56±0.41)%和(2.44±0.13)%,以上指标,miR-NC组与miR-497-5p mimics组相比,NC组与miR-497-5p inhibitors组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-497-5p mimics组中PD-L1蛋白表达显著较miR-NC组低;miR-497-5p in-hibitor组中PD-L1蛋白表达显著较NC组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-497-5p通过调控PD-L1表达抑制乳腺癌紫杉醇耐药细胞增殖并促进细胞凋亡。     

达格列净对高糖诱导的人近端肾小管细胞损伤的保护作用

目的 研究达格列净对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞（HK-2）损伤的保护作用。方法 将HK-2细胞随机分为空白组、对照组、模型组和实验组。空白组不进行任何干预;对照组加入5μmol·L^-1达格列净;模型组加入25 mmol·L^-1葡萄糖;实验组加入25 mmol·L^-1葡萄糖和5μmol·L^-1达格列净,各组细胞培养24 h后进行后续检测。用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,用噻唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖情况,用酶生化法和荧光显微镜法检测各组细胞内丙二醛（MDA）和活性氧（ROS）水平,用酶联免疫吸附法检测各组细胞内超氧化物歧化酶（SOD）和转化生长因子-β1（TGF-β1）、肝细胞生长因子（HGF）水平。结果 空白组、对照组、模型组和实验组HK-2细胞的凋亡率分别为（4.73±0.46）%,（4.46±0.61）%,（35.42±2.37）%和（19.55±1.87）%;细胞增殖光密度值分别为0.52±0.09,0.49±0.07,0.13±0.03和0.29±0.05;细胞内MDA水平分别为...     

黄芪对高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的 研究黄芪在高糖诱导的血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和迁移中的作用及其机制。方法 取VSMCs随机分为对照组（普通培养）、高糖组(25mmol·L^-1葡萄糖)、实验组(25 mmol·L^-1葡萄糖+40μg·m L^-1黄芪)、第1转染组(转染阴性对照寡核苷酸+25 mmol·L^-1葡萄糖+40μg·ml^-1黄芪)、第2转染组(转染miR-18a-5p模拟物+25 mmol·L^-1葡萄糖+40μg·m L^-1黄芪)。以细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测细胞的存活率;以划痕实验检测细胞迁移情况;以实时定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测miR-18a-5p的表达;以蛋白质印迹法检测线粒体融合蛋白2 （MFN2）蛋白的表达。结果 对照组、高糖组和实验组VSMCs存活率分别为（100.00±10.00）%,（188.24±18.17）%和（123.52±12.66）%;VSMCs迁移率分别为（15.16±1.64）%,（53...     

德都红花-7味散对四氯化碳所致慢性肝损伤大鼠凋亡蛋白表达的影响

目的 观察德都红花-7味散对四氯化碳（CCl₄）所致肝纤维化大鼠B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA表达的影响。方法 将40只SD雄性大鼠按体质量分层随机分为空白组、模型组、对照组和实验组,每组10只。用腹腔注射CCl₄的方法建立肝纤维化模型。空白组和模型组均灌胃给予等量蒸馏水;对照组灌胃给予21.0 mg·kg^-1水飞蓟宾;实验组灌胃给予0.3 g·kg^-1德都红花-7味散。4组大鼠每天给药1次,连续给药7周。用Masson染色法观察肝纤维化的情况,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠肝组织中Bcl-2和Bax mRNA的表达水平。结果 实验组、对照组、模型组和空白组的胶原百分比分别为（7.99±1.71）%,（8.82±2.63）%,（14.84±4.45）%和（0.80±0.29）%,Bcl-2 mRNA表达量分别为0.64±0.13,0.78±0.18,1.07±0.43和0.48±0.16,Bax mRNA表达量分别为0.95±0.10,0.98±0.26...     

敲降miR-454-3p上调细胞周期蛋白G2增强乳腺癌多柔比星耐药细胞的敏感性研究

目的 探讨miR-454-3p通过细胞周期蛋白G2(CCNG2)对乳腺癌MCF-7/多柔比星(ADR)细胞ADR耐药性的调控机制。方法 MCF-7细胞用不同浓度的ADR间歇诱导构建MCF-7/ADR耐药细胞模型,当浓度为6.0μmol·L^-1时,细胞稳定增殖,获得MCF-7/ADR耐药细胞。将MCF-7/ADR细胞分为NC组(MCF-7/ADR细胞)、转染1组(MCF-7/ADR细胞中转染miR-454-3p inhibitor)、转染2组(MCF-7/ADR细胞中转染pcDNA-CCNG2)、转染3组(MCF-7/ADR细胞中转染pcDNA-CCNG2+miR-454-3p mimic)、NC mimics组(MCF-7/ADR细胞中转染miR-454-3p mimic阴性对照)、miR-454-3p mimcs组(MCF-7/ADR细胞中转染miR-454-3p mimic)。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法检测miR-454-3p的表达水平;用蛋白质印迹法检测CCNG2的表达水平;用噻唑蓝法检测细胞的增殖活力。结果 MCF-10A、MCF-7和MCF-7/...     

纳洛酮对七氟醚诱导的胎鼠神经干细胞凋亡的影响

目的 探讨纳洛酮对七氟醚诱导的胎鼠神经干细胞（NSCs）凋亡的影响。方法 将NSCs分为空白组、对照组和低、中、高剂量实验组。空白组给予正常培养;对照组通入含3%七氟醚的混合气体培养48 h;低、中、高剂量实验组均通入含3%七氟醚的混合气体,并分别加入含0.1,1.0和10.0μmol·L^-1纳洛酮溶液的DMEM-12F培养基共培养48 h。用流式细胞仪检测NSCs的凋亡情况,用蛋白质印迹法检测沉默信息调节因子1（SIRT1）、磷脂肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）和哺乳动物西罗莫司靶蛋白（mTOR）蛋白的表达水平。结果 低、高剂量实验组和对照组、空白组的NSCs凋亡率分别为（32.25±4.83）%,（16.77±2.52）%,（43.59±6.53）%和（8.66±1.29）%;SIRT1蛋白表达水平分别为0.50±0.08,0.99±0.15,0.20±0.03和1.27±0.19;p-PI3K/PI3K蛋白相对表达水平分别为0.85±0.13,0.47±0.04,1.06±0.16和0.25±0.03;p-AKT/AKT蛋白相对表达水平分别为0...     

丹参素改善脂多糖诱导的支气管上皮细胞损伤研究

目的 探讨丹参素（DSS）对脂多糖（LPS）诱导的支气管上皮16HBE细胞损伤的影响及其机制。方法 采用噻唑蓝（MTT）法检测DSS对16HBE细胞活力的影响以筛选无毒性的DSS作用浓度。用LPS诱导构建支气管上皮细胞损伤模型。将细胞分为空白组、模型组和低、中、高剂量实验组。空白组细胞正常培养,模型组以25μg·mL^-1LPS诱导细胞24 h,低、中、高剂量实验组分别向LPS诱导的细胞中加入20,40,80μmol·L^-1 DSS处理24 h。以MTT法检测细胞活力;以流式细胞术检测细胞凋亡情况;以酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞炎症因子分泌和氧化应激指标含量;以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯（DCFH-DA）法检测细胞内活性氧（ROS）水平;以蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞沉默信息调节因子1（SIRT1）、NOD样受体蛋白3（NLRP3）蛋白的表达水平。结果 空白组、模型组和低、中、高剂量实验组细胞存活率分别为（96.11±5.14）%,（50.23±4.30）%,（51.12±4.08）%,（60.57±4.56）%和（...     

PTEN 在乳腺癌对顺铂化疗敏感性中的作用及其机制研究

目的：探讨PTEN在乳腺癌对顺铂化疗敏感性中的作用及其可能的机制。方法应用脂质体转染技术建立PTEN沉默的乳腺癌细胞系MCF-7/PTENi,通过MTT实验检测其对顺铂的敏感性,并通过Western印迹法检测细胞中Bcl-2的表达水平;应用小分子抑制剂ABT-737抑制Bcl-2表达后,再次检测MCF-7/PTENi对顺铂的敏感性。结果 MCF-7/PTENi和阴性对照细胞（MCF-7/NC）对顺铂的IC50值分别为（16.01±3.03）和（7.86±0.85）μM,两者差异有统计学意义（P=0.003）。MCF-7/PTENi细胞中Bcl-2的表达水平明显高于MCF-7/NC细胞（P=0.015）。2μM ABT-737处理的MCF-7/PTENi和MCF-7/NC细胞对顺铂的IC50值比较无显著性差异（P=0.087）。结论PTEN沉默可降低乳腺癌细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与其增加Bcl-2的表达有关。     

异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联用诱导HeLa细胞凋亡机制的初步研究

目的探讨异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合应用对Hela细胞生长的影响。方法体外培养Hela细胞,分别用顺铂、多西他赛、总酚、顺铂+总酚、多西他赛+总酚处理Hela细胞,并设对照组。MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡率和Bcl-2表达,半定量RT-PCR法检测生存素表达。结果总酚、顺铂和多西他赛对Hela有明显的抑制及促凋亡作用,早期凋亡率分别为(12.80±0.70)%、(18.87±3.79)%和(15.87±3.81)%(P<0.05)。应用总酚、顺铂和多西他赛处理Hela细胞后,Bcl-2表达分别降低(63.63±3.84)%、(49.20±4.08)%和(51.40±6.35)%,生存素表达分别降低(0.636±0.040)%、(0.431±0.048)%和(0.577±0.040)%;联合使用时更明显(P<0.01)。结论异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合可能通过降低Bcl-2和生存素表达促进Hela细胞凋亡。     

醋酸阿比特龙对戈舍瑞林去势抵抗性前列腺癌细胞化疗敏感性的影响

目的 探讨醋酸阿比特龙(AA)对戈舍瑞林去势抵抗性前列腺癌(CRPC)PC3细胞化疗敏感性的影响.方法 CRPC PC3细胞分为空白组、对照组、实验组和联合组,用不含药、含20％致死浓度(IC20)多西他赛、含IC20 AA、多西他赛IC20 AA+IC20多西他赛的细胞培养液进行干预.用噻唑蓝法检测细胞的增殖情况,用...     

长链非编码RNA FOXD3-AS1对黑色素瘤细胞增殖与侵袭的影响北大核心CSCD

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FOXD3-AS1靶向miR-128-3p/PDK1对黑色素瘤细胞增殖和侵袭的调控作用。方法转染组-1,转染组-2,转染组-3分别转染pcDNA-FOXD3-AS1、pcDNA-FOXD3-AS1与miR-128-3p mimics的阴性对照(mimic NC)、pcDNA-FOXD3-AS1与miR-128-3p mimics,以未进行转染的细胞作为对照组。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测黑色素瘤细胞和正常人表皮黑色素细胞FOXD3-AS1和miR-128-3p的表达差异;用双荧光素酶报告基因实验验证FOXD3-AS1与miR-128-3p的相互作用;用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞的增殖能力;用Transwell小室法检测细胞的侵袭;用蛋白质印迹法检测3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)蛋白的表达水平。结果对照组、转染组-1,转染组-2,转染组-3细胞24 h的增殖率分别为(100.00±0.00)%,(168.03±15.71)%,(163.58±6.24)%,(124.62±8.93)%;侵袭的细胞数分别为(21.33±2.08),(38.33±4.89),(40.00±2.65),(25.33±2.52)个;PDK1的表达水平分别为0.36±0.02,1.19±0.08,1.24±0.11,0.48±0.03。转染组-1与对照组比较,转染组-3与转染组-2比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论FOXD3-AS1通过靶向miR-128-3p/PDK1轴,促进黑色素瘤细胞的增殖与侵袭。     

肿瘤相关钙信号传导蛋白-2基因对乳腺癌细胞转移能力的影响

目的探讨TROP-2基因小干扰RNA（siRNA）对乳腺癌细胞黏附和侵袭力的影响。方法培养人乳腺癌Bcap-37、LCC1、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435、MDA—MB-468及ZR75-1细胞株,以荧光实时定量PCR方法检测TROP-2基因mRNA表达;筛选出TROP-2表达最高者。采用TROP-2基因小干扰RNA转染乳腺癌细胞,分别以荧光实时定量RT-PCR和免疫荧光方法观察TROP-2基因mRNA和蛋白水平,然后以四唑蓝（MTT）比色法检测细胞黏附性,以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力。结果7株乳腺癌细胞中,TROP-2均有不同程度的表达,以MCF-7细胞最高;以TROP-2siRNA转染乳腺癌MCF-7细胞后,癌细胞TROP-2基因mRNA和蛋白水平明显下降,且呈浓度依赖性;黏附试验结果显示,5、10、20nMsiRNA组黏附率分别为（52．9±2．5）％、（25．6±2．3）％、（12．8±2．2）％（P〈0．01）;Transwell试验结果显示,5、10和20nMsiRNA组穿过滤膜的细胞分别为（78±17）、（39±15）、（19±16）,而对照组分别为（136±25）、（139±21）（P〈0．01）。结论TROP-2基因在乳腺癌细胞黏附和侵袭中发挥着重要作用;以siRNA转染乳腺癌细胞,可抑制乳腺癌细胞黏附和侵袭能力。     

雌激素及三苯氧胺对MCF-7乳腺癌细胞BP1基因表达的影响

目的:检测乳腺癌MCF-7细胞在雌激素(E2)和三苯氧胺(TAM)作用后BP1基因的表达情况.方法:用雌激素(E2)和三苯氧胺(TAM)处理培养的处于对数生长期的MCF-7细胞,应用MTT比色分析法筛选最佳作用浓度.以筛选的浓度同步分组作用于MCF-7细胞72h,同时设对照.用原位杂交法检测BP1基因在ER处于激活和抑制状态下的表达状况,用免疫组化检测bcl-2的表达,用TUNEL法检测细胞凋亡状况.分析MCF-7在ER处于不同表达状态下BP1、bcl-2的表达变化和细胞凋亡变化情况.结果:E2在10-8mol/L、TAM在10-6 mol/L的浓度时,刺激和抑制MCF-7细胞生长的作用最显著.在E2和TAM处理后,MCF-7细胞BP1的表达率分别为95.0%±3.94%、58.5%±5.27%,bcl-2的表达率为80.9%±1.73%、37.8%±2.39%,凋亡指数分别为0.67±0.27、6.7±0.76.分别较对照组76.1%±6.54%、63.5%±3.28%、3.2±0.79之间的差异有统计学意义(P＜0.05).结论:在ER阳性的乳腺癌细胞,BP1的表达受到ER传导通路的调节,E2可能通过调节BP1的表达水平而在乳腺癌的发生中起作用.BP1可能在调节细胞凋亡的过程中起到抑制作用.BP1阳性表达可能成为预后不良的标志.