不同性状痰标本的前处理液沉渣对MGIT 960液体培养法污染率的影响

目的探讨不同性状的痰标本前处理液沉渣对MGIT 960液体培养污染率的影响及污染菌种的鉴定,以更好地控制污染。方法收集2018年1-2月于北京胸科医院门诊就诊的疑似肺结核患者痰标本共162份,其中干酪痰和血痰标本各20份,黏液痰标本122份。每份痰标本分为2份,每份5 ml,经前处理液消化处理15 min, 1份记录沉渣质量,1份取0. 5 ml上清(上清接种组)及0. 5 ml沉渣(沉渣接种组)分别接种于MGIT 960液体培养管中培养并进行涂片抗酸染色鉴定,分别记录上清接种组和沉渣接种组的培养结果 ,并对污染标本进行16S rDNA测序分析以鉴定菌种。结果 162份痰标本中,干酪痰标本消化处理15 min后所得沉渣质量[(0.17±0. 14) g],高于黏液痰标本[(0. 09±0. 07) g]和血痰标本[(0. 10±0. 07) g],差异均有统计学意义(F值分别为14. 56、4. 29,P值分别为0.00、0. 01),血痰标本前处理液的沉渣质量略高于黏液痰,差异无统计学意义(F=0. 09,P=0.80)。沉渣接种组标本污染率为16.05%(26/162),高于上清接种组[0.00%(0/162)],差异具有统计学意义(Fisher精确检验,P=0.00)。沉渣接种组不同性状的痰标本污染率不同,由大到小依次为血痰[50. 00%(10/20)]、干酪痰[15.00%(3/20)]和黏液痰[10.66%(13/122)],差异具有统计学意义(χ~2=15.61,P=0.00)。26例患者污染标本中,5例未扩增出DNA,其余21例鉴定结果分别属于10种菌,以芽孢杆菌和链球菌较为突出,分别占23.08%(6/26)和15.38%(4/26)。结论痰标本前处理液沉渣是MGIT 960液体培养法受污染的主要原因之一,接种时避免沉渣存在能够有效降低污染率。     

痰标本保存方法与时间对结核菌检出影响的初步探讨

本文通过28份痰标本,初步探讨了痰标本保存方法与时间。结果表明:(1)痰标本分别在室温和冰箱保存16天,厚涂片检出率不受影响;(2)痰标本在室温保存,培养检出率当天67.8%、保存3、10、16天分别为64.2%、35.7%、17.8%;(3)痰培养标本如不能及时接种,不宜在室温25℃时保存超过3天以上,否则会降低检出率。痰厚涂片标本在室温或冰箱保存16天,检出率不受影响。     

对流免疫电泳检测痰中肺炎球菌多糖诊断肺炎球菌性肺炎

用对流免疫电泳(CIE)检测痰中肺炎球菌多糖(PPS),和血清及尿中所检测的PPS以及痰的肺炎球菌培养结果对比,证实CIE对诊断肺炎球菌性肺炎很有价值。做CIE时痰液先经乙酰半胱氨酸液化,所用抗血清乃是包括所有已知83型的肺炎球菌多价抗血清,以及4～5个型别所组合的抗血清,如电泳洲出PPS,再进一步用单价的特异血消来鉴定型别。 41例患者分为4组。Ⅰ组:血培养阳性确诊为肺炎球菌性肺炎,Ⅱ组:符合肺炎球菌肺炎诊断标准,很可能为肺炎球菌性肺炎,痰固紫染色镜检以肺炎球菌形态的细菌占优势;Ⅲ组:不肯定为肺炎球菌性     

痰培养标本贮存时间探讨

痰培养标本贮存时间对结核菌分离检出的影响,彭祝宪等曾有报道,冰箱贮存3、10、16天培养阳性率均为64.2％,与当天培阳率67.8％无显著差异。究竟痰标本能贮存多长时间而检出率不受影响,本文以门诊肺结核病人的50份痰培养标本,根据不同贮存时间与当日接种的检出结果做一比较,现报告如下:     

590份痰标本细菌培养及鉴定分析

为了解呼吸系统细菌感染及其在痰内分布的情况 ,近 2年来 ,我们收集上呼吸道感染、肺心病及肺部肿瘤等患者的痰标本 5 90份 ,对其进行细菌培养及鉴定分析 ,现报告如下。检测方法 :收集患者清晨经灭菌盐水多次嗽口后的第一口痰于高压灭菌瓶内。每份痰标本先涂片 ,在显微镜下观察脓细胞及上皮细胞分布情况 ,然后将痰接种在血琼脂平板的麦康凯琼脂平板或伊红美蓝琼脂平板 ,放置 35℃温箱 2 4小时 ,选取可疑菌落涂片染色及生化反应 ,作细菌种类鉴定。结果 :5 90份痰标本中 ,分离出各种细菌 490株 ,细菌培养检出率占 83%。对 2 37份痰标涂片在显…     

简便裂解法和多聚酶链反应检测临床标本中结核分支杆菌的DNA

结核病一直是世界范围内重要的传染病之一,由于AIDS 的流行,有增长的趋势。作者讨论了用多聚酶链反应(PCR)来检测临床标本中结核杆菌的DNA,同时比较了两种简便的用于结核杆菌裂解和DNA 释放的方法:超声振荡和用非离子清洁剂,蛋白酶K 裂解.来自结核病患者的75份标本(痰48份、胸膜渗出液20份、尿2份、脓肿穿刺液2份、滑膜腔积液1份、淋巴结活检标本1份、腹水1份)经罗丹明直接染色镜检,接种到固体培养基或Bactec 系统上.正常人咽部冲洗液6份和非结核病患者痰标本12份作为阴性对照.先将25份培养阳性标本(痰16份,胸膜渗出液8份、腹水1份)分别用超声振荡和酶裂解。试验结果表明,酶裂解优于超声振荡用于结核菌DNA的检测.75份来自66例结核病患者的标本,用染色镜检、培养和PCR 分别检测。48份(64%)抗酸染色阳     

肺炎球菌产生的肺炎球菌自溶酶损伤人呼吸道上皮细胞

肺炎球菌是引起人类下呼吸道感染、败血症和脑膜炎的重要病原体。它合成许多蛋白质,其中包括被称作肺炎球菌自溶酶的溶血性巯基活化毒素。作者利用光度学技术和透射电子显微镜,在体外研究了肺炎球菌培养物滤液对人呼吸道上皮的影响。肉汤培养物滤液使11/15标本的纤毛摆动频率(CBF)明显减慢(p<0.001)。这种CBF 减慢与上皮结构的完整性受损,细胞空泡形成和上皮细胞坏死有关。自带有肺炎球菌自溶酶质粒的大肠杆菌培养液中纯化的重组肺炎球菌自溶酶,可引起剂量依赖性CBF 减慢,而培养     

普通尿培养阴性结果比率高的原因分析

在临床检验中,我们发现普通尿培养的阴性结果比率较高。为此,我们将本院1995年11月～1996年2月2000份尿标本的普通培养结果作一分析,并对其阴性结果多的原因进行讨论。 资料和方法:2000例均为疑诊为泌尿系感染的门诊及住院患者。收集标本时,认真记录是否按规定留取、送检,以及入院前后是否用过抗菌药物等。按《全国临床检验操作规程》将尿标本接种血平板,37℃培养。培养阴性者停药2天后再按规定重新留取标本培养1次,同时接种L型琼脂平板,35℃作L型细菌培养。 结果:2000份尿标本第1次普通培养阳性者900份(45％),阴性者1100份(55％)。阴性者经第二次培养,阳性290份(L型细菌90份),阴性(真阴     

支气管肺泡灌洗对疑诊肺结核者的诊断价值

在肺结核的诊断中,经痰及胃吸出液涂片找抗酸杆菌,阳性率可达40～60%,用 Lowenstein 培养,阳性率可达62～92%。问题是疑诊肺结核者涂片阴性时如何诊断,人们可能等待培养的结果或者不等结果而开始治疗。本文回顾了1985年对疑诊肺结核的222例患者的诊断经验。方法 222例中大多数使用痰或/和胃内吸出物涂片找抗酸杆菌,其中使用纤支镜检查加支气管冲洗和支气管肺泡灌洗(BAL)20例。作者重点分析了 BAL的诊断价值,BAL 的20例中,男12例、女8例,年龄17～71(平均42±18)岁,每例分别用 BAL、支气管冲洗及收集镜检后的痰液等3种方法收集标本。进行 BAL 时使用5%葡萄糖液和消毒生理盐水冲洗,总量100～200ml,如灌洗液仅能收集30 ml 或少     

1983～1984年国外肺炎球菌感染研究概况

本文扼要介绍国外1983～1984年有关肺炎球菌感染的研究概况。肺炎球菌感染发病情况肺炎球菌感染的实际发病率仍不明确,如能对患者的血液、痰液或体液采用对流免疫电泳法(countercurrent immunoelectrophoresis,CIE)和放射免疫法(RIA)等检测肺炎球菌抗原,则可更精确地估计肺炎球菌感染的发病率。 Lockley报告英国诺丁汉地区院外感染的肺炎患者中,3/4经CIE证实为肺炎     

复苏因子促进临床标本结核分枝杆菌生长的作用分析

目的探讨结核杆菌复苏因子在分枝杆菌快速培养中的实用性。方法收集41份抗酸杆菌涂片阳性的患者痰标本;经过NALC-NaOH法处理;接种到Bact/Alert mp快速培养瓶中;放入Bact/Alert 3d快速培养仪中;记录培养物阳性时间,统计分析。结果实验组阳性率均为90.2%,对照组阳性率为87.8%;实验组平均培养时间为14.8 d,对照组平均培养时间为14.9 d,两组比较有差异,但不明显(P>0.05);实验组有4份标本未生长,对照组有5份标本未生长且4份未生长标本与实验组相同,实验组有17份标本早于对照组生长,最多的提前2.67 d,20份标本晚于对照组生长,最多晚了2.61 d。结论结核分枝杆菌复苏因子对肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌的生长有一定促进作用,但没有明显差异。     

外源性感染的细菌性肺炎的快速诊断

以往临床上常采用对流免疫电泳(CJB)和协同凝集试验这二种方法,检测临床标本中的细菌性抗原,但仅限于对肺炎球菌抗原的检测。为了对非肺炎球菌所致肺炎及时作出诊断并减少其发病率和死亡率,本文利用上述二种方法检测了肺炎病人的链球菌、流感嗜血杆菌、克雷白杆菌和绿脓杆菌等抗原。并将检出结果与血、痰培养,痰涂片等进行了比较。方法:共检测101例外源性肺感染病人的痰标本。以胸片阴性的19例(11例哮喘和8例慢性支气管炎)     

老年人群接种23价肺炎球菌疫苗的不良反应观察

老年人群是肺炎球菌感染的高危人群，在老年人群中接种肺炎球菌疫苗是一条有效而经济的预防途径。1988年，世界卫生组织(WHO)就竭力推荐在全球老年人群中接种23价肺炎球菌疫苗。但我国该疫苗的接种令人十分不满意。为提高国内对其安全性的认识，我们观察了2002年11～12月315人老年人接种23价肺炎球菌疫苗后不良反应，现报道如下。     

双重PCR方法早期诊断军团菌肺炎意义的初步探索

目的　探讨双重PCR方法 (DPCR)检测痰及支气管肺泡灌洗液 (BALF)中军团菌DNA在早期诊断军团菌肺炎方面的意义。方法　两对引物可扩增军团菌 386bp 16SrRNA基因片段和 2 0 6bpmip基因片段。采用DPCR方法对军团菌肺炎组 (15例 )、临床可疑军团菌肺炎组 (14例 )和普通肺炎组 (2 5例 )三组患者在病程早期留取的痰及BALF标本进行检测。结果　军团菌肺炎组的所有标本包括 2 5份痰、8份BALF的DPCR结果均为阳性 ,而普通肺炎组的所有标本包括 32份痰和 16份BALF均为DPCR阴性。临床可疑军团菌肺炎组留取的 2 0份痰和 8份BALF中 3例患者的 6份痰、2份BALF标本呈DPCR阳性。同一患者留取的多份标本呈现相同的DPCR结果。模拟标本的DPCR最低检出限为 1× 10 3 cfu/ml。结论　初步结果显示 :采用DPCR方法检测痰和BALF标本中的军团菌DNA具有较好的敏感性、特异性和稳定性 ,其在临床早期诊断军团菌肺炎方面具有一定的价值     

采用通用引物PCR及RFLP快速检测下呼吸道感染常见病原菌的临床研究

目的 采用聚合酶链反应(PCR)配合限制性酶切片段多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)分析检测下呼吸道感染的常见病原菌,探讨其在临床快速诊断细菌感染中的应用价值.方法 在下呼吸道感染的住院患者中筛选出合格痰标本125例,分为2份,1份行痰培养作为对照,另1份以16S rRNA基因为靶序列,在其保守区建立通用引物进行PCR扩增,再分别用限制性内切酶HaeⅢ、MnlⅠ、AluⅠ、DdeⅠ和BstBⅠ酶切,进一步行RFLP分析,根据下呼吸道常见病原菌建立的特异酶切图谱诊断鉴定细菌,比较两种方法的检测结果.结果 125例合格痰标本中,PCR配合RFLP检测阳性85例,阳性率为68.0%,痰培养阳性72例,阳性率为57.6%,前者明显高于痰培养(P<0.01),其中肺炎链球菌及流感嗜血杆菌阳性率明显高于痰培养,部分革兰阴性杆菌阳性率也高于培养组,但部分革兰阳性球菌(溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌及屎肠球菌)阳性率较培养组低于痰培养.结论 PCR配合RFLP分析方法检测下呼吸道感染病原菌较常规培养方法敏感快捷,是一种具有临床应用价值的快速诊断方法.     

可曲性纤维光束支气管镜在痰菌阴性肺结核诊断中的应用

本文探讨可曲性纤维光束支气管镜(FFB)在痰菌阴性而胸部X线检查可疑肺结核病人中的价值。方法:本文对275例反复痰菌阴性而胸片疑有肺结核的病人进行FFB检查。取异常肺段的支气管刷检物直接涂片、培养及豚鼠接种检查结核菌。经FFB肺活检标本以10%福尔马林固定,用苏木精—伊红及抗酸染色。如有可能,取支气管镜检后的痰作进一步检查。     

呼吸系统疾病——中老年人用23价肺炎球菌荚膜多糖菌苗预防肺炎的随机试验

作者对无免疫抑制的肺炎住院后出院的中老年人以23价肺炎球菌菌苗进行试验,目的在于评价肺炎球菌菌苗对肺炎球菌性肺炎及所有各种肺炎的预防效果。病人和方法　选50～85岁社区内获得的肺炎住院病人,除外骨髓瘤或其它进展性癌肿,肾透析,低丙种球蛋白血症,脾切除或脾功能丧失,ＨＩＶＩ感染等免疫功能低下者;不能服从观察或接种过肺炎球菌菌苗和对菌苗成分过敏者均予以剔除。询问病史,行体检、胸部放射线检查,采血清标本。接种后4周、1年及3年作随访时分别重取血清。3次随访到的例数分别为:651、561和271例。随访期间发热(≥38℃>3天)疑有肺炎…     

13价肺炎球菌多糖结合疫苗的接种意愿及其影响因素调查分析

目的 针对广州市某2个社区儿童家长进行调查,收集其对13价肺炎球菌多糖结合疫苗的了解、接种意愿等行为状况,为13价肺炎球菌多糖结合疫苗的接种工作提供参考.方法 2017年7月1日-2017年12月31日,针对广州市某2个社区儿童预防接种信息,分别随机抽取各150名在册儿童个案,联系其家长进行面对面的问卷调查.共发放320份问卷,回收有效问卷316份.结果 此次调查中,针对不同文化程度人群进行了13价肺炎球菌多糖结合疫苗的知晓率调查中,大专及以上、高中或中专、初中及以下知晓率为85.33%、50.00%和 53.85%,差异有统计学意义(P<0.01).此外,此次调查中还针对不同家庭收入、不同职业家长进行了调查,其结果 两项调查结果 差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 开展预防接种服务工作时,需要发挥各种媒体的优势开展相关知识宣教,从而可以有效提高家长对肺炎球菌性疾病的了解,并对13价肺炎球菌多糖结合疫苗相关知识进行掌握.同时,通过不断健全社区疫苗以及接种管理工作机制,可以更好地为民众提供高效、规范的预防接种服务.     

恒河猴免疫接受裂殖子对诺氏疟原虫子孢子(蚊传)攻击的免疫力

恒河猴用福氏完全佐剂(FCA)处理的裂殖子免疫接种后,可防御诺氏疟原虫的免疫变种和其它变种或种的攻击。现已证明裂殖子疫苗接种对予防子孢子(蚊传——自然传播的形式)的攻击也有效。用植物血凝素微分沉淀法或用细胞筛从体外培养物中分离出的W1株裂殖子以FCA乳化3小时,或者在4C用甲醛盐水溶液(1∶1000)处理16小时并在10%(V/V)正常猴血清水溶液中冻干。冻干的疫苗用前在4C保存4周。肌肉接种恒河猴2～4次,每隔2～5周1次,接种裂殖子总量为3～11×10~9个。     

肝硬化病程中的肺炎球菌菌血症

本文的目的是研究肝硬化住院病人中肺炎球菌菌血症的发生率、易感环境和致死因素。作者对巴黎某大学附属医院3年来诊断为肺炎球菌菌血症的100例病人进行了回顾性研究,发现22例(22%)发生在肝硬化患者。其中16例(72%)是酒精性肝硬化。16例中有12例(75%)同时存在急性酒精性肝炎的病变。肺炎球菌菌血症在非肝硬化者的发病率为0.12%,在肝硬化者为1.42%(P<0.001),而在有急性酒精性肝炎病变的肝硬化者则高达5.05%(P<0.01)。在第1次血培养为阳性的当天,71%的肝硬化病人有黄疽,95%有腹水,52%有肝性脑病。