重组红细胞血型糖蛋白A脂质体与麦胚凝集素的相互作用

本研究应用重组的红细胞血型糖蛋白A脂质体．分别与麦胚凝集素和交联有麦胚凝集素的Sepharose 4B(WGA—Sepharose4B)相互作用。结果发现重组的红细胞血型糖蛋白A脂质体与麦胚凝集素作用，有明显的凝集现象；并能结合在交联有麦胚凝集素的Sepharose颗粒周边4B上．从而为人工模拟红细胞膜提供了一可靠的实验依据。     

傅里叶变换红外技术研究NO~-_3通过细胞膜带Ⅲ蛋白时的构象变化

目的进一步研究阴离子通过时，ｂａｎｄ３蛋白分子构象的变化。方法制备红细胞血影和重组脂蛋白体膜ｂａｎｄ３，并以ＦＴＩＲ技术测定阴离子通过时ｂａｎｄ３蛋白分子构象的变化。结果ＮＯ－３通过膜ｂａｎｄ３蛋白时，导致其α－螺旋增加，β－结构减少，且相同浓度ＮＯ－３作用下，脂蛋白体膜ｂａｎｄ３蛋白的二级结构变化较大。结论阴离子通过时，ｂａｎｄ３蛋白形成的离子通道发生有限性扩张。     

麦胚凝集素沉淀血清糖蛋白对原发性肝癌的诊断意义

采用麦胚凝集素(浓度5mg／me)分别与48例样品血清孵育，沉淀物用N-乙酰葡萄糖胺复溶，SDS-PAG电泳谱发现有三条区带；结果表明：原发性肝癌患者血清中与麦胚凝集素结合的二条区带SDS-PAG电泳谱带浓度显著增加；其机制可能是糖苷转移酶活性异常，或糖蛋白的生成增加，而清除能力下降．     

麦胚凝集素修饰胰岛素固体脂质纳米粒的研究

目的:制备胰岛素固体脂质纳米粒(SLNs)、麦胚凝集素(WGA)修饰固体脂质纳米粒(WGA-SLNs),研究其对口服吸收胰岛素的促进作用。方法:用复乳法制备SLNs,将WGA与磷脂酰乙醇胺(PE)结合物(WGA-PE)掺入SLNs中制成WGA-SLNs;按胰岛素剂量250IU/kg分别灌胃给予高血糖小鼠SLNs或WGA-SLNs,用葡萄糖酶试剂盒测定小鼠血糖。按胰岛素剂量50IU/kg分别灌胃给予大鼠SLNs及WGA-SLNs,分别用葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP)和放射免疫法(RIA)测定大鼠血糖及血清胰岛素浓度。结果:高血糖小鼠口服SLNs后,在0.5h血糖降至初始水平的(30.92±11.54)%,1h降至(46.84±10.21)%,4h为(76.83±10.54)%;口服WGA-SLNs后,在0.5h血糖降至初始水平的(37.56±14.66)%,1h降至(30.44±14.55)%,4h为(58.70±11.18)%,维持降糖作用12h。大鼠口服SLNs及WGA-SLNs后均具有降血糖作用,以皮下注射胰岛素溶液为对照,其相对生物利用度分别为4.99%和7.107%。结论:SLNs促进胰岛素的口服吸收,具有一定的降血糖效果。WGA修饰显著促进了胰岛素吸收,证实了凝集素的靶向作用和吸收促进作用。     

血型糖蛋白A在恶性疟原虫入侵红细胞中的受体作用

人红细胞膜血型糖蛋白A(GPA)与恶性疟原虫入侵红细胞关系密切。本实验在体外培养条件下,观察了GPA及其抗体,α1-酸性糖蛋白、鸡卵类粘蛋白及麦胚凝集素等对恶性疟原虫入侵红细胞的影响。结果表明:GPA与恶性疟原虫裂殖子之间的结合具有高度特异性和亲和力,有饱和趋势,结合后产生特定的生物效应。首次从配体—受体相互作用的特点,证实了GPA是恶性疟原虫裂殖子识别和结合的受体。     

膜带Ⅲ蛋白二级结构研究

目的进一步阐明人红细胞膜带Ⅲ蛋白转运阴离子的生物学机制。方法用傅里叶变换红外技术分别定量测定了带Ⅲ蛋白处于内向和外向两种状态时二级结构的变化。结果带Ⅲ蛋白处于内向状态时，α螺旋含量较多，处于外向状态时，α螺旋含量较少。结论这种带Ⅲ蛋白螺旋含量的不同，可能与其在不同状态下生理功能上的差异有关。     

麦胚凝集素慢病毒载体的构建及其表达的研究

目的 探讨麦胚凝集素慢病毒载体的构建与表达的方法.方法 采用基因工程方法,将麦胚凝集素的基因插入慢病毒表达载体Plvx-IRES-ZsGreen1中.再采用慢病毒包装,将构建好的质粒和其他三种包装质粒(RPEV、PRRE、VSVG)在293T细胞中进行共转染,获取病毒液后感染人源的脂肪干细胞(ADSC).结果 显微镜下显示绿色荧光报告蛋白表示感染成功.对感染后的脂肪干细胞运用免疫染色技术进行显色,结果显示麦胚凝集素已经成功在脂肪干细胞中实现表达.结论 慢病毒包装WGA蛋白的方法可靠高效,可作为一种高效的示踪技术广泛应用于各类细胞.     

卵巢癌的傅里叶变换红外光谱研究

目的研究应用傅里叶变换红外光谱（fourier transform infrared spectroscopy,FTIR）作为诊断卵巢癌的临床可行性。方法利用傅里叶变换红外光谱仪分析卵巢癌组织切片及正常组织红外切片,将二者的红外光谱图对照解析。结果卵巢癌组织切片的红外光谱图与正常组织的红外光谱图相比,具有明显且有规律的差异,包括癌变组织中核酸含量增加、糖原含量下降、氨基酸残基C-OH基团的结合氢键大部分遭到破坏、脂质的亚甲基链趋向无序等。结论可以利用FTIR法作为一种鉴别卵巢癌的临床诊断方法。     

WHEAT GERM AGGLUTININ (WGA) RECEPTORS ON HUMAN SPERM MEMBRANE AND MALE FERTILITY

Wheat Germ Agglutinin (WGA), one kind of lectins, was used as membrane probe to observe the alteration of human sperm WGA receptor during the process of in vitro capacitation and make comparison of WGA receptor between normal fertile men and infertile patients. FITC-labeled WGA was used to localize WGA receptor on sperm membrane. WGA△OD value, spectrophotometry of sperm agglutinability induced by WGA within 20 min was taken as an indicator to estimate WGA receptors. It has been proved that (1) the localization of WGA receptors on sperm membrane was shifted from head to tail and at the same time WGA-induced agglutinability was increased under the condition of in vitro capacitation. (2) the WGA△OD value of unexplained infertile men was much lower than the normal value among 69 out of 110 cases. Since the fertilizing ability of spermatozoa from these patients was recoverd after the membrane-bound Igs has been eliminated and WGA receptors reappeared after oral administration of steroid drugs or washing the spermatozoa, it seemed that there is a close relationship between WGA receptor on sperm membrane and male fertility.     

电场诱导癌细胞融合过程中膜蛋白构象改变

用付里叶变换红外光谱研究使水肝癌细胞在电场诱导下融合过程中膜蛋白结构的改变。结果表明在细胞融合中膜蛋白发生构象变化。     

阿霉素对细胞色素C诱导心磷脂多形性相变的影响

用~(31)P核磁共振研究表明,细胞色素C能诱导由心磷脂和二棕榈酰磷脂酰胆碱组成的人工脂膜发生六角形Ⅱ相的相变。阿霉素能稳定脂膜双层排列,阻止细胞色素C诱导的多形性相变。     

脂质过氧化对红细胞膜流动性影响的研究

为探讨氧自由基引发红细胞膜脂过氧化对红细胞膜流动性的影响在红细胞氧化损伤机制中的作用，以氧自由基发生系统作用于离体正常红细胞，分别用荧光偏振法，硫代巴比妥酸比色法测定红细胞膜微粘度，红细胞脂质过氧化物。     

活性氧对红细胞膜流动性影响的研究

目的 :研究活性氧诱导红细胞发生氧化溶血的机制。方法 :用不同浓度的 H2 O2 作用于离体正常红细胞 ,分别用比色法、硫代巴比妥酸荧光法、荧光偏振法测定红细胞溶血度、红细胞膜脂质过氧化物 (L PO)、红细胞膜微粘度。结果 :5 0 ,10 0 ,12 0 mm ol/ L 浓度的 H2 O2 作用于红细胞后 ,均引起红细胞发生氧化溶血 ,红细胞溶血度、红细胞膜 L PO、红细胞膜微粘度均明显增加 ;H2 O2 在 5 0～ 12 0 mm ol· L- 1浓度范围内 ,红细胞溶血度、红细胞膜 L PO、红细胞膜微粘度的增加与 H2 O2 有明显的量效关系 ;红细胞膜微粘度与红细胞溶血度呈明显正相关 ,红细胞膜 L PO与红细胞膜微粘度呈明显正关。结论 :活性氧引发红细胞膜脂质过氧化导致红细胞膜流动性降低在活性氧诱导红细胞发生氧化溶血的机制中起一定的作用     

膜蛋白降解对红细胞膜脂流动性的影响

目的与方法：本文通过实验的方法,采用胰蛋白酶降解红细胞膜蛋白,研究了膜蛋白降解对红细胞膜脂流动性的影响。结果：随着胰蛋白酶作用浓度的升高,经马来酰亚胺（ＭＳＬ）标记的膜蛋白ＥＳＲ谱表现为弱强固定比（Ｓ／Ｗ）趋于上升,ＤＰＨ标记的膜脂荧光偏振度（Ｐ）值上升,且呈现出明显的量效关系;结论;这意味着由于胰蛋白酶的作用,降解了红细胞膜蛋白,使得膜蛋白结构趋于收缩,最终导致了膜脂流动性的降低。     

不同抗冻剂预处理对直接快速液氮冻存人羊膜活性的影响

目的:筛选一种抗冻剂配方,为建立深低温高活性保存的羊膜库提供依据。方法:选取12只健康剖宫产产妇羊膜,根据预处理抗冻剂的不同随机分为4组:A组(空白对照组),B组(DMEM/甘油组),C组(DMEM/甘油/DMSO组),D组(DMEM/甘油/DMSO/海藻糖组)。冷冻保存后第1,3个月取羊膜行HE与台盼蓝染色,分别观察羊膜结构,计算羊膜上皮细胞死亡率,并与新鲜羊膜(E组)比较。结果:E组:上皮细胞呈柱状、排列整齐紧密,细胞膜清晰,细胞核圆润蓝染,基底膜连续,细胞死亡率为(6.95±1.95)%。A组:保存1,3个月羊膜上皮层结构完整性均破坏、核固缩呈深蓝染,基底膜渐变为模糊不清。细胞死亡率分别为(39.96±5.84)%,(81.50±4.50)%,两组比较差异有统计学意义(t=13.796,P<0.05)。B组:保存1,3个月细胞变形,核固缩加剧,基底膜渐变为不连续。细胞死亡率分别为(21.61±6.65)%,(36.76±10.72)%,两组比较差异有统计学意义(t=2.940,P<0.05)。C组:保存1个月后类似新鲜羊膜,保存3个月后羊膜上皮细胞扁平,细胞核深染固缩,基底膜较完整。细胞死亡率分别为(14.08±3.21)%,(29.68±8.19)%,两组比较差异无统计学意义(t=4.344,P>0.05)。D组保存1,3个月形态结构接近新鲜羊膜,死亡率分别为(8.51±1.75)%,(12.70±5.70)%,两组比较差异无统计学意义(t=1.722,P>0.05)。保存1个月的A、B、C组死亡率与D、E组比较均有统计学差异(P<0.05),D、E组间比较差异无统计学意义(P>0.05);保存3个月的A、B、C、D、E各组间比较均有统计学差异(P<0.05),但D组存活率仍然达到87.3%。结论:DMEM/甘油/DMSO/海藻糖可作为新型抗冻剂用于深低温高活性保存羊膜。     

胆红素自由基对人红细胞膜流动性的影响

用荧光偏振法研究胆红素自由基对人红细胞膜流动性的影响。结果表明,胆红素自由基使红细胞膜荧光偏振度(P)减少,微粘度(η)降低,膜流动性增加。并讨论了上述现象产生的原因。