耗竭心肌细胞内糖原对缺血后再灌注心肌的保护作用及其机制

本工作在离体大鼠等容收缩心脏模型上观察耗竭心脏细胞内糖原对心肌缺血再灌注损伤的影响。心脏富氧灌流30 min后,随机分为三组:Ⅰ、富氧组:富氧灌流75min。Ⅱ、对照组:常规K-H液富氧灌流15min,旷置30min,再灌流30min。Ⅲ、耗竭糖原组:先用充N_2(95%N_2:5%CO_2)的K-H液灌流15min,余同组Ⅱ。结果表明。耗竭心肌细胞内糖原可提高再灌注后心脏血液动力学的恢复;冠脉流出液中LDH活性及心肌组织MDA含量降低,线粒体及胞浆液中GSH-Px有较高的活性;心肌组织Na~+,Ca~(2+)超负荷减轻。说明耗竭心肌细胞内糖原可通过减少细胞内H~+的生成抑制Na~+/H~+交换,从而明显减轻心肌缺血再灌注损伤。     

芦丁对运动条件下小鼠肝糖原和肌糖原含量的影响

目的研究芦丁在提高运动能力方面是否具有积极的作用。方法以ICR小鼠（陕西省中医药研究院提供）为研究对象,随机分组,各给药组小鼠按剂量每天灌胃。持续20天后即刻从眼眶采血,取肝脏、股四头肌,测定肝糖原、肌糖原含量指标。结果芦丁对运动相同时间小鼠身体机能有显著的增强作用。对力竭运动小鼠机体机能的恢复有显著的作用。结论芦丁对力竭运动小鼠身体机能的恢复有显著的增强作用。并可消除力竭运动时机体内产生的大量的自由基,减弱机体内的脂质过氧化作用。     

力竭性游泳对大鼠房室结糖原和酶组织化学的影响

目的:探讨力竭性游泳对大鼠房室结(AVN)糖原和酶组织化学的影响。方法:建立大鼠力竭性游泳模型,运用组织化学技术,结合数字图像分析方法,观测房室结糖原(Gly)含量和乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、单胺氧化酶(MAO)和乙酰胆碱脂酶(ACHE)分布与含量的变化。结果:与对照组相比,1次力竭性游泳后房室结的Gly含量下降,LDH活性增强,SDH、MAO和ACHE的活性均减弱;与1次力竭组相比,1周力竭后Gly含量上升,LDH、SDH和MAO活性均减弱,ACHE活性增强。结论:力竭性游泳对房室结的糖原和酶组织化学的影响较为明显,这可能是造成房室结功能改变的因素之一。     

小鼠病毒性心肌炎的心肌结构及左室功能变化的初步研究

目的:探讨病毒性心肌炎时的心肌结构与收缩力变化的关系。方法:建立病毒性心肌炎的动物模型,观测病毒损伤阶段和免疫损伤阶段心肌的超微结构和心肌收缩力改变。结果:病毒性心肌炎早期的心肌细胞的线粒体超微结构发生了变化,心肌细胞收缩力下降,左室压(LVP)为(14.2±0.8)kPa,dp/dt为(273.1±10.0)kPa/s,正常对照LVP为(17.1±0.7)kPa,dp/dt为(359.8±9.3)kPa/s,P＜0.01;后期心肌组织严重损害,不仅有线粒体溶解破坏,而且肌原纤维变细、减少等,并且心肌收缩力指标明显下降,LVP为(11.8±0.2)kPa,dp/dt为(209.5±6.9)kPa/s,与早期相比差异有显著,P＜0.01。结论:病毒性心肌炎早期,即病毒损伤期,造成心脏功能下降的原因主要是病毒引起心肌细胞的超微结构改变,特别是对线粒体的损伤,使心肌细胞供能障碍,心肌收缩力减小;病毒性心肌炎后期,免疫反应造成心肌组织损害较病毒直接损害更严重,造成心肌收缩力明显减小。     

低氧后心肌钙瞬变变化与β-肾上腺素受体脱敏的关系

目的:慢性低氧时,心脏对β-肾上腺素受体激动的反应出现脱敏现象,细胞内钙[Ca²⁺]_i瞬变的幅度降低、时程延长,本研究观察上述变化在低氧时发生和发展的时间过程和对应关系。方法:在年龄对等的正常及慢性低氧1d、3d、1周、2周、3周、4周和8周的大鼠,分别分离正常及慢性低氧条件下的心室肌细胞,以Fura-2为[Ca²⁺]_i的指示剂,用光谱荧光法测定心肌细胞的[Ca²⁺]_i瞬变及其对心肌β-受体激动后反应的变化。结果:在低氧1d、3d、1周等时间内,电刺激引起的[Ca²⁺]_i瞬变、咖啡因引起的[Ca²⁺]_i瞬变及电刺激引起的[Ca²⁺]_i瞬变对β-受体激动剂异丙肾上腺素的增加反应无明显变化;在低氧2周以上时,电刺激引起的[Ca²⁺]_i瞬变的幅度开始降低,而时程开始延长,其对异丙肾上腺素的反应也开始降低。咖啡因引起的[Ca²⁺]_i瞬变幅度也开始降低;在低氧3周和4周时,上述变化程度逐渐加重;在低氧8周时各参数的变化有所恢复,但与4周时的变化程度无明显差异。结论:低氧2-4周时,心脏的β-肾上腺素受体发生脱敏现象,脱敏的机制与3种调节[Ca²⁺]_i瞬变的蛋白质:L-型钙通道、ryanodine受体操纵的钙通道和钙泵等活性的降低有关,后者也可能是低氧时心脏功能降低的重要机制。低氧4-8周时,心脏对低氧产生了适应和代偿。     

心肌局部冷冻后形态和功能的变化

目的：观察心肌局部冷冻后形态和功能变化。方法：实验动物随机分成实验组和对照组；在实验组中，利用冷冻探头(—60℃)对心肌进行局部冷冻，用温的生理盐水复温。研究心脏输出功能、心脏电生理、生化以及组织学变化。结果：急性期可见到心肌呈炎性改变，远期可见到疤痕形成；冷冻前后、心电因、电解质以及心室舒张、收缩压未见变化；心肌酶谱各项酶明显升高。结论：心肌冷冻是安全的；疤痕形成可能是心肌传导阻滞的原因之一。     

先天性心脏病心肌糖原的超微结构观察

电镜下观察30例先天性心脏病心肌糖原的改变。结果表明:先天性心肌细胞内糖原丰富,肌浆游离糖原呈β型,分布在正常心肌相同。4例心肌(占13.3%)观察到线粒体内β型糖原颗粒沉积,16例心肌(占53.3%),出现了髓鞘样结构,其内多含有β型糖原颗粒。线粒体内糖原沉积和贿鞘样结构的出现可能表明心肌慢性局烂性缺氧。     

慢性低氧对大鼠血浆尾加压素Ⅱ浓度和右心室尾加压素Ⅱ受体的影响

目的: 探讨尾加压素Ⅱ(UII)受体在慢性低氧性右心室肥大中的作用。方法: 在慢性低氧高二氧化碳肺动脉高压、右心室肥大的大鼠模型上, 采用放射性配基结合法, 测定不同缺氧时间(2周、4周)右心室肌浆膜上UII受体的结合率, 放免法测定血浆UII的含量。结果: 慢性低氧高二氧化碳大鼠的肺动脉平均压(mPAP)和右心室(RV)与左心室加室间隔(LV+S)重量比(RV/LV+S)明显高于对照组(P<0.01); UII受体结合位点(B_max), 低氧2周组比正常对照组高26.7%(P<0.01), 4周组又比2周组高19.8%(P<0.01), UII受体亲和力(Kd值)3组间无显著差别(P>0.05); 血浆UII水平呈先高后降的双向变化, 2周组比正常组高33.5%(P<0.01), 而4周组比2周组低15.4%(P<0.05), 与正常对照组相近。结论: 慢性低氧高二氧化碳使大鼠右心室肌浆膜上UII受体增加, 其变化可能参与了右室肥大。     

缺氧对急性心肌梗死后3周大鼠心室肌细胞持续性钠电流的影响

目的：研究缺氧对急性心肌梗死（AMI）大鼠心室肌细胞持续性钠电流的影响，以期更进一步探讨急性心肌梗死后心律失常的发生机制。 方法： 采用结扎大鼠冠状动脉左前降支建立AMI动物模型,应用膜片钳全细胞记录方法,观察AMI 3周心室肌外膜梗死区细胞持续性电流（INap）的变化。 结果： 常氧条件下，假手术组（n=9）的INap电流密度为0.144±0.022（pA/pF）,心梗组（n=9）的INap电流密度为0.121±0.013（pA/pF）,明显低于假手术组(P<0.01), 以上两组的INap 均可被河豚毒素（TTX）阻断。缺氧条件下，假手术组和心梗组的INap均随着缺氧时间的延续而增大，但假手术组INap的增大明显大于心梗组，两组的INap均可被谷胱甘肽（1 mmol/L）所阻断。 结论： 急性心肌梗死后，无论是在常氧或是再次缺氧情况下，心肌梗死区与非梗死区细胞INap的大小均存在差异，造成心肌复极离散度增大，可能是导致AMI后出现折返性室性心律失常的原因之一。     

Muscle glycogen repletion and pre-exercise glycogen content: effect of carbohydrate loading in rats previously fed a high fat diet

We have recently reported that rates of muscle glycogen repletion during the early period of recovery were increased by carbohydrate (CHO) loading in rats previously fed a high fat diet. However, the reason for this remained unanswered. The purpose of this study was to examine whether an increase of glycogen utilization due to an elevated pre-exercise glycogen store would enhance rates of glycogen repletion in muscle. Despite an equal degree of glycogen depletion, the rates of glycogen repletion of soleus, red and white gastrocnemius muscles by postexercise administration of glucose (3.0 g · kg^–1 body mass) and citrate (0.5 g · kg^–1 body mass) were faster in the CHO loaded (3 days) rats than in the nonloaded rats, as a result of elevated pre-exercise glycogen content and consequently the greater glycogen utilization. The higher rate of muscle glycogen repletion may in part be explained by increased postexercise glycogen synthase activity.     

西拉普利对低氧大鼠肺动脉和心肌细胞增殖的抑制作用

目的：探索cilazapril 对低氧大鼠肺血管和心肌细胞增殖的抑制机理。 方法： 采用生化、放射免疫、免疫组织化学、细胞凋亡标记和血流动力学技术研究低氧肺血管及心肌细胞增殖和结构重建。 结果： （1）低氧大鼠mPAP显著增高，伴有肺动脉血管管腔狭窄、管壁增厚，心肌肥大，R/L+S增高。（2）B组、C组大鼠肺动脉和右心肌细胞增殖指数（PI）均分别明显高于A组，而C组明显低于B组。ET-1免疫组化染色阳性细胞主要分布在肺动脉血管壁和心肌细胞上，染色程度由强到弱依次为B组>C组>A组。（3）B组大鼠ET-1水平和ACE活性明显高于A组，而C组显著低于B组。（4）直线相关分析显示ET-1、ACE分别与R/(L+S)、mPAP、肺动脉PI、心肌PI呈正相关；多元回归分析显示ET-1和ACE可能是影响PI的主要因素。 结论： 低氧大鼠存在细胞过度增殖状态，继发肺血管、右心结构重建是低氧性肺动脉高压发病机理之一。Cilazapril通过抑制ACE和ET-1的促增殖作用，阻止肺血管及心肌重建，对低氧性肺动脉高压的防治有一定作用。     

大鼠心肌顿抑时血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽含量的变化

目的：观察大鼠心肌顿抑时降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）的变化规律。方法：采用大鼠在体心肌顿抑模型,用放射免疫分析法测定血浆及心肌组织中ＣＧＲＰ含量。结果：心肌顿抑时血浆ＣＧＲＰ水平较对照组显著升高,而心肌组织中ＣＧＲＰ含量则较对照组显著降低。结论：心肌组织中与血浆中的ＣＧＲＰ含量呈负相关关系。     

预缺氧对急性缺氧大鼠心肌线粒体功能及ATP含量的影响

目的：观察预缺氧对急性缺氧大鼠心肌线粒体功能及ＡＴＰ含量的影响。方法：实验大鼠分三组。１常氧对照组;２急性缺氧组;３预缺氧组。测定了心肌ＡＴＰ含量及线粒体呼吸功能,以荧光偏振法测定线粒体膜流动性。结果：经预缺氧处理的大鼠遭受急性缺氧后ＡＴＰ含量从（３１８±２４２）ｍｇ１·ｇ－１增加到（６０５５±３．５２）ｍｇ－１·ｇ－１（Ｐ＜００１）;线粒体呼吸控制率（ＲＣＲ）从１８４±０５８上升到４５５±０３２（Ｐ＜００１）;线粒体膜流动性（ＭＭＦ）明显增加（Ｐ＜００５）,Ｆ０Ｆ１－ＡＴＰ酶及Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性分别提高６６％和２５％。结论：预缺氧可有效改善缺氧大鼠心肌能量代谢,其作用环节可能和提高线粒体膜流动性,改善线粒体呼吸功能有关。     

牛磺酸对低氧条件下豚鼠心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流的影响

目的：研究牛磺酸对低氧条件下单个豚鼠心室肌细胞膜上ATP敏感性钾电流（IK-ATP）的影响。方法： 应用100%纯氮饱和灌流液建立低氧模型和膜片钳全细胞记录技术。结果： 与对照组比较，低氧组心肌动作电位时程（APD）明显缩短，同时诱导出IK-ATP；给予牛磺酸后，使低氧时缩短的APD恢复至正常，并能剂量依赖性地抑制IK-ATP。结论： 牛磺酸具有抑制豚鼠心室肌细胞膜上ATP敏感钾通道（KATP）开放的作用。     

缺氧复氧对人心房肌细胞内钙离子浓度的影响

目的和方法:观察缺氧、复氧对人心房肌细胞内钙离子浓度的影响。急性分离人心房肌细胞,以Fluo-3作为Ca²⁺指示剂,用激光共聚焦显微镜观察细胞内Ca²⁺浓度变化。结果:人心房肌细胞在缺氧前[Ca²⁺]ⁱ为(117±48)nmol/L。在缺氧15 min时,[Ca²⁺]ⁱ即增加为(187±64)nmol/L(P<0.05,vs缺氧前)。缺氧30 min时[Ca²⁺]ⁱ为(417±139)nmol/L(P<0.01,vs缺氧前)。缺氧后复氧30 min[Ca²⁺]ⁱ为(786±238)nmol/L(P<0.01,vs缺氧前)。结论:人心房肌细胞在缺氧状态下胞内Ca²⁺浓度升高,而当其短期复氧时,胞Ca²⁺浓度继续增加。     

地高辛抗血清拮抗内洋地黄素介导的离体大鼠心肌缺氧复氧损伤的实验研究

目的：研究内洋地黄素在离体大鼠心脏缺氧复氧损伤中的变化，观察内洋地黄素特异性拮抗剂地高辛抗血清对大鼠心脏缺氧复氧损伤（A-RI）的拮抗作用。 方法： 制备离体大鼠心脏A-RI模型，60只SD 大鼠随机分为6组，每组10只。正常对照组：给予富氧K-H液灌流，流量10 mL·min-1，持续灌流90 min；A-RI组：富氧K-H液灌流30 min后，予以乏氧K-H液低流量（1-2 mL·min-1）灌流30 min，再给予富氧K-H液复灌30 min；维拉帕米组、小剂量、中剂量、大剂量地高辛抗血清组：于复氧前分别向灌流液中加入维拉帕米5 μg·kg-1、地高辛抗血清3.3 mg·kg-1、10 mg·kg-1、30 mg·kg-1，复氧灌流前灌注完，其余同A-RI组。各组于复氧灌流结束时，制备心肌匀浆，测定心肌匀浆中内洋地黄素含量、细胞膜Na+-K+-ATP酶活性以及线粒体总Ca2+水平，并观察心肌超微结构的变化。 结果： A-RI组心肌组织内洋地黄素水平明显高于正常对照组［（1.04±0.42）ng·g-1与（0.63±0.09）ng·g-1，P<0.01］，细胞膜Na+-K+-ATP酶活性明显低于正常对照组［（2.85±1.00) mmol·g-1Pr·h-1与（4.24±1.19)mmol·g-1Pr·h-1，P<0.01］，线粒体总Ca2+水平显著高于正常对照组［（0.368±0.113) μmol·g-1Pr·h-1与（0.130±0.004) μmol·g-1Pr·h-1，P<0.01］，心肌组织结构发生明显破坏。中、大剂量地高辛抗血清组心肌组织内洋地黄素水平显著低于A-RI组［（0.55±0.24)ng·g-1，(0.68±0.26) ng·g-1］，心肌组织Na+-K+-ATP酶活性显著高于A-RI组［（4.88±1.51)mmol·g-1Pr·h-1，（3.85±1.15)mmol·g-1Pr·h-1），心肌线粒体内总Ca2+含量显著低于A-RI组［（0.127±0.026)nmol·g-1Pr·h-1，（0.156±0.050)μmol·g-1Pr·h-1］，显著减轻A-RI导致的心肌组织结构的损伤。 结论： 地高辛抗血清对A-RI心肌有明显的保护作用，其作用机制可能通过拮抗内洋地黄素，恢复心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶活性，减轻细胞内钙超载。