铁离子-单宁酸处理增强牛颈静脉综合性能

经传统戊二醛(GA)交联的牛颈静脉易发生钙化,限制了其在临床上的广泛应用。在GA交联基础上增加单宁酸(TA)处理,取得了良好的抗钙化效果,但也存在组织柔顺性较差的不足。根据单宁酸易与金属阳离子产生螯合作用的特性,本研究尝试应用三价铁离子(Fe³⁺)与反应体系中的单宁酸形成螯合物,防止单宁酸过度反应,从而提高其抗钙化的综合性能。探索Fe³⁺添加方式和pH等反应条件,分别通过单轴拉伸实验测定力学性能、大鼠皮下植入实验测定钙化水平和两点弯曲法测定血管柔顺性,筛选出优化的TA-Fe³⁺处理方法,并对此方法处理得到的牛颈静脉进行生物相容性评价。结果表明,碱性条件(pH=8)下,TA处理前增加Fe³⁺处理步骤能改善TA固定牛颈静脉的组织柔顺性,柔顺度较TA组显著改善,同时保持了TA处理的力学强度;大鼠皮下植入21和60 d后钙含量显著低于GA组[21 d:(1.71±0.41) mg/g vs (38.12±7.40) mg/g; 60 d:(2.73±1.13) mg/g vs (124.19±14.22) ...     

生物瓣钙化机理初探

本文研究了三价金属离子AL~(3+)及Cr~(3+)对生物瓣原材料牛心包的作用.通过材料处理前后热收缩温度Ts的变化,指出AL~(3+)及Cr~(3+)处理材料可引起胶原分子间产生交联作用.指出了羧基在牛心包钙化中所起的重要作用,提出了新的牛心包材料钙化机理,利用该机理能较为圆满地解释前人的实验结果.为探索和找出有效的生物辦防钙化措施指出一条途径.     

不同交联改性牛心包材料的细胞毒性研究

本研究采用培养的人胚肺纤维细胞分析比较戊二醛、环氧１铬交联处理后４％甲醛保存的牛心包材料的细胞毒性。在浸泡前与浸泡１０、２０、３０天的周期中，不同交联处理的牛心包材料与浸出液的细胞增殖抑制指数显示：９１）三种交联剂处理的心包材料均有明显的细胞毒性。（２）随浸泡时期的延长，心包材料与浸出液的细胞毒性逐渐降低。（３）铬交联处理的牛心包材料与浸出液的细胞毒性显著高于其他交联材料。     

单宁酸与牛颈静脉的交联机制研究

为从化学角度探索单宁酸与牛颈静脉的交联机制,使用5种含有单宁酸不同特征基团的模式分子,分别对戊二醛固定后的牛颈静脉带瓣血管进行交联处理。体内实验采用20只SD大鼠皮下植入处理后的带瓣血管,21和60 d后用原子吸收光谱法测定抗钙化效果,用Masson和EVG染色测定交联程度。体外采用热稳定性和酶解实验检测交联程度,并使用傅里叶变换红外光谱检测带瓣血管化学结构的变化,推测单宁酸与带瓣血管交联作用的类型;进一步在确定交联类型的体系中加入系列浓度梯度(0.1、0.3、0.5、1 M)的尿素,对交联类型使用同样方法进行验证。结果显示,含多酚羟基的单宁酸组带瓣血管交联程度最高,21和60 d钙含量分别为2.25、8.26 mg/g,抗钙化能力最优(P<0.05);傅里叶变换红外光谱图中,单宁酸组带瓣血管有氢键生成。浓度梯度尿素实验表明,随着尿素浓度的增加,单宁酸与牛颈静脉组织交联程度下降(P<0.05),60 d时单宁酸组钙含量为8.10 mg/g,远低于加入0.1 M尿素组的16.83 mg/g和0.5 M尿素组的50.76 mg/g(P < 0.001)。研究表明,单宁酸对牛颈静脉带瓣血管的交联作用是由其所含的多酚羟基与组织中蛋白质基团间通过氢键而产生的,为进一步优化单宁酸抗钙化处理流程提供依据。     

环氧化合物预防生物假器官心脏瓣膜的组织钙化:体内外培养的钙化试验研究

戊二醛(GA)处理猪主动脉瓣膜或牛心包,制作生物假器官心脏瓣膜,发生钙化作用是造成临床失败的主要原因。研究用Epon812(美国产)制备成EP1,用聚甘油缩水甘油醚配制成EP2的两种类型的环氧化合物。新鲜的牛心包壁,去脂肪切割成4×5cm~2片,分为新鲜心房组织用无菌水贮存,按文献先用0.5%GA、pH7.4浸96小时,应用0.2%戊二醛,在4℃贮存并将     

环氧交联牛心包材料内皮化的抗钙化作用研究

研究生物材料内皮化延缓钙化的效果 ,从材料学上改进生物瓣性能 ,提高其耐久性打下基础。方法 ,将环氧交联的牛心包材料体外内皮化后同时进行犬股动脉间位移植和腹部皮下包埋 ,与单纯戊二醛处理者和单纯环氧处理进行钙化程度对比。结果 :钙含量测试结果以内皮化环氧交联材料皮下包埋最低 ,未内皮化材料中以环氧处理者钙含量较低。结论 :环氧交联牛心包材料确可实现体外快速内皮化 ,生物材料的内皮化“活化”有赖于表面全部被自体存活内皮细胞覆盖才能实现 ,完全的内皮化确有抗钙化效果 ,两种动物模型研究生物材料抗钙化和内皮化时各有优缺点     

不同处理方法的牛心包生物力学特性测试分析

目的　探索一种理想的牛心包处理方法。方法　观察戊二醛及 2 ,3 -丁二醇改性戊二醛处理后的牛心包热挛缩温度、生物力学特性及超微结构变化。结果　鞣制后心包厚度和僵硬度增加 ,柔韧性降低。丁二醇组的弹性模量 (8.75± 1 .71 )较戊二醛组 (6.5 9± 1 .3 7) (P <0 .0 5 )更近似于正常瓣膜组织 ;且其极限拉伸强度优于戊二醛组。超微结构显示丁二醇组胶原纤维与弹性纤维结构完整 ;戊二醛组胶原纤维和弹性纤维均明显变性 ,结构模糊。结论　 2 ,3 -丁二醇改性处理后的牛心包具有更好的生物力学特性 ,该方法是一种较为理想的牛心包处理方法     

牛心包瓣性能的综合改进（Ⅲ）：醛处理对牛心包钙化的影响

本文观察了不同浓度戊二醛、甲醛处理对牛心包理化性能的影响。牛心包的收缩温度随着戊二醛或甲醛浓度的增高而提高。而抗拉强度在76～85℃收缩温度范围内,并没有随着收缩温度的提高而增强。随着收缩温度的提高,牛心包的抗蛋白酶水解性能有所增强。随着经甲醛溶液浸泡的牛心包收缩温度的提高,牛心包的钙化越趋严重。而经戊二醛溶液浸泡的牛心包,随着收缩温度的提高,其钙化有所减轻。     

原花青素交联牛心包材料的研究

本研究针对天然交联剂原花青素处理牛心包材料的性能进行研究.采用原花青素交联牛心包组织,制备人工生物心脏瓣膜材料,并对其交联特性、力学特性、抗酶降解性能、亲疏水性能、细胞毒性试验以及溶血试验等进行分析.结果显示:原花青素或戊二醛处理的牛心包组织变性温度、力学特性、表面亲水性能和抗酶降解能力都明显提高;与传统交联剂戊二醛相比组织稳定性、亲水性能和抗酶降解能力未见显著性差异,但是最大断裂强度显著提高(原花青素交联组织最大断裂强度(13.863 0 MPa)明显高于戊二醛交联组织(10.784 2 MPa);溶血试验结果表明原花青素处理固定组织的溶血率(2.61%)远低于戊二醛处理的组织(12.54%);细胞毒性试验结果表明原花青素交联组织在1、3、5 d的细胞增殖率分别为76.19%、88.96%、100.12%,而戊二醛在相同的时间点的细胞增殖率分别为63.15%、57.28%、48.74%.原花青素交联的瓣膜材料组织结构稳定、亲水性好、毒性小且能维持较好的力学性能,作为人工生物瓣膜材料具有很好的研究前景.     

氧化海藻酸钠交联改性脱细胞基质材料及其细胞相容性研究

运用高碘酸钠氧化法制备新型的生物交联剂—氧化海藻酸钠(ADA)并将之用于交联改性脱细胞基质材料,通过检测一些交联指标及交联后材料的性能特征来研究ADA交联改性脱细胞基质材料的特点。实验中采用了目前典型的两类交联剂(戊二醛(GA)和京尼平(GP))作为实验对照组。用三种交联剂处理血管组织15min～72h,测定交联过程中的交联指数,并对彻底交联后材料的力学性能以及细胞相容性进行研究。结果表明,ADA交联脱细胞基质材料的交联速率、交联程度不亚于GA,明显优于GP;交联后的材料也具有更适宜的力学性能;在细胞相容性方面,ADA交联的材料也具有明显优于GA、与GP相当的这样非常理想的效果。综上所述,ADA是一种具有很大发展前景的生物组织交联剂。     

一种新的生物瓣材料——Ⅶ.醛固定剂对牦牛心包流变性能的影响

本文用软组织生物材料试验机,在37℃生理盐水环境下研究醛固定剂对牦牛心包材料应力—应变和应力松弛等性能的影响。实验结果表明:(1)用戊二醛固定的心包试样,其应力松弛明显地比新鲜试样小。固定后戊二醛使胶原纤维在低应变下的应力增加,并有超高形变出现。(2)甲醛的交联作用在PH7.5附近产生。甲醛在形成交联的同时还引起心包中基质的固化,致使试样变硬,在受拉时常呈脆性断裂,断裂伸长率减小。用0.625％甲醛处理的试样交联度低,而用1.2％和5％甲醛处理的则有较高的交联度。(3)固定后的材料,在抗张强度上均有不同程度的降低。     

不同化学方法改性的牛心包体外降解规律的研究

牛心包材料是一种以胶原蛋白为主要成分的天然生物材料。为了研究牛心包作为组织工程材料的可能，本实验通过采用失重法、蛋白质检测法及氨基酸测定法定量地研究和对比了几种不同改性方法处理过的牛心包的体外降解规律，力求找到一种改性方法使材料既有可控的降解性，又有较小的抗原性，以使牛心包成为一种良好的可降解性GTR材料。研究结果显示，用乙醇封端处理的心包相对于戊二醛及环氧交联处理的心包，在降解性方面更易满足可降解GTR材料的要求。蛋白质检测法及氨基酸测定法也为以后建立控制心包降解速率的数学模型奠定了良好基础。     

肝素化牛心包膜对VEGF165控释的体外研究

通过交联的去细胞牛心包膜进行肝素化表面改性,提高对血管内皮细胞生长因子(VEGF)的控释能力及对内皮细胞(ECs)的促增殖能力.采用3种方式进行肝素改性,即共价键合肝素、离子结合肝素以及共价-离子联合负载肝素.评估肝素化基质对VEGF控释及促ECs粘附和增殖的影响.结果表明,共价键合肝素,结合VEGF稳定性强;而离子结合肝素,结合VEGF量可任意调节,且表面易于ECs粘附;共价-离子联合负载肝素,将两种方法的优点相结合,取长补短,使这种方式肝素改性的牛心包具有良好的VEGF控释能力和促ECs增殖能力.     

藤黄酸对卵巢癌细胞SKOV3生长、转移和侵袭的作用研究

目的 探究藤黄酸(gambogic acid,GA)对卵巢癌SKOV3细胞恶性生物学行为的影响.方法 将SKOV3细胞分为GA(0μmol/L)组、GA(2μmol/L)组、GA(5μmol/L)组、GA(10μmol/L)组,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Hoechst染色和流式检测细胞凋亡,Transwell实验和...     

牛心包液氮冷冻减薄后性能研究

本文研究了牛心包液氮冷冻并减薄后的性能变化,并与猪心包进行了对比。采用苏木精-伊红(HE)染色的方法进行组织学微结构观察,并通过拉伸试验评价了冷冻和减薄对心包力学性能的影响,组织学观察和力学性能评价均采用猪心包作为对照。结果表明牛心包在液氮冷冻后性能未见区别;冷冻减薄后,割线模量和极限强度与猪心包基本相当,弹性模量略高于猪心包。研究表明,牛心包减薄容易获得理想的厚度和预期的性能,其可作为经导管瓣膜瓣叶材料的一种选择。     

心血管组织钙化时内源性硫化氢系统下调

目的：观察心血管组织钙化时内源性硫化氢生成系统(CSE/H2S)的变化，以探讨内源性硫化氢在心血管组织钙化中的作用及血管钙化的细胞分子机制。方法：在维生素D3 (Vit D3)和尼古丁(nicotine)诱导大鼠血管钙化模型上，测定钙含量、［45Ca2+］沉积及碱性磷酸酶（ALP）活性判断心血管钙化程度,采用生化法测定血浆、心肌组织和主动脉H2S含量及CSE活性，半定量RT-PCR方法测定心血管组织CSE mRNA水平。结果：钙化组大鼠心肌组织钙含量较对照组高3.8倍,主动脉钙含量、［45Ca2+］ 沉积及ALP 活性分别较对照组高6.8倍、1.4倍和 1.9倍（P＜0.01）；钙化组大鼠血浆H2S含量较对照组低39%（P<0.01），心肌和主动脉组织的 H2S含量也分别较对照组低39%和31%，CSE mRNA表达也分别低28％和36％（P<0.01），CSE活性分别低56%和53%(P<0.01)。结论：钙化心血管组织CSE/H2S通路受抑制，内源性H2S生成减少。     

氧化铝和聚氨酯表面的白蛋白吸附

目前有许多金属及合金被用于各种修复和心血管系统植入材料中,而用于心血管的非生物材料的主要缺陷是在组织与植入物表面有血栓形成,其原因主要为植入物接触血液时,血小板即粘附,继而出现瞬间蛋白吸附现象。本文作者利用阳极氧化法将铝表面包裹成各种厚度的氧化层以观察氧化铝表面和无氧化层的铝及聚醚氨基甲酸乙酯脲(PEuu)表面的蛋白吸附情     

用六次甲基二异氰酸酯(HDI)作为牦牛心包材料交联剂的探索实验

为寻求一种优于戊二醛(GA)的新型生物瓣膜材料交联剂,作者从可行性探索的角度,用气态六次甲基二异氰酸酯(HDI)处理川西牦牛心包材料。通过对心包材料的收缩温度(T_s)和氮基酸组成的测定,对气态HDI与心包胶原组织的反应作了初步分析。此外还评价了材料的生物相容性和缓钙化性能,测定了材料的力学性能。实验结果表明:HDI可以作为心包材料的交联剂,但必须防止HDI与心包作用的同时,也与心包中含有的水份反应。经HDI处理的牦牛心包材料具有良好的生物相容性和力学性能。与戊二醛处理的牦牛心包材料相比,其缓钙化能力有所提高,证明HDI有可能成为一种生物瓣膜材料的交联剂。     

生物材料的钙化—病理学、机理和预防措施

在心血管体系和非心血管体系的医用装置都可产生不同程度的钙化(即磷灰石矿物)。钙化造成目前的生物瓣失效,钙化也限制了试验性的机械血泵和临床长期使用的全人工心脏的功能寿命。目前的研究旨在阐明生物材料钙化的宿主、植入物和周围环境之间复杂的关系,并探讨有效的预防治疗方法。本     

抗β2-受体激动剂盐酸克伦特罗抗体的制备

目的 :制备抗盐酸克伦特罗 (clenbuterol,CL)抗体。方法 :采用重氮化方法 ,将其与牛血清蛋白 (BSA)和卵清蛋白 (OVA)交联 ,分别合成免疫抗原 (CL BSA)和包被抗原 (CL OVA)。结果 :兔抗血清中确证含有针对CL的抗体 ,效价为 1∶32× 10 5竞争ELISA法检测表明 ,CL标准液的浓度为 0 .1μg/L时 ,其阻断率已达 93.4 % ,5 0 %阻断率为 1.2 μg/L。结论 :CL抗体可用于ELISA试剂盒的研究