大肠癌及癌旁组织中抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax的表达及意义

目的：研究抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax在大肠癌及癌旁组织中的表达及意义。方法：应用免疫组织化学S－P法对31例大肠癌患者的癌组织及距癌组织外缘3cm内的癌旁组织和3cm以远的正常大肠组织中bcl-2和bax基因的表达进行检测。结果：大肠癌及其癌旁组织中bcl-2蛋白表达阳性率分别为64．5％和60．0％，显著高于正常组织（35．0％），P＜0．05；bax蛋白表达阳性率分别为45．2％和45．0％，显著低于正常组织（60．0％），P＜0．05；大肠癌组织与癌旁组织中bcl-2和bax蛋白表达阳性率的差异无显著性意义（P＞0．05）。bcl-2和bax蛋白在大肠癌组织中的表达与其病理类型和临床分期无明显关系（P＞0．05）。结论：大肠癌及其癌旁组织中有不同水平的bcl-2蛋白过度表达和bax蛋白低表达，两者通过参与调节细胞凋亡而与大肠癌的发生有关，但与大肠癌的病理类型、临床分期无关。距大肠癌组织外缘3cm以内的癌旁组织应视为癌前期组织，手术时应切除。     

Livin mRNA及Bel-2，p53蛋白在胰腺癌中的表达

目的探讨凋亡抑制蛋白Livin在胰腺癌组织中的表达及其与Bcl-2和p53蛋白表达的关系。方法采用逆转录-多聚酶链反应（RT—PCR）法检测52例胰腺癌和12例正常胰腺组织中Livin mRNA的表达；用免疫组织化学法检测胰腺癌组织中Bcl-2和p53蛋白的表达。结果Livin mRNA在胰腺癌中的表达率为71．2％，明显高于正常胰腺组织（P〈0．01）。Livin基因表达与胰腺癌的分化程度和淋巴结转移有关（P〈0．05）。Livin基因表达与Bcl-2蛋白表达有关，而与p53蛋白无关。结论Livin基因在胰腺癌的发生发展中起重要作用；Livin与Bcl-2的异常表达可能在胰腺癌的发生中起协同作用；Livin基因过表达与抑癌基因p53的失活无关。     

Livin mRNA及Bcl-2，p53蛋白在胰腺癌中的表达

目的:探讨凋亡抑制蛋白Livin在胰腺癌组织中的表达及其与Bcl-2和p53蛋白表达的关系。 方法:采用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）法检测52例胰腺癌和12例正常胰腺组织中Livin mRNA的表达；用免疫组织化学法检测胰腺癌组织中Bcl-2和p53蛋白的表达。 结果:Livin mRNA在胰腺癌中的表达率为71.2%，明显高于正常胰腺组织（P＜0.01）。Livin基因表达与胰腺癌的分化程度和淋巴结转移有关（P＜0.05）。Livin基因表达与Bcl-2蛋白表达有关，而与p53蛋白无关。 结论:Livin基因在胰腺癌的发生发展中起重要作用；Livin与Bcl-2的异常表达可能在胰腺癌的发生中起协同作用；Livin基因过表达与抑癌基因p53的失活无关。     

胰腺癌细胞凋亡与bcl-2,bax基因的表达

目的探讨胰腺癌组织中的bcl-2和bax的表达及bcl-2/bax比值与胰腺癌细胞凋亡的关系.方法对30例胰腺癌标本应用免疫组化SP方法测定胰腺癌切片中的凋亡抑制基因bcl-2和凋亡促进基因bax的表达;同时应用TUNEL法测定胰腺癌细胞原位凋亡情况.结果高分化腺癌的凋亡指数(AI)为(5.70±1.21)%;中低分化腺癌为(6.80±2.01)%.AI与bcl-2/bax比值呈负相关关系(r=- 0.5583,P<0.05 ).结论 bcl-2和bax在胰腺癌细胞凋亡调节过程中起着重要作用.     

Bax基因表达在胰腺癌组织细胞凋亡中的作用

目的:探讨胰腺癌组织中细胞凋亡与bax基因表达的相互关系及其在肿瘤发生发展中作用。方法：采用原位末端标记法（ISEL）和免疫组织化学技术检测40例胰腺癌组织及14例慢性胰腺炎组织的细胞凋亡（AI），凋亡相关基因bax蛋白的表达。结果：胰腺癌组织中的AI均值明显高于慢性胰腺炎组织（P＜0．01），随肿瘤进展AI逐渐减少。在癌组织中bax 基因阳性表达率为72．50％（29／40），且bax基因高表达组的AI均值明显高于低表达组（P＜0．01）。结论：细胞凋亡相对减少，在胰腺癌发生发展中起重要作用。bax蛋白是调节胰腺癌组织中细胞凋亡的重要因素。     

胃肠道粘膜相关淋巴组织淋巴瘤的细胞凋亡及其基因调控

目的 探讨细胞凋亡和bcl-2及p53蛋白在胃肠道粘膜相关淋巴组织（MALT）淋巴瘤中的表达与MALT淋巴瘤恶性程度及预后的关系。方法 收集我院1990年年1月－1998年12月胃肠道MALT淋巴瘤32例,行免疫组织化学染色方法检测bcl-2和p53蛋白的表达,应用原位末端标记法进行细胞凋亡检测。结果 本组32例中凋亡细胞呈低密度9例、高密度23例;bcl-2蛋白表达阴性22例、阳性10例;p53蛋白表达阴性18例、阳性14例。细胞凋亡与bcl-2蛋白表达呈负相关,与p53蛋白表达无关。结论 凋亡细胞密度和bcl-2蛋白表达对判断胃肠道MALT淋巴瘤的恶性程度和预后均有帮助。     

Survivin在食管癌中的表达及其与bcl-2表达关系的相关研究

目的探讨Survivin在食管癌组织中的表达及其与bcl-2蛋白表达的相关性。方法应用免疫组织化学SP法,检测Survivin、bcl-2蛋白在68例食管癌组织和20例正常食管组织中的表达。结果Survivin蛋白在正常食管组织中低表达或不表达,68例食管癌组织中,49例表达阳性,占72.1%。Survivin蛋白表达与分化程度、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。食管癌组织bcl-2蛋白表达阳性、阴性组中,Survivin蛋白阳性表达率分别为94.7%(36/38)和43.3%(13/30),两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Survivin蛋白表达与bcl-2蛋白表达密切相关。结论Survivin在食管癌组织中表达上调,通过抑制细胞凋亡,在食管癌的发生中起到重要作用;凋亡相关基因bcl-2的上调与Survivin的表达可能在食管癌变中起协同作用。     

人粘连蛋白基因在胰腺癌中的表达

目的：探讨人粘连蛋白（FN）基因在胰腺癌发生和转移中的作用。方法：应用博道4096型cDNA基因芯片和原位杂交技术检测18例胰腺癌标本、8例慢性胰腺炎组织FN基因表达。结果：FN基因在18例胰腺癌基因芯片检测中表达显著增高（Cy5/Cy3＞2．0，P＜0．01），伴有区域淋巴结转移时增高更加明显；在慢性胰腺炎中的表达与正常组织比较差异无显著性（Cy5/Cy3＜2．0，P＞0．05），与原位杂交结果相同。结论：基因芯片技术能够为胰腺癌的相关基因分析提供特异和可靠的数据；人胰腺组织中FN基因表达升高可能与胰腺癌的发生和转移有关。     

大鼠脊髓急性损伤后bax和bcl—2的表达

目的：检测大鼠脊髓损伤后凋亡相关基因的表达,以探讨神经细胞凋亡的分子机制。方法：大鼠脊髓（T8．9）经中度压迫损伤后,分别在30min、2h、4h、8h、24h、48h和72h处死取材（n=6)。主要应用免疫组化及原位杂交技术对脊髓组织进行标记,以检测bcl-2和bax的表达。结果：损伤4h后bax蛋白大量表达,而bcl-2蛋白仅有少量表达,bcl-2 mRNA未见表达。结论：脊髓损伤后凋亡基因bax大量表达,并可能在神经细胞的凋亡过程中起重要作用。     

肝硬变门静脉高压症患者肝细胞凋亡与原癌基因表达的研究

目的探讨肝细胞凋亡与肝硬变及原癌基因的关系。方法取正常人及肝硬变门静脉高压症患者的肝组织。行透射电镜检查，并检测其凋亡细胞及原癌基因表达。结果肝硬变患者肝组织内的凋亡细胞及凋亡指数高于正常人；肝组织原癌基因c-myc，c-fos和bcl-2均呈过度表达，而正常人肝组织则无表达。结论肝细胞凋亡在肝硬变的演变过程中发挥一定作用，原癌基因c-myc，c-fos和bcl-2参与肝细胞凋亡的调控。     

瘢痕Bcl-2基因与细胞增殖和凋亡的关系

目的:探讨增生性瘢痕成纤维细胞Bcl-2基因表达水平与细胞增殖活性及凋亡程度的关系。方法:用原位杂交、免疫组化染色ABC法,对79例增生性瘢痕组织分别检测Bcl-2mRNA、Bcl-2蛋白和增殖细胞核抗原的表达,并用TUNEL法作原位细胞凋亡检测。结果:75例（94.9％）表达Bcl-2mRNA,70例（88.6％）表达Bcl-2蛋白,两者表达水平呈正相关（rs=0.989,P<0.01）;随成纤维细胞Bcl-2蛋白表达水平升高其增殖活性相应增加,而凋亡相应减少,Bcl-2蛋白+++组与++组（P<0.05）及前两组分别与-组和+组间（P<0.01）两项指标差异均有显著性。结论:增生性瘢痕中成纤维细胞Bcl-2基因高表达可抑制其凋亡,可能由此引起的细胞凋亡减少与其他基因异常所致的细胞过度增殖共同导致瘢痕的形成。     

转bak基因促膀胱癌多药耐药细胞凋亡的研究

目的　观察转入bak基因对膀胱癌多药耐药 (MDR)细胞的杀伤效果 ,探讨其可能的机制。　方法　用脂质体将bak基因导入MDR细胞 ,通过原位杂交法检测bakmRNA的表达 ,SABC免疫组化法分析bak和bcl 2的表达。采用细胞计数法检测细胞生长抑制率 ,流式细胞仪检测细胞周期的变化。荧光染色观察细胞形态。　结果　bak基因可成功转入MDR细胞 ,转染第 3天bakmR NA阳性率 64 % ,bak表达阳性率 60 % ,明显高于对照组 ;转染后细胞中bcl 2表达显著减少 ,P <0 .0 5。转染第 4天EJ/bak细胞抑制率 32 % ,显著高于对照组 ,P <0 .0 5。细胞周期分析可见凋亡峰 ,凋亡率 35 %。凋亡细胞在荧光显微镜下形成凋亡小体。　结论　转入bak基因可显著促进MDR细胞的凋亡 ,其作用机制与下调bcl 2基因的表达有关     

凋亡抑制基因bcl-2在前列腺组织中的表达

目的　探讨前列腺组织中bcl 2基因表达的意义。　方法　采用核酸分子原位杂交技术 ,对 11例胎儿和 2 7例成人尸体前列腺组织、6 0例良性前列腺增生患者前列腺组织中bcl 2基因mRNA表达进行检测。　结果　 9例胎儿前列腺组织bcl 2阳性表达于胚芽上皮细胞 ,其中轻度阳性8例、中度 1例 ,呈弥漫分布 ,染色浅淡。 17例成人正常前列腺组织bcl 2阳性表达于腺上皮基底细胞 ,阳性率 6 3.0 %。分泌细胞阳性表达者 9例 ;高倍镜下见细胞浆染色 ,较淡。 5 0例增生前列腺组织bcl 2阳性表达于腺上皮基底细胞 ,阳性率 83.4 % ;分泌上皮细胞阳性表达 34例 (5 6 .7% ) ;高倍镜下染色均见于细胞浆。增生组前列腺基底细胞、分泌上皮细胞bcl 2阳性表达均高于正常前列腺组 (χ2=4 .36 ,χ2 =4 .0 6 ) ,差别有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;正常前列腺与增生前列腺基底上皮细胞bcl 2阳性表达均高于分泌上皮细胞 (χ2 =7.5 0 ,χ2 =10 .2 0 ) ,差别有显著性意义 (P <0 .0 5 )。　结论　bcl 2基因主要表达于前列腺基底细胞 ,可能在调节前列腺上皮细胞凋亡中有重要作用     

化疗诱导人肝癌细胞凋亡中p53和bcl-2基因的调控

目的 建立化疗药物丝裂霉素诱导肝癌细胞凋亡的模型,初步探讨在该凋亡过程 中重要凋亡相关基因ｐ５３和ｂｃｌ－２的调控作用。方法 用丝裂霉素诱导人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２凋亡,我显微镜和透射电镜观察肝癌细胞的形态学改变,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞ＤＮＡ片段的梯状条带,用流式细胞仪免疫荧光法检测凋亡不同时期Ｐ５３和Ｂｃｌ－２蛋白的表达量。结果 ８ｍｇ／ｍｌ丝裂霉素作用１２,２４,４８ｈ后,Ｐ５３蛋白表达量明显增高,尤以１２ｈ明显,而后逐渐下降。Ｂｃｌ－２蛋白在整个凋亡过程中无明显变化。结论 在化疗药物丝裂霉素诱导肝癌细胞凋亡过程中,ｐ５３基因参与了调控,并为凋亡信号传导途径中的早期事件。丝裂霉素诱导的肝癌细胞凋亡途径为ｐ５３依赖方式,而在该凋亡过程中,ｂｃｌ－２基因的调控并不重要。     

p53和c—myc异常表达与胃癌细胞多药耐药性关系的研究

应用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法研究６７例胃标本中ｐ５３和ｃｍｙｃ的表达与多药耐药性（ＭＤＲ）的关系。结果显示：本组胃癌中ｐ５３阳性３２例，阳性率４７８％；ｃｍｙｃ阳性３７例，阳性率５５２％；Ｐｇｐ阳性３９例，阳性率５８２％。ｐ５３的异常表达与ｍｄｒ１基因表达呈显著正相关（ｒ＝０６３，Ｐ＜００５），而ｃｍｙｃ和ｍｄｒ１的表达无明显相关。提示ｐ５３异常表达可增加ｍｄｒ１基因的表达，从而使胃癌细胞获得ＭＤＲ表型。     

bcl-2和bad蛋白表达与乳腺癌的相关性研究

目的探讨bcl 2、bad基因在乳腺癌前病变及其在癌组织中的表达 ,以及与ER、PR及淋巴结转移间的关系。方法采用免疫组织化学染色SABC法 ,观察 19例乳腺单纯性增生 ,2 0例乳腺非典型增生 ,4 8例乳腺癌组织中bcl 2、bad蛋白的表达 ,并同时检测 4 8例乳腺癌组织中ER、PR的表达。结果bcl 2在正常组和乳腺单纯性增生组 10 0 %表达 ,非典型增生组 ,乳腺癌组的表达率分别为 85 0 %和 5 8 33% ,二组之间比较差异有显著性 ( χ2 =3 37,P <0 0 5 )。bad蛋白在各组中的表达率较bcl 2表达有下降趋势 ,分别为 87 5 % ,84 2 % ,5 5 % ,4 7 91%。bcl 2、bad在各组中表达阳性率差异有显著性 ( χ2 =2 3 0 5 ,P <0 0 0 1,χ2 =11 2 9,P <0 0 1)。结论bcl 2、bad基因在乳腺癌的恶性转化中起重要作用 ;同时其表达与雌激素的调节有密切关系 ;bcl 2蛋白表达与乳腺癌淋巴结转移有关     

Bcl-2反义寡核苷酸诱导增生性瘢痕细胞凋亡的研究

目的：探讨反义寡核苷酸(ASODN)对bcl-2基因的表达调控及诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的作用。方法：采用RT-PCR法和流式细胞术检测ASODN对bcl-2蛋白和mRNA表达量的调控；通过MTT法比较两条人工合成ASODN直接作用及脂质体D0’FAt，转染对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制效果；用相差显微镜、电子显微镜观察bcl-2ASODN诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡效果。结果：ASODN降低bcl-2蛋白和mRNA表达；两条ASODN抑制增生性瘢痕成纤维细胞增殖的作用呈浓度和时间依赖性，且靶位点于mRNA蛋白编码区(ASODN2)和以DOTAP为载体的ASODN对成纤维细胞的增殖抑制效果最佳。Bcl-2ASODN作用于成纤维细胞后，成纤维细胞缩小、凋亡小体和染色质浓缩等特征性改变出现。结论：bcl-2ASODN能抑制bcl-2mRNA和蛋白表达，诱导成纤维细胞凋亡。     

肝外胆管癌中bcl-2/Bax的表达及其意义

目的：研究抗凋亡基因bcl-2(B cell lymphoma-2)和促凋亡基因Bax(Bcl-associated x protein)在肝外胆管癌中的表达及意义.方法:用免疫组化S-P法测定41例肝外胆管癌中bcl-2和Bax的表达产物,以13例慢性胆管炎做对照.结果:肝外胆管癌中bcl-2的阳性率为58.54%,高于慢性胆管炎组织的0(P<0.01);而Bax在肝外胆管癌中的阳性率为56.10%,低于慢性胆管炎组织的92.31%(P<0.05).高中分化癌组和无转移组中bcl-2与Bax的阳性率明显高于低分化癌组和转移组(P<0.05).结论:bcl-2和Bax的表达与肝外胆管癌的分化有关,可作为判断胆管癌患者预后的参考指标.