Growth and activation of PI-3K/PKB and Akt by stromal cell-derived factor 1α in endometrial carcinoma cells with expression of suppressor endoprotein PTEN

Background Mutation or deletion in the phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten （PTEN） gene has been identified as an important cause of endometrial carcinoma; stromal cell derived factor-1α （SDF-1α） exerts growth-promoting effects on endometrial cancer cells through activation of the PI-3 kinase/Akt pathway and downstream effectors such as extracellular-responsive kinase （ERK）. In this study, a plasmid containing the PTEN gene was transfected into Ishikawa cells to investigate the difference in growth and signal transduction between Ishikawa-PTEN and Ishikawa cells after SDF-1α stimulation, and to study mechanisms of the involvement of PTEN protein in endometrial carcinoma development. Methods Ishikawa cells were transfected with a plasmid （pLXSN-PTEN） containing the PTEN gene and a plasmid （pLXSN-EGFP） with enhanced green fluorescent protein （EGFP）. Cells were then screened to obtain Ishikawa-PTEN cells and Ishikawa-neo cells that can both stably express PTEN protein and EGFP. Expression of PTEN protein, phosphorylation levels of AKT and ERK （pAKT and pERK） and growth differences in Ishikawa-PTEN, Ishikawa-neo and Ishikawa cells before and after SDF-1α stimulation were then determined by Western blots and MTT assays. Results Western blot analysis showed that Ishikawa cells produced PTEN after transfection with the PTEN gene. At 15 minutes after SDF-1α stimulation, the pAKT level of Ishikawa-PTEN cells was lower than that of Ishikawa-neo cells and Ishikawa cells. There was no significant difference in pERK levels among the three cell lines. The positive effect of SDF-1α on Ishikawa-PTEN cells growth was markedly less than the effect on Ishikawa-neo and Ishikawa cells. However, in the absence of SDF-1α stimulation （baseline）, the pAKT level in Ishikawa-PTEN cells was less than that in Ishikawa cells. There was a significant difference in growth between the Ishikawa-PTEN cells and the Ishikawa-neo cells. Conclusions PTEN gene transfection can regulate the level of pAKT but not pERK in Ishikawa-PTEN cells. PTEN protein may suppress the growth-promoting effect of SDF-1α on endometrial carcinoma by inhibiting the PI-3K/AKT signal transduction pathway.     

胃癌组织中SDF-1的表达及临床意义

目的:探讨基质细胞源性生长因子-1(SDF-1)在胃癌组织中的表达,并分析SDF-1的表达水平与胃癌患者各临床病理特征及其预后的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测100例胃癌患者胃癌组织及10例正常胃黏膜组织中SDF-1的表达。结果:胃癌组织及正常胃黏膜组织中均可检测到SDF-1的表达,胃癌组织的表达水平明显高于正常胃黏膜组织(P<0.05)。SDF-1在胃癌原发灶中的表达与肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移及预后相关(P<0.01),与患者年龄、性别、肿瘤部位及病理类型无相关性(P>0.05)。结论:胃癌组织中SDF-1表达与肿瘤的分期、分化程度、淋巴结转移及预后有关,SDF-1可作为判断胃癌患者预后的一项指标。     

肝星状细胞经趋化因子SDF-1/CXCR4轴途径促进肝癌细胞侵袭的作用及其机制

目的：探讨肝星状细胞（HSC）通过SDF-1/CXCR4轴对肝癌细胞侵袭的影响和可能机制,为研究肝癌的侵袭过程提供依据。方法: 采用Western blotting和RT-PCR检测HSC LX02和肝癌细胞MHCC97、SMMC7721、Hep3B、HepG2中SDF-1和CXCR4的表达。采用Transwell实验检测LX02共培养或外源性SDF-1干预对肝癌细胞HepG2以及CXCR4基因沉默后的HepG2侵袭的影响。Western blotting法检测上皮标志E-Cadherin和间质标志Vimentin的表达水平。结果：与肝癌细胞比较,LX02中趋化因子SDF-1呈高表达（P<0.05）。4株人肝细胞癌细胞均有CXCR4高表达。HSC或SDF-1均能促进肝癌细胞HepG2侵袭（P<0.05）,并诱导E-Cadeherin蛋白表达下调,Vimentin蛋白表达上调。通过RNA干扰技术靶向沉默肝癌细胞CXCR4基因后,HSC和SDF-1对肝癌细胞HepG2侵袭能力均无明显影响（P>0.05）,肝癌细胞E-Cadeherin、Vimentin蛋白及mRNA表达水平亦无明显变化。结论：HSC可通过SDF-1/CXCR4轴促进肝癌细胞侵袭,其机制可能与诱导肝癌细胞上皮-间质转化有关。     

子宫内膜癌中PTEN与错配修复基因hMLH1的表达及其与临床病理学特征的关系

目的探讨抑癌基因PTEN及错配修复基因hMLH1在子宫内膜癌中的表达及其与子宫内膜癌的临床病理学特征的关系。方法采用免疫组化SP法,检测36例散发性子宫内膜癌、22例子宫内膜不典型增生、23例正常子宫内膜组织中PTEN及hMLH1的表达。结果hMLH1基因在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌中的表达分别为83％（19／23）、64％（14／22）、11％（4／36）,hMLH1基因在子宫内膜不典型增生及正常子宫内膜中的表达与其在子宫内膜癌中的表达差异有显著性（P〈0．01）;hMLH1基因表达与子宫内膜癌的淋巴结转移、肌层侵润、手术分期、病理类型无统计学差异（P〉0．05）,与子宫内膜癌病理分化程度有关（P〈0．01）：PTEN基因在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌中的表达分别100％（23／23）、73％（16／22）、56％（20／36）,PTEN基因在子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌中的表达与其在正常子宫内膜中的表达差异有显著性（P〈0．01）;PTEN基因表达与子宫内膜癌的分化程度、淋巴结转移、手术分期、病理类型、肌层是否侵润无统计学相关（P〉O．05）;PTEN与hMLH1两种基因蛋白在子宫内膜癌变过程中的表达有相关性（相关系数r=0．28;P〈O．05）。结论hMLH1及PTEN均是子宫内膜的保护性基因,在子宫内膜的癌变过程中表达逐渐减少,可能与早期子宫内膜癌癌变的启动有关,且二者有显著的相关性;免疫组化法测定PTEN的表达有可能成为筛选子宫内膜癌变的早期指标;测定hMLH1的表达有可能成为预测子宫内膜癌预后的指标。     

抑癌基因PTEN在子宫内膜癌组织中的表达

目的 :了解抑癌基因PTEN在子宫内膜癌中的表达及与子宫内膜癌临床病理因素的相关性 ,探讨其与子宫内膜癌发生发展的关系 .方法 :运用免疫组织化学SABC法测定PTEN蛋白在 77(子宫内膜样腺癌 72 ,子宫浆液性癌 5 )例子宫内膜癌组织和 2 5例正常子宫内膜中的表达 ,并比较PTEN表达变化与组织学类型、手术临床分期、病理分级、子宫肌层浸润程度、淋巴结转移及患者年龄等临床病理因素之间的相关性 .结果 :子宫内膜癌组织中PTEN表达缺失率为 6 0 % ,与正常子宫内膜相比 (0 % )存在显著性差异 (P =0 .0 0 0 0 ) .子宫内膜样腺癌中PTEN的失表达率为 6 4 % ,而子宫浆液性癌为0 % ,二者差异显著 (P =0 .0 0 4 8) .PTEN的失表达率随内膜癌恶性程度的增加而增加 (P =0 .0 0 34) ,但与手术临床分期、肌层浸润程度、淋巴结转移及患者年龄等因素无关 (P >0 .0 5 ) .结论 :抑癌基因PTEN是在子宫内膜癌发生过程中占重要地位的突变基因 ,PTEN基因的失表达与子宫内膜癌 ,特别是子宫内膜样腺癌的发生发展密切相关     

SDF-1通过PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路对人微血管内皮细胞功能产生影响

目的:观察基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对人微血管内皮细胞 (human microvascular endothelial cell line-1,HMEC-1)功能的影响,并对相关机制进行初步探讨,从而明确SDF-1在糖尿病血管病变中的作用?方法:体外培养HMEC-1,分别在培养基中加入不同浓度的SDF-1(0?25?50?100 ?滋g/L),Western blot检测HMEC-1中PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路的活化情况,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况,划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力的变化情况?采用PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路抑制剂LY294002和U0126阻断HMEC-1中PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路后,再以SDF-1处理HMEC-1,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况;划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力的变化情况?结果:Western blot结果显示,25 ?滋g/L的SDF-1处理即可显著活化HMEC-1中的PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路,且随着SDF-1处理浓度的升高,PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路活化水平逐渐升高?同0 ?滋g/L 的SDF-1处理组相比,25?50?100 ?滋g/L的SDF-1均可显著加强HMEC-1的增殖和迁移能力(P < 0.01),并抑制HMEC-1的凋亡水平(P < 0.01),且这种作用具有剂量依赖性?当采用LY294002和U0126阻断HMEC-1中的PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路后,SDF-1促HMEC-1增殖和迁移能力及抑制HMEC-1凋亡的能力均显著降低(P < 0.01)?结论:SDF-1可通过活化PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路,进而促进HMEC-1的增殖和迁移,并抑制HMEC-1的凋亡水平,从而在糖尿病血管病变中发挥一定的作用?     

miR-27a低表达对子宫内膜癌HEC-1-A细胞增殖的影响

目的研究miR-27a低表达对子宫内膜癌HEC-1-A细胞增殖的影响。 方法构建miR-27a低表达HEC-1-A细胞株。细胞实验分为空白对照组(HEC-1-A不做任何处理)、NC-miR组(转染miR-27a空载体)及miR-27a inhibitor组(转染miR-27a抑制剂)。qRT-PCR法检测各组细胞miR-27a表达情况；MTT比色法和平板克隆技术检测各组细胞增殖能力。 结果成功构建miR-27a低表达HEC-1-A细胞株。miR-27a inhibitor组miR-27a水平及细胞增殖能力均低于NC-miR组及空白对照组(P＜0.05)。 结论miR-27a低表达抑制子宫内膜癌HEC-1-A细胞增殖能力。     

miR-181a促进人子宫内膜间质细胞蜕膜化催乳素的表达

目的目前虽已发现一些在胚胎着床过程中起重要作用的分子,但微小RNA(microRNA,miRNA)在蜕膜化过程中作用的研究报道较少,文中调查孕鼠围着床期子宫组织中miR-181a的表达规律,并探讨miR-181a对人子宫内膜间质细胞(human endometrial stromal cell,hESC)体外诱导蜕膜化过程中蜕膜化标志基因蜕膜化催乳素(decidual prolactin,dPRL)表达的调控作用。方法收集怀孕0～6.5 d孕鼠子宫组织,采用TRIZOL法提取总RNA,通过实时定量PCR检测子宫组织中miR-181a的表达。制备Ad-miR-181a重组腺病毒,并感染hESC,24 h后采用0.5 mmol/L 8-Br-cAMP和1μmol/L Medroxyproges-terone(MPA)联合进行体外蜕膜化诱导培养;通过化学发光免疫法和实时定量PCR分别检测细胞培养液上清中dPRL的浓度与间质细胞中催乳素(prolactin,PRL)mRNA的表达;同时采用荧光素酶报告基因检测miR-181a对hESC中dPRL(-332/+65)启动子的调控作用。结果早孕小鼠子宫组织中miR-181a的表达高于非妊娠小鼠子宫,且随着妊娠天数的增加呈逐渐上升的趋势,在小鼠着床"窗口期"即孕4.5 d达到高峰(2.60±0.15倍,P<0.01,n=5),孕5.5 d子宫miR-181a的表达开始平稳下降;成功获得滴度为5.19×1010ifu/ml的miR-181a腺病毒,该腺病毒介导的miR-181a过表达显著增加hESC蜕膜化标志基因dPRL mRNA表达水平,增高超过8倍(P<0.01);在8-Br-cAMP和MPA联合诱导hESC体外蜕膜化时,高表达miR-181a可明显增加8-Br-cAMP联合MPA诱导的PRL mRNA表达水平与PRL蛋白分泌(P<0.01)。荧光素酶报告基因进一步证实miR-181a可以激活dPRL(-332/+65)启动子的活性达到2倍(P<0.05)。结论 miR-181a参与8-Br-cAMP和MPA诱导子宫内膜间质细胞蜕膜化过程中PRL的表达调控。     

雷公藤甲素对离体子宫内膜癌细胞株增殖及凋亡信号通路PI3K/PKB的影响

目的:探讨雷公藤甲素对人子宫内膜癌细胞株HEC-1B增殖和凋亡的影响,初步探讨其与凋亡信号通路磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB)的关系?方法:观察PI3K/PKB通路抑制剂(LY294002)对雷公藤甲素致子宫内膜癌细胞株HEC-1B凋亡的影响;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测雷公藤甲素对细胞增殖的减轻情况;Western blot观察HEC-1B的PKB磷酸化蛋白表达?结果:MTT实验显示PI3K/PKB通路抑制剂能明显减轻雷公藤甲素对HEC-1B细胞生长的抑制作用,呈浓度依赖性(P < 0.05);Western blot结果显示细胞株磷酸化蛋白的表达水平与雷公藤甲素作用浓度呈反比(P < 0.05)?结论:雷公藤甲素对子宫内膜癌细胞株HEC-1B的增殖产生抑制作用,并能影响PI3K/PKB信号通路诱导细胞凋亡?     

子宫内膜癌组织中PTEN的表达及其与mTOR磷酸化的相关性研究

目的探讨子宫内膜癌组织中磷酸酶与张力蛋白同源物（phosphataseandtensinhomolog,PTEN）的表达及其对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammaliantargetofrapamycin,mTOR）磷酸化的影响。方法利用SP免疫组化法对19例正常子宫内膜组织、28例不典型增生子宫内膜组织、53例子宫内膜癌组织中PTEN、磷酸化mTOR（P—mTOR）、真核细胞翻译起始因子4E（eukaryoticinitiationfactor4E,eIF-4E）的表达情况进行检测。结果PTEN在正常子宫内膜组织、不典型增生子宫内膜组织、子宫内膜癌组织中阳性程度逐渐降低（P〈0．05）,P—mTOR和eIF-4E在子宫内膜癌组织中阳性程度最高,在不典型增生子宫内膜组织和正常子宫内膜组织中阳性程度逐渐降低（P〈0．05）;PTEN与P—roTOR在子宫内膜癌组织中的表达呈负相关（r=-0．347,P=0．011）,P—mTOR和elF-4E在子宫内膜癌组织中的表达呈正相关（r：0．806,P=0．000）。结论子宫内膜癌组织中存在mTOR通路蛋白异常高表达,PTEN的表达减少与mTOR的磷酸化及其下游因子eIF-4E的活化有关。     

血清基质细胞衍生因子-1水平与糖尿病周围神经病变的相关性

目的探索基质细胞衍生因子-1(SDF-1)与糖尿病周围神经病变(DPN)的相关性。方法回顾性分析2018年9月至2019年10月中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)内分泌科138例2型糖尿病患者的临床资料,根据有无神经病变,分为无DPN组与DPN组,每组69例。探讨SDF-1与DPN发病的关系。结果 DPN组患者SDF-1水平为(0.33±0.17)μg/mL,低于无DPN组,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman分析结果显示,SDF-1水平与病程呈负相关(r=-0.178,P<0.05);logistic回归分析显示,血清SDF-1水平降低、病程可能是影响DPN发病的因素(P<0.05)。结论 SDF-1水平降低可能与DPN的发病有关。     

Role of phosphatase PTEN in the activation of extracellular signal-regulated kinases induced by estradiol in endometrial carcinoma cells

Objectives To study extracellular signal-regulated kinase (ERK) activation in the endometrial carcinoma cell line Ishikawa with stimulation by 17-β-estradiol, and to elucidate the role of phosphatase and tensin homologue (PTEN) and estrogen receptor (ER) subtype on the activation of ERKs. Methods Western blot was used to examine the expression of PTEN and PTEN (G129E) in Ishikawa cells after stable transfection as well as ERK activation in Ishikawa-EGFP, Ishikawa- PTEN and Ishikawa- PTEN (G129E) stimulated with various doses of 17-β-estradiol for different lengths of time. Western blot was also used for examining the expression of ERα and ERβ in NIH3T3 fibroblasts after transient transfection of pCXN2hERα and pCXN2hERβ. Then, ERK activation was examined after stimulation with 17-β-estradiol. Results 17-β-estradiol activated ERK cascades (mainly ERK2) in Ishikawa cells. The activation of ERK increased gradually as concentration of 17-β-estradiol also increased. The maximal activation of ERK2 took place 5 min after stimulation with 17-β-estradiol. The activation of ERK2 was inhibited markedly by PTEN, but not by PTEN (G129E). 17-β-estradiol activated ERK cascades in NIH3T3 fibroblasts after transient transfection of pCXN2hERα. Conclusions 17-β-estradiol activate ERK cascades in Ishikawa cells by integrating with ERα. Lipid phosphatase PTEN has an inhibitory role on the activation of ERK stimulated by 17-β-estradiol in Ishikawa cells.     

宫颈癌和子宫内膜癌组织中LIV-1基因mRNA的表达及意义

目的 探讨雌激素相关基因LIV-1 mRNA在宫颈癌和子宫内膜癌组织中的表达及其意义.方法 采用逆转录PCR方法检测49例宫颈癌、11例正常宫颈组织、24例子宫内膜癌和5例正常子宫内膜中LIV-1基因的mRNA水平,并分析其与各临床病理指标的相关性.结果 LIV-1 mRNA在正常宫颈组织、宫颈原位癌和宫颈浸润癌中的表达水平分别为0.20±0.16、0.31±0.13和0.40±0.15,差别具有统计学意义(方差分析P=0.000);但LIV-1 mRNA水平在不同FIGO分期、病理分级、浸润深度和淋巴结转移之间无显著变化(P均＞0.05).子宫内膜癌和正常子宫内膜LIV-1 mRNA水平的差异无统计学意义(分别为0.62±0.22和0.65±0.18,P＞0.05).结论 LIV-1基因的表达上调具有组织特异性,其可能参与了宫颈癌的发生发展,而与子宫内膜癌的进展无关.     

基质细胞衍生因子-1通过促进C-kit表达提高小鼠心肌干细胞增殖和迁移能力的研究

目的：探讨基质细胞衍生因子-1（ SDF-1）提高小鼠心肌干细胞（ CSCs ）增殖和迁移能力的机制。方法：从小鼠心肌中分离、培养出CSCs ,并用免疫磁珠法筛选出c-kit （＋） CSCs ,用流式细胞仪检测CSCs表面标志：干细胞因子受体c-kit、干细胞抗原Sca-1。用SDF-1及SDF-1特异性拮抗剂AMD3100干预c-kit（＋） CSCs,qPCR及Western blotting检测c-kit的mRNA和蛋白表达,用CCK-8试剂盒及transwell趋化实验检测细胞增殖和迁移能力。结果：分离、培养出的细胞经免疫磁珠筛选后,流式细胞仪检测c-kit和Sca-1表达均大于80％。 SDF-1干预后, qPCR和Western blotting 结果显示c-kit mRNA 和蛋白表达均增高, CCK-8及transwell趋化实验结果显示SDF-1干预后细胞的增殖及迁移能力明显提高,并且可以被AMD3100拮抗。结论：SDF-1通过促进c-kit表达提高c-kit（＋） CSCs的增殖及迁移能力。     

PTEN及TGF-β1在子宫内膜癌中的表达及意义

目的探讨PTEN和TGF-β1在不同子宫内膜组织中的表达,分析其在子宫内膜癌发病中的意义。方法选择怀化市第一人民医院1995￣2005年间的子宫内膜标本90例,其中子宫内膜癌47例、子宫内膜增生过长24例、正常子宫内膜19例,采用免疫组织化学SP法测定PTEN及TGF-β1在子宫内膜中的表达,所有数据输入SPSS11.0统计软件,采用χ2检验行统计分析。结果PTEN在正常子宫内膜、子宫内膜增生过长和子宫内膜癌中的表达缺失率分别为10.53%、54.17%和70.21%,子宫内膜癌组及子宫内膜增生过长组显著高于正常子宫内膜组(P<0.005)。TGF-β1蛋白的阳性表达率在前述三组中分别为94.74%、70.83%和68.09%,三组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。PTEN蛋白表达缺失率与细胞分化程度无关(P>0.05),而TGF-β1蛋白的阳性表达率在高分化组明显高于中低分化组(P<0.05)。PTEN蛋白表达缺失组,TGF-β1阳性率为72.73%;PTEN蛋白表达阳性组,TGF-β1阳性率为57.14%,两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论抑癌基因PTEN的表达缺失与子宫内膜癌的发病有关;细胞分化程度越高,TGF-β1蛋白阳性表达率越高,与PTEN蛋白表达缺失率无关。     

WT1在子宫内膜腺癌中的表达及其临床意义

目的：探讨Wilms肿瘤基因（WT1）在子宫内膜腺癌组织、子宫内膜不典型增生组织以及正常内膜组织中的蛋白和基因表达水平及其临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR及2-ΔΔCt法定量分析WT1 m RNA的相对表达量,应用蛋白印迹（Western blot）法检测子宫内膜组织中WT1蛋白的表达。结果：WT1在子宫内膜腺癌组织中的基因和蛋白表达均明显高于子宫内膜不典型组织和正常内膜组织（均P〈0.01）;WT1 m RNA与子宫内膜腺癌患者年龄、绝经情况、临床分期、淋巴结浸润情况、雌激素受体（ER）和体质量指数（BMI）无显著相关性,与病理分级、肌层浸润情况和孕激素受体（PR）相关（P〈0.05）;WT1蛋白的表达与患者年龄、绝经情况、临床分期、肌层浸润、ER、PR和BMI无显著相关性,与病理分级、淋巴结转移情况相关（P〈0.05）。结论：子宫内膜腺癌中存在WT1 m RNA和蛋白表达水平上调,可能与子宫内膜腺癌的发生和进展有关。     

胃肠道间质瘤中PI3K、Akt及PTEN的表达及意义

目的 通过对胃肠道间质瘤(GIST)中PI3K、Akt和PTEN的蛋白表达变化的检测,探讨其表达与GIST临床病理特征及预后的相关性,并探讨它们间的相互关系.方法 选择临床病理资料完整、随访结果确切的中国医科大学附属盛京医院1990年～2007年2月手术切除、病理证实的GIST新鲜组织标本124例.应用Western blitting检测PI3K、Akt及PTEN在GIST及对照组的表达.结果 在124例GIST中,随NIH分级PI3K和Akt表达增强,PTEN下调,但Akt蛋白在GIST中的表达水平明显增高.PI3K、Akt蛋白阳性表达之间呈显著正相关(r =0.292,P=0.031);PI3K与PTEN蛋白阳性表达之间呈显著负相关(r=-0.412,P=0.036);PTEN与Akt蛋白阳性表达之间呈显著负相关(r=-0.386,P=0.024).结论 在GIST中,随NIH分级PI3K、AKt表达上调,而抑癌基因PTEN的表达下调,PI3K/Akt与PTEN在GIST的发生发展中可能互相拮抗共同作用.     

WT1在子宫内膜腺癌中的表达及其临床意义#br#

目的：探讨Wilms肿瘤基因（WT1）在子宫内膜腺癌组织、子宫内膜不典型增生组织以及正常内膜组织中的蛋白和基因表达水平及其临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR及2-ΔΔCt法定量分析WT1 mRNA的相对表达量,应用蛋白印迹（Western blot）法检测子宫内膜组织中WT1蛋白的表达。结果：WT1在子宫内膜腺癌组织中的基因和蛋白表达均明显高于子宫内膜不典型组织和正常内膜组织（均P＜0.01）;WT1 mRNA与子宫内膜腺癌患者年龄、绝经情况、临床分期、淋巴结浸润情况、雌激素受体（ER）和体质量指数（BMI）无显著相关性,与病理分级、肌层浸润情况和孕激素受体（PR）相关（P＜0.05）;WT1蛋白的表达与患者年龄、绝经情况、临床分期、肌层浸润、ER、PR和BMI无显著相关性,与病理分级、淋巴结转移情况相关（P＜0.05）。结论：子宫内膜腺癌中存在WT1 mRNA和蛋白表达水平上调,可能与子宫内膜腺癌的发生和进展有关。     

miR-135b通过靶向FOXO1促进子宫内膜癌细胞的增殖

目的探讨miR-135b在子宫内膜癌中的表达及对子宫内膜癌细胞增殖的作用的机制。方法运用RT-PCR的方法检测22 对子宫内膜癌组织及相应的癌旁组织中的miR-135b 和FOXO1 的表达;运用RT-PCR 的方法检测JEC、Ishikawa、HEC-1-B、 RL-952这4种子宫内膜癌细胞株中miR-135b和FOXO1的表达。分别转染miR-135b的模拟物抑制物于子宫内膜癌细胞株,通 过RT-PCR检测转染的效果,通过MTT增殖试验检测对子宫内膜癌细胞增殖的影响。通过RT-PCR的方法检测FOXO1 mRNA 的变化,Western blotting 检测在FOXO1 蛋白的变化。结果miR-135b 在子宫内膜癌组织中较对应的癌旁组织表达增高（P< 0.05）, FOXO1在子宫内膜癌组织中较对应的癌旁组织表达降低（P<0.05）。荧光定量PCR显示子宫内膜癌细胞中miR-135b与 FOXO1表达趋势成负相关。miR-135b能促进子宫内膜癌细胞增殖（P<0.05）。上调miR-135b能够降低FOXO1 mRNA和蛋白 的表达（P<0.05）,下调miR-135b能够提高FOXO1 mRNA和蛋白的表达（P<0.05）。结论miR-135b在子宫内膜癌的发生发展 中发挥重要的作用,其部分分子机制可能是通过调控靶基因FOXO1而发挥作用。