E—cad和VEGF在妊娠滋养细胞疾病中的表达及意义

目的观察E—cad和VEGF在妊娠滋养细胞疾病中的表达变化及意义,为妊娠滋养细胞疾病早期诊断、预后判断提供理论依据。方法收集滋养细胞疾病标本50例,其中葡萄胎10例（均为完全性葡萄胎）,侵蚀性葡萄胎20例,绒毛膜癌20例,所有病例均经病理确诊。正常早孕绒毛标本10例为对照组。应用免疫组织化学技术检测E-cad和VEGF在早孕绒毛、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌组织中的表达情况。结果E—cad在正常早孕绒毛、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌中的表达逐渐降低,分别为3．521,3．1045,0．9655,0．7682,各组差异有统计学意义（P〈0．05）;VEGF在正常早孕绒毛、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌中的表达逐渐升高,分别为0．4219,0．7521,0．9611,1.1420,各组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论①E-cad在滋养细胞肿瘤和葡萄胎中的表达均低于正常绒毛组织,E-cad表达减弱与GTT恶性进展有关,对于良、恶性葡萄胎鉴别有重要意义。②E—cad和VEGF的表达变化,使滋养细胞粘附异常,侵蚀性增强,是滋养细胞疾病发生的重要途径之一。     

妊娠滋养细胞疾病组织中端粒酶逆转录酶表达的研究

目的探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)在妊娠滋养细胞疾病中的表达及其临床意义。方法采用兔抗人端粒酶逆转录酶抗体,利用免疫组织化学方法检测29例妊娠滋养细胞肿瘤、18例葡萄胎和20例正常早孕绒毛组织中hTERT的表达,结合Leica Qwin图像分析系统对hTERT阳性细胞进行灰度分析。结果hTERT表达定位于细胞质。hTERT阳性细胞平均灰度值在妊娠滋养细胞肿瘤、葡萄胎和正常早孕绒毛组织中分别为123.31±11.93、99.00±11.21和102.55±16.35。hTERT在妊娠滋养细胞肿瘤中的表达明显高于葡萄胎和早孕绒毛组织,差异有显著性(P<0.01)。结论端粒酶的活化在妊娠滋养细胞肿瘤形成中可能起重要作用,端粒酶活性的检测可能是预测葡萄胎预后的重要指标。     

PCNA在妊娠滋养细胞肿瘤中的表达与相关性研究

目的：通过检测PCNA在3种妊娠滋养细胞疾病和正常绒毛中的表达找出规律，并观察良性葡萄胎可疑恶变化疗后对PCNA表达值的影响，从而找出预测葡萄胎恶变的阳性指标，方法：采用免疫组化SP法检测正常早孕绒毛（人流术）20例，葡萄胎40例，侵蚀性葡萄胎20例，绒毛膜癌20例中PCNA的表达，并采用等级资料的秩和检验法进行统计。结果：绒癌，侵蚀性葡萄胎中PCNA阳性细胞数均高于正常绒毛或葡萄胎（P＜0．01），绒癌中PCNA阳性细胞数高于侵蚀性葡萄胎（P＜0．01），结论：PCNA在滋养细胞疾病中的表达阳性率与滋养细胞疾病的增生程度和恶性程度呈正相关关系。PCNA做为预测葡萄胎恶变，及恶变程度和预后的手段是客观，可靠，易行的。     

基质金属蛋白酶及其抑制物在妊娠滋养细胞疾病中的表达分析

目的探讨基质金属蛋白酶（MMP）及其抑制物（TIMP）在妊娠滋养细胞疾病中的表达水平与其侵袭程度的关系。方法采用免疫组织化学PV-6000法测定49例葡萄胎（其中8例发生恶变，为葡萄胎恶变组；另外41例为葡萄胎未恶变组）、6例侵蚀性葡萄胎（侵蚀性葡萄胎组）、2例绒毛膜癌（绒毛膜癌组）和18例正常早孕绒毛组织（正常绒毛组）的MMP-7、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达及分布情况。结果MMP-7、MMP-9、TIMP-2、MMP-9／TIMP-1值在绒毛膜癌、侵蚀性葡萄胎及葡萄胎恶变组中的表达分别高于正常绒毛和葡萄胎未恶变组（F=10．950，7．760，7．304，3．442；P均〈0．05）；MMP-7、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达在正常绒毛和葡萄胎未恶变组之间差异均无统计学意口．结论MMP和TIMP表达水平的高低与妊娠滋养细胞疾病的侵袭程度有关。     

Survivin mRNA在妊娠滋养细胞疾病中的表达及其意义

目的 探讨Survivin mRNA在妊娠滋养细胞肿疾病生发展中的作用。方法 应用原位杂交技术检测85例妊娠滋养细胞疾病中凋亡抑制蛋白Survivin mRNA的表达。结果 绒癌组的平均光密度（OD）值显著高于正常早期绒毛组织组、完全性葡萄胎组及侵袭性葡萄胎组。侵袭性葡萄胎组的OD值显著高于正常早期绒毛组织组及完全性葡萄胎。完全性葡萄胎组与正常早期绒毛组织组相比差异无显著性，随分化程度的逐渐降低OD值升高。结论 Survivin mRNA在绒癌及侵袭性葡萄胎组中过度表达。推测Survivin参与妊娠滋养细胞疾病的发生、发展以及与妊娠滋养细胞疾病的预后不良、复发密切相关。是一个具有潜在价值的妊娠滋养细胞疾病标志物。     

滋养细胞肿瘤P53基因蛋白的检测

本文通过免疫组织化学技术对３８例滋养细胞肿瘤组织Ｐ５３基因蛋白进行了检测，试图探讨Ｐ５３基因与滋养细胞肿瘤的关系。结果３８例滋养细胞肿瘤中（葡萄胎１０例、恶性葡萄胎１０例、绒癌１８例），恶葡阳性表达２０％（２／１０），绒癌阳性表达２２．２％（４／１８），有３例为高表达，１０例良性葡萄胎均为阴性。结果提示：Ｐ５３基因与滋养细胞肿瘤的生物学行为有密切关系。随着临床的进展，高表达增加。Ｐ５３的检测可望成     

NDPKnm23基因在滋养细胞肿瘤中的表达及其意义

目的：探讨ｎｍ２３基因表达产物（ＮＤＰＫ）在滋养细胞中的表达及其意义。方法：采用免疫组织化学方法,检测经病理证实的正常绒毛（２５例）,葡萄胎（３０例）,侵蚀性葡萄胎（２５例）,绒毛膜癌（２６例）组织中ＮＤＰＫ／ｎｍ２３的表达状况。结果：（１）５１例滋养细胞肿瘤中ＮＤＰＫ／ｎｍ２３的阳性表达率为１５．７％,远低于正常绒毛组织７６．０％,差异有高度显著性。（２）葡萄胎,侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌中ＮＤＰＫ     

NDPK/nm23基因在滋养细胞肿瘤中的表达及其意义

目的：探讨ｎｍ２３基因表达产物（ＮＤＰＫ）在滋养细胞中的表达及其意义。方法：采用免疫组织化学方法,检测经病理证实的正常绒毛（２５例）、葡萄胎（３０例）、侵蚀性葡萄胎（２５例）、绒毛膜癌（２６例）组织中ＮＤＰＫ／ｎｍ２３的表达状况。结果：①５１例滋养细胞肿瘤中ＮＤＰＫ／ｎｍ２３的阳性表达率为１５．７％（８／１５）,远低于正常绒毛组织７６．０％（１９／２５）,差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。②葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌中ＮＤＰＫ／ｎｍ２３的阳性表达率分别为６６．７％、２８．０％、３．９％,差异有显著性（Ｐ＜００５）。③伴有转移的１４例滋养细胞肿瘤中,无１例ＮＤＰＫ／ｎｍ２３阳性表达。④ＮＤＰＫ／ｎｍ２３在葡萄胎中阳性表达率稍低于正常绒毛对照组,差异无显著性（Ｐ＞００５）。结论：ＮＤＰＫ／ｎｍ２３的低表达或不表达与滋养细胞肿瘤的发生、转移、恶性程度及预后密切相关。     

妊娠滋养细胞疾病P16和P53蛋白表达及意义

目的 探讨P16、P53基因产物在正常绒毛细胞，葡萄胎，恶性葡萄胎（恶葡），绒毛膜上皮癌（绒癌）中的表达与恶性程度及预后的关系。方法 采用SP免疫组织化学技术对正常绒毛组织，葡萄胎，恶葡，绒癌组织中肿瘤抑制基因P16、P53蛋白表达进行检测。结果 正常绒毛组织，葡萄胎，恶葡，绒癌组织中P16蛋白阳性率分别为100％（10／10），75％（30／40），41．7％（5／12），22．2％（2／9）呈递减趋势。正常绒毛组织与葡萄胎之间以及葡萄胎，恶葡，绒癌之间差异有显著性（P＜0．05）；正常绒毛细胞P53蛋白不表达，葡萄胎表达呈弱阳性30％（12／40），恶葡为83．3％（10／20）,绒癌为88．9％（8／9），显著高于正常绒毛组织和葡萄胎（P＜0．05）。正常绒毛，葡萄胎，恶葡和绒癌中P16和P53蛋白表达之间未见明显相关。结论 恶葡及绒癌组织中P16蛋白低表达和P53蛋白过表达均有促进肿瘤细胞增殖作用，与滋养叶细胞肿瘤恶性程度及预后有关。     

应用PCR-SSCP技术检测妊娠滋养细胞肿瘤p53基因突变

应用聚合酶链式反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）溴乙锭染色技术检测２０例葡萄胎及４例绒毛膜癌组织石腊标本ｐ５３基因第５和８外显子基因突变。结果显示：正常绒毛０／９，葡萄胎６／２０（３０％），绒毛膜癌３／４发生ｐ５３基因突变。提示ｐ５３基因突变是滋养细胞肿瘤形成和演进过程中的一个重要事件，葡萄胎应属于良性滋养细胞肿瘤。     

基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其组织抑制剂TIMP-1、TIMP-2与滋养细胞疾病关系的研究

目的通过研究基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其组织抑制剂TIMP—1、TIMP-2在不同类型滋养细胞疾病中的表达,探讨基质金属蛋白酶系统与滋养细胞及滋养细胞疾病的关系。方法应用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学方法对20例正常早孕（〈12周）绒毛组织、15例部分性葡萄胎、55例完全性葡萄胎、15例侵蚀性葡萄胎、8例绒毛膜癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2进行检测。结果（1）MMP-2在不同类型滋养细胞中的表达差异无统计学意义（x^2：0．926,P=0．921）;（2）MMP-9在正常早孕绒毛组织、部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌中均100％表达,但随着滋养细胞恶性程度的增加其表达显著升高,差异有统计学意义（x^2=26．421,P=0．0001）;（3）TIMP—1在正常早孕绒毛组织均有表达,而在部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌中分别有6．67％、5．45％、6．67％、12．50％不表达,且随着肿瘤恶性程度的升高,其染色程度和染色细胞百分率减少,差异有统计学意义（x^2=9．575,P=0．048）;（4）TIMP-2在各组织中的表达差异无统计学意义（x^2=1．462,P=0．833）。结论随着滋养细胞疾病恶性程度的增加,MMP-9表达上调而TIMP-1表达下调。MMP-2、TIMP-2与滋养细胞浸润无密切关系。     

表皮生长因子受体表达与预测葡萄胎恶变相关性研究

目的研究表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）在妊娠滋养细胞疾病中的表达,探讨EGFR对预测葡萄胎恶变的价值。方法采用免疫组化方法,检测石蜡包埋的105例妊娠滋养细胞肿瘤组织和20例正常早孕绒毛组织EGFR蛋白表达水平。结果在合体滋养层,妊娠滋养细胞肿瘤组织和正常早孕绒毛组织均强表达EGFR蛋白;在细胞滋养层,正常早孕绒毛、非恶变组葡萄胎的EGFR蛋白表达高于恶变组葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌的表达（P〈0.05,P〈0.05,P〈0.05）;而恶变组的EGFR蛋白表达强于侵蚀性葡萄胎和绒癌的表达（P〈0.05,P〈0.05）;EGFR蛋白表达在侵蚀性葡萄胎和绒癌之间差异无显著性（P〉0.05）。结论EGFR表达降低在妊娠滋养细胞疾病发生发展过程中起重要作用,并有可能成为预测葡萄胎恶变的一项新的指标。     

妊娠滋养细胞疾病中EMT相关蛋白CK-18、波形蛋白的表达及意义

目的 检测上皮细胞间质细胞转化（EMT）相关蛋白--细胞角蛋白18（CK-18）和波形蛋白（vimentin）在正常早孕绒毛、葡萄胎及妊娠滋养细胞肿瘤中的表达及与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组化法（SP法）检测39例正常早孕绒毛组织、33例葡萄胎组织和32例妊娠滋养细胞肿瘤组织（侵袭性葡萄胎27例、绒毛膜癌5例）中CK-18、vimentin的定位及表达情况。结果 CK-18在各种类型滋养细胞中呈强阳性表达,正常绒毛组的CK-18表达水平高于葡萄胎组及妊娠滋养细胞肿瘤组,差异有统计学意义（P<0.01）,葡萄胎组CK-18表达高于滋养细胞肿瘤组,差异有统计学意义（P<0.01）;vimentin于各组滋养细胞中呈弱阳性表达,各组间的表达差异无统计学意义（P>0.05）。在葡萄胎滋养细胞轻度增生组,CK-18蛋白的相对表达量高于滋养细胞中或重度增生组（P<0.01）。在滋养细胞肿瘤解剖学Ⅰ期组CK-18蛋白的相对表达量高于解剖学Ⅱ期及以上组（P<0.001）。结论 伴随着滋养细胞恶性度的升高CK-18的表达逐渐降低,提示EMT可能与滋养细胞的恶性转化有相关性。     

表皮生长因子受体表达与葡萄胎恶变相关性分析

目的研究表皮生长因子受体（EGFR）在妊娠滋养细胞疾病的表达,探讨EGFR对预测葡萄胎恶变的价值. 方法采用免疫组化方法,检测石蜡包埋的105例妊娠滋养细胞疾病和20例正常早孕绒毛组织EGFR蛋白表达水平. 结果在合体滋养层中,妊娠滋养细胞疾病和正常早孕绒毛组织均强烈表达EGFR蛋白;在细胞滋养层,正常早孕绒毛、非恶变组葡萄胎的EGFR蛋白表达显著高于恶变组葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌（P＜0.01, P＜0.01, P＜0.01）,而恶变组的EGFR蛋白表达显著高于侵蚀性葡萄胎和绒癌（P＜0.05, P＜0.05）,EGFR蛋白表达在侵蚀性葡萄胎和绒癌之间差异无显著性（P＞0.05）. 结论 EGFR表达降低在妊娠滋养细胞疾病发生发展过程中起重要作用并有可能成为预测葡萄胎恶变的一项新的指标.     

p16,CDK4和PCNA蛋白在滋养细胞肿瘤中的表达

用ＳＰ法检测滋养细胞肿瘤，葡萄胎和正常绒毛中ｐ１６蛋白，ＣＤＫ４及ＰＣＮＡ的表达，发现：（１）ｐ１６蛋白在肿瘤表达低于绒毛中（Ｐ〈０．０５），ｐ１６蛋白阳性标本的ＰＣＮＡ表达率低于ｐ１６阴性者（Ｐ〈０．０５）。（２）ＣＤＫ４表达在滋养细胞肿瘤，葡萄胎和绒毛三者间及与ＰＣＮＡ表达间无差异（Ｐ〉０．０５）。（３）ｐ１６阳性肿瘤患者３年存活率较高，提示ｐ１６基因突变可能是滋养细胞癌变的重要原因，检测ｐ１     

Rb蛋白在滋养细胞疾病中的表达及其临床意义

目的探讨Rb基因蛋白在妊娠滋养细胞疾病时的表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法。检测石蜡包埋的161例妊娠滋养细胞疾病和20例正常早孕绒毛组织Rb蛋白表达水平。结果Rb在部分滋养细胞和合体滋养细胞中表达。正常早孕绒毛组的Rb表达与非恶变葡萄胎组差异无显著性（P〉0．05）,但显著弱于恶变葡萄胎组（P〈0．01）。非恶变葡萄胎组Rb表达显著弱于恶变葡萄胎组（P〈0．05）。侵蚀性葡萄胎、绒癌Rb表达显著强于葡萄胎（P〈0．01,P〈0．01）。但侵蚀性葡萄胎与绒癌的Rb表达差异无显著性（P〉0．05）。滋养细胞重度增生者Rb表达显著强于滋养细胞轻度增生者（P〈0．05）。葡萄胎恶变与子宫大小、卵巢黄素化囊肿密切相关。结论Rb表达增强是导致滋养细胞恶变因素之一,Rb表达增强在葡萄胎恶变过程中可能有重要的生物学意义。     

组织蛋白酶B和L在早期妊娠绒毛及蜕膜中的表达

目的 观察组织蛋白酶B（cathepsin B，CB）和L（cathepsin L，CL）在人早期妊娠绒毛及蜕膜中的表达．探讨它们在胚胎着床及发育过程中的作用。方法 研究组包括：正常早期妊娠行人工流产者30例、早期自然流产者25例、正常分泌期子宫内膜lO例和葡萄胎15例。应用免疫组织化学法检测CB和CL的表达。结果 CB、CL主要阳性表达于正常早期妊娠滋养层细胞和蜕膜细胞：CB在正常分泌期内膜．正常早期妊娠蜕膜、自然流产蜕膜中的阳性率表达分别为10％（1／10）、83.3％（25／30）、32．0％（8／25）；CL则分别为0、63.3％（19／30）、32．0％（8／25）；CB和CL在3组间的表达有显著性差异（P〈0．05）。CB在早期妊娠绒毛、自然流产绒毛、葡萄胎组织中表达强阳性率分别为10．0％（3／30）、0.66．7％（10／15）；CL则分别为26．7％（8／30）、4．0％（1／25）、80．0％（12／15）。CB和CL在3组间的表达有显著性差异（P〈0．05）。结论 CB和CL在正常和异常妊娠蜕膜和绒毛中的表达差异提示它们胚胎着床过程中可能起着很重要的作用。     

应用PCR—SSCP技术检测妊娠滋养细胞肿瘤p53基因突变

应用聚合酶链式反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）溴乙锭染色技术检测２０例葡萄胎及４例绒毛膜癌组织石腊标本Ｐ５３基因经５和８外显子基因突变。结果显示：正常绒毛０／０，葡萄胎６－２０（３０％），绒毛膜癌３／４发生Ｐ５３基因突变。提示Ｐ５３基因突变是滋养细胞肿瘤形成和演进过程听一个重要事件，葡萄胎应属于生滋养细胞肿瘤 。     

表皮生长因子受体在滋养细胞肿瘤组织中的表达及临床意义

目的：探讨表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）在滋养细胞肿瘤组织中的表达情况及临床意义。方法：采用免疫组化ＳＰ法检测１０例正常早孕绒毛、２０例葡萄胎、１０例侵蚀性葡萄胎及８例绒毛膜癌组织ＥＧＦＲ的蛋白表达量,利用单因素确切概率法及多因素Ｌｏｇｉｓｔｉｃ逐步回归法并结合临床资料进行结果分析。结果：ＥＧＦＲ在正常早孕绒毛及滋养细胞肿瘤组织均有表达。在正常早孕绒毛及未恶变的葡萄胎组织表达量明显高于发生恶变的葡萄胎及恶性滋养细胞肿瘤组织（Ｐ＜０．０５）。统计分析结果表明恶性糍养细胞肿瘤临床期别与ＥＧＦＲ蛋白表达水平关系最密切（Ｐ＝０．０２６及ＯＲ＝９．８７４）。结论：ＥＧＦＲ蛋白表达量可作为葡萄胎转归、恶性滋养细胞肿瘤临床分期及预后的一项辅助判断指标。     

p16,CDK_4和PCNA蛋白在滋养细胞肿瘤中的表达

用ＳＰ法检测滋养细胞肿瘤、葡萄胎和正常绒毛中ｐ１６蛋白、ＣＤＫ４及ＰＣＮＡ的表达，发现：①ｐ１６蛋白在肿瘤中表达低于绒毛中（Ｐ＜０．０５），ｐ１６蛋白阳性标本的ＰＣＮＡ表达率低于ｐ１６阴性者（Ｐ＜０．０５）。②ＣＤＫ４表达在滋养细胞肿瘤、葡萄胎和绒毛三者间及与ＰＣＮＡ表达间无差异（Ｐ＞０．０５）。③ｐ１６阳性肿瘤患者３年存活率较高。提示ｐ１６基因突变可能是滋养细胞癌变的重要原因。检测ｐ１６蛋白表达有助于估计患者预后。