病毒性肝炎的预防

病毒性肝炎是由多种病毒引起的肝脏疾患,临床上多见的为甲型、乙型和非甲非乙型肝炎三种,我国以甲型、乙型为多,甲型肝炎发病率最高。甲型肝炎病毒(HAV)属肠道微小病毒科RNA病毒,人及非人灵长类动物如黑猩猩、狨猴可感染HAV,在我国证明短尾猴(红西猴)和恒河猴也易感,HAV可在体     

一株感染普通棉耳狨猴的呼吸道病毒的 RT-PCR鉴定

目的：鉴定一株在普通棉耳狨猴（Callithrix Jacchus)群体中引起急性呼吸道感染并引起大批狨猴死亡的病毒。方法：根据几种可能的呼吸道病毒的保守基因序列设计合成引物，用RT－PCR方法对分离到的病毒进行鉴定。结果：唯有仙台病毒的引物能够扩增出PCR产物，且与预期扩增片段大小一致。结论：本次狨猴群体中流行的病原体是一株仙台病毒（sendai virus)。     

腺相关病毒介导的狨猴P53基因沉默

目的在细胞和整体动物水平,利用RNA干扰技术下调绒猴p53基因表达。方法对狨猴p53基因做生物信息学分析,针对靶序列设计shRNA干扰序列,构建在腺相关病毒载体上,转染非洲绿猴肾细胞(cos-7),在细胞水平用荧光定量PCR检测p53mRNA抑制效果,以Western blot方法检测p53蛋白水平表达变化;优选shRNA干扰序列,包装含shRNA干扰序列的8型腺相关病毒,静脉注射感染狨猴;手术取少量肝脏组织,用Western blot和免疫组化方法检测p53蛋白水平的变化。结果细胞水平研究发现2个有效RNA干扰靶点,mRNA干扰效率分别为(82.7±8.1)%和(80.7±7.5)%(P0.05);蛋白表达下调(77.3±11.5)%和(73.7±10.7)%(P0.05);2只绒猴感染病毒后,经活体荧光成像分析可见病毒在肝脏、睾丸、颈部等位置分布,狨猴肝脏P53蛋白经Western blot、免疫组化分析未见明显变化。结论本研究在细胞水平实现绒猴P53基因表达下调,但整体动物水平狨猴肝脏P53蛋白表达未发现明显变化;今后需在感染方式等方面做进一步优化。     

腺相关病毒介导的狨猴P53基因沉默研究

目的 在细胞和整体动物水平,利用RNA干扰技术下调绒猴p53基因表达。 方法 对狨猴p53基因做生物信息学分析,针对靶序列设计shRNA干扰序列,构建在腺相关病毒载体上,转染非洲绿猴肾细胞(cos-7),在细胞水平用荧光定量PCR检测p53mRNA抑制效果,以Western blot方法检测p53蛋白水平表达变化;优选shRNA干扰序列,包装含shRNA干扰序列的8型腺相关病毒,静脉注射感染狨猴;手术取少量肝脏组织,用Western blot和免疫组化方法检测p53蛋白水平的变化。结果 细胞水平研究发现2个有效RNA干扰靶点,mRNA干扰效率分别为(82.7?.1)%和(80.7?.5)%(P<0.05);蛋白表达下调(77.3?1.5)%和(73.7?0.7)%（P<0.05）;2只绒猴感染病毒后,经活体荧光成像分析可见病毒在肝脏、睾丸、颈部等位置分布,狨猴肝脏P53蛋白经Western blot、免疫组化分析未见明显变化。结论 本研究在细胞水平实现绒猴P53基因表达下调,但整体动物水平狨猴肝脏P53蛋白表达未发现明显变化;今后需在感染方式等方面做进一步优化。     

普通棉耳狨猴仙台病毒感染的报道

仙台病毒在分类上属副粘病毒科、副粘病毒属、副流感病毒 1型。仙台病毒过去的名称包括新生儿肺炎病毒 ,日本血凝病毒和Ｄ型流感病毒等。在国内普通实验小鼠群中仙台病毒感染非常普遍 ,而未见仙台病毒感染普通狨猴的报道。 1999年夏季 ,天津某高校一个狨猴实验室中暴发仙台病毒感染 ,动物发病率达 80 % ,病死率约 10 %。流行大约持续了一个月。狨猴发病初始均表现为精神不振 ,嗜睡 ,惧冷 ,食欲下降。继续发展表现为鼻腔出现分泌物 ,呼吸加快 ,发热 ,气喘 ,呼吸困难 ,多数病狨从发病至死亡在 3- 15ｄ。解剖发现病死狨猴肺叶呈杨梅色 ,切开时…     

狨猴研究Ⅵ.狨猴肝脏组织的形态学观察

引言我中心于1984～1986年先后从日本和秘鲁引进两批不同品种(Callithrix jacchus和Saguinus mystax)狨猴。为了开展对甲肝病毒疫苗的研究,首次从秘鲁引进了对甲型肝炎病毒具有易感性的白髭狨猴。为了实验对照,在疫苗感染前将全部狨猴进行了肝脏穿刺。经组织病理学检查,白髭狨猴肝脏的组织形态学特点与人类肝组织相似。被检的部分标本中,肝细胞有小灶性退行性变或坏死,肝窦中常见白细胞,枯否氏细胞增生。在半数标本中,可见微丝蚴,肝细胞胞浆内可见淡黄色的色素颗粒,这种轻度非特异性病变,可能与寄生虫感染有关。鉴于正常狨猴的肝穿组织形态学国内尚无报道,谨为开展这方面工作提供一些基础资料。     

狨猴笼养情况的初步观察

狨猴是一种珍贵实验动物,具有体型小、性情温顺、实验用途广等特点,特别是在甲型肝炎的研究中作为敏感的动物模型,得到了国际承认。我国已开始引进和应用。我们对本单位陆引进的4种狨猴:髭狨(Saguinusmystax mystax)、粗足狨(Saguinus oedipus oedipus)、普通狨(Callithrix jacchus jacchus)和棕肩狨(Saguinusfuscicollis illigeri)进行了初步观察与记录。一、环境狨猴属于新大陆猴类,栖息于南美热带雨林。进入实验室后,其对温、湿度的要求仍无明显改变。我们力求模拟自然环境,将温度控制在22～28℃,相对湿度为40～70％,室内用改良型日光谱灯补充自然光照。笼具的设置则根据引进前狨猴的生活习惯,分别     

14例野生狨猴尸检分析

白髭狨猴(S.mystax)是生长于南美亚马逊河流域的一种小型灵长类动物,被认为是甲肝病毒研究的理想模型。我所曾于1986年从美国迈阿密灵长类中心引进一批从秘鲁野外捕获的白髭狨猴。现将14例死亡狨猴的尸检和病理学观察结果作一报道。材料和方法一、动物自然死亡的14只白髭狨猴,雌雄各7只,体重500～700克。运输途中死亡2只,检疫期第1周内死亡2例,其余10例分别于饲养驯化的第4至第12个月内死亡。二、饲养条件分笼饲养,引进初期每天饲喂进口狨猴饲料(Zu/Preem,MARMOSET),以后逐步改用自制的狨猴饲料,其营养成份能够满足狨猴的     

精制甲型肝炎灭活疫苗的狨猴保护实验

目的　检测精制甲型肝炎 (甲肝 )灭活疫苗的保护效果。方法　甲型肝炎病毒 (YN5株 )经Vero细胞培养制成精制甲肝灭活疫苗 ,采用普通狨猴进行疫苗的免疫原性和保护性研究。结果　 7只狨猴均有特异性抗体产生 ,无血清酶活性升高和肝组织学病理改变 ,接种疫苗的狨猴能抵抗甲肝病毒强毒 (Han ZD)株的攻击。但是 ,对照组狨猴均出现血清酶异常升高和肝组织学病理改变。结论　甲肝灭活疫苗 (YN5株 )具有良好的免疫原性和保护效果。     

甲型肝炎病毒实验感染猕猴(摘要)

以往,仅证明狨猴和黑猩猩对人甲型肝炎病毒的感染易感,但我国无此种珍、稀、贵的动物.猕猴来源较易,但迄今未被病毒学和血清学证明对甲型肝炎病毒易感.我们于1979年开始研究我国产的猕猴属中的红面猴(Macaca speciosa)对人甲型肝炎病毒的易感性,结果证明,红面猴对人甲型肝炎病毒的感染是易感的,并     

以普通狨猴作为人类甲型肝炎动物模型的初步研究

本文报道以不同剂量的不同 HAV 毒株经静脉和胃肠道分别接种普通狨(Callthrix jacchus)和白须狨(Saguinus mystax)后,其血清 ALT、AST 和 LDH 活性均升高。对酶活性比接种前增加 X+3 SD 值的6只狨猴作肝活组织检查,见有与急性病毒肝炎相一致的组织病理变化。用免疫电镜法检出狨猴粪便中 HAV 粒子,狨猴接种 HAV 后36天,血清 IgM 类和总抗 HAV 抗体均阳转。上述结果提示,普通狨猴有可能作为研究甲型肝炎的理想动激模型。     

关于猴类血液成份中的元素

关于各种猴类血液成份中的元素,是由放射性的分析方法测定而来的。应用猴的种类有日本猕猴、恒河猴、食蟹猴、普通狨猴、银狨、棉顶狨、狨(犭胥)、鼠猴、夜猴和树鼩十一种。取全血及血清放在0.2～0.3克试验纸上测定,洗净后立刻放入聚乙烯袋内密封起来,然后照射试样。短时间照射(3分钟)来进行非破坏性     

狨猴的研究——(Ⅰ)饲养与管理

前言近年来,随着生物医学科研的迅速发展,狨猴—作为一种小型、价廉,容易饲养和实验操作方便的灵长类实验动物,已受到了极大的关注。据报道,狨猴在病毒研究,恶性肿瘤研究,免疫学研究中是不可缺少的理想实验动物。然而狨猴作为实验动物的历史还比较短,在我国,对狨猴的研究还只刚刚开始,缺乏     

狨猴研究Ⅲ—血液学检查

狨猴是一种适用于肿瘤学和病毒学研究的小型灵长类实验动物,本文主要介绍为配合甲肝病毒试验所进行的血常规和部分肝功能生化测定。材料和方法对4只雄性普通狨猴(CALLITHRIX JACCHUS)共进行3个月的实验,平均每2星期采血一次,时间均在上午,每次每只狨猴的采血量不超过3ml。4只狨猴的年龄在2～3岁,平均体重见表-1所示。测定的项目包括:红细胞、白细胞和血小板计数;白细胞分类计数(WRIGHT’S染色);血红蛋白浓度(沙利氏比色法),红细胞渗透脆性试验;出、凝血时间;谷丙转氨酶(sGPT);谷草转氨酶(sGOT);     

组织培养抗原和粪便抗原检测甲型肝炎IgM抗体的比较

1979年Duermeyer等首先应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测甲型肝炎(下称甲肝)患者血清中特异性IgM抗体,并提出这一方法可用于早期诊断。尔后,国内外许多学者相继报道这方面的工作。但到目前为止,检测甲肝IgM抗体所用的抗原大多是从感染甲肝病毒(HAV)的狨猴肝或患者粪便中提取而得。狨猴肝来源极其困难,价格昂贵,难以推广。患者粪便抗原虽可使用,但阳性     

棉顶狨饲养与繁殖经验

棉顶狨(Saguinus oedipus oedipus)属灵长目狨猴科,产于南美哥伦比亚的西北部。1973年起被列为世界珍稀濒危物种之一。棉顶狨(简称棉狨)具有小型灵长类实验动物之优点,近年来已应用于生物医学领域中的多项研究。因此,开展狨猴的实验室饲养与繁殖研究十分必要。由于棉狨的妊娠期长(平均166d以上),两胎间隔期长(10～12个月),流产、死胎率和婴幼猴死亡率高,因此棉狨的繁殖较其他狨猴(如普通狨猴)困难,特别是笼生棉狨(captiveborn)抚育仔猴,其难度更大。我所于1988年7月从英国引进3对棉狨,计划由此建立一个实验室繁殖群体。3年来,3对棉狨已完全适应本实验室的饲养环境。现将棉狨的饲养管理及繁殖情况报告如下。     

甲型肝炎减毒活疫苗病毒的水平传播

目的 探讨甲型肝炎（甲肝）减毒活疫功接种后的病毒水平传播。方法 在昆明市安宁县2个观察点筛选出丙氨酸转氨酶（ALT）正常、甲肝（HAV）抗体（抗－HAV）阴性的4－7岁儿童199人,按1：1.4比例分接种组（82人）和接触组（117人）进行H2株甲肝减毒活疫苗病毒的水平传播观察;另外,取接种者和接触者HAV检测阳性的粪便悬液上清,分别静脉接种于8普通狨猴（Callithrix jacchus）体内,观察粪便HAV毒力水平。结果 接种组接种后6周抗体阳转率为97.6％（80／82）,接触组9周时抗体阳转率为13.7％（16／117）,两组儿童肝功能均未见异常 种组和接触组的粪便HAV检出率分别为89.5%(34/38)和70.7%(53/75）;以2株接种者粪便HAV和2株接触者粪便HAV感染的8只狨猴,均未检出血清酶升高和肝脏组织病理学改变,抗－HAV和2株接触者粪便HAV感染的8只狨猴,均未检出血清酶升高和肝脏组织病理学改变,抗－HAV阳转时间延迟且效价低。结论 H2株甲肝减毒活安全性及免疫原笥良好,疫苗病毒在人体内增殖活跃,且保持减毒性能稳定,能在人群中造成水平传播,但不会引发甲肝。     

甲型肝炎疫苗研制动态

1979年Provost等用人的甲型肝炎病毒经活体外在一种狨猴的细胞培养物中连续继代培养,已研制成了一种弱毒活毒疫苗(《Proe.Soc.Exp.Biol.Med.》,160:213～221,1979)。用该弱毒株免疫的狨猴或黑猩猩,在用野毒攻击时,都具有良好的保护作用,可免于感染发病。近年已在临床对人体试用,目前尚未完成。据初步判     

普通狨猴部分传染性疾病检疫指标的探讨

目的 对从南非引进普通狨猴和实验室人工繁殖饲养的狨猴进行传染病的检验,通过比较分析,以获得普通狨猴的传染性疾病的检疫指标.方法 对动物分别进行了血浆甲型肝炎病毒检测、肝脏B超检测、结核杆菌皮肤检测、肠道寄生虫检查、粪常规及肠道致病菌检查、皮肤及口腔疱疹病毒检测等.结果 所有待检狨猴均未出现甲肝、结核杆菌、肠道寄生虫致病菌、疱疹病毒的阳性感染.结论 经该传染病检验方法的检测,所有动物均未感染传染性疾病,且方法安全有效,适合作为普通狨猴的传染病初筛方法.     

兔抗狨猴IgG-HRP标记抗体的制备及初步鉴定

目的狨猴血清中纯化IgG抗体,制备兔抗狨猴抗血清,并纯化抗血清中IgG,HRP(辣根过氧化物酶)标记兔抗狨猴IgG。方法 Hi TrapTMProtein G亲和层析纯化狨猴和兔抗狨猴血清IgG,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行纯度鉴定,免疫琼脂双扩散法(double immunodiffusion assay)测定制备的兔抗狨猴抗血清效价,改良"简易过碘酸钠标记法"制备兔抗狨猴IgG-HRP标记抗体,酶联免疫吸附测定法(ELISA)及蛋白免疫印迹法(Western blotting)对兔抗狨猴IgG-HRP标记抗体进行工作浓度测定及特异性鉴定。结果狨猴和兔抗狨猴血清纯化IgG纯度分别大于95%、97%;兔抗狨猴IgG抗血清的效价为1∶64。ELISA和Western blotting鉴定了兔抗狨猴IgG-HRP酶标抗体参考工作浓度为1∶256 000、1∶15 000,特异性明显。结论制备狨猴IgG-HRP标记抗体并初步鉴定,包括ELISA及Western blotting的特异性及使用浓度,为狨猴病原体免疫学检测体系及分子免疫学检测体系储备了资源。