急性白血病五种血浆凝血因子测定及临床意义

目的 探讨急性白血病(AL)血浆凝血因子V、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、X活性(FV：c，FⅦ：c，FⅧ：c，FⅨ：c和FX：c)的变化。方法 采用COAG—MATE—XM型血凝自动分析仪测定36例AL患者(ANLL28例，ALL8例)五种凝血因子活性水平，并与30例正常人作对照。结果 ①AL患者FV：c，FⅦ：c，Ⅷ：c和FX：c大多降低，ANLL较ALL更显著；②组间比较：高危组FⅧ：c、FX：c降低；出血组FV：c、FⅦ：c、FⅧ：c和FX：c降低；缓解组FV：c、FⅦ：c、FⅧ：c和FX：c升高，前三项已恢复正常水平。结论 检测上述凝血因子水平对AL病情和预后判断有一定意义。     

遗传性凝血因子V缺陷症的诊断

目的对遗传性凝血因子V(FV)缺陷症进行诊断。方法通过检测先证者及家系成员的活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、FV促凝活性(FV∶C)和FV抗原(FV∶Ag)等进行临床表型诊断,应用聚合酶链反应(PCR)方法对先证者F5基因的25个外显子及其侧翼序列进行扩增,PCR产物进行直接测序以发现其基因突变,进行家系调查以期发现遗传规律。结果先证者APTT和PT显著延长,FV∶C为3.5%,FV∶Ag为1.47%。F5基因测序发现,先证者F5基因外显子区共有7处与GenBank AY364535序列不同的位点,其中外显子10区的C38591T杂合突变导致产生1个终止密码(R506Term),外显子13区的C47504T纯合变异导致编码氨基酸L1369F替换,该变异被证实为基因多态性。家系分析表明,前者遗传于先证者母亲,后者遗传于其父母双亲。结论通过表型检测、家系调查和基因诊断,明确该先症者为遗传性凝血因子V缺陷症,C38591T杂合突变产生终止密码是导致先证者FV缺陷的原因之一。     

凝血因子Ⅹ研究进展

凝血因子Ⅹ (FⅩ )处于内源性凝血途径和外源性凝血途径的共同通路 ,在凝血过程中发挥着关键作用。近年来 ,通过对遗传性凝血因子Ⅹ缺陷症的FⅩ基因突变的研究 ,对FⅩ的结构与功能的关系有了深入理解。     

复合杂合突变导致的遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系分析

目的:对1个遗传性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺陷症家系进行临床表型及基因突变分析,探讨其分子致病机制.方法:检测先证者及其家系成员(共3代5人)血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)、D-D二聚体(D-D)、凝血因子Ⅻ促凝活性(FⅫ:C)和凝血因子Ⅻ抗原(FⅫ∶Ag)等凝血指标.采...     

遗传性凝血因子V缺陷症的诊断

目的对遗传性凝血因子V（FV）缺陷症进行诊断。方法通过检测先证者及家系成员的活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、FV促凝活性（FV：C）和FV抗原（FV：Ag）等进行临床表型诊断，应用聚合酶链反应（PCR）方法对先证者F5基因的25个外显子及其侧翼序列进行扩增，PCR产物进行直接测序以发现其基因突变，进行家系调查以期发现遗传规律。结果先证者APTT和PT显著延长，FV：C为3．5％，FV：Ag为1．47％。F5基因测序发现，先证者F5基因外显子区共有7处与GenBank AY364535序列不同的位点，其中外显子10区的C38591T杂合突变导致产生1个终止密码（R506Term），外显子13区的C47504T纯合变异导致编码氨基酸L1369F替换，该变异被证实为基因多态性。家系分析表明，前者遗传于先证者母亲，后者遗传于其父母双亲。结论通过表型检测、家系调查和基因诊断，明确该先症者为遗传性凝血因子V缺陷症，C38591T杂合突变产生终止密码是导致先证者FV缺陷的原因之一。     

罕见遗传性出血性疾病诊断与治疗中国专家共识(2021年版)

一、概述在遗传性凝血因子缺乏症中,缺乏凝血因子Ⅷ、Ⅸ的血友病A及血友病B相对常见,与血管性血友病(VWD)构成了95%~97%的遗传性出血性疾病,目前已有独立的血友病及VWD相关中国专家共识/指南[1-2]。本共识所指的罕见遗传性出血性疾病(Rare inherited bleeding disorders,RBD)包括遗传性纤维蛋白原缺乏症(FⅠD)、凝血酶原缺乏症(FⅡD)、凝血因子Ⅴ缺乏症(FⅤD)、凝血因子Ⅴ和Ⅷ联合缺乏症(FⅤ+ⅧD)、凝血因子Ⅶ缺乏症(FⅦD)、凝血因子Ⅹ缺乏症(FⅩD)、凝血因子Ⅺ缺乏症(FⅪD)、凝血因子??缺乏症(F??D)及维生素K依赖性凝血因子缺乏症(VKDFD)。     

遗传性凝血因子V缺乏1例

目的:通过对遗传性凝血因子V(FV)缺乏患者诊疗过程的介绍为临床提供对凝血功能异常患者的诊断思路。方法:对一例APTT明显延长伴出血体征患者进行APTT血浆纠正试验,依据纠正试验结果进行血浆蛋白C(PC)、血管性假血友病因子(vWF)及相关凝血因子活性检测。结果:APTT血浆纠正实验(即刻和37℃2h)均纠正;PC活性为96%,vWF抗原、活性为145.6%、134%,均提示正;凝血因子活性检测提示FV活性为:2.5%,明显降低,其它因子活性无异常。结论:血浆纠正试验为凝血功能异常患者的临床诊断提供价值依据,凝血因子活性检测是诊断因子缺乏直接证据。对于凝血因子V缺乏的患者,一旦出血需要及时止血并补充凝血因子。     

人凝血因子XⅢ的研究进展

人凝血因子XⅢ（coagulation factorXⅢ，FXⅢ）是参与凝血过程的最后一个凝血因子，不仅参与止血过程，而且与组织修复，伤口愈合，炎症，肿瘤等病理过程密切相关，先天性凝血因子XⅢ缺乏症是由于FXⅢ基因缺陷所致，目前已有数十种，FXⅢ蛋白空间结构的阐明对理解FXⅢ功能与结构的关系有很大的帮助，本文对目前FXⅢ研究现状作一简要介绍。     

遗传性凝血因子V缺陷症的实验室诊断

目的　探讨遗传性凝血因子V(FV)缺陷症家系的实验室诊断和分子发病机制。方法　对 1个FⅤ缺陷症家系进行研究。采用活化部分凝血活酶时间 (APTT) ,凝血酶原时间 (PT)及FV促凝活性 (FV :C)和FV抗原 (FV :Ag)测定进行表型诊断 ;用PCR法对先证者FV基因 2 5个外显子及其侧翼序列进行扩增 ,PCR产物纯化后直接测序 ,检测其基因突变。通过cDNA测序分析剪切位点突变引起编码序列的变化。结果　先证者APTT 12 3s ,PT 4 3 4s ,FV :C 1 6 % ,FV :Ag 7 2 %。基因分析发现 ,先证者第 8内含子受点发生AG→GG突变 ;cDNA分析发现 ,该突变导致剪切位点前移 2 4bp ,即在编码序列中 ,于第 8外显子和第 9外显子间插入了 2 4bp ,插入序列未引起读码框架漂移 ,使编码的FV蛋白插入了 8个氨基酸。结论　先证者为I型遗传性FV缺陷症 ,第 8内含子 3′端剪切位点突变 ,引起编码序列 2 4bp插入是导致该例先证者发生FV缺陷症的分子机制。     

血浆部分凝血因子在疾病中的变化及其意义

对血浆凝血因子在与之相关的疾病中的变化及其意义作一综述。血浆FⅧ升高与动、静脉血栓事件存在着密切关系。国内的研究认为，汉族人群中凝血因子VLeiden突变和凝血酶原基因G20210A变异发生率低，可能不是静脉血栓或冠心病的主要遗传性危险因素。FⅦ基因第8外显子的Q等位基因可能是心肌梗死的遗传保护因子。FⅫ：蛋白C(protein C)下降可能降低了纤溶酶原的活性，形成血栓性疾病。FⅫ Leu34对防止脑梗死、心肌梗死的发生是一种保护因素，而对出血性卒中则可能是一种危险因素。肝硬化患者FⅪ、FⅫ、FⅫ、PK、KK及维生素K依赖性凝血因子(FⅡ、FⅦ、FⅨ、FX)均明显降低，FV：C可作为慢性重型肝炎诊断、预后指标及肝衰竭患者进行肝移植术时的主要筛选指标；肝移植术后，凝血因子及凝血功能的检测对于调控其凝血功能、保证手术成功意义重大。在肾病患者，活化凝血酶和纤维蛋白促进炎症反应；尿毒症患者透析后使体内蛋白C抗凝途径的抗凝活性增强，导致透析患者出血。颅脑损伤患者FⅡ、V、X水平与颅脑损伤的严重程度相关，可为判断急性闭合性颅脑损伤预后提供线索。     

应用凝血酶生成试验评估肝硬化患者血栓形成风险的研究

目的：研究抗凝血因子和促凝血因子对凝血酶原时间（PT ）、活化部分凝血活酶时间（APTT ）和凝血酶生成试验（TGA）结果的影响,探讨TGA用于评估肝硬化患者血栓形成风险的价值。方法收集93名肝硬化患者和50名健康人群的血液标本,分别进行凝血象、凝血活酶、抗凝因子和抗凝血酶的测定。TGA利用荧光读数仪测定,通过软件监测绘制样本的凝血酶生成曲线。结果 PT受凝血因子（F）Ⅱ、FⅤ、FⅦ、FⅨ和蛋白C浓度的影响,而 APTT 结果主要由 FⅡ、FⅨ和 FⅩ决定。在5 pmol/L组织因子（TF）的TGA反应体系中,凝血酶生成潜力（ETP）比值受FⅡ、抗凝血酶和蛋白C水平的影响,并且肝硬化组与对照组之间没有明显差异;而在1 pmol/L T F反应体系中ET P比值主要由FⅨ和蛋白C决定,肝硬化组与对照组的ET P比值差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 PT和 TGA 受凝血和抗凝因子的调控,并且 TGA实验对于蛋白C浓度变化较为敏感;TGA能够在PT延长的情况下,提示肝硬化患者存在血栓形成的风险,TGA可作为临床评估肝硬化患者血液高凝状态的敏感指标。     

巴曲亭及其有效成分对出血性疾病患者凝血功能的影响

本研究旨在观察巴曲亭及其有效成分的止血机理及对出血性疾病凝血功能的影响。采用全自动血凝仪检测巴曲亭及其有效成分巴曲酶与凝血因子Ⅹ激活物(FⅩA)对正常人及出血性疾病患者血浆的活化部分凝血活酶时间(APTT)与凝血酶原时间(PT)的影响,用发色底物法检测FⅩA、巴曲酶及巴曲亭对凝血因子Ⅹ(FⅩ)活化及凝血酶生成的影响。结果表明:巴曲亭及其有效成分可以缩短正常人血浆的APTT,其中FⅩA缩短APTT的作用在一定浓度范围内存在量效关系(r=0.889,P<0.05)。FⅩA、巴曲酶及巴曲亭可纠正出血性疾病患者APTT的延长,三者对PT无明显影响。FⅩA能促进FⅩ的活化及凝血酶的生成,巴曲酶及巴曲亭对二者无明显作用。结论:巴曲亭有明显的促进凝血效果,并可纠正出血性疾病的止血异常,其有效成分巴曲酶直接作用于纤维蛋白原,而FⅩA通过活化FⅩ促使凝血酶的生成。     

凝血酶生成试验在血友病患者中的应用

目的：探讨凝血酶生成试验在血友病患者中的应用。方法：收集134例血友病患者[其中血友病A（HA）114例，血友病B（HB）20例1的临床资料，根据FⅧ：C／FIX：C不同，将无FⅧ／FⅨ抑制物的132例HA／HB患者分成重型（FⅧ：C／FIX：C〈1％）、中型（FVIU：C／FIX：C1％～5％）及轻型（FⅧ：C／FIX：C6％～25％）3组，检测凝血酶生成、FⅧ：C／FIX：C及其抑制物。结果：重型HA／HB患者与轻型者比较，出血频度及凝血酶生成各指标差异均有统计学意义（P〈0．01）；而重型者与中型者比较，除延迟时间和达峰时间差异有统计学意义外（P〈0．01），其余指标差异均无统计学意义；中型者与轻型者比较，除延迟时间和达峰时间差异无统计学意义外，其余指标差异均有统计学意义（P〈0．01）。HA／HB患者的出血频度与FⅧ：C或FIX：C无关（P=0．16），而与凝血酶生成潜力（ETP）密切相关（P=0．0001）：结论：凝血酶生成试验可作为预测HA／HB患者出血风险的有效手段。     

Determinants of the APTT- and ETP-based APC sensitivity tests

BACKGROUND: A reduced sensitivity for activated protein C (APC) is associated with an increased risk of venous thrombosis even in the absence of the factor (F)V Leiden mutation. This risk has been demonstrated with two APC sensitivity tests, which quantify the effects of APC on the activated partial thromboplastin time (APTT) and the endogenous thrombin potential (ETP), respectively. OBJECTIVES: We examined determinants of both APC sensitivity tests in the control group of the Leiden Thrombophilia Study (LETS). METHODS: Multiple linear regression analysis was performed with normalized APC-SR(APTT) or APC-SR(ETP) as dependent variable and putative determinants [levels of FII, FV, FVII, FVIII, FIX, FX, FXI, FXII, FXIII A subunit, FXIII B subunit, protein S total, protein S free, protein C, tissue factor pathway inhibitor (TFPI) total, TFPI free, antithrombin and fibrinogen] as independent variables. RESULTS AND CONCLUSIONS: The major determinant of the APTT-based test was FVIII level, followed by FII level. The ETP-based test was influenced most by free protein S and free TFPI levels. In both tests FXa formation plays a major role, as the effect of FVIII and TFPI on the tests seems to be executed via FXa. The ETP-based test was also strongly influenced by oral contraceptive use, even when we adjusted for all the clotting factors listed above. This means that the effect of oral contraceptives on the ETP-based test is not fully explained by the changes of coagulation factor levels investigated in this study, and that the molecular basis of acquired APC resistance during use of oral contraceptives remains to be established.     

CA-510全自动血凝仪的临床应用

目的：探讨CA-510全自动血凝仪应用于临床检验结果的准确性。方法：收集120例患者,抽取新鲜静脉血浆,分别应用日本Sysmex公司CA-510全自动血凝分析仪及美国IL公司ACL Advance全自动血凝分析仪进行检测。比较两仪器检测凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）和纤维蛋白原（Fbg）指标的结果。结果：两台血凝分析仪检测PT,APTT,TT和Fbg指标结果比较,差异无统计学意义。结论：应用CA-510全自动血凝仪检查患者凝血指标结果可靠,对临床诊断出血、血栓性疾病、正确给予治疗措施并观察其治疗效果具有重要的意义。     

Coagulation factors and the protein C system as determinants of thrombin generation in a normal population.

BACKGROUND: Thrombin generation is a powerful tool to probe overall plasma coagulability. OBJECTIVE: To determine which plasma factors influence the various parameters of the thrombin generation curve, for example lag time, peak height and endogenous thrombin potential (ETP), under different experimental conditions. PATIENTS AND METHODS: Plasma levels of coagulation factors and inhibitors, as well as thrombin generation at 1 pm tissue factor (TF) +/- thrombomodulin (TM) and at 13.6 pm TF +/- activated protein C (APC), were determined in plasma from 140 healthy individuals. Data were analysed by multiple regression models. RESULTS: Thrombin generation increased with age and was higher in females than in males. Under all conditions, the lag time was mainly dependent on the levels of free tissue factor pathway inhibitor (TFPI), free protein S (PS), factor VII (FVII), FIX and fibrinogen. The major determinants of thrombin generation (ETP and peak height) at 1 pm TF were fibrinogen, FXII (despite inhibition of contact activation), free TFPI and antithrombin (AT), both in the absence and in the presence of TM. Thrombin generation in the presence of TM was also dependent on protein C levels. At 13.6 pm TF, thrombin generation was determined by prothrombin, AT, fibrinogen, free TFPI and FV levels in the absence of APC, and by free TFPI, free PS and FX levels in the presence of APC. CONCLUSIONS: The lag time, ETP and peak height of thrombin generation depend on the levels of multiple coagulation factors and inhibitors. The specific assay determinants vary with the experimental conditions.     

Factor XI contributes to thrombus propagation on injured neointima of the rabbit iliac artery

BACKGROUND: Thrombus formation through the activation of tissue factor (TF) and factor (F) XI is a critical event in the onset of cardiovascular disease. TF expressed in atherosclerotic plaques and circulating blood is an important determinant of thrombogenicity that contributes to fibrin-rich thrombus formation after plaque disruption. However, the contribution of FXI to thrombus formation on disrupted plaques remains unclear. METHODS: A mouse monoclonal antibody against FXI and activated FXI (FXIa) (XI-5108) was generated by immunization with activated human FXI. Prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (APTT), bleeding time, and ex vivo platelet aggregation in rabbits were measured before and after an intravenous bolus injection of XI-5108. We investigated the role of FXI upon arterial thrombus growth in the rabbit iliac artery in the presence of repeated balloon injury. RESULTS: The XI-5108 antibody reacted to the light chain of human and rabbit FXI/FXIa, and inhibited FXIa-initiated FXa and FXIa generation. Fibrin-rich thrombi developed on the injured neointima that was obviously immunopositive for glycoprotein IIb-IIIa, fibrin, TF, and FXI. Intravenous administration of XI-5108 (3.0 mg kg(-1)) remarkably reduced thrombus growth, and the APTT was significantly prolonged. However, PT, bleeding time and platelet aggregation were not affected. CONCLUSIONS: These results indicate that plasma FXI plays a potent role in thrombus growth on the injured neointima. Inhibition of plasma FXI activity might help to reduce thrombus growth on ruptured plaques without prolonging bleeding time.     

东德克萨斯出血性疾病

东德克萨斯出血性疾病是近10余年新发现的一种常染色体显性遗传性出血性疾病.这种罕见的出血性疾病是由于染色体1q24编码的凝血因子(F)Ⅴ基因外显子13发生单核苷酸突变,导致FⅤ发生剪切异常,形成了1个250 kD大小的短段FⅤ (F Ⅴ-short).这种短段FⅤ在早期凝血过程中与组织因子途径抑制物(TFPI)α形成复合体,抑制凝血酶原复合物并增加TFPIα浓度,造成出血.该病临床表现多为轻度出血,包括瘀斑、鼻出血、创伤后出血、拔牙或手术后出血,一般不会出现自发性出血.其实验室检查结果示凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)延长,但可测得的所有凝血因子检查结果正常.目前该病有效的治疗措施以替代治疗为主.     

消化性溃疡患者凝血功能和D-二聚体检测的临床意义

目的研究消化性溃疡（PU）患者血浆中凝血功能指标和D-二聚体（D-D）的变化及临床意义。方法选择32例PU患者和50例PU合并出血患者及21例健康对照者,进行了凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fib）和D-D的检测和分析。结果PU组的PT、APTT、Fib、TT及I）ID的水平与健康对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。PU合并出血组的PT、APTT、Fib、TT及DID与健康对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）,PU组和PU合并出血组之间上述各项指标差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论PU患者合并出血者因出血可使机体内处于血栓前状态,并可能会出现继发性纤溶亢进。