喉鳞状细胞癌组织中骨桥蛋白和p53的表达及其临床意义

目的 研究人喉鳞状细胞癌（LSCC）及其癌旁相对正常组织中骨桥蛋白 (OPN)和p53表达水平,并探讨两者的相互关系及其临床病理学意义。方法 采用免疫组织化学SP法,对44例LSCC及癌旁组织手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,检测OPN和p53的表达,结合喉癌患者的临床病理学特征进行分析。结果 ①44例喉癌组织中OPN和p53表达阳性率分别为75.0%（33例）和65.9%（29例）,癌旁相对正常组织中分别为13.6%（6例）和2.3%（1例）;②OPN的表达与颈部淋巴结转移、临床分期、病理组织学分级有关,与性别、年龄、原发部位无相关性;③OPN和p53的表达呈显著正相关（r＝0. 360,P＝0.016）。结论 OPN在喉癌组织中的表达高于癌旁相对正常组织,可能参与了喉癌的发生、发展和转移,有可能成为判断预后的重要生物学标记物。     

p63基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

p63基因是由Osada于1998年发现的另一个p53基因家族成员，定位于3q27-3q29。p63与p53蛋白具有非常相似的结构和功能，目前已被认为是一个候选抑癌基因。我们应用原位杂交方法分别检测喉鳞状细胞癌、癌旁增生组织、非典型增生组织和声带息肉中的p63基因表达程度，藉以探讨     

喉鳞状细胞癌组织中p63表达的临床意义

目的：探讨p63基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法：用免疫组织化学法检测63例喉鳞状细胞癌（喉癌组）及其45例癌旁组织（癌旁组）、24例转移淋巴结（转移淋巴结组）、40例未转移淋巴结（未转移淋巴结组）及25例喉非癌组织（非喉癌组）中p63基因的表达。结果：p63基因在喉鳞状细胞癌组织中均为细胞核阳性表达,喉癌组及转移淋巴结组的中、强阳性率为95．2％（60／63）和83．3％（20／24）;癌旁组及未转移淋巴结组中无中、强阳性表达;非喉癌组中1例乳头状瘤为弱阳性表达,其余均为上皮细胞或基底细胞核弱阳性表达。结论：p63可作为喉鳞状细胞癌有特异性的标记物,对喉鳞状细胞癌的早期诊断和鉴别诊断有重要意义。p63可能主动参与了调控喉鳞状细胞癌的发生过程,但在喉鳞状细胞癌的发展过程中处于被激活状态,可能在发展过程中发挥负反馈的作用。     

生长抑制基因1在喉鳞状细胞癌中的突变检测及与p53蛋白表达关系的研究

目的:研究喉鳞状细胞癌组织中生长抑制基因1(ING1)基因的突变情况,并探讨p33ING1b与p53蛋白表达的关系。方法:抽提33例石蜡固定喉鳞状细胞癌组织DNA,PCR扩增ING1第2外显子序列,测序检测突变情况;免疫组织化学法检测喉鳞状细胞癌p33ING1b蛋白与p53蛋白的表达水平,并分析两者之间的关系。结果:喉鳞状细胞癌组织中ING1基因无突变现象,但2例组织中出现编码区第170个密码子核苷酸多态性位点,由GGG变为AGG;免疫组织化学检测结果显示p33ING1b、p53蛋白表达与喉鳞状细胞癌临床病理参数之间无相关性。但配对χ2分析显示p33ING1b、p53蛋白表达有明显差异,在p53阳性的病例中,p33倾向于阴性表达。结论:喉鳞状细胞癌中ING1基因的突变较少见,在正常生理环境中,p33ING1b可能与野生型p53蛋白协同发生作用。     

喉鳞状细胞癌组织中Survivin基因与p15和p16基因表达的关系

OBJECTIVE:: To investigate the expression of Survivin (SVV) and its relationship with expression of p15, p16 in laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC). METHODS: Using strep avidin-biotin complex (SABC) method, we examined the expression of SVV, p15 and p16 gene in 48 LSCC tissus samples, 24 normal laryngeal mucosa tissus samples and 24 normal laryngeal tissus adjacent to the tumors samples. RESULTS: SVV was expression in 27 of 48 (56.3%) samples of LSCC and expression in 6 of 24 (25.0%) samples of normal laryngeal tissus adjacent to the tumors. Normal laryngeal mocosa tissus samples did not expressed SVV. Overexpression of SVV was related to the tumor site, grade, clinical stage and tumor prognosis (P < 0.05). The expression of SVV in LSCC was positive correlated with p16 expression( C = 0.52 P < 0.001), but not with p15 expression. CONCLUSION: SVV may play a role in the pathway of carcinogenesis and tumor progress. It is feasible for early diagnosis and prognosis estimation. Overexpression of SVV gene and de-activation of antioncogene p16 may be play synergetic roles in the carcinogenesis of LSCC.     

喉鳞状细胞癌中P53和PTEN蛋白的表达及临床意义

目的 探讨喉鳞状细胞癌中P53、PTEN蛋白的表达及其与临床特征的关系。方法 采用免疫组化技术检测66例喉鳞癌组织和36例喉黏膜慢性炎症组织中P53、PTEN蛋白的表达。结果 P53、PTEN蛋白在66例喉鳞癌组织和36例喉黏膜慢性炎症组织中表达均存在统计学意义（P〈0．05）。66例喉鳞癌组织中，P53蛋白的表达水平在Ⅲ～Ⅳ期组高于Ⅰ～Ⅱ组（P〈0．05），淋巴结转移者高于无淋巴结转移者（P〈0．05）；PTEN蛋白的表达水平Ⅰ～Ⅱ期组高于Ⅲ～Ⅳ期组（P〈0．05），高分化癌组高于中低分化癌组（P〈0．05），无淋巴结转移者高于有转移者（P〈0．05）。喉鳞癌组织中P53、PTEN蛋白两者表达有相关性（P〈0．05）。结论 PTEN蛋白的表达对预测喉鳞癌的预后有一定参考价值。     

转化生长因子β1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨转化生长因子β1(TGF—β1)与喉鳞状细胞癌患者的病理分级、临床分期问的相互关系，研究TGF-β1在喉鳞状细胞癌发病机制中的作用。方法：分别提取21例喉鳞状细胞癌组织,15例喉正常组织的总RNA，采用逆转录聚合酶链反应技术，检测TGF-β1 mRNA的水平。结果：21例喉鳞状细胞癌组织中10例(47．62％)TGF-β1 mRNA表达阳性。TGF-β1 mRNA与喉鳞状细胞癌病理分级和临床分期有一定关系。结论：TGF-β1可作为评定喉鳞状细胞癌的进展、浸润的指标。     

抑癌基因p15、Rb在喉鳞状细胞癌中表达的研究

目的 :研究抑癌基因p15、Rb蛋白表达对喉鳞状细胞癌诊断、治疗及预后判断的意义。方法 :用免疫组化SABC法检测喉癌组 45例石蜡标本与对照组 15例喉部正常或增生的黏膜上皮标本的 p15、Rb蛋白表达情况。结果 :喉鳞状细胞癌组p15蛋白阳性率 (48.9%)与对照组阳性率 (10 0 .0 %)比较 ,差异有极显著性意义 (P<0 .0 1) ;喉癌组中 0～Ⅱ期 p15蛋白阳性率 (6 6 .7%)与Ⅲ～Ⅳ期阳性率 (33.3%)比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;喉癌组Rb蛋白阳性率 (88.9%)与对照组阳性率 (93.3%)比较 ,差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;2× 2列联表 χ2 检验 ,p15、Rb蛋白表达无相关性 (P >0 .0 5 ) ;对照组中 ,p15蛋白的表达以鳞状上皮组织中远离基膜的棘层细胞、颗粒层细胞明显 ,而Rb蛋白的表达则以基底层细胞及近侧棘层细胞明显。结论 :抑癌基因 p15的表达缺失对喉鳞状细胞癌的发生、发展有一定的作用 ,p15蛋白的检测对喉鳞状细胞癌的治疗及估计预后有指导意义 ;喉鳞状细胞癌组织中 p15、Rb的蛋白表达无相关性 ;正常及增生的喉部鳞状上皮的细胞层次间 ,p15、Rb蛋白表达不一致 ,p15蛋白表达对细胞增殖有抑制作用。     

p53蛋白在喉鳞癌及癌旁组织中表达的研究

应用抗ｐ５３单克隆抗休琢ＬＳＡＢ免疫组织化学染色法检测喉鳞癌，喉癌旁组织及声带息肉ｐ５３蛋白的表达。结果显示：２５例喉鳞癌呈阳性反应，４例距肿瘤边缘〈０．５ｃｍ的喉癌旁组织呈弱阳以应，２０例距肿瘤边缘〉２ｃｍ的喉癌旁组织及１６例声带息肉均为阴性。     

喉癌手术切缘中Survivin和Caspase-3及p53的表达意义及相关性研究

目的:研究Survivin、Caspase-3及p53在喉鳞状细胞癌手术切缘中的表达意义及相关性.方法:116例患者术后按肿瘤复发情况分成4组,分别为:复发≤1年组,＞1～3年组,＞3～＜5年组,≥5年组(包括5年后无复发),应用免疫组织化学方法检测手术切缘Survivin、Caspase-3及p53的表达情况.结果:Survivin在4组中的表达分别为92.9%、85.0%、50.0%及21.1%(P＜0.01)Caspase-3在4组中的表达分别为50.0%、50.0%、66.7%及89.5%(P＜0.01);p53在4组中的表达分别为57.1%、37.5%、45.8%及18.4%(P＜0.05);Survivin、Caspase-3及p53在4组的表达均有统计学意义.结论:喉癌手术切缘中Survivin、Caspase-3及p53的表达在喉鳞状细胞癌的发生、发展中可能起重要作用,并对喉鳞状细胞癌的早期诊断和预后判断有意义.     

基质金属蛋白酶-2在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨基质金属蛋白酶（MMP）-2在喉鳞状细胞癌（LSCC）中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学SP法检测了63例LSCC及其中20例癌旁安全缘正常组织（ASM）和18例声带息肉（VCP）中MMP2的表达。结果：MMP2在LSCC、VCP和ASM中的阳性率分别是66．7％、33．3％、15．0％，3者之间均差异有统计学意义（均P〈0．05）；在I．SCC不同病理分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级间表达存在差异（均P〈0．05）；在LSCC淋巴结转移与非转移者间的表达差异无统计学意义（P〉0．05）；在不同临床分期及不同年龄组间的表达差异无统计学意义。结论：MMP-2可能只在LSCC发生及发展中起重要作用，而与LSCC的转移无关。     

喉癌组织中Survivin和p63的表达及临床意义

目的：探讨Survivin、p63在喉鳞状细胞癌（LSCC）组织中的表达及与LSCC发生、发展的关系和生物学意义。方法：应用原位分子杂交方法,检测Survivin mRNA、p63 mRNA在47例LSCC组织、癌旁组织及14例正常喉组织中的表达。结果：①Survivin mRNA在正常喉组织中不表达;在LSCC组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为59．6％（28／47）、25．5％（12／47）,其差异有统计学意义（P〈0．05）;组织分化程度越低、TNM分期越晚、淋巴结转移率越高,则Survivin mRNA表达越强（均P〈0．05）。②p63mRNA在LSCC组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为91.5％（43／47）、93．6％（44／47）,分别与正常喉组织（57．1％）比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;p63 mRNA与喉癌临床病理特征无关。结论：Survivin在LSCC中表达上调,提示其通过抑制细胞凋亡在LSCC的发生、发展过程中起重要作用,可能成为LSCC基因治疗的新靶点;其高表达预示肿瘤有较高的侵袭性和不良预后。p63对LSCC生物学行为的影响较小。     

P73基因在喉鳞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨P73基因在喉鳞癌中的表达。方法用原位杂交方法检测49例喉鳞癌组织、19例声带息肉、12例癌旁组织及8例非典型增生组织中P73的表达。结果喉鳞癌组织P73阳性表达26例定位于胞浆，9例定位于腺体，5例定位于胞核，9例未表达。P73阳性表达率在喉鳞癌组织、声带息肉、癌旁组织及非典型增生组织中分别为53．06％(26／49)，36．84％(7／19)，41．67％(5／12)，37．5％(3／8)，P73与喉鳞癌的临床分型、分期无相关性。结论P73基因可能并非喉癌癌变过程中的靶基因，在喉癌的发生发展中可能不发挥重要作用。     

Skp2、p27蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:探讨喉鳞状细胞癌(LSCC)中Skp2和p27蛋白的表达与患者临床病理和预后的关系以及两种蛋白之间的相关性。方法:用免疫组织化学SP法检测20例正常喉黏膜(NLT)、27例LSCC癌前病变不典型增生(LPL)和70例LSCC组织中Skp2和p27蛋白的表达情况。结果:Skp2蛋白在NLT、LPL和LSCC中的阳性表达率分别为10.00%(2/20),37.04%(10/27)和41.43%(29/70),后两者的阳性率显著高于前者(均P<0.05)。Skp2蛋白表达与临床分期及淋巴结转移显著正相关(P<0.05)。p27蛋白在NLT和LSCC中阳性率分别为85.00%(17/20),48.57%(34/70),两者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。p27蛋白表达与颈淋巴结转移呈负相关(P<0.05)。Skp2蛋白在LSCC中表达与p27蛋白呈负相关(P<0.05)。Skp2表达阳性而p27表达阴性的LSCC患者生存率明显低于其他患者(P<0.05)。结论:Skp2可能通过对细胞周期抑制因子p27蛋白的降解而参与LSCC的发生、发展,联合检测Skp2及p27蛋白的表达对预测LSCC患者的预后具有重要意义。     

CPS1在喉鳞癌组织中的表达及临床意义

目的 研究氨基甲酰磷酸合成酶1(CPS1)在喉鳞癌患者组织中的表达水平及与临床病理指标的相关性,探讨CPS1对喉鳞癌的临床意义。 方法 采用逆转录实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot免疫印迹技术,分别检测喉鳞癌组织及癌旁组织中CPS1 mRNA及蛋白表达水平,同时采用免疫组织化学法检测 CPS1在喉鳞癌组织中的表达水平及其结构中的分布情况。 结果 RT-qPCR 和Western blot结果显示,与癌旁组织相比,喉鳞癌组织CPS1 mRNA 和蛋白表达明显增高,表达差异有统计学意义(P<0.01);免疫组化结果显示CPS1表达与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移等因素密切相关(P<0.05),而与患者年龄、性别、吸烟史、饮酒史及肿瘤部位无关(P>0.05)。 结论 在喉鳞癌组织中CPS1的mRNA和蛋白表达明显升高,且与临床进展密切相关,说明CPS1在喉癌发生及转移过程中起到一定的作用,可能作为喉癌诊断的重要指标。     

Prognostic significance of p53/bcl-2 co-expression in patients with laryngeal squamous cell carcinoma

OBJECTIVE: The p53, bcl-2, and bax genes are known to be involved in control of cell cycle progression and regulation of apoptotic cell death. Although they are frequently altered in laryngeal squamous cell carcinoma, their clinical relevance is not yet fully understood. In the present study, individual and combined expressions of these genes were related with patient survival as well as with proliferative and apoptotic activity. DESIGN: Retrospective study. METHODS: Paraffin-embedded tissue sections of 88 laryngeal squamous cell carcinomas that were diagnosed and treated between 1986 and 1996 were investigated for p53, bcl-2, and bax protein expression by immunohistochemistry. Apoptotic cells were visualized using the nick end labeling method. To assess proliferative activity of tumors, mitotic indices were determined. RESULTS: Age of patients, advanced disease (stages HI and IV), high mitotic activity, positive bcl-2 expression, high level of p53 expression, and p53/bcl-2 co-expression were significantly associated with shortened overall survival in univariate analysis. In multivariate analysis, only age and p53/bcl-2 co-expression had independent prognostic value. Other combinations of genes, i.e., bcl-2-to-bax and p53-to-bax ratios, were not associated with patient outcome. A significant positive correlation was found between apoptotic and mitotic activity. However, protein levels of p53, bcl-2, and bax were unrelated to proliferation and apoptosis of tumor cells. CONCLUSIONS: The co-expression of p53/bcl-2 was an independent predictor of patient outcome and had a prognostic value superior to both parameters considered separately. The rate of apoptosis mainly counterbalanced proliferative activity but appeared not to be significantly influenced by p53, bcl-2, and bax.     

p185和CD44v6在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨癌基因蛋白p185和细胞黏附因子CD44v6在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达、临床意义及其相关性。方法:采用免疫组织化学SP法检测63例LSCC及其中20例癌旁安全缘组织(ASM)和18例声带息肉(VCP)中p185与CD44v6的表达。结果:p185在VCP中不表达,在LSCC和ASM中的阳性率分别是74.6%、35.0%,两者之间差异有统计学意义;p185在不同病理分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级间存在差异(P<0.05);p185在不同临床分期的表达,差异无统计学意义(P>0.05);CD44v6在LSCC、VCP和ASM中的阳性率分别是96.8%、83.3%、60.0%,3者之间差异有统计学意义(P<0.05);CD44v6在不同病理分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级及不同临床分期间的表达差异无统计学意义(P>0.05);LSCC中p185与CD44v6的表达存在正相关(r=0.393,P<0.01)。结论:根据实验结果,p185可能在LSCC发生及发展中起重要作用,CD44v6可能只在LSCC的发生中起作用,在癌旁组织中p185与CD44v6的表达均较良性病变中的表达量增加,反映癌旁移行黏膜中两者可能作为不稳定因素与LSCC复发有关,且两者可能存在协同作用。