HE制片中组织固定包埋的体会

优质组织切片是正确病理诊断的前提 ,标本处理是制片过程中的重要环节 [1 ]。本文报道我们在 HE切片中组织固定和包埋的体会 ,旨在提高对其重要性的认识。1　组织固定和包埋1.1　及时固定　标本以 10 %的中性福尔马林固定最好 ,尽量避免酒精固定 ,因酒精固定后的核蛋白质遇水可溶解 ,致使核染色不清。固定效果决定了以后制片的各个环节 ,因此组织离体后要尽快固定。固定液的量至少应为标本体积的五倍 ,固定时间因组织的大小而异 ,较大组织要切成小块固定 ,时间12～ 2 4h,微小标本 (如内窥镜活检标本等 ) 2～ 4h即可。然后将标本修成大小约 …     

胰腺冰冻切片免疫组化中组织的固定方法比较

目的 寻找一种胰腺冰冻切片免疫组化过程中的最佳组织固定方式.方法 将20例冰冻组织OCT包埋后置于冰冻机切片8-10μm,每例组织各切5张片,各分成5组,接着分别采用以下5种不同的方法进行固定10min,即丙酮4℃固定法(A组)、丙酮室温固定法(B组)、4%多聚甲醛室温固定法(C组)、10%甲醛室温固定法(D组)、Bouin液室温固定法(E组),然后0.01M PBS冲洗5minx3次,枸橼酸电炉热修复后进行免疫组化染色.结果 A组的冰冻切片免疫组化染色结果其他组好.结论 丙酮4℃固定比4%多聚甲醛、10%甲醛、Bouin液固定较好保存胰腺中PKCa抗原的活性.     

冰冻切片制作技术的改进及临床应用

目的：探讨冰冻切片制作过程中的影响因素及改进措施,提高冰冻切片的临床应用价值。方法：选取新鲜活体组织,取材后直接冻结,采用恒温式冰冻切片机切片,冰冻固定液固定,HE染色。结果：质量较好,染色鲜艳,显微镜下组织结构、细胞形态清晰,细胞核浆对比分明。结论：制作高质量的冰冻切片需要在取材、冷冻、切片、固定等多个环节上精益求精,不断改进,以提高病理诊断率,提高其临床应用价值。     

皮肤组织冰冻切片在直接免疫荧光法中包埋剂的改良应用

目的用普通胶水代替OCT包埋皮肤组织来制作冰冻切片,不仅降低了成本,而且所制切片与用OCT包埋剂包埋所制切片在制片质量与染色效果上无异。方法行冰冻切片时,用普通胶水代替OCT对皮肤组织起支托固定作用。结果用普通胶水包埋制作的冰冻切片,在制片质量及染色效果上均与用OCT包埋剂包埋制片无异。结论冰冻切片行直接免疫荧光法要求冰冻切片质量优良,且在制片过程中快捷、力求保持抗原的完整性。质量优良的包埋剂在制片过程中可以达到以上要求,但其价格昂贵;用普通胶水代替质量优良的包埋剂,不仅在制片质量及染色效果上与前者无异,且价格便宜,值得推广使用。     

冰冻切片防止脱片的几种方法

冰冻切片是将组织直接冰冻进行切片，是一种简便快速的方法，常常用于配合临床手术等在短时间内制出切片的病理急诊。由于冰冻切片组织不需经过酒精脱水、二甲苯透明和包埋等过程，脂肪、类脂质、抗原等化学物质成分不受影响，因此是临床上常用的制片方法。     

人体活检穿刺组织、实验动物组织荧光制片、HE制片中的技术改进

目的人体活体行肺、肝、肾穿刺及实验用动物的肺、肝、肾组织制作免疫荧光切片、石蜡HE切片,用以明确疾病的性质以及做科研时动物试验的组织进行科学病理分析。方法我院患者的活检组织标本、试验室的动物组织标本取1/4及1/3用普通胶水代替OCT包埋剂,冰冻机下行冰冻切片用以制作直接免疫荧光染色。剩余标本组织在脱水机改进时间后进行脱水处理,行石蜡包埋切片做HE染色。结果组织荧光制片效果好,无背景着色,切片完整,组织结构清晰。组织石蜡HE切片染色胞浆分明,切片完整。两种制片镜下观察定位准确。结论采用改进后方法制片,节约资金,制片的阳性强度及阳性检出率与未改进前相比效果好,定位准确。     

提高病理冰冻切片质量的探讨

目的探讨在冰冻切片制过程中对不同组织采取相应的对策,以达到最佳的切片效果。方法回顾分析2011年我院1235例术中冰冻病理的制片方法。针对不同组织,选用冰冻切片机的温度不同、冰冻时间不同。结果 1712例术中冰冻病理切片,切片平整,镜下细胞核与细胞质染色对比清晰、很少有冰晶形成。结论冰冻切片机的适宜温度、冰冻时时间、切片手法、染色封片等是制作优质冰冻切片的关键。     

法医病理学皮肤切片制作的方法与探讨

目的:鉴于法医病理学皮肤病理制作难的特点,从而摸索皮肤组织制片的新方法与新思路。方法:采用软化剂固定液处理,延长脱水时间与浸蜡时间、进行石蜡切片、HE染色。结果:经软化固定液处后的皮肤组织结构完整、厚薄均匀、组织细胞结构清晰的皮肤组织切片,为法医学病理诊断及法医学判案提供了有力的证据。     

AAF液微波固定石蜡制片

为了克服组织切片制作过程中固定时间长,部分脂肪、皮肤、肌肉组织难固定和不易切片的难题,笔者应用AAF固定液微波固定法固定石蜡制片.     

制作冰冻切片对包埋剂的选择及应用

冰冻切片是病理诊断与技术工作中的一项重要工作。临床手术中快速病理诊断、荧光免疫检测,研究试验用动物某些组织等都需要制作冰冻切片。制作一张质量优良的冰冻切片,制片过程中的每一步环节都很重要,其中包埋剂的使用也很关键,包埋剂包埋组织（-20℃到-25℃）冷冻后对组织起到支托固定的作用。现工作中制作冰冻切片常用包埋剂是OCT,     

术中快速冰冻切片免疫组化染色研究

目的:探讨术中快速冰冻切片免疫组化及时回报的应用。方法:246例来自外科手术送检的各类新鲜组织标本,同时采用快速冰冻切片免疫组化方法及普通免疫组化法做病理分析,并比较两种方法对疾病的检出率。结果:246例组织标本中,快速冰冻切片免疫组化恶性肿瘤确诊率为97.4%,良性肿瘤97.1%,炎症及增生性病变96.8%;普通免疫组化确诊率分别为97.4%,98.1%和98.4%;两组间比较差异有统计学意义(P>0.05)。结论:快速冰冻切片免疫组化可以达到术中与快速冷冻切片同期出结果的要求,且不影响疾病的检出率。     

GS环保固定与传统固定染色在冷冻切片中应用

目的：探讨GS环保固定在冷冻切片中应用价值。方法选取标本300例,150例进行GS固定,150例使用传统固定液,比较两组在使用上出现刺激性气味、固定效果不佳及染色效果不佳的比例,并对骨组织脱钙和肺癌TIF-1＋固定效果进行比较。结果 GS固定染色套液临床使用上出现刺激性气味、固定效果不佳及染色效果不佳的比例显著低于常规组（P＜0.05）。结论 GS环保套液效果满意,具有在病理技术工作中推广应用的价值。     

冰冻切片质量控制对病理诊断准确性的影响

目的：分析冰冻切片病理诊断准确性及影响因素。方法：收集4780例冰冻切片诊断结果和常规病理组织学诊断结果进行对比分析。结果;冰冻切片诊断准确率在98．1％（4690／4780）,其中优片率达81％（3872／4780）。结论：冰冻切片质量对病理诊断准确性影响较大,对手术中确定病变性质和选择合理的治疗方案具有重要价值。     

术中冰冻切片对卵巢肿瘤诊断的临床意义

目的：评价卵巢肿瘤手术中冰冻切片诊断的临床意义。方法：回顾分析我科1996年－1999年90例卵巢肿瘤术前冰冻诊断和与术后石蜡切片诊断的符合情况,并分析误诊原因。结果：术中冰后片与术后石蜡切片诊断的符合率为98．8％。结论：讨论影响术中冰冻切诊断的原因,强调病理医师与临床医师合作的重要性。     

232例术中卵巢肿瘤冰冻切片诊断分析

目的:评价术中快速冰冻切片对卵巢肿瘤诊断的意义并分析误诊原因。方法:回顾性总结2000~2004年武汉大学中南医院232例卵巢肿瘤冰冻切片的病理诊断资料。结果:术中冰冻切片与术后石蜡切片相比较,确诊222例,确诊率为95.69%;误诊10例,误诊率为4.31%。结论:冰冻切片是手术中确定卵巢肿瘤的有效方法,手术医师与病理医师的团结合作能提高冰冻切片诊断卵巢肿瘤的准确性及制定正确的手术方案。     

乳腺恶性肿瘤冰冻切片诊断准确率的病理及临床因素研究

目的探讨影响冰冻切片诊断乳腺恶性肿瘤的诊断准确率的病理及临床因素。方法回顾我院2010年1月至2011年6月间90例诊断乳腺恶性肿瘤冰冻切片与术后石蜡切片的诊断结果,探讨临床医师取材送检的肿物组织大小对术中冰冻切片诊断准确率的影响,分析造成延迟诊断的病理及临床因素。结果临床医师取材送检组织大小≥2.5cm的诊断准确率明显高于送检组织大小<2.5cm诊断准确率,差异具有统计学意义(0.05≥P>0.01)。结论冷冻切片诊断乳腺恶性肿瘤有其重要意义和较高的准确性。送检肿物组织越大,术中冰冻与术后诊断符合率就越高。延迟诊断可能与送检组织局限、交界性病变和疑难病例诊断困难以及诊断医师经验不足有关。     

Alkaline hydrolysis of methyl, ethyl and n-propyl 4-hydroxybenzoate esters in the liquid and frozen states

The alkaline hydrolysis of the methyl, ethyl and n-propyl esters of 4-hydroxybenzoic acid was studied in the liquid and frozen states in sodium hydroxide solutions. The temperature range was −26 to 60°C. Significant acceleration of the reaction rate was evident in the frozen state compared with rates found at liquid state temperatures. The maximum reaction rate in the frozen state occurred in the temperature range −12 to −10°C. Methyl 4-hydroxybenzoate showed more than a 20-fold increased rate constant from 7.17 × 10⁻⁶ s⁻¹ at 30°C to 1.53 × 10⁻⁴ s⁻¹ at −9°C in a 1.00 × 10⁻² M solution of sodium hydroxide. Rate constants in the liquid and frozen states followed pseudo first-order kinetics over 2–4 half-lives of reaction. Data were fitted to a theoretical model describing the reaction rate in the frozen state as dependent upon the increased concentration of solutes in liquid vesicles in the frozen state and the predicted reduction in the reaction rate constant with temperature decrease. Although the data exhibited similar trends to that predicted by the model, there was frequently a 50% difference in the rates observed compared with those predicted. This study has clearly demonstrated that there is a significantly increased rate of hydrolysis of these esters in the frozen state. This is a further indication that it cannot be assumed that drugs stored in solution will necessarily be stabilized, or their stability enhanced, on freezing. Storage under refrigeration conditions (4–8°C) results in enhanced shelf-lives compared with deep-freeze storage at −20°C under the conditions of this study.     

不同冻存条件对细胞因子诱导的杀伤细胞的细胞表型及杀伤活性的影响

目的 探讨不同冻存条件下细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)细胞表型的变化及对K562细胞杀伤活性的影响.方法 收集培养12 d的CIK细胞,分别冻存于-80℃冰箱及液氮中,于冻存后4、12、24周复苏,通过流式细胞仪检测CIK细胞表型变化,CCK-8法测定其对K562细胞的杀伤活性,并与未冻存CIK细胞进行比较.结果 液氮冻存4、12、24周及-80℃冻存4周后复苏培养的CIK细胞增殖、细胞存活率、免疫细胞表型及对K562的杀伤活性与未冻存组比较差异无统计学意义(P＞0.05).-80℃冻存12周及24后复苏培养的CIK细胞与未冻存组比较,细胞增殖明显抑制,细胞存活率低,CD3+、CD3 +/CD4+、CD3 +/CD8+、CD3 +/CD56+细胞比例显著降低,对K562细胞杀伤活性显著抑制(P＜0.05).结论 临床治疗中CIK细胞应尽量冻存于液氮中,如冻存于-80℃时冻存时间应≤4周.     

子宫内膜间质肉瘤14例临床分析

目的:探讨子宫内膜间质肉瘤的诊断、治疗及预后。方法:回顾性分析我院1999年6月～2006年6月收治的14例子宫内膜间质肉瘤的诊治方法和结果。结果:确诊主要依靠病理结果,术前病理检查7例,其中阳性5例,术中快速病理检查确诊6例,3例术前误诊者术后通过石蜡病理明确诊断。7例采用全子宫及双附件切除术,4例采用广泛性子宫及双附件切除加盆腔淋巴结清扫术,3例二期手术。全部病例均接受化疗或放疗。结论:诊断性刮宫或宫颈赘生物活检、术中快速病理检查可降低误诊率;子宫内膜间质肉瘤的恶性度与预后关系密切,低度恶性者切除范围足够大,手术前后辅助化疗或放疗可减少复发和提高存活率。