大鼠脑缺血再灌流脑区一氧化氮变化的研究

目的研究大鼠脑缺血及再灌流后脑部一氧化氮的变化。方法采用荧光法和放射免疫法测定４个脑区一氧化氮（ＮＯ）代谢产物ＮＯ２和环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）。结果脑缺血１０ｍｉｎ,各脑区ＮＯ２和ｃＧＭＰ含量明显增高;脑缺血３０ｍｉｎ,各脑区ＮＯ２和ｃＧＭＰ含量开始下降。缺血１０ｍｉｎ再灌流１５ｍｉｎ以及缺血３０ｍｉｎ再灌流１５ｍｉｎ,各脑区ＮＯ２和ｃＧＭＰ含量再次增加,与单纯脑缺血组相比,有显著差异性（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。结论ＮＯ参与了脑缺血再灌流的损伤过程     

出血性卒中脑脊液环核苷酸变化的研究

放免法测定４６例出血性卒中患者（蛛网膜下腔出血３０例，脑出血１６例）脑脊液环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）和环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）含量的变化，并与２０例外科病人作对照。结果发现出血性卒中急性期脑脊液的ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ含量明显高于对照组（Ｐ＜０．０１～０．０５）。文中对引起这种改变的机理及其临床意义进行了讨论。     

外源性NO与内源性NO对海马区cGMP合成的影响

正常沙土鼠海马脑片孵化时加用硝普钠及钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型.硝普钠增加cGMP的产生,cGMP主要分布在海马本部曲张的纤维及少数的细胞体中.脑缺血再灌流后增加cGMP的产生,cGMP主要分布在海马本部的细胞体及少量纤维中.认为外源性NO与内源性NO介导海马区cGMP的合成分布不同.     

基于环磷酸鸟苷-腺苷合成酶/膜蛋白干扰素基因刺激因子通路探讨奥拉西坦对脑出血大鼠神经功能的影响

目的 从环磷酸鸟苷-腺苷合成酶(cGAS)/膜蛋白干扰素基因刺激因子(STING)通路方面,探讨奥拉西坦(ORC)对脑出血大鼠认知功能的影响。方法 将SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、ORC组(50 mg/kg)、RU.521组(cGAS抑制剂,50 mg/kg)、DMXAA组(STING激活剂,25 mg/kg)、ORC+DMXAA组,每组15只。用Longa法测大鼠神经功能变化;干湿比重法测脑含水量;电镜测血肿周围病理变化;铁染色法测血肿周围组织铁沉积,以评估血肿程度;TUNEL法测血肿周围组织神经元凋亡状况;免疫组化法测血肿周围组织cGAS阳性表达。Western blotting法测STING、TNF-α、IL-12、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、转铁蛋白(Tf)、转铁蛋白受体(Tf R)、水通道蛋白4(APQ4)蛋白表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠死亡、偏瘫及侧旋转等神经功能缺损行为评分明显升高,血肿周围组织神经元水肿及凋亡明显增加,脑水肿、铁沉积严重,cGAS/STING通路蛋白及其介导的炎症反应和促凋亡...     

偏头痛患者血小板膜粘附分子表达的变化及L-精氨酸、环磷酸鸟苷体外作用的影响

我们对 49例偏头痛患者进行血小板膜粘附分子的检测 ,并观察Ｌ 精氨酸、环磷酸鸟苷 (ｃＧＭＰ)的体外作用 ,现将检测结果分析如下。表 1　 偏头痛患者对不同刺激物血小板膜ＣＤ41、ＣＤ6 2Ｐ的表达 (% , ｘ±ｓ)组别例数ＡＴＡ ＬＡ ＣＴ ＬＴ Ｃ对照组 2 5ＣＤ411 7± 0 62 1± 0 81 3± 0 5 1 1± 0 61 6± 0 91 7± 0 8ＣＤ62Ｐ 0 5± 0 3 1 4± 0 60 7± 0 40 6± 0 3 1 5± 0 81 7± 0 9发作组 2 6ＣＤ414 3 .7± 8.6 62 .6± 12 .5 3 5 .8± 7.6 42 .4± 8.3 48.9± 10 .6 5 0 .7± 11.5 ＣＤ62Ｐ 12 …     

罗哌卡因对脑缺血/再灌注损伤大鼠的脑保护作用及cGAS/STING通路的影响

目的 探讨罗哌卡因对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及环磷酸鸟苷-腺苷合成酶/膜蛋白干扰素基因刺激因子(cGAS/STING)通路的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、罗哌卡因低剂量组(0.075 mg/kg)、罗哌卡因中剂量组(0.15 mg/kg)、罗哌卡因高剂量组(0.30 mg/kg)、阳性对照组(尼莫地平,5 mg/kg),每组8只,除假手术组外,其余各组大鼠均采用线栓法构建脑缺血再灌注大鼠模型,给药第0天、第3天、第7天各组大鼠的神经功能缺损评分;苏木精-伊红染色(HE)检测脑组织病理学变化;2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)法检测脑梗死面积;酶联免疫吸附(ELISA)检测脑组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;qRT-PCR检测线粒体DNA(mtDNA)水平;蛋白免疫印迹法检测脑组织cGAS/STING通路蛋白表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠脑组织受损严重,脑梗死面积、神经缺损评分、脑组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平、胞质mtDNA水平、cGAS、STING...     

阿片机制参与基底外侧杏仁核的睡眠调节作用

应用多道睡眠描记术（ＰＳＧ）研究大鼠基底外侧杏仁核（ＢＬＮ）在睡眠－觉醒调节中的作用与机制。双侧ＢＬＮ 内微量注射损毁神经元胞体剂量的海人酸（ＫＡ）立即引起不眠状态,自第３ 天开始慢波睡眠（ＳＷＳ）增多,但快波睡眠（ＰＳ）不受影响。单侧ＢＬＮ内注射吗啡引起慢波睡眠抑制效应,而阿片受体阻断剂纳洛酮促进ＳＷＳ并可阻断吗啡的效应。环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）增加ＳＷＳ,但环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）减少ＳＷＳ。鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝的效应与ｃＧＭＰ相反。本研究表明ＢＬＮ内阿片机制在睡眠－觉醒调节中具有重要作用,内源性阿片样物质抑制ＳＷＳ,这一作用可能是通过ｃＧＭＰ增多或ｃＡＭＰ减少实现的。     

脑缺再灌后海马区cGMP的分布及浓度的变化

目的研究脑缺血再灌流后海马区cGMP的变化。方法钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型,应用双重免疫荧光染色法染色。结果脑缺血再灌流后,cGMP迅速短暂地增高,cGMP阳性细胞主要分布在海马本部的始层、放射层及腔隙分子层,cGMP阳性细胞多数是星形胶质细胞。结论cGMP阳性细胞可能通过cGMP的功效对脑缺血起保护作用。cGMP阳性细胞可能对脑缺血耐受。     

蛛网膜下腔出血对兔脑基底动脉内皮细胞松弛因子释放及环-磷酸鸟苷含量的影响

本文观察蛛网膜下腔出血(SAH)对兔基底动脉内皮细胞松弛因子(EDRF)释放及环-磷酸鸟苷(cGMP)含量的影响。SAH 引起明显脑血管痉挛,同时明显降低了离体时乙酰胆硷(Ach)经过基底动脉诱发的生物检定环松弛,并降低了基底动脉 cGMP 含量。实验结果提示 SAH 可抑制基底动脉 EDRF 的释放及降低平滑肌胞浆中 cGMP 水平,从而降低基底动脉的松弛反应,易导致脑血管痉挛发生。     

雌激素受体/一氧化氮/环磷酸鸟苷通路介导雌马酚逆转环孢素抑制骨髓间充质干细胞

背景：长期服用环孢素可抑制成骨细胞分化,导致骨质疏松,而植物雌激素雌马酚可促进成骨细胞增殖与分化。目的：探讨雌马酚对环孢素处理的小鼠骨髓间充质干细胞增殖及向成骨细胞分化的影响,分析其可能存在的信号通路。方法：贴壁法分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,分为5组,分别给予雌马酚、环孢素、雌马酚+环孢素、雌马酚+环孢素+ICI182780、雌马酚+环孢素+L-NAME。倒置显微镜下观察骨髓间充质干细胞的形态学变化及矿化能力,通过检测[3H]-甲基胸腺嘧啶掺入率反映细胞增殖情况,通过测定细胞内碱性磷酸酶活性与钙沉积量反映细胞向成骨细胞分化能力,测定培养液中一氧化氮产量与细胞内环磷酸鸟苷含量。结果与结论：合用雌马酚与环孢素可完全逆转单用环孢素引起[3H]-甲基胸腺嘧啶掺入率、细胞内碱性磷酸酶活性、钙沉积量的减少(P < 0.05或0.01),并伴随一氧化氮产量与细胞内环磷酸鸟苷含量的恢复(P < 0.01),同时倒置显微镜下可观察到干预12 d时较高的细胞生长密度和矿化结节形成,以上作用可被雌激素受体拮抗剂ICI182780、一氧化氮合酶抑制剂L-NAME取消。提示雌马酚可通过雌激素受体/一氧化氮/环磷酸鸟苷信号通路逆转环孢素抑制骨髓间充质干细胞的增殖及向成骨细胞的分化。     

脑缺血再灌流后海马区cGMP的分布及浓度的变化

目的:研究脑缺血再灌流后海马区cGMP的变化.方法:钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型,应用双重免疫荧光染色法染色.结果:脑缺血再灌流后,cGMP迅速短暂地增高,cGMP阳性细胞主要分布在海马本部的始层、放射层及腔隙分子层,cGMP阳性细胞多数是星形胶质细胞.结论:cGMP阳性细胞可能通过cGMP的功效对脑缺血起保护作用.cGMP阳性细胞可能对脑缺血耐受.     

兔蛛网膜下腔出血模型内皮素、一氧化氮、环磷鸟苷的测定

研究蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）后血浆中内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ）、环磷鸟苷（ｃＧＭＰ）的含量变化。方法用单次杭大地注血法制成兔ＳＡＨ模型。采用生物化学法和放射免疫法,对免ＳＡＨ后１～４ｄ血浆中ＥＴ、ＮＯ、ｃＧＭＰ的含量进行了测定。结果兔ＳＡＨ后２、３、４ｄＥＴ的含量升高,第３天达峰值。ＮＯ含量在ＳＡＨ后第３、４天下降。ＳＡＨ后第４天ＣＧＭＰ含量与正常相比相差显著。结论ＥＴ、ＮＯ、ｃＧＭＰ的含量在ＳＡＨ后发生变化,它们可能参与ＳＡＨ后脑血管痉挛的发生。     

藏红花素通过调控cGMP/PKG通路对癫痫大鼠的神经保护及对海马神经元兴奋性的影响

目的 观察藏红花素对癫痫大鼠的神经保护及对海马神经元兴奋性的影响。方法 取45只大鼠,随机选取10只设为健康组,剩余35只建立癫痫模型,成功30只。随机分为癫痫组(10只)、藏红花素组(10只)、抑制剂组(10只); 藏红花素组腹腔注射藏红花素(50 mg/kg); 抑制剂组腹腔注射藏红花素(50 mg/kg),髓鞘注射ODQ[1H(1,2,4)oxadiazolo(4,3 α)quinoxaline 1 one] [环磷酸鸟苷(Cyclic guanosine monophosphate,cGMP)/cGMP依赖性蛋白激酶(cGMP-dependent protein kinase,PKG)通路抑制剂](10 μg/只); 健康组、癫痫组腹腔注射等体积生理盐水; 1次/d,干预14 d; 检测血清氧化应激反应水平指标; 检测神经元钙离子水平; 用原位末端标记法(Terminal deoxynucleoitidy transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测海马神经元凋亡率; 用免疫印迹法检测海马组织cGMP,PKG、磷酸化-PKG(Phosphorylation-PKG,p-PKG)蛋白表达水平。结果 与癫痫组比较,藏红花素组血清丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平、海马神经元内钙离子水平、海马神经元凋亡率降低,血清超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性水平、海马组织cGMP蛋白表达水平、p-PKG/PKG升高(P<0.05); 与藏红花素组比较,抑制剂组血清MDA水平、海马神经元内钙离子水平、海马神经元凋亡率升高,血清SOD活性水平、海马组织cGMP蛋白表达水平、p-PKG/PKG降低(P<0.05)。结论 藏红花素可抑制海马组织氧化应激,降低海马神经元兴奋性,保护神经功能,推测其作用机制可能与激活cGMP/PKG信号通路有关。     

内皮素-1、一氧化氮和一氧化氮合成酶在蛛网膜下腔出血中的作用机制探讨

继发性脑血管痉挛是蛛网膜下腔出血(SAH)患者死亡和致残的重要原因.内皮素(ET-1)通过收缩脑血管、介导脑血管和脑组织损伤引发脑损伤;而一氧化氮(NO)和内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)对脑组织可以起到减少损伤作用;另一方面NO的过量生成以及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达可直接对细胞产生强大的毒性作用,或者通过诱导细胞凋亡来损伤脑组织;在蛛网膜下腔出血整个病理过程中ET-1和NO的失衡也在脑组织损伤过程中起着至关重要的作用.     

白藜芦醇对成纤维细胞分泌心钠素及脑钠素的影响

背景：白藜芦醇是从传统中药中提取的多酚类化合物，具有抑制成纤维细胞增殖作用。 目的：观察白藜芦醇对成纤维细胞分泌心钠素和脑钠素的影响，验证白藜芦醇对肌腱瘢痕成纤维细胞增殖的抑制作用。 设计、时间及地点：分组对照观察，与2007-03/12在广东医学院实验动物中心完成。 材料：雌性健康成年日本大耳白兔6只，体质量2.0~2.5 kg。白藜芦醇，中国药品生物制品鉴定所提供，纯度99%，用二甲基亚砜溶解成50 mmol/L储存液，置-20 ℃保存。 方法：采用差速贴壁法体外分离培养兔肌腱瘢痕成纤维细胞。将培养的细胞分为2组，对照组不加药物；白藜芦醇组又分为4个亚组，分别加入25，50，75，100 μmol/L白藜芦醇作用72 h。 主要观察指标：采用放免法及ELISA法检测细胞培养液中心钠素及脑钠素水平；反转录-聚合酶链反应方法检测脑钠素、心钠素mRNA表达；硝酸还原酶法测细胞培养液中一氧化氮水平；化学比色法测细胞上清液中一氧化氮合酶水平；放免法测定细胞内环磷酸鸟苷水平。 结果：白藜芦醇25~100 μmol/L作用细胞后一氧化氮、一氧化氮合酶及环磷酸鸟苷水平升高，心钠素、脑钠素水平降低，心钠素、脑钠素mRNA的表达下降，在一定范围内有明显的剂量及时间依赖性。 结论：白藜芦醇在一定浓度范围能降低培养液中心钠素及脑钠素水平，并抑制细胞中心钠素及脑钠素mRNA的表达。     

精神疾病患者血清一氧化氮含量的研究

目的 探讨一氧化氮(Nitric Oxide,NO)在精神病患者血清中的含量及其临床意义。方法 采用化学比色法检测了356例精神疾病患者血清中NO含量。结果 精神疾病患者血清中NO含量高于对照组(P<0.01);发病年龄在“51岁～”组NO含量最低,病程在“15年～”组NO含量最高;精神分裂症家族史阳性者血清中NO高于精神分裂症阴性家族史者(P<0.05)。结论 精神疾病患者血清中NO含量增高可能是精神症状产生的原因之一。     

转基因自主多巴胺细胞的实验研究(论著摘要)

共转导多巴胺合成所必需酶与辅酶基因,使被转导细胞成为自主多巴胺细胞。１　材料和方法　ｐＴＨ、ｐＧＣＨ、ｐＡＡＤＣ分别为含酪氨酸羟化酶（ＴＨ）、三磷酸鸟苷环水解酶Ｉ（ＧＣＨ）、芳香族氨基酸脱羧酶（ＡＡＤＣ）基因的腺伴随病毒（ＡＡＶ）载体质粒。以磷酸钙共沉积法转染载体质粒、辅助质粒与腺病毒质粒于２９３包装细胞,所获ＡＡＶ载体颗粒滴度约１０１１～１０１２／ｍＬ。共转导２９３细胞分：（１）ＡＡＶ－ＴＨ单转导组;（２）ＡＡＶ－ＴＨ／ＡＡＶ－ＧＣＨ共转导组;（３）ＡＡＶ－ＴＨ／ＡＡＶ－ＧＣＨ／ＡＡＶ－ＡＡＤ…     

急性疱疹病毒性脑炎的治疗

应用阿糖胞苷、无环岛苷和丙氧鸟苷分别治疗急性疱疹病毒性脑炎32例、36例及20例,好转率分别为56．2％、80．5％、80％．其中丙氧鸟苷对巨细胞病毒性脑炎疗效较好。阿糖胞苷的副作用较多,特别是对骨髓有明显抑制作用,无环岛苷和丙氧鸟苷的副作用较少。     

一氧化氮及其合成酶与脑创伤性损害

一氧化氮(NO)是一种具有生物活性作用的小分子,它分布于人体多种组织中。NO内源合成的关键酶是一氧化氮合成酶(NOS)。脑损伤能诱导局部神经元和传入到损伤区域的神经元表达NOS,伤口内反应性的星形细胞和相关的胶质细胞聚集并有较高的NOS活性。NO发挥神经毒性作用的中心环节是损伤DNA,使细胞内能量储备耗竭而引起细胞死亡。     

内皮型一氧化氮合成酶与蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛关系的研究进展

蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)是由于多种原因造成血液进人颅内或椎管内蛛网膜下腔所引起的综合征.脑血管痉挛(cerebralvasospasm,CVS)是蛛网膜下腔出血后最严重的并发症之一,具有较高的致死率和致残率[1~3],至今尚无特效药物预防或治疗.