高效液相色谱结合固相萃取测定人血中去甲万古霉素及在血药浓度监测中的应用

目的采用固相萃取技术结合反相高效液相色谱法建立测定血清去甲万古霉素浓度的方法.方法样品经PT-C18萃取小柱纯化后进样,色谱条件为Thim-pack CLC-ODS柱,流动相为甲醇-0.05 mol/L磷酸(30:70),检测波长为254nm.结果应用该法对临床使用去甲万古霉素患者血药浓度进行监测,其浓度范围在0.5～100 ug/ml之间呈线性关系,平均回收率为89.3%～92.7%,日内RSD为2.65%～3.57%,日间RSD为4.92%～6.59%.结论该方法简便、快速、准确,可用于去甲万古霉素的血药浓度测定和药动学研究.     

HPLC法测定人血清中万古霉素的浓度

目的 建立人血清中万古霉素的HPLC测定方法.方法 色谱柱为20RBAX Eplison XDB - C18( 150 mm×4.6 mm,5um)柱;流动相为醋酸铵溶液(含0.25％甲醇)-甲醇(85∶15),流速为1ml/min;检测波长为225 nm;以去甲万古霉素为内标,采用20％硫酸锌直接沉淀蛋白后进样.结果 万古霉素血清浓度与峰面积线性关系良好,万古霉素回归方程为Y=0.0683+ 0.0318X,r=0.9966;线形范围为3.8～ 114ug/ml,日内RSD小于3.6％,日间RSD小于5.6％;万古霉素高、中、低浓度的平均方法回收率分别为100.6％,100.2％,98.8％,平均提取回收率分别为64.9％,66.2％,65.3％.结论 方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定及相关科研的应用.     

高效液相色谱法测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度

目的建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度的高效液相色谱法（HPLC）测定方法。方法色谱柱为Hypersil BDS C18（250mm×4.6mm,5μm）柱;流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇（87∶13）,流速1ml/min;紫外检测波长236nm;以甲硝唑为内标,采用乙腈和硫酸锌沉淀蛋白后直接进样。结果万古霉素、去甲万古霉素血清浓度与峰面积线性关系良好,万古霉素回归方程为Y=0.0873X-0.0061,r=0.9999;去甲万古霉素回归方程为Y=0.1000X-0.0004,r=0.9997;线性范围1.0～50.0mg/L。日内相对标准编差（RSD）小于4.8%,日间RSD小于6.6%;万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为102.41%,100.44%,104.69%,平均提取回收率分别为87.54%,89.86%,88.13%;去甲万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为99.46%,98.88%,99.47%,平均提取回收率分别为78.13%,77.41%,76.45%。结论方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定及相关科研的应用。     

HPLC法测定万古霉素和去甲万古霉素血清药物浓度

目的建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素的HPLC测定方法 ,用于万古霉素和去甲万古霉素血药浓度临床监测。方法色谱柱为Shim-pack（150×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇∶磷酸二氢钾缓冲液（pH=3.2）=19∶81,检测波长为236 nm,流速1 ml/min,柱温为35℃,万古霉素和去甲万古霉素互为内标。结果万古霉素和去甲万古霉素的保留时间分别为4.835 min和4.020 min;标准曲线回归方程分别为Y=32.16624X-2.117683,r=0.9997（n=3）,Y=51.53402X-2.958621,r=0.9992（n=3）;线性范围均为2.5~100μg/ml;方法回收率〉95%,绝对回收率〉80%,日内和日间RSD〈6.2%。结论本测定方法快速、准确、简便,适用于万古霉素和去甲万古霉素的临床常规血药浓度的监测。     

环孢素A血药浓度的HPLC测定方法

目的：建立环孢素A血药浓度的HPLC测定方法。方法：采用反相HPLC的方法,血样经乙醚萃取,正己烷洗脱等处理后测定。采用DiamonsilTM C18色谱柱,流动相为乙腈-水（74：26,V/V）,流速为1 ml/min,柱温为70℃,检测波长为210 nm。结果：环孢素A血药浓度在50~1000 ng/ml范围内线性关系良好,R2=0.9997,低中高三种浓度的提取回收率为70.01%~75.00%,方法回收率为98.93%~103.08%,日内精密度RSD为0.84%~4.76%,日间精密度RSD为5.38%~9.87%。结论：该方法快速灵敏准确,可用于环孢素A血药浓度的监测。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中奥美拉唑的浓度

目的建立测定奥美拉唑血药浓度的反相高效液相色谱法,考察样品提取及色谱分离条件.方法血浆中加入内标尼美舒利后,用以乙醚提取,进行高效液相色谱法检测.以Dikma Technologies C18柱,甲醇:水:三乙胺:冰醋酸(60:40:0.5:0.5)为流动相进行色谱分离.流速1.0ml/min,检测波长302nm.结果奥美拉唑浓度在50～1 800ng/ml范围内线性良好,r=0.9995.测定浓度为15、100、1 500ng/ml的血浆样品,其日间及日内的RSD分别为0.86%、6.7%、4.93%和3.04%、4.25%、5.22%(n=5).3种浓度的提取回收率分别为77.74%、79.44%和86.30%.结论方法简便、准确、灵敏,可用于奥美拉唑血药浓度的测定.     

酶放大免疫法测定去甲万古霉素的血药浓度

目的 考察酶放大免疫法(enzyme-multiplied immunoassay technique,EMIT)法检测去甲万古霉素血药浓度的可行性.方法 用EMIT法测定万古霉素和去甲万古霉素的等摩尔浓度模拟血浆样本的吸光度,分别按照各自的标准曲线计算浓度,用配对t检验考察两者间差异;比较HPLC法与EMIT法测定静脉滴注去甲万古霉素后的稳态谷浓度血样,将样本进行配对t检验,考察两者间的差异.结果 以EMIT法测定万古霉素与去甲万古霉素等摩尔浓度模拟血浆样本时,在质量浓度为0～25 mg·L-1范围内,2种药物的测定结果差异无统计学意义(P＞0.05),而质量浓度在25～46.9 mg·L-1范围内的测定结果差异有统计学意义(P＜0.05);以HPLC法和EMIT法测相同样本去甲万古霉素血药浓度时,2种方法的测定结果差异无统计学意义(P＞0.05).结论 EMIT法可用于临床测定去甲万古霉素血药浓度,方法较HPLC法简单、快捷.     

光化学荧光法测定血浆中对乙酰氨基酚的浓度

目的建立光化学荧光法测定血浆中对乙酰氨基酚的浓度。方法利用光化学法使对乙酰氨基酚的荧光强度增强,采用荧光分光光度计测定血浆中药物的浓度。结果对乙酰氨基酚在0.001-0.125mg/ml范围内线性良好,r=0.9954,检测限为0.2μg/ml,回收率为85.8%-101.2%,高、中、低三浓度的日内精密度RSD均小于0.39%,日间精密度RSD均小于0.47%。结论本法具有灵敏、快速、稳定性好等特点,可用于临床上对乙酰氨基酚血药浓度的快速检测。     

盐酸氨溴索注射液有关物质检查方法研究

目的建立高效液相色谱法测定盐酸氨溴索注射液有关物质。方法采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.5 mm,5μm),以0.01 mol/L磷酸氢二铵溶液(用磷酸调节p H至4.0)-甲醇(45∶55)为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为250 nm和238 nm。结果盐酸氨溴索杂质B在3.6~23.9 ng/ml范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系,r=0.998 7,平均回收率为103.3%~109.4%,RSD=3.8%;盐酸氨溴索杂质E在1.74 ng/ml~14.64 ng/ml范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 6,平均回收率为96.4%~104.8%,RSD=3.9%。结论试验结果表明本方法简便、快速、准确,适用于盐酸氨溴索注射液试验样品与参比样品有关物质检查。     

高效液相色谱法同时测定人血阿莫西林钠/克拉维酸钾血药浓度

目的建立阿莫西林钠/克拉维酸钾人血药浓度的色谱分析方法。方法采用对乙酰氨基酚为内标,人血浆样品用甲醇沉淀蛋白后高速离心进样;色谱柱:C18色谱柱(依利特Hypersil BDS,5μm,4.6mm×150mm);流动相:乙腈-0.05mmol/L磷酸盐缓冲液=10∶90(V/V,磷酸调pH至2.3);紫外检测波长:220nm;流速:1.0ml/min;柱温:25℃。结果克拉维酸钾、阿莫西林钠及内标物对乙酰氨基酚保留时间分别为5.3、7.2、8.5min,人血浆中内源性杂质对目标物的测定没有干扰。阿莫西林钠在0.52~4.16μg/ml范围线性良好(r2=0.9996),克拉维酸钾在0.266~2.14μg/ml范围线性良好(r2=0.9998);阿莫西林钠和克拉维酸钾的最低检测浓度分别为0.065和0.066μg/ml。;阿莫西林钠的相对回收率分别为95.9%~96.5%(n=5),克拉维酸钾的相对回收率分别为92.5%~98.8%(n=5),阿莫西林钠日内RSD为1.84%~6.4%,日间RSD为2.1%~7.8%;克拉维酸钾日内RSD为3.57%~8.6%,日间RSD为1.8%~9.1%。结论本方法简便、准确、灵敏、特异性强、重现性好,可作为同时测定人血浆中阿莫西林钠/克拉维酸钾浓度方法 。     

HLPC法测定妇炎康咀嚼片中芍药苷的含量

目的 建立反相高效液相色谱法测定妇炎康咀嚼片中芍药苷含量的方法 .方法 采用BOS Hypersil C18 OD82色谱柱,乙-0.4%醋酸为流动相,按外标法进行检测.结果 芍药苷在浓度为2.50ug/ml～75.06ug/ml范围内线性关系良好,r=0.9977,样品加样平均回收率为99.1 6%.RSD为1.42%.结论 该方法 简便、准确、重复性好,专属性强.可作为妇炎康咀嚼片的含量测定有:方法 .     

高效液相色谱法测定人血浆中盐酸吡格列酮浓度

目的 :建立盐酸吡格列酮血药浓度的测定方法。方法 :采用高效液相色谱法测定血药浓度 ,血样用乙醚萃取 ;色谱柱为HiQsilC1 8(4 .6mm× 1 5 0mm ,5 μm) ;流动相为 0 .0 5 %磷酸二氢钾缓冲液 (pH =6.3 0 )∶甲醇∶乙腈 (3∶2∶3 .5 ) ;流速 1 .0ml/min;测定波长 2 3 0nm。结果 :血药浓度线性范围为 2 5ng/ml～ 3 2 0 0ng/ml(γ =0 .9994,n =1 2 ) ,最低检测浓度为 2 5ng/ml;高、中、低 3种浓度的萃取回收率分别为 :70 .63 %± 2 .61 % ,76.0 5 %± 4.3 1 % ,82 .1 0 %± 6.92 % ;方法回收率分别为 :1 0 1 .2 4%± 6.74% ,1 0 6.1 6%± 7.89% ,90 .77%± 2 .87% ;日内相对标准偏差 (RSD) <7.41 % (n =5 ) ,日间RSD <5 .2 4% (n =5 )。结论 :该法为盐酸吡格列酮的药物动力学研究提供了一种检测方法。     

HPLC测定人血清中阿米替林及去甲阿米替林的浓度

目的：建立测定血清中阿米替林( AM)及其产物N-去甲阿米替林( N-AM)浓度HPLC法。方法：血清样品碱化后采用乙醚萃取,其有机相吹干检测。以甲醇：乙腈：水：正丁胺：冰乙酸(55：90：45：2：1.5)为流动相,检测波长为254nm,VP-ODS柱。结果：血清中阿米替林(AM)及其产物N-去甲阿米替林(N-AM)线性范围均为25~400μg/L,方法回收率分别为92.3%~125.7%及109.9%~121.8%,日内 RSD 分别为5.52%~7.70%及1.76%~9.46%,日间RSD分别为4.59%~7.70%及1.96%~9.59%。结论：本方法在阿米替林血药浓度监测应用上具有可操作性强,重现性好,临床监测周期短等优点,适合人体药动学研究。     

HPLC法测定追风透骨片的含量

目的 采用HPLC法测定追风透骨片中芍药苷的含量.方法 以乙腈-0.05mol/l磷酸二氢钾溶液(用10%磷酸调pH值为2.5)(3070)为流动相,检测波长为230nm,流速为1.0ml/min进行测定.结果 芍药苷在8.383～100.6 ug/ml浓度范围内线性良好,平均回收率99.71%,RSD为0.81%(n=5).结论 本法操作简便,回收率好,结果准确可靠.     

HPLC法测定姜黄中去甲氧基姜黄素的含量

目的:测定姜黄中去甲氧基姜黄素的含量。方法:采用超声波提取法和柱层析法,Prep Nova-Pak HR C_(18)柱(5μm,250mm×4.6mmI.D),流动相为乙腈:水=41:53+10%冰醋酸;检测波长为254nm;流速为1.2ml/min;柱温为35℃。结果:去甲氧基姜黄素在9～150μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.9998),回收率97.24%,RSD为2.0%。结论:方法准确、快速,为测定姜黄中去甲氧基姜黄素的含量提供了依据。     

HPLC法测定追风透骨片的含量

目的采用HPLC法测定追风透骨片中芍药苷的含量。方法以乙腈-0.05mol/l磷酸二氢钾溶液(用10%磷酸调pH值为2.5)(30:70)为流动相,检测波长为230nm,流速为1.0ml/min进行测定。结果芍药苷在8.383~100.6ug/ml浓度范围内线性良好,平均回收率99.71%,RSD为0.81%(n=5)。结论本法操作简便,回收率好,结果准确可靠。     

某院2010-2011年万古霉素血药浓度监测结果分析

目的 分析某院万古霉素血药浓度的监测情况,促进临床合理用药.方法 调取该院2010-2011年间测定万古霉素血药浓度患者的资料,回顾性分析万古霉素血药浓度分布及疗效分布的情况.结果 364例万古霉素监测结果中,236例(64.8％)血药浓度在5～10 μg/ml,128例(35.2％)浓度大于10 μg/ml; 240...     

人体血浆中奥硝唑的HPLC测定

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定人体血浆中奥硝唑浓度方法.方法以C18柱(4.6 mm×250 mm)为色谱柱,甲醇-水(30∶70)为流动相,血浆样品用乙腈沉淀蛋白.结果人体血浆中的内源物质不干扰奥硝唑的测定,奥硝唑在2.0～25 μg/ml浓度范围内峰面积与浓度线性关系良好(r=0.999 8),最低检测限为0.5 μg/ml.平均回收率为(99.87±0.46)%,高、中、低3种浓度的日内差(RSD)≤2.43%,日间差(RSD)≤3.18%.结论本方法简便、快速、准确,重现性好,可应用于奥硝唑人体药动学研究.     

高效液相色谱法检测糖尿病肾病尿儿茶酚胺含量

目的: 研究一种简便、准确、易于临床推广的儿茶酚胺(CAs)检测方法,进行尿中 CAs测定,探讨 2 型糖尿病肾病(DN)动态血压(ABP)与尿儿茶酚胺(UCA)的关系。方法: 利用高效液相色谱及荧光检测器,对正常人和糖尿病肾病病人24 h尿中去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)和多巴胺(DA)进行测定。结果: NE浓度在3~15 ng/ml范围及E浓度在0.3~1.5 ng/ml、DA浓度在1.5~120 ng/ ml范围内时,与色谱峰峰高的线性关系良好( r=0.999 1);NE、E回收率为 75%~82%,DA回收率为 76%;NE、E、DA的精密度 RSD(%)分别为 1.11%、7.21%、1.43% (n=5)。结论: 高效液相色谱法检测尿CAs具有简单、准确、特异性高的优点。通过对正常人及糖尿病肾病病人24 h尿样分析,不能认为交感神经肾上腺髓质系统活性与糖尿病肾病高血压及血压昼夜节律异常之间有相关性。     

人血清中万古霉素浓度的改良监测方法

目的：优化HPLC测定人血清中万古霉素浓度的方法.方法：在不同流动相配比、沉淀剂及柱温条件下,高效液相色谱法测定血万古霉素浓度,确定最佳的色谱条件和操作方法.结果：在色谱条件为色谱柱C18（250.0 mm×4.6 mm,5μm）、流动相磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.2）-乙腈（90：10,v/v）、流速1.0 ml/min、检测波长236 nm、柱温35℃的情况下,万古霉素浓度在4.47～60.83 mg/L范围内线性关系良好（r=0.9 943,n=5）,回收率在85％～115％范围内;日内、日间RSD＜15％,在定量下限附近RSD＜20％.结论：优化后,操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定.