低剂量T-2毒素对大鼠体外培养软骨细胞DNA损伤的SCGE观察

目的观察低剂量T-2毒素对大鼠体外培养软骨细胞DNA损伤情况,进一步探索大骨节病等真菌毒素中毒疾病的发病机制,预防亚临床损害和促进人类健康。方法单层原代培养的软骨细胞加入不同浓度T-2毒素(0、1、10、100μg/L)培养24 h,用单细胞凝胶电泳(SCGE)观察软骨细胞DNA损伤情况。结果随着T-2毒素剂量的升高,大鼠体外培养软骨细胞的拖尾率增加,且10μg/L组及100μg/L组与对照组相比差异均有显著意义。同时可见,随着T-2毒素剂量的升高,软骨细胞的尾DNA含量、尾长、尾动量均增加,与对照组相比,三项指标差异均具有显著意义。结论低剂量T-2毒素对体外培养的大鼠关节软骨细胞DNA可产生明确损伤,剂量越大,损伤越严重。     

体外培养大鼠软骨细胞老化的机制初探

目的对体外传代培养的大鼠软骨细胞进行相关因子检测，初步探讨其复制性老化（传代培养出现的老化表现）的机制。方法对连续培养的第二、三、四代软骨细胞进行实验，采用免疫细胞化学检测p16、pRb、E2F、CyclinD、CDK4等因子表达水平，TRAP—ELISA检测端粒酶活性，观察软骨细胞老化过程中各因子的变化。结果随着细胞复制性老化p16、pRb、CyelinD表达水平显著上升（P〈0．01），E2F、CDK4、端粒酶表达水平显著下降（P〈0．01）。结论体外培养软骨细胞老化过程与p16、pRb、CyclinD表达增加，E2F、CDK4、端粒酶表达下降密切相关。     

低剂量T-2毒素对大鼠体外培养软骨细胞影响的超微结构观察

目的观察低剂量T-2毒素对大鼠体外培养软骨细胞的影响。方法单层原代培养的软骨细胞加入不同浓度T-2毒素(0．5、1．0μg／L)培养24h，用透射电子显微镜观察软骨细胞超微结构。结果0．5μg/L T-2毒素组软骨细胞细胞质内细胞器数量明显减少，核固缩，染色质形成斑块状散布核内，核膜增厚，双层膜结构不清；粗面内质网数量减少且不扩张；部分线粒体空泡变性和髓样变。1．0μg/L T-2毒素组软骨细胞表面微绒毛脱失，细胞核改变非常明显，可见许多畸形核；胞质内可见大量空泡变性的线粒体，并可见线粒体的髓样变；粗面内质网扩张成囊状，脱颗粒，偶见凋亡的软骨细胞，细胞核固缩，形成高密度斑块。结论0．5μg/L T-2毒素即可对体外培养软骨细胞造成损害，剂量越大．损害越严重。     

不同剂量T-2毒素对大鼠关节软骨损伤的形态学观察

目的 观察不同剂量T-2毒素对大鼠关节软骨的损害程度,探讨低剂量T-2毒素与大鼠关节软骨损伤的关系。方法 Wistar大鼠120只,体质量50～70 g。按体质量将大鼠随机分为4组：T-2毒素0（对照）、100、200、300 μg/kg组,每组30只。对照组食用常规颗粒料,T-2毒素组食用经T-2毒素(剂量分别为100、200、300 μg/kg)染毒的颗粒料。喂养6个月后处死大鼠,取双侧膝关节,制备切片,光镜和电镜下观察大鼠关节软骨的损伤情况。结果 光镜下,对照组大鼠关节软骨细胞群排列整齐,层次清晰,结构完好;100μg/kg 组关节软骨细胞排列紊乱;200μg/kg组关节软骨细胞出现变形、变性,细胞核固缩;300μg/kg组可见大面积的软骨细胞坏死,坏死部位细胞显著减少,呈现无细胞区,在坏死灶周围可见单个坏死软骨细胞,坏死细胞胞质红染、胞核浓缩、碎裂和溶解。扫描电镜下,对照组大鼠关节软骨细胞形态、结构良好,层次分明,排列整齐;100 μg/kg组关节软骨表面明显粗糙;200 μg/kg组软骨纤维凸起、断裂,呈片状剥脱;300μg/kg组关节面塌陷,出现大量窝状凹坑。透射电镜下,对照组大鼠软骨细胞胞质丰富,粗面内质网发达;100 μg/kg组软骨细胞核染色质块状边集,核膜增厚,内质网空泡变性;200 μg/kg组软骨细胞内质网扩张明显,蛋白潴留,细胞器溶解破裂;300μg/kg组软骨细胞细胞器大量溶解消失,膜结构破裂,基质溶解。结论 在100～300μg/kg剂量范围内,T-2毒素致大鼠关节软骨损伤与剂量有关,染毒剂量越大,关节软骨损害越严重。     

T-2毒素致胎儿软骨细胞凋亡的观察

目的 探讨T-2毒素与软骨细胞凋亡的关系。方法 水囊引产胎儿的软骨细胞体外单层培养。T-2毒素浓度分为0,5,10,20和40ug/L5组,第1代软骨细胞接种后培养4d,加入没浓度的T-2毒素,作用16h。应用TUNEL法和流式细胞技术定性和定量检测软骨细胞凋亡。同时观察T-2毒素对软骨细胞增殖的影响。结果 各组细胞在加入T-2毒素后,胞体明显皱缩,T-2毒素浓度越大,皱缩越严重。流式细胞仪检测与TdT中介脱氧尿苷三磷酸末端标记（TUNEL）法检测均发现,当T-2毒素在0～12ug/L之间时,T-2毒素浓度越大,凋亡细胞越多。结论 T-2毒素地软骨细胞的增殖有明显的抑制作用,并与T-2毒素浓度呈剂量--效应关系。T-2毒素可以引起体外培养的软骨细胞凋亡,且与T-2毒素浓度有一定关系。     

体外培养大鼠软骨细胞退变现象的连续观察

目的对体外培养大鼠软骨细胞退变现象进行连续观察，为进一步研究软骨退变机制实验及药物干预实验提供基础资料。方法进行大鼠软骨细胞取材并传代培养，对各代次细胞进行连续性观察。采用倒置相差显微镜、透射电镜观察细胞形态与微结构，免疫组化法检测增殖细胞核抗原（PCNA），阿力新蓝染色检测胞外基质硫酸糖氨多糖（GAG）含量和结构，反转录-聚合酶链式反应方法检测软骨细胞Ⅱ型胶原和Aggrecan表达，观察软骨细胞退变。结果第四代软骨细胞出现长梭形改变，电镜下超微结构出现核固缩或水肿、细胞器减少或变形等退变表现，PCNA表达百分率明显减少（P〈0．01），GAG含量、长链分子百分比显著减少（P〈0．01），Ⅱ型胶原及Aggrecan mRNA表达显著减少（P〈0．01）。结论体外培养软骨细胞第四代出现明显功能退变。     

低剂量T-2毒素对大鼠关节骺板软骨损伤的组织病理和超微结构观察

目的观察低剂量T-2毒素对机体的损伤作用，从而探讨粮食中T-2毒素的最大允许量，为将来制订粮食中T-2毒素含量卫生标准奠定理论基础。方法利用大鼠进行短期毒性实验和亚慢性毒性实验，通过透明软骨的组织病理改变来观察低剂量T-2毒素对软骨的损伤作用。结果T-2毒素组大鼠胫骨近端骺板软骨增殖层细胞柱排列紊乱．软骨细胞变形、数量明显增多，细胞的堆积造成骺板软骨向干骺端嵌入，亚慢性毒性试验高剂量T-2毒素组．在增殖层和过渡层之间还出现了大面积的软骨细胞坏死。超微结构可见，T-2毒素组软骨细胞固缩．细胞器空泡变性．数量减少。结论低剂量T-2毒素可致大鼠关节骺板软骨出现“骨软骨病”改变，而且T-2毒素与大鼠关节骺板软骨损伤之间存在剂量和时间效应。     

基质金属蛋白酶在类似人类2型糖尿病大鼠肾病中的研究

目的 动态研究基质金属蛋白酶－2（MMP－2）和其体内特异的抑制物－金属蛋白酶组织抑制剂－2（TIMP－2）在类似人类2型糖尿病大鼠肾组织的改变。方法 利用免疫组织化学观察Ⅳ型胶原在肾小球的表达,酶谱法测定肾皮质MMP－2的活性,蛋白印迹法检测肾皮质TIMP－2的含量,Northern Blot观察肾皮质MMP－2和TIMP－2的基因表达。结果 类似人类2型糖尿病大鼠肾小球Ⅳ型胶原成分表达增强,肾皮质MMP－2基因表达减弱（P＜0．01）;其活性进行性减少（P＜0．0001）,而TIMP－2基因表达（P＜0．01）及其含量逐渐增加（P＜0．01）。结论 类似人类2型糖尿病大鼠肾组织MMP－2活性进行性降低、TIMP－2含量增加,两者比例失衡为肾小球ECM成份沉积的重要原因之一,基质降解减弱也参与了2型糖尿病大鼠肾脏病变的发生和发展。     

慢支咳喘灵对免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的 探讨慢支咳喘灵对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法 制备免疫低下功能模型小鼠，给予慢支咳喘灵，14天后进行免疫功能的测定。结果 中、高剂量的慢支咳喘灵应用后均可使免疫功能低下小鼠的体重、胸腺和脾脏重量显著增加（P〈0．05或P〈0．01），但小剂量组作用不甚明显。与模型组比较，慢支咳喘灵中、高剂量具有显著促进吞噬作用（P〈0．05或P〈0．01）；高剂量时的吞噬作用和正常对照组差异无显著性（P〉0．05），但小剂量组作用不甚明显；高、中、低3个剂量组的慢支咳喘灵对小鼠迟发型变态反应均有显著的抑制作用（P〈0．05或P〈0．01），可显著提高血清溶血素水平（P〈0．05或P〈0．01）。结论 慢支咳喘灵可提高机体的免疫功能。     

雌激素对去卵巢大鼠不同脑区酪氨酸激酶A表达的影响

目的观察内源性和外源性雌激素变化对大鼠脑内不同部位酪氨酸激酶A（TrkA）表达的影响。方法21只雌性Wistar大鼠随机分为假手术对照组、卵巢切除组（OVX组）、雌激素治疗组（E2组）。免疫细胞化学法计数海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核等部位TrkA蛋白表达阳性细胞数。放免法测量大鼠血清雌激素含量。结果与对照组比较，OVX组大鼠海马CA1区、大脑皮层区、杏仁复合体区TrkA阳性细胞数显著减少（均P〈0．01），Meynert核区无显著差异（P〉0．05），血雌激素含量明显降低（P〈0．01）；E2组脑部各区TrkA表达与OVX组比较显著增多（均P〈0．01），血清雌激素含量显著增高（P〈0．01）。结论内源性和外源性雌激素含量变化可影响大鼠脑内多部位TrkA的表达。     

英夫利昔治疗瘘管型克罗恩病的研究进展

瘘管是克罗恩病（CD）常见的一种并发症,往往导致患者生活质量明显下降.许多临床试验证实英夫利昔对瘘管型CD安全有效.对传统治疗方案无效者,早期规律给予英夫利昔可很好地控制疾病进展和复发.对单药治疗效果不佳者,联合英夫利昔和内外科治疗可提高疗效.本文就近年英夫利昔治疗瘘管型CD的研究进展作一综述.     

大黄素诱导急性胰腺炎胰腺细胞凋亡机制的实验研究

目的 从凋亡信号传导的角度探讨中药大黄素治疗大鼠急性胰腺炎的分子生物学机制。方法 将44只雄性Wistar大鼠随机分为正常组，非治疗组，大黄素组，以腹腔注射雨蛙肽物方法诱导大鼠急性胰腺炎模型。并于大黄素治疗后6，24，48，72，96小时处死大鼠。应用HE染色比较胰腺组织病理学改变，应用Tunel法检测胰腺细胞凋亡指数，应用RT-PCR技术检测治疗前后凋亡调控基因Bak和BaxmRNA表达。结果 大黄素干预治疗急性胰腺炎后96小时淀粉酶值显低于未治疗组，胰腺细胞凋亡指数显高于未治疗组，凋亡调控基因BakmRNA的表达与未治疗组之间无显性差异。而BaxmRNA的表达显高于未治疗组。结论 大黄素治疗实验性急性胰腺炎的机制可能与干预凋亡调控基因有关。诱导凋亡调控基因Bax表达增强可能是干预凋亡信号传导的重要机制，而与Bak基因表达无关。     

苯并咪唑类药物治疗包虫病研究进展

包虫病主要是由细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的幼虫引起的严重的人兽共患寄生虫病。在我国,由于受手术复发、死亡等手术水平的限制,药物治疗仍然是目前最主要的治疗方法,每年药物治疗的数量远大于手术治疗数。药物在术前缩小病灶、减轻痛苦,延长患者寿命发挥着重要作用。本文综述苯并咪唑类药物及其新剂型的动物及临床治疗包虫病现况,为探索包虫病药物治疗研究的发展方向提供依据。     

北京市某医院结核科护士压力源调查分析

目的 对结核科护士工作压力源进行调查分析.方法 自行设计调查问卷,采用便利抽样方法,对首都医科大学附属北京胸科医院88名结核科护士工作压力源进行调查.结核科护士平均年龄为（33.04±9.07）岁,工作年限（12.70±9.04）年,每月夜班数（4.25±2.25）个.本研究结核科护士工作压力源问卷分为8个维度,共有61个条目,采用分量法计分.其中,没有压力1分,压力程度一般为2分,压力程度较高为3分,压力程度非常高为4分,可能的得分范围为61～244分,分数越高,表明护士所承受的压力越大.采用问卷调查法,调查前向被调查者说明调查的目的、方法,取得知情同意.由研究者亲自发放调查问卷,30 min后当场收回.本次共发放问卷90份,回收88份,有效88份,有效回收率97.8％.结果 （1）结核科护士压力源总体得分为（154.81±36.03）分.（2）压力源各维度得分从高到低依次是：结核护理专业特殊性的问题（3.07±0.81）分;工作环境及资源方面的问题（2.88±0.81）分;工作量及时间分配问题（2.67±0.78）分;社会环境带来的问题（2.63±0.78）分;护理专业发展方面的问题（2.55±0.74）分;患者护理方面的问题（2.52±0.68）分;护理专业及工作方面的问题（2.45±0.74）分;管理及人际关系方面的问题（1.89±0.64）分.（3）得分排在前10位的压力源条目分别是：长期接触排菌、耐药肺结核患者（3.55±0.78）分;担心自己患上结核病（3.47±0.88）分;同伴被确诊患上结核病（3.36±0.89）;担心消毒防护设施的效果（3.28±0.94）分;担心工作中出现差错事故（3.21±0.95）分;工作环境差（3.18±0.92）分;病区拥挤（3.02±1.07）分;收入差距大（2.98±0.94）分;工作量太大（2.97±0.94）分;经常倒班（2.94±1.03）分.结论 结核科护士承受着较高的工作压力,护理管理者应采取有针对性的措施,指导护士积极应对,减轻护士工作压力.     

Role of xanthine oxidoreductase in the anti-thrombotic effects of nitrite in rats in vivo

The mechanisms underlying nitrite-induced effects on thrombosis and hemostasis in vivo are not clear. The goal of the work described here was to investigate the role of xanthine oxidoreductase (XOR) in the anti-platelet and anti-thrombotic activities of nitrite in rats in vivo. Arterial thrombosis was induced electrically in rats with renovascular hypertension by partial ligation of the left renal artery. Sodium nitrite (NaNO₂, 0.17?mmol/kg twice daily for 3 days, p.o) was administered with or without one of the XOR-inhibitors: allopurinol (ALLO) and febuxostat (FEB) (100 and 5?mg/kg, p.o., for 3 days). Nitrite treatment (0.17?mmol/kg), which was associated with a significant increase in NOHb, nitrite/nitrate plasma concentration, resulted in a substantial decrease in thrombus weight (TW) (0.48?±?0.03?mg vs. vehicle [VEH] 0.88?±?0.08?mg, p?p?ex vivo using collagen-induced whole-blood platelet aggregation (70.5?±?7.1% vs. VEH 100?±?4.5%, p?2 generation was fully reversed by both XOR-inhibitors. In addition, nitrite decreased plasminogen activator inhibitor-1 concentration (0.47?±?0.13?ng/ml vs. VEH 0.62?±?0.04?ng/ml, p?In vitro the anti-platelet effect of nitrite (1?mM) was reversed by FEB (0.1?mM) under hypoxia (0.5%O₂) and normoxia (20%O₂). Nitrite treatment had no effect on coagulation parameters. In conclusion, the nitrite-induced anti-platelet effect in rats in vivo is mediated by XOR, but XOR does not fully account for the anti-thrombotic effects of nitrite.     

Patterns of in vitro BFU-E proliferation in different forms of polycythaemia and in thrombocythaemia

To investigate erythroid colony formation in polycythaemia of different types and in thrombocythaemia, a study was performed in 121 subjects, including 13 normal volunteers (N), 30 patients with Primary Proliferative Polycythaemia (PPP), 35 with Idiopathic Erythrocytosis (IE), 19 with Secondary Polycythaemia (SP), 10 with Primary Thrombocythaemia (PT) and 14 with Secondary Thrombocytosis (ST); BFU-E colony formation from peripheral blood samples was studied in the presence of medium only, medium plus a source of burst-promoting activity (BPA) and medium BPA, plus erythropoietin (Ep). In the presence of medium only, practically no colonies were seen in cultures from N and SP, while a variable number was observed in cultures from PPP, IE and PT. Significant differences between groups were as follows: N v PPP; IE v PPP; SP v PPP; N v PT; ST v PT. Such differences persisted in the presence of BPA, but disappeared when Ep was added to the cultures. Further experiments, plating non-adherent mononuclear cells in a chemically defined serum-free medium, confirmed the growth of tiny erythropoietic colonies from circulating stem cells of patients with PPP and PT, in the absence of BPA and EP. These results provide a useful criterion to differentiate PPP, as a group, from other types of polycythaemia; individual cases of IE may need further characterization.