PCR快速诊断结核性脑膜炎的初步研究

采用PCR技术检测脑脊液中结核杆菌DNA,可早期、快速诊断结核性脑膜炎。本文对20例临床诊断为结核性脑膜炎患者的脑脊液作了PCR检测和结核杆菌培养,阳性率分别为50%和15%,二者相比具有较显著差异(P<0,025)。非结脑组PCR、培养均为阳性。并对5例结脑患者进行动态观察,2例经抗痨治疗后PCR仍为阳性,证明PCR具有敏感、特异、快速等优点。     

斑点酶免疫渗滤法抗体检测对结核性脑膜炎诊断价值的评估

脑脊液(CSF)检查有助于准确诊断结核性脑膜炎(TBM).我们将CSF涂片找抗酸杆菌、PCR扩增结核杆菌DNA和金标抗体试剂盒检测IgG设为对照,评价用重组结核分支杆菌38000蛋白作抗原所建立的斑点酶免疫渗滤法(DIEFA)快速检测CSF抗体的价值,报告如下.     

ELISA法检测结核性脑膜炎脑脊液中抗-BCG或抗-PPD水平

本研究用酶联免疫吸附试验(ELISA)对结核性、病毒性、隐球菌性脑膜炎及对照组脑脊液中牛型卡介苗结核杆菌(BCG)及PPD的IgG抗体进行了测定。结果显示抗-BCG与抗PPD水平呈正相关。研究发现,抗-BCG和抗-PPD水平在结核性脑膜炎组、非结核性脑膜炎组及对照组之间差异显著。如果以OD值0.16作为诊断结核性脑膜炎的标准,灵敏度达83.6%,特异性达97.6%,阳性预告值93.7%。所以本法对结核性脑膜炎早期诊断较为有用。     

T-SPOT-TB检测法在结核性脑膜炎早期诊断中的应用分析

目的探究结核感染T细胞斑点检测法(T-SPOT-TB)在结核性脑膜炎早期诊断中的应用价值。方法选取2014年5月至10月甘孜州人民医院收诊的结核性脑膜炎疑似患者36例进行研究,对患者行T-SPOT-TB检测、脑脊液结核抗体、脑脊液抗酸染色及脑脊液结核杆菌培养试验(金标准)、结核菌素试验检测,观察对比各种检测方法下患者阳性检出率,计算各检测方法灵敏度、特异度及准确度。结果 T-SPOT-TB灵敏度为93.9%,特异度为100%,准确度为97.0%。脑脊液结核抗体检测灵敏度为81.8%,特异度为100%,准确度为90.9%。脑脊液抗酸染色灵敏度为42.4%,特异度为100%,准确度为71.2%。结核菌素试验灵敏度为78.8%,特异度为100%,准确度为89.4%。结论 T-SPOT-TB检测法能够简便、快捷地为结核性脑膜炎患者的诊断提供科学有效的依据,其临床价值高,值得进一步的推广使用。     

结核性脑膜炎的诊治探讨

目的:研究结核性脑膜炎的临床表现和各项实验室检查结果对结核性脑膜炎的诊断价值,并探讨其治疗,尤其是重症结核性脑膜炎的治疗。方法:对1998年至2005年收治的46例结核性脑膜炎进行了回顾性的研究。结果:46例病人在肺部均可发现结核病灶,其中以发热、头痛起病45例,32例脑脊液白细胞10×106/L～500×106/L,34例蛋白1.0g/L～5.0g/L,糖降低21例,氯化物降低27例。24例聚合酶链反应(PCR)检测结核菌DNA(TB DNA),阳性19例。46例治疗好转44例,2例死亡。结论:由于脑脊液中找到结核杆菌的阳性率较低,结核性脑膜炎的诊断仍需综合各方面的临床资料。治疗方面宜注意控制颅内高压,对于陷入重度昏迷的重症患者宜行颅骨钻孔脑脊液引流及冲洗。     

PCR快速检测脑脊液中的结核杆菌及其临床意义

结核性脑膜炎是神经系统常见的感染性疾病。由于临床表现复杂 ,常因早期诊断和治疗不及时而危及生命。传统的脑脊液 (ＣＳＦ)常规病原学检测方法 ,达不到早期快速诊断的目的。近年来 ,随着分子生物学诊断技术的发展和应用 ,使结核菌和实验诊断由常规的表型鉴定向基因型诊断发展。聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术 ,可在较短的时间内将极微量的ＤＮＡ片段扩增至百万倍 ,将ＰＣＲ技术应用于结核性脑膜炎的快速诊断具有重要的现实意义[1 ] 。本研究根据人型结核杆菌异性基因序列设计一对引物 ,用于快速检测ＣＳＦ中的结核杆菌 ,并同时用直接涂片染色…     

三种快速实验室检测技术在儿童结核性脑膜炎早期诊断中的价值

目的评价三种快速实验室检测技术对儿童结核性脑膜炎的早期诊断价值。方法收集沈阳市胸科医院2017年6月～2019年12月收治的疑诊儿童结核性脑膜炎病例52例,分别进行血T-SPOT.TB、脑脊液LAMP和脑脊液Xpert MTB/RIF检测。结果采用SPSS18.0软件进行统计分析,计算三种检测方法在诊断结核性脑膜炎的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、一致率。结果在52例患者中,血T-SPOT.TB诊断结核性脑膜炎的敏感度为93.75%,特异度8.33%,阳性预测值31.25%,阴性预测值75.00%,一致率34.62%。脑脊液LAMP诊断结核性脑膜炎的敏感度为81.25%,特异度75.00%,阳性预测值59.09%,阴性预测值90.00%,一致率76.92%。脑脊液Xpert MTB/RIF诊断结核性脑膜炎的敏感度为87.50%,特异度88.89%,阳性预测值77.78%,阴性预测值94.12%,一致率88.46%。结论血T-Spot、脑脊液LAMP和脑脊液Xpert MTB/RIF检测对儿童结核性脑膜炎的早期诊断具有一定的价值,值得临床推广。     

成人脑脊液乳酸含量测定在结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎鉴别诊断中的意义

目的分析脑脊液中乳酸含量在结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎鉴别诊断中的意义,总结诊断经验。方法选取2014年7月~2016年7月本院神经内科收治结核性脑膜炎患者30例,病毒性脑膜炎患者30例,行脑脊液乳酸水平监测,进行数据分析。结果初次及第2次脑脊液检查,结核性脑膜炎组脑脊液乳酸高于病毒性脑膜炎组,结核性脑膜炎组GCS评分低于病毒性脑膜炎,差异有统计学意义(P0.05)。初次检查结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎脑脊液乳酸与GCS评分存在相关性,第2次检查结核性脑膜炎存在相关性(P0.05)。第1次脑脊液乳酸鉴别诊断结核性脑膜炎以及病毒性脑膜炎灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率均高于第2次,差异有统计学意义(P0.05)。结论脑脊液中乳酸含量在结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎鉴别诊断中有较高的价值,特别是初次检查结果,需要及早进行分析,脑脊液中乳酸含量还与疾病严重程度关系密切。     

结核性脑膜炎脑脊液中结核杆菌DNA的检测

我们采用聚合酶链式反应（PCR）方法直接将结核菌染色体中的一段核音酸作为靶DNA进行扩增来检测结核杆菌，并对临床诊断为结核性脑膜炎的患者进行了检测。现报告如下。l材料和方法11标本来源27份脑脊液（CSf）标本来自本院神经科经临床表现、体征检查及CSf细胞和生化检查确诊为结核性脑膜炎患者。巨·2制剂和仪器结核杆菌PCR检测试剂盒购于华美生物制品研究所。PCR扩增仪为美国生产的PTC－150。2实验方法2．l标本预处理取lmlcsf置于Eppendorf管中，14000rPn。离心smln，弃上清，沉淀用无菌生理盐水洗涤1次后，加人含0lmol／LNaOH…     

结核性脑膜炎临床与脑脊液检测结果74例分析

目的探讨脑脊液实验检测在诊治结核性脑膜炎中的临床意义。方法对74例结核性脑膜炎的脑脊液检测结果结合临床进行回顾性分析。结果 74例病例中脑脊液糖降低占66.2%,氯化物降低占71.6%;中性粒细胞多在急性期或病情严重者出现,慢性期及恢复期以淋巴细胞为主。结论脑脊液中发现结核杆菌可确诊本病,糖、氯化物同时降低为结核性脑膜炎的典型改变,脑脊液实验检测是重要的辅助诊断手段。     

聚合酶链反应诊断结核性脑膜炎的再评价

目的：评价聚合酶链反应对结核性脑膜炎的诊断意义。方法：收集１５例连续结核性脑膜炎２６例次的脑脊液标本，以常规热变性提取结核杆菌ＤＮＡ，放在反应体系中进行扩增，引物选择２４０ｂｐ片段，并以４８例同时期的非线性结核性离膜多炎患者５８例次为对照组，结果：敏感性５０％，早期敏感性６０％，特异性８７．９％，似然比４．１３，结论；本实验结果没有达到文献报道的理想程度，优于传统方法，需克服技术和材料方面的问题，     

GeneXpert MTB/RIF检测结核性脑膜炎患者脑脊液标本的临床应用价值

目的 探讨GeneXpert MTB/RIF（以下简称“GeneXpert”）检测结核性脑膜炎患者的脑脊液应用价值。方法 选取2014 年12 月至2019 年12 月在沈阳市第十人民医院住院治疗的初诊为结核性脑膜炎患者120 例作为研究对象,收集患者的脑脊液标本,进行脑脊液抗酸杆菌涂片检测、脑脊液结核分枝杆菌960 培养及脑脊液GeneXpert 检测,分析GeneXpert 的检测效能。结果 脑脊液抗酸杆菌检测阳性9 例,阴性111 例;脑脊液结核分枝杆菌960 培养阳性40 例,阴性80 例;脑脊液GeneXpert 检测阳性39 例,阴性81 例。以脑脊液涂片为标准,GeneXpert检测的灵敏度及特异度分别为100.00%和72.97%;以脑脊液960 培养为标准,GeneXpert 检测的灵敏度及特异度分别为97.50%和100.00%;以临床诊断为标准,GeneXpert 检测的灵敏度及特异度分别为95.12%和100.00%。结论 脑脊液GeneXpert 检测灵敏度和特异度较高、检测时间短,有利于临床早期诊断结核性脑膜炎。     

SPA—ELISA法检测csf中结核抗体在结脑早期诊断中的应用

<正> 结核性脑膜炎(简称结脑)的早期诊断比较困难,由于疾病早期临床表现和脑脊液的早期变化不典型,x线仅用于有无脑外结核的检查,所以较难与病毒性脑膜炎、化脓性脑膜炎相鉴别。尽管从csf中找到结核杆菌即可确定诊断,但阳性率太低,因此结脑的误诊     

多重聚合酶链反应快速检测脑膜炎中的病原体

目的 建立脑膜炎多重PCR检测系统,以在一次扩增中快速、特异地同时检出新型隐球菌、结核杆菌、脑膜炎双球菌,用于脑膜炎病原体感染的快速诊断。方法 根据新型隐球菌URA保守序列、脑膜炎双球菌基因组中特定的H.8外膜蛋白基因序列、结核分枝杆菌基因组中的IS986插入基因序列片段,分别设计出3对特异性寡聚核苷酸引物,采用多重PCR技术,同时检出脑脊液中的新型隐球菌、结核杆菌、脑膜炎双球菌。结果 应用多重PCR反应体系,对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果：我重PCR扩增的预期结果为：单一菌感染出现一条特异性扩增区带;混合感染应出现2条或3条特异性扩增区带,经实验达到预期的扩增结果;对15份已明确诊断的脑脊液标本,分法均能扩增出预期的目的片段。符合率达100%,对20例临床脑脊液标本的PCR扩增结果分别为：新型隐球菌15%（3/20）、结核肝菌20%（5/20）、脑膜炎双球菌10%（2/20）。结论 多重PCR有效地为临床病原体的混合感染,以及原因不明的脑膜炎患的快速诊断,提供了快速、准确的诊断手段。有效地减少了脑膜炎的误诊和漏诊,更提高了检验效率。     

脑脊液腺苷脱氨酶测定对诊断小儿结核性脑膜炎的意义

目的探讨脑脊液腺苷脱氨酶（ADA）测定对小儿结核性脑膜炎诊断的临床意义. 方法对确诊的37例结核性脑膜炎、38例化脓性脑膜炎、40例病毒性脑炎及40例非脑炎患儿采用全自动生化分析仪检测脑脊液ADA. 结果结核性脑膜炎患儿脑脊液ADA明显高于其它各组,差异有统计学意义.以ADA＞8U/L作为阳性阈值,诊断结核性脑膜炎的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值分别为81.1%、98.3%、94.2%、93.8%、94.4%. 结论脑脊液腺苷脱氨酶可作为诊断小儿结核性脑膜炎的重要参考指标.     

微波-碱性非离子型表面活性剂-氯仿法用于结核性脑膜炎脑脊液模板处理的效果观察

目的 观察微波-碱性非离子型表面活性剂-氯仿法用于结核性脑膜炎脑脊液模板处理的效果。方法 建立微波-碱性非离子型表面活性剂-氯仿法用于结核性脑膜炎脑脊液模板处理,并与简易氯仿法、碱性非离子型表面活性剂法和经典酚氯仿法比较;用PCR抑制物实验确定脑脊液中抑制PCR反应的成分。结果 同一份结核杆菌培养阳性的脑脊液样本微波-碱性非离子型表面活性剂-氯仿法检出的最低稀释度为1：8,简易氯仿法为1：4,碱性非离子型表面活性剂法和经典酚氯仿法均为1：2;结核杆菌阳性脑脊液上清液抑制PCR反应,氯仿抽提可去除抑制物。结论 微波-碱性非离子型表面活性剂-氯仿法处理模板可有效提高结核杆菌IS6110 PCR扩增的敏感性。     

应用聚合酶链反应快速诊断结核性脑膜炎

应用聚合酶链反应快速诊断结核性脑膜炎中国医科大学第二临床学院（１１０００３）郭津津，房荣庄，郭阳朝阳市结核病防治院梁志津沈阳市第一结核病院张革平结核性脑膜炎的早期诊断有赖于从脑脊液中检出结核杆菌，传统的涂片抗酸染色法阳性率低，特异性差。常规培养法需８...     

脑脊液环介导等温扩增和GeneXpert MTB/RIF在结核性脑膜炎早期诊断中的效能分析

目的分析和比较脑脊液环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)和GeneXpert MTB/RIF(简称GeneXpert)在结核性脑膜炎早期诊断中的效能。方法选取沈阳市胸科医院2018年6月～2019年6月疑诊结核性脑膜炎的患者189例,采集患者抗结核治疗前的脑脊液标本分别进行液体培养(MGIT)、LAMP和GeneXpert检测。以液体培养法(MGIT)为标准,计算2种检测技术在结核性脑膜炎诊断中的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、一致率、Kappa值。结果 LAMP的敏感度为79.6%,特异度为94.3%,阳性预测值为83.0%,阴性预测值93.0%,一致率90.5%,Kappa值=0.749。GeneXpert的敏感度为98.0%,特异度为88.6%,阳性预测值为75.0%,阴性预测值为99.2%,一致率为91.0%,Kappa值=0.787。结论 LAMP和GeneXpert对结核性脑膜炎检测的灵敏度较液体培养(MGIT)明显提高,可以在一定程度上提高临床医生对疑似结核性脑膜炎患者的诊治能力,值得在基层结核病院实验室广泛推广。     

IL-33和ADA水平在结核性脑膜炎病程中的动态变化及意义

目的 探讨白细胞介素-33(IL-33)、腺苷脱氨酶(ADA)水平在结核性脑膜炎病程中的动态变化及意义.方法 选取2017年3月至2019年2月该院结核内科收治的176例脑膜炎患者为研究对象.其中结核性脑膜炎患者46例为结核性脑膜炎组,化脓性脑膜炎患者48例为化脓性脑膜炎组,病毒性脑膜炎患者39例为病毒性脑膜炎组.以头痛为主诉而脑脊液正常患者43例为头痛症状组.采用ELISA法检测各组患者脑脊液IL-33、ADA水平,Pearson进行相关性分析,受试者工作特征(ROC)曲线分析诊断价值.结果 结核性脑膜炎组患者脑脊液中IL-33、ADA水平明显高于化脓性脑膜炎组、病毒性脑膜炎组、头痛症状组(P<0.05).治疗6周后结核性脑膜炎患者脑脊液中IL-33、ADA水平明显低于治疗4周后、治疗2周后、入院当天(P<0.05).结核性脑膜炎患者脑脊液中IL-33与ADA水平呈正相关(P<0.05).IL-33、ADA联合鉴别诊断结核性脑膜炎的曲线下面积(AUC)为0.870(95％CI:0.790～0.949),特异度为95.8％,灵敏度为76.1％.结论 脑脊液IL-33、ADA水平可作为鉴别诊断结核性脑膜炎及病情好转的参考指标.     

IL-33和ADA水平在结核性脑膜炎病程中的动态变化及意义

目的 探讨白细胞介素-33(IL-33)、腺苷脱氨酶(ADA)水平在结核性脑膜炎病程中的动态变化及意义.方法 选取2017年3月至2019年2月该院结核内科收治的176例脑膜炎患者为研究对象.其中结核性脑膜炎患者46例为结核性脑膜炎组,化脓性脑膜炎患者48例为化脓性脑膜炎组,病毒性脑膜炎患者39例为病毒性脑膜炎组.以头痛为主诉而脑脊液正常患者43例为头痛症状组.采用ELISA法检测各组患者脑脊液IL-33、ADA水平,Pearson进行相关性分析,受试者工作特征(ROC)曲线分析诊断价值.结果 结核性脑膜炎组患者脑脊液中IL-33、ADA水平明显高于化脓性脑膜炎组、病毒性脑膜炎组、头痛症状组(P<0.05).治疗6周后结核性脑膜炎患者脑脊液中IL-33、ADA水平明显低于治疗4周后、治疗2周后、入院当天(P<0.05).结核性脑膜炎患者脑脊液中IL-33与ADA水平呈正相关(P<0.05).IL-33、ADA联合鉴别诊断结核性脑膜炎的曲线下面积(AUC)为0.870(95％CI:0.790～0.949),特异度为95.8％,灵敏度为76.1％.结论 脑脊液IL-33、ADA水平可作为鉴别诊断结核性脑膜炎及病情好转的参考指标.