生殖股神经对单侧隐睾睾丸组织INSL3基因表达的影响

目的:研究生殖股神经(GFN)在单侧隐睾动物模型中,对睾丸组织中胰岛因子3(INSL3)基因表达的影响。探讨GFN在单侧隐睾对侧睾丸损害的可能机制。方法:通过注射17-β雌二醇获得隐睾大鼠动物模型,取单侧隐睾大鼠12只设为A组;另取12只单侧隐睾大鼠在出生后第30天切断隐睾侧GFN设为B组;双侧隐睾大鼠10只设为C组;10只正常大鼠设为对照D组。在第8周采集各组大鼠血清,放射免疫法测血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡激素浓度(FSH)。睾丸组织用Trazol法提取总RNA,通过RT-PCR和Northernblot检测INSL3基因mRNA表达水平。结果:隐睾大鼠血清T水平下降;A、B两组血清LH升高,B组较A组升高明显(P<0.05);A、B两组隐睾侧INSL3 mRNA表达量低于D组(P<0.05);B组正常侧睾丸表达量高于A组(P<0.05)。结论:INSL3基因表达量在单侧隐睾睾丸组织中降低,GFN可能是影响INSL3基因表达水平,从而造成对侧已降睾丸的生精功能的损害。     

两种手术方式对小儿隐睾治疗效果的影响研究

目的:探讨两种手术方式对小儿隐睾治疗效果的影响。方法:选取80例(101侧)隐睾患儿,随机分为观察组40例(51侧)和对照组40例(50侧),观察组采用经腹股沟皮纹横切口治疗小儿隐睾,对照组采用传统腹股沟大斜切口手术治疗,观察两组患儿临床疗效。结果:观察组的40例(51侧)出院时睾丸均位于阴囊内,其中12例(15侧)术前高位隐睾患儿术后睾丸位于阴囊中部,其余睾丸位于阴囊底部,未发现睾丸萎缩;与对照组的40例(50侧)隐睾疗效相当,创伤小,恢复快。结论:采用经腹股沟皮纹横切口治疗小儿隐睾创伤小,手术快,术后切口瘢痕不明显,外形美观,疗效满意,值得推广运用。     

邻苯二甲酸二丁酯致大鼠隐睾睾丸和附睾病理组织学改变研究

目的：邻苯二甲酸二丁酯（DBP）孕晚期染毒诱导子代雄鼠隐睾的发生和探讨隐睾睾丸、附睾病理组织学的改变。方法：孕鼠40只，随机分组，在怀孕14-18天期间，每天分别灌胃给予大豆油（A组）、DBP100mg／kg（B组）、500mg／kg（C组）、800mg／kg（D组）。出生70天后观察雄仔鼠隐睾发生率及隐睾睾丸、附睾病理组织学改变。结果：C、D组雄仔鼠隐睾发生率为10．8％和63．5％；隐睾睾丸、附睾的脏器系数显著减轻；睾丸生精上皮萎缩，生精细胞层减少甚至消失，曲精小管体积减小；同时附睾管腔中精子缺如。电镜下隐睾睾丸中出现异常的支持细胞。结论：睾丸是DBP主要作用的靶器官；中、高剂量DBP孕晚期染毒可致雄仔鼠隐睾的发生、睾丸生精上皮的损害，从而影响其生育能力。     

Semen Quality in Infertile Men with a History of Unilateral Cryptorchidism

Objective To evaluate semen quality in infertile men with a history of unilateral cryptorchidism Methods Semen samples were obtained from 47 infertile men with a history of unilateral cryptorchidism. Semen analysis and membrane integrity including both eosin Y stain and hyo-osmotic swelling tests were performed using standard procedures. All men were divided into three groups according to their age at surgery of orchidopexy as follows： group A, 2-7 years （n=23）, group B, 8-13 years （n=14） and group C, 14-17years （n=10）. Results There was wide range for sperm count and motility for all the subjects studied. Majority of men had high percentage of abnormal sperm morphology. Among the three groups of men, group A and B had significantly higher sperm count, motility and membrane integrity than that of group C. Group C also had the highest frequency of oligoasthenoteraozoospermia （50%） than group A （17%） and group B （35%）. Conclusion Semen quality of men with a history of unilateral cryptorchidism appears to be related to their age of performing orchidopexy. Surgery at early age of childhood may improve spermatogenesis which results in better semen quality in adulthood.     

视黄酸对隐睾生精细胞增殖分化及减数分裂的 作用及其机制研究

目的 探讨视黄酸对隐睾生精细胞增殖分化及减数分裂的作用及其机制。方法 将30 只SD 孕 鼠随机分为3 组,每组10 只,取子代雄鼠进行研究。对照组常规饲养不给任何药物或试剂;模型组采用雄激 素拮抗剂氟他胺（Flu）复制隐睾大鼠模型;干预组在模型组基础上,在子代雄鼠生精细胞发育时期予以视黄 酸干预。采用TUNEL 法检测生精细胞的凋亡,免疫组织化学法观察睾丸组织中c-Kit、Stra8、Scp3 蛋白的 表达,qRT-PCR 检测睾丸组织中Stra8、c-Kit、Scp3 mRNA 的表达,Western blotting 检测睾丸组织中Stra8、 Scp3、c-Kit 和PLZF 蛋白的表达。结果 免疫组织化学结果显示,对照组和干预组中可见大量精子细胞排列 整齐;而模型组睾丸各级生精细胞数目减少、排列紊乱,且曲细精管管腔缩窄。TUNEL 检测结果显示,与对 照组和干预组比较,模型组可见大量生精细胞凋亡。对照组和干预组凋亡指数低于模型组（P <0.05）。对照 组和干预组Stra8、c-Kit、Scp3 mRNA 和蛋白相对表达量高于模型组（P <0.05）。对照组和干预组PLZF 蛋 白相对表达量高于模型组（P <0.05）。结论 视黄酸促进生精细胞发育的作用机制可能与调控隐睾生精细胞 增殖分化及减数分裂有关,可一定程度上恢复隐睾大鼠的生殖功能。     

一种新的大鼠隐睾模型的建立

目的 改善大鼠隐睾模型的制作方法,提高隐睾模型的质量,并对新模型的稳定性进行研究.方法 28只大鼠随机分为对照组(ctrl)和模型组(modl)采用模拟失重大鼠模型,对大鼠进行3周尾部悬吊进行造模,随后模型组大鼠解悬吊恢复8周观察该模型的稳定性.结果 经过3周的尾部悬吊,模型组所有大鼠睾丸均滑入腹腔,同时和对照组相比,睾丸和附睾的重量出现极显著的降低(P＜0.01).HE染色发现对照组大鼠睾丸的生精小管结构排列紊乱,精原细胞消失,附睾尾中成熟精子消失.经过8周的恢复,大鼠的睾丸及附睾仍未恢复到正常水平(P＜0.01),HE染色显示其生精小管结构和精原细胞数量并未出现明显的改善.结论 尾吊法所建立的大鼠隐睾模型效果稳定,可以有效模拟大鼠隐睾时的睾丸温度变化情况,同时对大鼠的伤害较小,操作比较简单.     

PIAS2蛋白在不同病理分型的无精子症患者睾丸组织中的表达

目的:探讨PIAS2在不同生精功能状态的人睾丸组织中的表达情况。方法:对80例无精子症患者进行睾丸组织病理检查诊断,根据病理形态的不同分为：生精功能正常或基本正常(n=40)、精子发生低下(n=20)、唯支持细胞综合征(n=20)等。选择上述各型结构完整的睾丸组织,分别应用免疫组化法(SP)对PIAS2在不同生精功能状态的睾丸组织进行研究。结果:PIAS2在各级生精细胞多为强阳性表达,呈深棕黄色;PIAS2在间质细胞及支持细胞表达弱阳性表达或不表达。结论:PIAS2染色强弱与睾丸生精功能的强弱有一定关系,是一个潜在的判断睾丸生精功能的指标。     

重症手足口病患儿血清神经元特异性烯醇化酶的变化

目的 研究重症手足口病患儿血清神经元特异性烯醇化醇的变化,为治疗提供科学依据.方法 收集2009年4月至2009年6月收治的手足口病患儿40例,单纯隐睾或斜疝儿童20例.分为手足口病普通病例组20例,手足口病重症病例组20例和对照组20例.手足口病重症病例组出现神经系统受累,但无心肺功能损害.入院第1天及第2天分别子静...     

单侧隐睾复位大鼠血清性激素及抗精子抗体的检测

目的探讨单侧隐睾复位大鼠血清性激素及抗精子抗体(AsAb)的水平。方法将21日龄SD雄性大鼠48只随机分为假手术组和单侧隐睾组各24只,2周后行隐睾大鼠睾丸下降固定术,于40日龄、60日龄采集血清后处死。采用ELISA间接法测定血清AsAb水平。用放射免疫方法测血清雌二醇(E2)、睾酮(T)水平。结果40日龄、60日龄时2组血清E2和T水平比较均无显著差异(P>0.05);2组60日龄时的E2、T水平均较40日龄时显著增高(P<0.05)。单侧隐睾组大鼠40日龄、60日龄时血清AsAb IgG、IgA、IgM水平均显著高于假手术对照组(P<0.05);60日龄时隐睾组大鼠血清AsAb水平高于40日龄(P<0.05),而假手术组血清AsAb水平无显著差异(P>0.05)。单侧隐睾组大鼠AsAb的检出率明显高于假手术组(P<0.01)。结论隐睾大鼠行睾丸下降固定术后,存在高雌激素血症;AsAb产生可能是导致男性不育的原因之一。     

睾丸皮下埋藏对精子发生影响的可逆性探讨

目的 探讨新西兰大白兔睾丸皮下埋藏导致精子发生障碍后,将埋藏之睾丸放回正常阴囊内其精子发生障碍是否可逆.方法 育龄期雄性新西兰大白兔42只,曾有过生育史的雌性12只,将雄兔应用随机数字表法完全随机分成3组:空白组(12只);双埋组(双侧睾丸埋藏组12只);单埋组(单侧睾丸埋藏组18只).双埋组将睾丸埋藏于两侧腹股沟区皮下;单埋组将一侧睾丸置于腹股沟区皮下,另一侧睾丸保留在阴囊内;空白组不作任何处理.模型成功后第9周空白组、双埋组、单埋组分别随机取6只进行睾丸活检,均行HE染色及采用TUNEL法检测生精细胞凋亡情况,同时对空白组及双埋组的剩余6只与分别与雌兔一一配对喂养观察生育情况.同期将单埋组未取活检的12只动物的未处理侧睾丸从正常阴囊内移出埋藏至同侧腹股沟区皮下,而将前期埋藏之睾丸放回刚移走睾丸的对侧正常阴囊内.单埋组睾丸放回阴囊后第4周及第9周分别对放回阴囊之睾丸取6只取活检,HE染色及TUNEL法检测生精细胞凋亡情况.结果 与空白组相比双埋组模型建立后第9周的HE染色见曲细精管内生精细胞明显减少,排列紊乱,管腔内未见精子;TUNEL法检测结果显示精原细胞也有明显凋亡征象,生精细胞凋亡指数(apoptotic index,AI)明显高于空白组(P<0.05);配对喂养雌兔均无生育,生育率明显低于空白组(P<0.05).单埋组模型建立后第9周埋藏之睾丸活检HE染色结果与双埋组相似,TUNEL法检测结果生精细胞的凋亡指数与双埋组相比较差异无统计学意义.埋藏睾丸放回阴囊术后第9周的HE染色示曲细精管内生精细胞层数增多,可见成熟精子,凋亡指数与双埋组比较明显降低.结论 睾丸皮下埋藏与皮瓣重建阴囊一样会导致睾丸精子发生障碍,但这种损害是可逆的.     

Expression profile of a novel germ cell-specific gene,TSCPA, in mice and human

In order to identify novel genes involved in spermatogenesis, testis cDNA samples from Balb/C mice of different postnatal days were hybridized with the whole mouse genome Affymetrix chip to screen the testis-specific genes. The characteristics of the selected genes were analyzed by RT-PCR as well as other bioinformatic tools. A novel differentially expressed testis-specific gene （GenBank Accession No： NM_029042） in the developmental stages of testes was identified, and named TSCPA. Cellular mapping prediction of TSCPA indicated that its protein was probably expressed in nuclei, and one putative domain （aa 332 377） was anchoring domain of cAMP-dependent type Ⅱ PK. The result of subcellular localization of GFP-TSCPA fusion protein in Cos-7 cells showed that TSCPA protein was expressed in nuclei. RT-PCR analysis revealed that TSCPA was expressed specifically in mouse and human testis. TSCPA gene was expressed weakly in 21-day-old mouse testis and the expression was increased gradually from 38th day to 6th month of mouse testes. No expression of hTSCPA was found in cryptorchidism and Sertoli-cell-only syndrome patients. It was concluded that the expression profile of TSCPA in human and mice indicated that TSCPA might play an important role in spermatogenesis.     

TAB2基因多态性与中国西南汉族人群隐睾症易感性的相关性研究

  目的  初步探讨TAB2（transforming growth factor-beta activated kinase 1 binding protein 2）基因与中国西南地区汉族人群隐睾症发病的相关性。  方法  选取西南地区259名隐睾患者和355名成年男性健康对照,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析方法,对TAB2基因的3个标签单核苷酸多态性位点（tag single nucleotide polymorphism, tag SNP）rs237028、rs521845、rs652921进行基因分型,并采用卡方检验分析3个tag SNP位点与隐睾症发病的关系。  结果  本实验的3个tag SNP位点基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡,限制性酶切实验分型结果与Sanger测序结果一致。TAB2 rs237028位点的G等位基因在隐睾组中的频率高于对照组（30.9% vs. 25.6%,P=0.04,OR=1.31,95%CI:1.01～1.70）,在显性遗传模型中AG/GG基因型携带者罹患隐睾症的风险升高（P=0.006,OR=1.57,95%CI:1.14～2.17）。在隐睾组中rs652921位点的TC/CC基因型频率高于对照组,差异有统计学意义（75.3% vs. 67.0%,P=0.03;OR=1.50,95%CI:1.05～2.14）。未观察到rs521845与中国人群隐睾遗传易感性的相关性。  结论  TAB2基因rs237028的AG/GG基因型和rs652921的TC/CC基因型可能与中国西南地区汉族人群罹患隐睾症的风险性增加相关。     

小儿隐睾89例诊治临床分析

目的:探讨小儿隐睾的合理诊治方法,以减少并发症的发生。方法:89例小儿隐睾症,对其中16例<2岁和3例B超发现睾丸体积过小的3例患儿进行人绒毛膜促性腺激素(HCG)治疗,每次1500U肌肉注射,每周2次,总剂量15000U。对经HCG治疗失败以及年龄>2岁的患儿采用手术治疗。结果:9例患儿HCG治疗1个疗程后睾丸降至阴囊;7例经HCG治疗睾丸未降至阴囊,但睾丸比注射前增大。经手术治疗的患儿中76例1次手术完成,3例分2次手术,睾丸缺如1例;3例睾丸过小的患者尽管睾丸未降到阴囊,但是睾丸比注射前明显增大;本组中未发现癌变,无睾丸坏死及睾丸切除,无睾丸回缩等并发症。结论:尽早采取合理的治疗方法是有效治疗小儿隐睾、减少并发症的关键。     

热应激对大鼠睾丸Bcl-2和Bax表达的影响

目的研究热应激对大鼠睾丸B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X(Bcl-2 associated X,Bax)表达的影响。方法42天龄24只雄性SD大鼠建立单侧隐睾作为热应激处理的模型,随机选取16只大鼠建立左侧隐睾作为热应激处理的模型,其余8只将左侧睾丸还纳入阴囊后关腹作为假手术组。术后第3天和第7天分别采用RT-PCR和免疫组织化学SABC方法检测热应激处理后睾丸Bcl-2、Baxm RNA和蛋白表达的变化。结果与假手术组睾丸相比,热应激后第7天睾丸生精上皮和睾丸间质细胞内Bax mRNA和蛋白表达增高,而Bcl-2 mRNA蛋白在热应激后第3天表达明显降低,差异有显著性(P<0.05)。结论热应激能导致睾丸内Bax表达增高,Bcl-2表达降低,从而促进生精细胞凋亡增加。     

黄芩苷对脑缺血-再灌注小鼠纹状体Bax和Bcl-2蛋白表达影响

目的探讨黄芩苷对脑缺血－再灌注损伤小鼠脑纹状体神经细胞的Bax／Bcl-2表达水平的影响．方法昆明小鼠30只,随机分为假手术组（n=10）、再灌注组h=10）及黄芩苷组（n=10）．夹闭小鼠颈总动脉方式建立脑缺血模型,免疫蛋白印记法检测Bax和Bcl-2表达及其比值变化．结果在脑缺血-再灌注损伤4d后,Bcl-2与Bax表达都上调,黄芩苷预处理可以下调小鼠脑组织纹状体区神经细胞Bax的表达水平,降低Bax／Bcl-2比值（P〈0．05）．结论黄芩苷能够下调Bax／Bcl-2的比值,可能对脑缺血-再灌注损伤具有抗神经元凋亡保护的作用．     

代谢综合征大鼠不同组织血管紧张素转换酶2的表达

目的：探讨代谢综合征（MS）模型大鼠心脏、血管内皮、肺、肝、胰腺、肾、睾丸和脑组织血管紧张素转换酶2（ACE2）的表达.方法：20只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和果糖诱导MS组,每组10只.6wk后测定三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、胰岛素敏感指数（ISI）、内脏脂肪/体质量、体质量指数（Lee′sindex）、口服糖耐量（OGTT）为指标,判断造模成功情况.用免疫组化法检测上述8种组织中ACE2表达;用实时荧光定量PCR技术观察ACE2 mRNA表达.结果：与对照组相比较MS模型组大鼠血清TG[（1.18±0.19）vs（1.74±0.12）mmol/L];TC[（1.44±0.13）vs（2.04±0.18）mmol/L];LDL-C[（0.39±0.09）vs（0.89±0.12）mmol/L];体质量指数（297.48±9.82）vs（323.50±12.95）;内脏脂肪/体质量（0.0373±0.0019）vs（0.0442±0.0014）;血压[（109.34±5.02）vs（144.47±3.26）mmHg]（1mmHg=0.133kPa）等均高于对照组（P均〈0.05）.HDL-C[（0.75±0.12）vs（0.43±0.10）mmol/L];ISI[（-4.48±0.07）vs（-5.26±0.16）];OGTT[（8.26±0.56）vs（9.22±0.59）mmol/L]均低于对照组（P均〈0.05）.与对照组相比较MS模型组大鼠ACE2mR-NA的表达量在心脏[（0.97±0.13）vs（0.55±0.12）],血管内皮[（16.71±0.46）vs（8.53±0.28）],肺[（31.11±0.24）vs（12.45±0.11）],肾[（37.48±0.27）vs（15.64±0.15）],睾丸[（4.85±0.05）vs（1.78±0.15）],脑组织[（24.27±0.25）vs（4.82±0.15）]也均低于对照组（P均〈0.05）.结论：MS减少大鼠心脏、血管内皮、肺、肾、睾丸和脑组织中ACE2的表达.     

热休克蛋白60在高脂及高脂高糖大鼠睾丸中的表达及对生精细胞凋亡的影响

目的 探讨热休克蛋白60(Hsp60)在高脂及高脂高糖SD大鼠睾丸组织中的表达情况及对生精细胞凋亡的影响.方法 将雄性SD大鼠60只随机分成对照组15例、高脂组15例及高脂高糖组30例,对照组给予普通饲料喂养,高脂组给予高脂饲料喂养,24周后加入含0.2%丙硫氧嘧啶继续喂养;高脂高糖组给予高脂饲料喂养,24周后腹腔注射链脲佐菌素,所有大鼠均喂养36周.造模成功后取睾丸组织,用免疫组化法和免疫印迹试验分析检测大鼠睾丸组织中Hsp60表达情况,并检测组织中细胞凋亡情况.结果 对照组生精细胞数量多且按序逐层排列,管腔中央可见大量精子细胞,HSP60少量表达于次级精母细胞;高脂组及高脂高糖组生精细胞数量减少且排列紊乱,部分切片可观察到生精细胞脱落.免疫组化及免疫印迹试验结果均显示,高脂组及高脂高糖组Hsp60蛋白表达量高于对照组(P<0.05),而高脂组与高脂高糖组间比较差异无统计学意义(P>0.05).高脂组及高脂高糖组的生精细胞凋亡数量明显多于对照组,且高脂高糖组生精细胞凋亡数量多于高脂组(P<0.05).结论 高脂及高脂高糖大鼠睾丸生精细胞凋亡的发生可能与Hsp60密切相关.     

不可触及隐睾及其恶变的MSCT诊断价值

目的 探讨MSCT对腹部隐睾及其恶变的诊断价值.方法 回顾性分析经手术病理证实的29例33枚临床未触及的隐睾及其CT表现,其中3枚恶变.结果 29例33枚隐睾全部检出并定位,其中4例为双侧隐睾,5枚均位于腹腔内,1枚位于髂窝部腹膜后,2枚位于腹股沟区.25例单侧隐睾中17枚位于腹腔内,3枚位于腹膜后,5例位于腹股沟区.其CT征象为卵圆形或类圆形软组织肿块,肿块长轴多与睾丸下降路径一致.无恶变者边界清楚,轮廓光整,较正常睾丸小,密度均匀.若肿块较大、密度不均匀、形态不规则,并由患侧睾丸动脉供血者,则可作出腹部隐睾恶变的定性诊断.结论 MSCT能检出不可触及的隐睾,并鉴别是否恶变,对术前定位定性、指导临床手术具有较高的价值.