Apoptin对宫颈癌Hela细胞放疗增敏作用实验研究

目的探讨Apoptin增加宫颈癌Hela细胞的敏感性及作用机制。方法应用脂质体转染方法将表达Apoptin的重组载体pEGFP—Apoptin转染入人宫颈癌Hela细胞。其中转染pEGFP-Apopti为实验组,转染pEGFP—C2组为阳性对照组,未转染组为阴性对照组。上述各组经射线干预后利用平板克隆形成实验、流式细胞术、MTT及蛋白印迹western—blot等方法分别检测细胞凋亡、周期及相关蛋白表达水平。结果pEGFP—Apoptin在人宫颈癌Hela细胞中稳定表达。Apoptin可增加宫颈癌Hela细胞对放射线的敏感性,Apoptin可使p21、p27的表达量上调,使Rad50及Ku80的表达量下调,而对XLF的表达量则无影响。结论Apoptin可增加宫颈癌Hela细胞的放疗敏感性,其机制可能与细胞周期阻滞及同源与非同源重组修复相关蛋白的表达水平改变有关。     

garcinol对宫颈癌Hela细胞放射敏感性影响的研究

目的研究多聚异戊二烯基苯甲酮（garcinol）对宫颈癌Hela细胞株放射敏感性的影响。方法不同浓度garcinol作用于人宫颈癌Hela细胞12、24、48h,CCK-8法检测garcinol对Hela细胞增殖活性的影响,并计算出24h时的20％和50％的药物抑制浓度（IC20和IC50）值;克隆形成实验检测20Ixmol／Lgarcinol对Hela细胞放射敏感性的影响;反转录PCR法和Westernblot法检测Hela细胞内环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）在mRNA水平和蛋白表达水平的变化。结果garcinol抑制宫颈癌Hela细胞的生长,并且有明显的时间-剂量依赖性;通过单击多靶模型计算放射生物学参数,经20μmol／Lgarcinol处理24h的Hela细胞,与单纯照射组相比,放射敏感性增加（t=6．69,P〈0．05）,放射增敏比（SER）为1．26;经20μmol／Lgarcinol处理24h的Hela细胞,COX-2的蛋白表达水平下降（P〈0．05）,而COX-2mRNA水平无明显变化（P〉0．05）。结论garcinol可以增加宫颈癌Hela细胞的放射敏感性,这可能与其降低Hela细胞中COX-2的蛋白表达水平有关。     

Egr-1基因在人宫颈癌Hela细胞中的表达及其对细胞凋亡的作用

目的　研究不同剂量60 Co射线照射后Egr 1基因在人宫颈癌Hela细胞中的表达及与细胞凋亡的关系。方法　将人宫颈癌Hela细胞株进行体外培养 ,用不同剂量的60 Co射线照射 ,流式细胞仪记录细胞周期的分布和凋亡率 ,电子显微镜观察细胞形态 ,半定量RT PCR法检测Hela细胞Egr 1基因的表达。结果　放射线可抑制人宫颈癌Hela细胞的生长 ,诱导其凋亡。照射后细胞凋亡率随照射剂量增加而增加 ,至 12 0 0cGy时达高峰值 ,与对照组相比均有极显著性差异 (P <0 .0 1) ;照射后Hela细胞出现G0 /G1期阻滞 ,S期明显减少 ,且呈剂量依赖性 ,与对照组相比均有极显著性差异 (P <0 .0 1) ;照射后Egr 1基因表达随照射剂量增加而增加 ,至 12 0 0cGy时达峰值 ,与对照组比均有极显著性差异 (P <0 .0 1) ,Egr 1基因表达与凋亡率相关 (r=0 .96 9,P <0 .0 1)。结论　60 Co射线可引起人宫颈癌Hela细胞周期阻滞并诱导细胞凋亡 ,Egr 1基因为促凋亡基因 ,可能与宫颈癌的发生、发展及预后有关     

三氧化二砷对人宫颈癌Hela细胞的放射增敏作用

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对人宫颈癌Hela细胞的放射增敏作用及其机制。方法:MTT法确定As2O3对Hela细胞的半数致死浓度(ID50);克隆形成法观察20%ID50的As2O3对Hela细胞的放射增敏作用;流式细胞仪测定细胞周期。结果:细胞生长抑制率随As2O3浓度增加而增高;As2O3+照射组的细胞存活率、D0值和Dq值均小于单纯照射组(P<0.05);存活曲线肩区(Dq)变小,放射增敏比(SER)为1.39;As2O3和γ-射线均能使细胞阻滞在G2/M期,联合应用比单独应用抑制作用显著(P<0.01)。结论:As2O3对宫颈癌Hela细胞株有明显的放射增敏作用;可能与As2O3改变细胞周期有关。     

花椒挥发油抗宫颈癌Hela细胞作用研究

目的 研究花椒挥发油抗宫颈癌Hela细胞作用及其可能机制.方法 花椒挥发油按不同时间(24、48、72、96h)及不同浓度(0.125～16me/mL)分别处理Hda细胞,MTS法分析细胞的增殖速度,用流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期.结果 4mg/mL花椒挥发油处理Hela细胞72h可显著抑制Heh细胞增殖,1 mg/mL花椒挥发油处理Hela细胞72h即可导致亚凋亡峰的出现,且G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少.结论 花椒挥发油可抑制Hela细胞增殖并激发细胞凋亡.     

苦参碱诱导宫颈癌Hela细胞的凋亡作用

目的:研究不同浓度的苦参碱(Mat)对宫颈癌Hela细胞株的体外增殖抑制作用。方法:采用体外细胞培养技术,以不同浓度的Mat作用于宫颈癌Hela细胞,相同条件下培养24h、48h、72h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定Mat对Hela细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:不同浓度Mat在体外均能不同程度抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并且作用呈现时间-剂量依赖性;苦参碱诱导Hela细胞凋亡率增加。结论:Mat有抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,诱导其凋亡作用。     

花姜酮对Hela细胞株细胞生物学特性的影响

【摘要】目的 探究花姜酮对Hela细胞株增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法 购买人宫颈癌Hela细胞株,进行培养并分为空白组、花姜酮5 μmol/L组、花姜酮10 μmol/L组、花姜酮20 μmol/L组4组。空白组使用常规细胞培养液培养,其他三组分别使用相对应浓度的花姜酮进行培养。观察4组细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡情况及上皮细胞间充质（EMT）相关蛋白相对表达量。结果 24、48、72 h花姜酮20 μmol/L组细胞增殖率低于花姜酮5 μmol/L组、花姜酮10 μmol/L组及空白组（P＜005）;24、48、72 h花姜酮20 μmol/L组细胞凋亡率高于花姜酮5 μmol/L组、花姜酮10 μmol/L组及空白组（P＜005）;花姜酮20 μmol/L组细胞迁移、侵袭数均低于花姜酮5 μmol/L组、花姜酮10 μmol/L组及空白组（P＜005）;花姜酮20 μmol/L组细胞波形蛋白（Vimentin）、组蛋白甲基转移酶同源序列2增强子(EZH2)相对表达量均低于花姜酮5 μmol/L组、花姜酮10 μmol/L组空白组;花姜酮20 μmol/L组细胞α 连环蛋白（α cat）、上皮性钙粘蛋白(E cadherin)相对表达量均高于花姜酮5 μmol/L组、花姜酮10 μmol/L组及空白组（P＜005）。结论 花姜酮能够促进HeLa细胞株的凋亡,抑制Hela细胞株的增殖、迁移及侵袭能力,其能力呈现浓度依赖。     

米非司酮对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用

目的 :探讨米非司酮对人子宫颈癌Hela细胞增殖的影响。方法 :采用MTT测定 ,观察不同浓度米非司酮 (10 ,5 ,2 .5 μmol/L)对Hela细胞增殖的抑制作用 ;通过ABC免疫组化法 ,检测用药后Hela细胞Ki 6 7抗原表达的变化。结果 :3个浓度的米非司酮对Hela细胞增殖均有抑制作用 ,并呈剂量依赖性 ,其中以 10 μmol/L浓度抑制作用最强 ,抑制率达 5 7.6 9% ;2 .5 μmol/L米非司酮可使Ki 6 7抗原表达明显减少。 结论 :米非司酮体外对PR阳性的人宫颈癌细胞有明显的抑制作用 ,通过降低细胞Ki 6 7抗原的表达而抑制其增殖。     

多西紫杉醇对宫颈癌细胞系Hela细胞毒性和放射增敏作用的研究

目的探讨多西紫杉醇对宫颈癌细胞系Hela的细胞毒性和放射增敏作用。方法MTT法检测多西紫杉醇对Hela的细胞毒性以及1.0nM多西紫杉醇对Hela不同分割放疗方式的增敏效果;克隆形成实验分析不同浓度多西紫杉醇对Hela细胞生长抑制的影响,多靶单击拟合模型方程测定的各组细胞放射增敏比,评价增敏效果。结果0.1￣20.0nM多西紫杉醇对Hela细胞的细胞毒性有明显剂量和时间依赖性,20.0nM以上浓度及药物作用超过48h多西紫杉醇的细胞毒性并无明显增加。1.0nM和5.0nM多西紫杉醇放射增敏比分别为1.26和1.69。1nM多西紫杉醇对2.0Gy/次、1.0Gy/次(×2)、0.5Gy/次(×4)分割放疗组的放射增敏比分别为:2.03、2.51、3.57;多西紫杉醇增敏比分别为:1.41、1.82、2.92,每组中放射增敏比较多西紫杉醇增敏比高。结论多西紫杉醇对宫颈癌细胞系Hela有良好的细胞毒性和放射增敏作用,对低剂量分割放射的增敏作用更强。     

米非司酮对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用

目的：探讨米非司酮对人子宫颈癌Ｈｅｌａ细胞增殖的影响。方法：采用ＭＴＴ测定,观察不同浓度米非司酮（１０,５,２．５μｍｏｌ／Ｌ对Ｈｅｌａ细胞增殖的抑制作用;通过ＡＢＣ免疫组化法,检测用药后Ｈｅｌａ细胞Ｋｉ－６７抗原表达的变化。结果３个浓度的米非司酮对Ｈｅｌａ细胞２均有抑制作用并呈剂量依赖性,其中以１０μｍｏｌ／Ｌ浓度抵制作用最强,抑制率达５７．６９％．２．５μｍｏｌ／Ｌ米非司酮可使Ｋｉ－６７抗原表     

和厚朴酚对人宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨和厚朴酚抑制人宫颈癌Hela细胞增殖及诱导其凋亡的作用。方法利用MTT检测和厚朴酚在不同浓度和时间下对Hela细胞增殖的影响;用流式细胞术、Hoechst 33258荧光染色和DNA ladder检测和厚朴酚作用下Hela细胞的凋亡。结果MTT结果显示和厚朴酚可明显抑制Hela细胞的增殖,且抑制率存在剂量和时间依赖性;流式结果表明10μg/mL和20μg/mL和厚朴酚作用细胞24h后,凋亡细胞的比例分别为22.5%和62.2%,而对照组为8.7%;和厚朴酚处理过的Hela细胞,经Hoechst33258染色后细胞、细胞核出现明显的凋亡形态学变化,在DNA琼脂糖凝胶上可见特征性的梯状条带。结论和厚朴酚具有抑制Hela细胞增殖和诱导凋亡的作用。     

Experimental Studies on Cyclooxygenase-2 Inhibitor Induced Cervical Cancer Hela Cell Apoptosis and Its Molecular Mechanism

Objective To investigate the Hela cells growth inhibition and apoptosis possible molecular mechanisms. Methods Hela cells were treated with various concentrations (100 μmol/L,200 μmol/L, 300 μmol/L,400 μmol/L) of NS-398 (selective for COX-2 inhibition). Cell growth was measured by MTT (Thiazolyl blue). Apoptosis was detected by double staining flow cytometry (FCM). Levels of PGE2 were measured by radioimmunoassay. The expres- sions of COX-2 protein were also examined by Western blot analysis. Results After treated with different concentrations of NS-398, the growth of Hela cells was suppressed significantly in a dose-and time-dependent manner (P<0.01). The NS-398 can induce apoptosis with the apoptosis rates at 8.53%-43.46% by FCM in a dose-dependent manner. The release of PGE2 was reduced in Hela cells with the values of 69.26 ± 2.13, 47.46 ± 2.18, 28.15 ± 1.64 and 17.01 ± 1.12, respectively, there was significant difference compared with control group (83.78 ± 1.11) (P<0.01). The NS-398 could inhibit the activity and expression of COX-2 in a dose- dependent manner and down-regulated the expression of COX-2 protein greatly. Conclusion NS-398 could inhibit the proliferation and increase apoptosis in human Hela cells. These effects may be depended on the inhibition of the expression of COX-2 and PGE2 by NS-398.     

维生素C对Hela细胞系增殖及细胞周期的影响

目的 探讨维生素C对Hela细胞系增殖及细胞周期的影响。方法 采用MTT测定，观察不同浓度维生素C(1μmol／L～3500μmol／L)对Hela细胞系增殖的抑制作用；运用流式细胞仪检测用药后细胞周期分布及增殖指数的变化。结果 各个浓度的维生素C对Hela细胞系增殖均有抑制作用，并呈剂量依赖性，3500μmol／L时，抑制率为66．15％。维生素C能使Hela细胞系阻滞于G0／G1期，抑制DNA的合成，使细胞增殖指数明显下降。且此作用随用药浓度的增加而增强。结论 维生素C在体外对Hela细胞系有明显的抑制作用，使细胞阻滞于G0／G1期。     

分割剂量射线照射富集宫颈癌肿瘤干细胞的研究

【目的】 研究分割剂量射线照射的宫颈癌Hela细胞表达肿瘤干细胞相关蛋白情况及裸鼠体内成瘤能力,探讨经此法富集宫颈癌肿瘤干细胞的可行性。【方法】 Hela细胞分组接受分割剂量分别为2、4、6、8、10及12 Gy的射线照射,总照射剂量24 ~ 42 Gy。流式细胞术检测各照射组及对照组细胞的ABCG2、CD44及CD133表达率;各组细胞接种裸鼠皮下,检测其体内成瘤能力。【结果】 各照射组细胞的ABCG2表达率均明显上调,以Hela-R2组(4 Gy×10次)细胞的表达率最高[(46.89±1.20)%],且随着照射次数的增加而升高(P < 0.05);各组细胞的CD44及CD133表达率变化均无明显趋势;Hela-R2组细胞的裸鼠体内成瘤能力最高,其次为Hela-R5组(10 Gy×3次)。【结论】 分割剂量射线照射可在体外富集宫颈癌肿瘤干细胞,以分割剂量为4 Gy组富集效果最好,诱导Hela细胞株表达ABCG2显著上调,及提高其裸鼠体内成瘤能力。     

蛇床子素诱导Hela细胞凋亡及其机制研究

目的：探讨蛇床子素诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其机制。方法：采用MTT法检测各浓度蛇床子素对Hela细胞增殖的抑制作用;光学显微镜观察细胞的形态学变化;凝胶电泳分析DNA的片段化改变;采用RT-PCR检测Hela细胞fas和bcl-2基因mRNA的表达水平。采用10μg/mL的蛇床子素作用于Hela细胞24h后的培养上清称为ost-La;洗去蛇床子素,用新鲜培养液进行24h再培养的Hela细胞培养上清称为ost-Lb;不经蛇床子素处理的Hela细胞同步培养上清作为对照,称为control-L;定量Elisa法测定各上清中TGF-β1含量。结果：蛇床子素可显著抑制Hela细胞的体外增殖,诱导Hela细胞的凋亡,且均呈剂量依赖性。RT-PCR：凋亡相关基因fas的表达量升高,而bcl-2的表达量下降,表达量的变化与蛇床子素的浓度有关。Elisa：TGF-β1的含量在ost-La中为16.732±3.068 ng/mL（P〈0.01）;在ost-Lb中为2.031±0.112 ng/mL（P〈0.01）;在control-L中为385.282±42.613 ng/mL。结论：子素可诱导Hela细胞的凋亡,其机制可能与促进Fas基因表达,抑制Bcl-2基因表达和TGF-β1含量改变有关。     

刺五加注射液对Hela细胞抑制作用的实验研究

目的：探讨刺五加注射液对人宫颈癌细胞株Hela体外增殖的抑制作用。方法：采用MTT法测定了不同浓度的刺五加注射液对人宫颈癌细胞株Hela的体外抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态变化。结果：刺五加注射液浓度越高对Hela细胞抑制作用越好,作用时间越长抑制效果越强,量效关系和时效关系良好;形态学观察到细胞凋亡。结论：刺五加注射液对人宫颈癌细胞株Hela的细胞增殖有较强的抑制作用。     

黄酮类化合物逆转HeLa细胞株多药耐药性

目的　探讨黄酮类化合物对人类子宫颈癌 He L a细胞多药耐药 (MDR)的逆转作用。　方法　采用WST- 1法鉴定多药耐药亚系 Hvr1 0 0 - 6细胞对抗癌药物长春碱、阿霉素、柔红霉素及 5 -氟尿嘧啶 (5 - Fu)的耐药性 ,观察槲皮素等黄酮类化合物对其耐药的逆转作用 ;采用 RT- PCR法检测联用黄酮类化合物前后 Hvr1 0 0 - 6细胞mdr1 m RNA表达水平。　结果　 Hvr1 0 0 - 6细胞与亲本株 He L a细胞相比 ,对长春碱、阿霉素、柔红霉素均表现出显著耐药性 (P<0 .0 0 1 ) ,耐药倍数分别为 4 96 ,5 2和 1 98倍。加入槲皮素 (1 0μmol/ L )的长春碱、柔红霉素、5 - Fu组与相应浓度单用药物组比较 ,其细胞抑制率差异均有显著性 (P<0 .0 5 ) ,但细胞 m dr1 m RNA表达量在使用槲皮素前后没有变化。　结论　槲皮素对长春碱、柔红霉素、5 - Fu的细胞毒性有增敏作用 ,可逆转 He L a细胞耐药株对部分化疗药物的多药耐药     

LAK细胞对Hela细胞杀伤作用的初步探讨

IL-2诱导正常人 PBL 后,所产生的 LAK 细胞在体外对 Hcla 细胞的杀伤作用,以90u/ml 的 IL-2诱导 PBL 产生的 LAK 细胞对 Hela 细胞杀伤作用较明显。实验揭示出 LAK 细胞的作用比单独使用 IL-2效果好,而 IL-2与 LAK 细胞的联合作用,其效果更佳。