胚胎植入前遗传学诊断方法的进展

胚胎植入前遗传学诊断已经在辅助生殖技术中应用十余年了。荧光原位杂交和聚合酶链式反应是胚胎植入前遗传学诊断的两大基本技术。本文综述了胚胎植入前遗传学诊断方法的一些进展，包括荧光聚合酶链式反应、间期染色体转换、定量聚合酶链式反应、多重聚合酶链式反应、质谱分析、全基因组扩增及DNA芯片技术等。这些技术的发展可使胚胎植入前遗传学诊断成为更广泛使用的临床工具。     

荧光原位杂交技术在胚胎植入前遗传学诊断中的应用进展

体外受精的成功使人类有可能进行胚胎植入前遗传学诊断，目前荧光原位杂交用于胚胎植入前遗传学诊断，包括：鉴定胚胎的性别、高龄妇女的染色体倍性分析、反复流产患者的特异染色体分析及临别染色体结构的异常改变。     

胚胎植入前遗传学诊断进展与前景

胚胎植入前遗传学诊断经过10年的发展,在其检测技术聚合酶链反应（PCR）和荧光原位杂交（FISH）的基础上又有许多分子生物学新技术,如：荧光PCR,巢式PCR,比较基因组杂交等的应用,不仅使许多遗传性疾病在胚胎植入前得以诊断,而且为众多以前不能解决的生育问题带来希望,还应用于遗传学的最新领域－克隆。     

荧光原位杂交技术在胚胎植入前遗传学诊断中的应用进展

体外受精的成功使人类有可能进行胚胎植入前遗传学诊断,目前荧光原位杂交用于胚胎植入前遗传学诊断,包括:鉴定胚胎的性别、高龄妇女的染色体倍性分析、反复流产患者的特异染色体分析及鉴别染色体结构的异常改变。     

胚胎植入前遗传学诊断的进展

胚胎植入前遗传学诊断（ＰＧＤ）自１９９０年诞生，１９９２年运用２ＰＧＤ后首例无囊性纤维化单基因缺陷的婴儿成功分娩，现已有４０余例婴儿分娩，虽然ＰＧＤ给人以希望但仍有不少技术上的困难，使之难以成为临床上的工具，本文叙述近年来技术上的进展和问题。     

胚胎植入前遗传学诊断的研究进展

自从1990年首例植入前遗传学诊断（PGD）应用于临床以来，这项技术在多个临床生殖中心迅速的开展起来，对于辅助生殖技术（ART）产生了巨大影响，这主要得益于人类对遗传性疾病认识的深入和分子诊断技术的不断提高，综述了这些遗传学检测技术的新进展，并对存在的问题和发展的前景做了进一步的阐述和展望。     

胚胎植入前遗传学诊断进展与前景

胚胎植入前遗传学诊断经过10年的发展,在其检测技术聚合酶链反应(PCR)和荧光原位杂交(FISH)的基础上又有许多分子生物学新技术,如:荧光PCR、巢式PCR、比较基因组杂交等的应用.不仅使许多遗传性疾病在胚胎植入前得以诊断,而且为众多以前不能解决的生育问题带来希望,还应用于遗传学的最新领域--克隆.     

胚胎植入前遗传学诊断进展与前景

胚胎植入前遗传学诊断经过10年的发展,在其检测技术聚合酶链反应(PCR)和荧光原位杂交(FISH)的基础上又有许多分子生物学新技术,如:荧光PCR、巢式PCR、比较基因组杂交等的应用。不仅使许多遗传性疾病在胚胎植入前得以诊断,而且为众多以前不能解决的生育问题带来希望,还应用于遗传学的最新领域——克隆。     

胚胎植入前遗传学诊断/筛查的应用研究进展

胚胎植入前遗传学诊断(PGD)/筛查(PGS)是目前临床上较为常用的新型胚胎植入前遗传学检查方法。PGD主要用于在胚胎移植前检测特定的突变以及非平衡染色体异常是否传递到卵子或胚胎。PGS主要用于检测胚胎染色体的非整倍性。本文主要综述PGD和PGS目前在临床上的应用情况,为胚胎植入前遗传学检查方法的选取提供理论依据。     

染色体易位的植入前遗传学诊断

染色体易位是一种较常见的遗传 性疾病，目前尚无有效的治疗方法。近年有研究采用植入前遗传学诊断技术，通过第一极体、第二极体或卵裂球活检，结合荧光原位杂交技术分析其染色体核型，对易位携带者的配子或胚胎进行筛选植入。应用该技术后，易位携带者的流产率显著下降，分娩正常胎儿几率明显上升。就植入学遗传学诊断技术应用于染色体易位诊断的研究进展进行简要综述。     

胚胎植入前遗传学诊断和筛查的研究进展

胚胎植入前遗传学诊断（ PGD）和筛查（ PGS）是近年来发展的植入前遗传学检测（ PGT）方法。 PGD主要适用于父母携带基因突变或染色体平衡易位,通过体外受精,在胚胎移植前检测特定的突变以及非平衡染色体异常是否传递到卵子或胚胎。 PGS是运用相同的检测方法检测胚胎染色体非整倍性,通过移植正常的胚胎从而提高妊娠率。 PGD／PGS相关检测技术发展日新月异,传统FISH技术逐渐被取代,更多的新技术也在研发中。但是,PGD／PGS仍存在费用昂贵,无法检测所有胚胎异常等不足之处。该文综述PGD／PGS相关进展和PGD／PGS所存在的问题。     

植入前遗传学诊断研究进展

近年来 ,随着辅助生殖技术如体外受精 胚胎移植技术 ,显微操作技术如卵胞浆内单精子注射技术的发展 ,因其携带遗传性缺陷的风险和生殖细胞畸变的比率明显高于正常人群 ,故在此基础上发展了植入前遗传学诊断技术。目前 ,此项技术已在国内外各生殖中心迅速开展 ,现对其研究进展作一综述。     

Duchenne型肌营养不良症植入前遗传学诊断研究进展

植入前遗传学诊断是在胚胎着床前确定其遗传物质是否正常 ,从而决定该胚胎能否移植的一门新兴技术 ,该技术已应用于性别、单基因遗传病及染色体遗传病的诊断。目前世界上已有两百多个正常婴儿通过植入前诊断技术诞生 ,该资料回顾了DMD植入前诊断技术的发展 ,并对其技术路线及目前存在的问题及解决方法进行综述。     

孕妇尿液中游离胎儿DNA的研究进展

优生优育观念深入人心,无创伤性产前基因诊断受到广泛关注。孕妇尿液中游离胎儿DNA的发现为无创性胎儿产前基因诊断打开了新思路,其检测方法及临床应用前景具有广阔的研究空间。     

植入前诊断在优生方面的应用

植入前遗传学诊断技术是随着辅助生殖技术和分子生物学迅速发展起来的一门新技术,主要用于单基因遗传病夫妇、染色体异常夫妇,此外,还可用于肿瘤遗传易感性分析、组织相容性抗原配对、Rh血型的选择、迟发起病疾病的诊断和性别选择。植入前遗传学诊断对于提高人口素质、控制出生缺陷以及不孕症的治疗是一项非常好的措施,而且大量临床经验初步表明这项技术的安全可靠性。     

First attempts in preimplantation genetic diagnosis: genetic analysis]

Preimplantation genetic diagnosis is a new approach for the prevention of genetic disorders, which provides a healthy pregnancy avoiding the need for its possible termination. The combination of in vitro fertilization techniques and single cell molecular genetic diagnosis allows only unaffected embryos to be selected for transfer to the uterus. It is an acceptable alternative of prenatal diagnosis for certain couples. Here we report our first attempts in the application of fluorescent PCR for sex determination and the detection of the delta-F508 mutation in human blastomeres. We modelled clinical PGD situations as we performed sex determination on 23 preembryos. Sex determination was successful is 20 preembryos (83%). We performed the detection of the delta-F508 mutation on 23 preembryos, which was successful in 20 preembryos (87%). Our experience suggests, that the established fluorescent PCR analysis is a reliable method for PGD, which enables us to apply it for clinical preimplantation genetic diagnosis.     

染色体综合征的产前诊断分子技术研究进展

各类染色体病患者大多有智力缺陷等严重症状 ,目前尚无有效的治疗措施 ,进行产前诊断及时终止妊娠是防止该病发生的有效预防措施 ;经典的细胞遗传学核型分析是检验染色体病的金标准 ,但此方法有实验周期长、费力、微小染色体改变不能检出等缺点 ;随着分子生物学的飞速发展 ,许多新的方法和技术不断应用于染色体综合征的产前诊断 ,这些新的方法和技术各具有各自的优点 ,都具快速、敏感、特异等特点 ,虽这些分子生物学实验方法在临床某些方面不稳定等缺点 ,但改进后会大力推进染色体综合征的产前诊断速度和准确性     

First attempts in preimplantation genetic diagnosis: blastomere biopsy]

There is an increasing expectation from couples that serious inherited diseases should be recognized at the earliest stages of embryonic development. A valuable tool for early prenatal diagnosis, preimplantation genetic diagnosis (PGD), involves the removal of 1 or 2 blastomeres from an in vitro fertilized embryo with micromanipulator (blastomere biopsy) without affecting the viability of the embryo. Genetic analysis of the removed blastomeres is performed to determine whether the embryo carries the genes responsible for the examined disease. Based on the results of the genetic analysis it is possible to transfer only unaffected embryos to the uterus. In this study, the authors performed blastomere biopsy on 35 embryos at the 6-10 cells stage. A total of 104 blastomeres were analyzed. On follow-up, 64% of biopsied embryos were cleaved and 43% developed to the morula or blastocyst stage. The introduction of this new procedure into the field of assisted reproduction can provide an alternative for couples who do not want to give birth to children affected by a genetic disease but would reject induced abortion after a positive prenatal diagnosis.     

软骨发育不全植入前遗传学诊断的方法学研究

目的针对软骨发育不全(ACH)高危家系的FGFR3基因的突变类型(c.1138G>A,p.G380R),建立多种快速特异、行之有效的植入前遗传学诊断(PGD)方法 ,为实施该ACH家系的PGD创造必要的前提条件。方法在确诊该ACH患者特定突变类型的基础上,首先用外周血建立各种PGD方法 ,包括:A.直接测序法;B.ARMS法;C.酶切鉴定法;D.ARMS/RE法。然后对单个卵裂球的全基因组扩增(WGA)产物进行相应方法学的研究。最后,对各种方法进行优化优选。结果 A.直接测序法:正常对照c.1138为G纯合子,而患者为G/A杂合峰;B.ARMS法:正常对照扩增阴性,而患者有445 bp的特异扩增条带。C.酶切鉴定法:正常对照酶切后仍为513 bp,而患者酶切后产生205 bp、308bp、513 bp三条带;D.ARMS/RE法:正常对照扩增阴性,无法做酶切鉴定。而患者有445 bp扩增产物,经SfcI酶切后可产生27 bp和418 bp两个片段。结论本研究已成功建立针对c.1138 G>A杂合错义突变的直接测序法、ARMS法、酶切鉴定法和ARMS/RE法。所建立的4种方法快速、特异,但各有利弊,同时使用可相互弥补,结合STR连锁分析可把误诊风险降到最低程度。在正常情况下,可在24 h内完成对ACH高危胚胎的PGD。     

First case of successful pregnancy after preimplantation genetic diagnosis

Preimplantation genetic diagnosis is introduced for prevention of genetic disorders. The combination of in vitro fertilization technique and single cell molecular genetic diagnosis allows only unaffected embryos to be selected for embryotransfer, providing a healthy pregnancy and so also avoiding the need for its possible termination. CASE REPORT: The authors report the first successful case of the clinical application of preimplantation genetic diagnosis in Hungary, resulting the birth of an unaffected baby. Preembryonal biopsy and subsequent fluorescent-PCR analysis of the blastomeres taken from the preembryos of a woman who is a carrier for Duchenne muscular dystrophy was performed. Sexing of the preembryos by X and Y chromosome specific primers were performed and three female preembryos were found. RESULT: All three preembryos were transferred into the uterus, which resulted a singleton pregnancy, resulting the birth of a healthy female baby. The authors are offering preimplantation genetic diagnosis with sexing for couples, who are at risk of having a child with X-linked diseases, or are carriers for the delta-F508 mutation of cystic fibrosis. CONCLUSIONS: The application of this diagnostic tool is also planned for other monogenic disorders.